胰腺癌相关Sc6抗原对胰腺癌术前诊断的初步临床研究
作者：郭晓钟 刘志凡 安 戎 赵学良 李方华 王凯庚
单位：110015沈阳部队总医院消化科(郭晓钟、安 戎、赵学良、李方华)，同位素室(刘志凡、王凯庚)
关键词：抗体，单克隆；胰腺肿瘤；放射免疫测定
中华医学杂志930112 摘要 应用建立的单克隆抗体Sc6的放射免疫分析法对40名正常人、42例术前初步诊断的胰腺癌、16例急性胰腺炎和7例慢性胰腺炎做了测定。结果正常上限为41U/ml。42例术前诊断胰腺癌的病人Sc6抗原浓度有19例高于正常上限；其中15例手术病理证实为胰腺癌，占手术病理确诊21例胰腺癌阳性率的76.2%(15/2)。该抗原对胰腺癌诊断的特异性为94%、假阳性率较CA19-9低。对4例胰腺癌病人血清做了动态观察，最长1例观察12周。结果显示Sc6抗原对胰腺癌的诊断、预后及判断复发有意义，且有助于胰腺癌的早期发现。
, 百拇医药
胰腺癌的早期诊断、早期手术切除可提高胰腺癌患者的生存率[1]。目前影像学[B型超声、CT、胰胆管逆行造影(ERCP)及核磁共振]对胰腺癌的诊断可提供一种手段，但大部分病人术前尚难确诊，尤其是早期胰腺癌的发现，故需寻找新的肿瘤标志物。我们应用自制的单克隆抗体Sc6(McAbSc6)，采用放射免疫发析法[2]对胰腺癌等病人的血清进行测定，发现它有较高的敏感性[3]。本文着重研究Sc6抗原(Sc6-Ag)对术前胰腺癌患者的诊断，以探讨早期胰腺癌的发现。
材料和方法
一、病例来源
1.正常对照组：共40名；男26名，女14名。年龄19～68岁，平均48.6岁。
2.本研究共收集术前诊断(依据临床、B型超声、CT及部分ERCP)胰腺癌患者的血清42份，术后病理证实如下：(1)胰腺癌组：21例；男14例，女7例。年龄26～79岁，平均54.7岁。(2)其它组共21例：胰腺转移癌7例，壶腹及胆管下端癌5例，胰岛细胞癌1例，胰腺腺瘤2例，胰腺囊肿1例，其它5例。
, 百拇医药
3.急性胰腺炎16例，慢性胰腺炎7例，经免疫生化检测或手术病理证实。
二、McAbSc6和(Sc6-Ag)纯品的提取
含McAbSc6的小鼠腹水经ProteinA-Sephrose4B柱得到了纯化的McAbSc6。将此抗体与溴化氰活化琼脂糖4B偶联，从可溶性结肠癌组织中提取相应的Sc6-Ag。SDS电泳示McAbSc6和Sc6-Ag均为一条带。
三、McAbSc6的放射免疫分析法[2,4]
纯化的McAbSc6采用125I-Iodogen法标记后，建立放射免疫分析法，采用双抗体夹心法操作。重复测定的批内误差为5.4%，批间误差为8.7%。
四、标准曲线制作
, 百拇医药
以纯化的Sc6抗原稀释成15.6ng/ml确定为1个标准单位，标准曲线依次稀释成8.16、32、64、128和256U/ml。以测定的CPM值为纵坐标，Sc6-Ag标准为单位为横坐标，在γ-自动计数仪(西安市262厂生产)上自动绘制标准曲线。
结 果
一、Sc6抗原的标准曲线(图1)
二、Sc6-Ag在胰腺癌等疾病中的表达水平(附表)
图1 Sc6抗原测定标准曲线
附表 Sc6-Ag在胰腺癌等疾病中的表达水平 组别
总例数
, http://www.100md.com
阳性例数
阳性率(%)
正常组
40
0
0.0
胰腺癌
21
15
76.2
胰腺转移癌
7
2
, 百拇医药
28.6
壶腹+胆管癌
5
2
40.0
胰岛细胞瘤
1
0
0.0
胰腺腺瘤
2
0
0.0
, 百拇医药 胰腺囊肿
1
0
0.0
慢性胰腺炎
7
0
0.0
急性胰腺炎
16
1
6.3
其它
5
, 百拇医药
0
0.0
1.正常对照组：血清Sc6-Ag含量19.3±10.8U/ml，以41.0U/ml(x+2s)为正常高限。
2.42例术前诊断胰腺癌的病人中，Sc6-Ag浓度高于正常上限的共19例；其中15例手术病理证实为胰腺癌，占手术病理确诊21例胰腺癌病人阳性率的76.2%(15/21)。血清Sc6-Ag浓度59.1±43.2U/ml，与正常对照组相比差异有非常显著意义(P<0.0001)。另外4例Sc6-Ag浓度高于正常人限的病人，术后病理证实为胰腺转移癌2例，胆管壶腹癌2例。
三、Sc6-Ag对胰腺癌患者的初步临床动态观察(图2)
图2 4例胰腺癌病人血清Sc6-Ag动态变化
, 百拇医药
本研究对4例胰腺癌病人血清Sc6-Ag的动态变化做了观察。其中3例Sc6-Ag浓度高于正常上限：第1例患者行胰腺部分切除术，术后第1周Sc6-Ag下降，3周后开始升高，2个月后死亡。第2例手术不能切除的患者，血清Sc6-Ag无明显升高。第3例失去手术机会的患者血清Sc6-Ag持续升高。第4例2cm大小的胰腺癌病人行肿瘤切除术，术后Sc6-Ag下降，第4周基本降至正常标准以下，第12周复查的Sc6-Ag仍正常。
四、Sc6-Ag与肿瘤大小及部位的关系
<5cm、5～10cm和>10cm的胰腺癌Sc6-Ag阳性率分别为60%(3/5)、72.7%(8/11)和80%(4/5)；其中1例2cm胰腺癌手术，术后第12周Sc6-Ag仍在正常上限以下。头部和体尾部肿瘤的阳性率分别为61.5%(8/13)和87.5%(7/8)。
讨 论
, 百拇医药
本研究以正常对照41.0U/ml(x+2s)为正常上限，对照组无1例升高。术前初步诊断胰腺癌的42例病人，CT及部分ERCP等检查尚难诊为原发性胰腺癌，尤其是对胰腺转移癌及壶腹周围癌更难鉴别，经血清Sc6-Ag检测有19例高于正常上限，其中手术病理证实有15例是胰腺癌。该检测结果与手术病理诊断的符合率，即阳性率为76.2%(15/21)。Sc6-Ag在胰腺癌升高的原因可能是癌细胞合成了较多的Sc6-Ag或肿瘤压迫阴塞胰管Sc6-Ag分泌入血增多所致。Sc6-Ag在胰腺疾病中对胰腺癌诊断特异性为94%，其阳性预检值为75%。血清Sc6-Ag在转移阳癌阳性率为28.6%(2/7)，壶腹和胆管癌为40%(2/5)；其升高的原因可能与这些肿瘤有共同的抗原决定簇有关。血清Sc6-Ag在胰岛细胞癌、胰腺囊肿及慢性胰腺炎等不升高。急性胰腺炎有1例升高(1/16)。方差分析显示，Sc6-Ag在胰腺癌与其它各组疾病差异有非常显著意义(P<0.05～0.0001)，提示Sc6-Ag有可能成为术前诊断胰腺癌的一种较可靠的诊断手段。
我们观察了<5cm的胰腺癌共5例；其中≤2cm胰腺癌2例，Sc6-Ag有1例升高，行手术切除，另1例已有远处转移。<5cm的3例胰腺癌中，2例Sc6-Ag浓度高于正常对照组。>5cm16例胰腺癌中有12例阳性。结果显示随着肿瘤的增大Sc6-Ag阳性率有所升高；胰头癌阳性率61.5%，胰体尾癌87.5%。统计学分析两者差异有显著意义(P<0.05)。因Sc6-Ag在≤5cm胰腺癌中阳性率达60%(3/5)，推测该抗原可能有益于早期胰腺癌的发现，且对胰腺头部和体部肿瘤的鉴别有一定意义。
, 百拇医药
我们对4例胰腺癌病人Sc6-Ag在术前、术后的浓度变化做了血清学动态观察，最长达12周。结果发现1例部分手术切除的患者术后Sc6-Ag水平下降，第3周再次升高，升高的原因可能与残余癌增殖浸润有关。另1例不能手术的患者血清Sc6-Ag增加有关。动态观察1例病人该抗原持续低水平可能是该抗原决定簇表达较少。第4例肿瘤<2cm手术切除的病人，术后约第4周降到正常，第12周复查无异常，提示血清Sc6-Ag对于胰腺癌病人的复发及预后变化有一定的意义。
参考文献
1 Moossa AR,Levin B.The Diagnosis of early pancreatic cancer:The University of Chicago Experince.Cancer.1981,47:1688.
2 Guo XZ,Lu ZF,Lu MP,et al.Immunoradiometric assay for Sc6 antigen in the diagnosis of pahcreatic cancer.J Gastroenterol Hepato.1991,6(Suppl 2):31.
, http://www.100md.com
3 Guo XZ,Li XX,ANR,et al.Significance of serum Sc6 antigen defined by an immunoradiometric assay in the diagnosis of pancreatic cancer.J Gastuonterol Hepato.1991,6(Suppl 2):18.
4 Fraker PJ.Protein and cell memberance iodinations with a sparingly soluable chloroaminde 1.3.4.6.-tetrachloro-3.6-diphenyecoluril.Biochem Biophys Res Commun.1978.80:847.
(收稿：1992-01-31 修回：1992-10-12), http://www.100md.com
单位：110015沈阳部队总医院消化科(郭晓钟、安 戎、赵学良、李方华)，同位素室(刘志凡、王凯庚)
关键词：抗体，单克隆；胰腺肿瘤；放射免疫测定
中华医学杂志930112 摘要 应用建立的单克隆抗体Sc6的放射免疫分析法对40名正常人、42例术前初步诊断的胰腺癌、16例急性胰腺炎和7例慢性胰腺炎做了测定。结果正常上限为41U/ml。42例术前诊断胰腺癌的病人Sc6抗原浓度有19例高于正常上限；其中15例手术病理证实为胰腺癌，占手术病理确诊21例胰腺癌阳性率的76.2%(15/2)。该抗原对胰腺癌诊断的特异性为94%、假阳性率较CA19-9低。对4例胰腺癌病人血清做了动态观察，最长1例观察12周。结果显示Sc6抗原对胰腺癌的诊断、预后及判断复发有意义，且有助于胰腺癌的早期发现。
, 百拇医药
胰腺癌的早期诊断、早期手术切除可提高胰腺癌患者的生存率[1]。目前影像学[B型超声、CT、胰胆管逆行造影(ERCP)及核磁共振]对胰腺癌的诊断可提供一种手段，但大部分病人术前尚难确诊，尤其是早期胰腺癌的发现，故需寻找新的肿瘤标志物。我们应用自制的单克隆抗体Sc6(McAbSc6)，采用放射免疫发析法[2]对胰腺癌等病人的血清进行测定，发现它有较高的敏感性[3]。本文着重研究Sc6抗原(Sc6-Ag)对术前胰腺癌患者的诊断，以探讨早期胰腺癌的发现。
材料和方法
一、病例来源
1.正常对照组：共40名；男26名，女14名。年龄19～68岁，平均48.6岁。
2.本研究共收集术前诊断(依据临床、B型超声、CT及部分ERCP)胰腺癌患者的血清42份，术后病理证实如下：(1)胰腺癌组：21例；男14例，女7例。年龄26～79岁，平均54.7岁。(2)其它组共21例：胰腺转移癌7例，壶腹及胆管下端癌5例，胰岛细胞癌1例，胰腺腺瘤2例，胰腺囊肿1例，其它5例。
, 百拇医药
3.急性胰腺炎16例，慢性胰腺炎7例，经免疫生化检测或手术病理证实。
二、McAbSc6和(Sc6-Ag)纯品的提取
含McAbSc6的小鼠腹水经ProteinA-Sephrose4B柱得到了纯化的McAbSc6。将此抗体与溴化氰活化琼脂糖4B偶联，从可溶性结肠癌组织中提取相应的Sc6-Ag。SDS电泳示McAbSc6和Sc6-Ag均为一条带。
三、McAbSc6的放射免疫分析法[2,4]
纯化的McAbSc6采用125I-Iodogen法标记后，建立放射免疫分析法，采用双抗体夹心法操作。重复测定的批内误差为5.4%，批间误差为8.7%。
四、标准曲线制作
, 百拇医药
以纯化的Sc6抗原稀释成15.6ng/ml确定为1个标准单位，标准曲线依次稀释成8.16、32、64、128和256U/ml。以测定的CPM值为纵坐标，Sc6-Ag标准为单位为横坐标，在γ-自动计数仪(西安市262厂生产)上自动绘制标准曲线。
结 果
一、Sc6抗原的标准曲线(图1)
二、Sc6-Ag在胰腺癌等疾病中的表达水平(附表)
图1 Sc6抗原测定标准曲线
附表 Sc6-Ag在胰腺癌等疾病中的表达水平 组别
总例数
, http://www.100md.com
阳性例数
阳性率(%)
正常组
40
0
0.0
胰腺癌
21
15
76.2
胰腺转移癌
7
2
, 百拇医药
28.6
壶腹+胆管癌
5
2
40.0
胰岛细胞瘤
1
0
0.0
胰腺腺瘤
2
0
0.0
, 百拇医药 胰腺囊肿
1
0
0.0
慢性胰腺炎
7
0
0.0
急性胰腺炎
16
1
6.3
其它
5
, 百拇医药
0
0.0
1.正常对照组：血清Sc6-Ag含量19.3±10.8U/ml，以41.0U/ml(x+2s)为正常高限。
2.42例术前诊断胰腺癌的病人中，Sc6-Ag浓度高于正常上限的共19例；其中15例手术病理证实为胰腺癌，占手术病理确诊21例胰腺癌病人阳性率的76.2%(15/21)。血清Sc6-Ag浓度59.1±43.2U/ml，与正常对照组相比差异有非常显著意义(P<0.0001)。另外4例Sc6-Ag浓度高于正常人限的病人，术后病理证实为胰腺转移癌2例，胆管壶腹癌2例。
三、Sc6-Ag对胰腺癌患者的初步临床动态观察(图2)
图2 4例胰腺癌病人血清Sc6-Ag动态变化
, 百拇医药
本研究对4例胰腺癌病人血清Sc6-Ag的动态变化做了观察。其中3例Sc6-Ag浓度高于正常上限：第1例患者行胰腺部分切除术，术后第1周Sc6-Ag下降，3周后开始升高，2个月后死亡。第2例手术不能切除的患者，血清Sc6-Ag无明显升高。第3例失去手术机会的患者血清Sc6-Ag持续升高。第4例2cm大小的胰腺癌病人行肿瘤切除术，术后Sc6-Ag下降，第4周基本降至正常标准以下，第12周复查的Sc6-Ag仍正常。
四、Sc6-Ag与肿瘤大小及部位的关系
<5cm、5～10cm和>10cm的胰腺癌Sc6-Ag阳性率分别为60%(3/5)、72.7%(8/11)和80%(4/5)；其中1例2cm胰腺癌手术，术后第12周Sc6-Ag仍在正常上限以下。头部和体尾部肿瘤的阳性率分别为61.5%(8/13)和87.5%(7/8)。
讨 论
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本研究以正常对照41.0U/ml(x+2s)为正常上限，对照组无1例升高。术前初步诊断胰腺癌的42例病人，CT及部分ERCP等检查尚难诊为原发性胰腺癌，尤其是对胰腺转移癌及壶腹周围癌更难鉴别，经血清Sc6-Ag检测有19例高于正常上限，其中手术病理证实有15例是胰腺癌。该检测结果与手术病理诊断的符合率，即阳性率为76.2%(15/21)。Sc6-Ag在胰腺癌升高的原因可能是癌细胞合成了较多的Sc6-Ag或肿瘤压迫阴塞胰管Sc6-Ag分泌入血增多所致。Sc6-Ag在胰腺疾病中对胰腺癌诊断特异性为94%，其阳性预检值为75%。血清Sc6-Ag在转移阳癌阳性率为28.6%(2/7)，壶腹和胆管癌为40%(2/5)；其升高的原因可能与这些肿瘤有共同的抗原决定簇有关。血清Sc6-Ag在胰岛细胞癌、胰腺囊肿及慢性胰腺炎等不升高。急性胰腺炎有1例升高(1/16)。方差分析显示，Sc6-Ag在胰腺癌与其它各组疾病差异有非常显著意义(P<0.05～0.0001)，提示Sc6-Ag有可能成为术前诊断胰腺癌的一种较可靠的诊断手段。
我们观察了<5cm的胰腺癌共5例；其中≤2cm胰腺癌2例，Sc6-Ag有1例升高，行手术切除，另1例已有远处转移。<5cm的3例胰腺癌中，2例Sc6-Ag浓度高于正常对照组。>5cm16例胰腺癌中有12例阳性。结果显示随着肿瘤的增大Sc6-Ag阳性率有所升高；胰头癌阳性率61.5%，胰体尾癌87.5%。统计学分析两者差异有显著意义(P<0.05)。因Sc6-Ag在≤5cm胰腺癌中阳性率达60%(3/5)，推测该抗原可能有益于早期胰腺癌的发现，且对胰腺头部和体部肿瘤的鉴别有一定意义。
, 百拇医药
我们对4例胰腺癌病人Sc6-Ag在术前、术后的浓度变化做了血清学动态观察，最长达12周。结果发现1例部分手术切除的患者术后Sc6-Ag水平下降，第3周再次升高，升高的原因可能与残余癌增殖浸润有关。另1例不能手术的患者血清Sc6-Ag增加有关。动态观察1例病人该抗原持续低水平可能是该抗原决定簇表达较少。第4例肿瘤<2cm手术切除的病人，术后约第4周降到正常，第12周复查无异常，提示血清Sc6-Ag对于胰腺癌病人的复发及预后变化有一定的意义。
参考文献
1 Moossa AR,Levin B.The Diagnosis of early pancreatic cancer:The University of Chicago Experince.Cancer.1981,47:1688.
2 Guo XZ,Lu ZF,Lu MP,et al.Immunoradiometric assay for Sc6 antigen in the diagnosis of pahcreatic cancer.J Gastroenterol Hepato.1991,6(Suppl 2):31.
, http://www.100md.com
3 Guo XZ,Li XX,ANR,et al.Significance of serum Sc6 antigen defined by an immunoradiometric assay in the diagnosis of pancreatic cancer.J Gastuonterol Hepato.1991,6(Suppl 2):18.
4 Fraker PJ.Protein and cell memberance iodinations with a sparingly soluable chloroaminde 1.3.4.6.-tetrachloro-3.6-diphenyecoluril.Biochem Biophys Res Commun.1978.80:847.
(收稿：1992-01-31 修回：1992-10-12), http://www.100md.com