Graves病患者甲状腺及外周血中淋巴细胞亚群的观察
作者：李 健 高 慧 苏 敏
单位：710061西安医科大学第一附属医院内分泌科(李 健，高 慧)；西安医科大学病理教研室(苏 敏)
关键词：
中华医学杂志930316 为了了解Graves病(GD)患者淋巴细胞亚群的情况，我们采用单克隆抗体及免疫组化技术对其甲状腺原位及外周血中的T淋巴细胞亚群进行了观察。
一、对象及方法
1.对象：(1)我院内分泌专科门诊及住院活动性GD患者30例，男11例，女19例，平均年龄33±9岁。有甲亢典型临床表现，甲状腺Ⅱ度以上肿大，T3、T4、TSH、TGA、MCA及131Ⅰ摄取率测定支持诊断。部分患者所做TRH兴奋试验不被兴奋。(2)20例作为正常对照组，系我院献血员，无甲状腺病史及体征，化验检查正常。
, http://www.100md.com
2.方法：(1)甲状腺内浸润淋巴细胞亚群测定：30例GD患者采用粗针活检取材，标本用OCT包埋剂包埋，冰冻切片，厚5μm。取其中一张作常规病理诊断，免疫组化染色采用ABC过氧化物酶法〔Am J Clin Pathol,1981,75:816〕。所用单抗OKT系统、抗HLA-DR抗原单抗Ⅰ2及ABC药盒购自Coulter,Vector等公司(美国)。(2)外周血中T淋巴细胞亚群测定：穿刺活检当日取肘静脉抗凝血3ml，分离淋巴细胞，免疫组化染色同上，计数200个淋巴细胞中阳性细胞数，求出阳性细胞百分率。
二、结果
1.甲状腺及外周血中T淋巴细胞亚群观察结果。从附表中可见，GD患者外周血中T4、T8、T11细胞及T4/T8细胞比值均显著低于甲状腺内相应细胞数量(P<0.01)；也明显低于正常对照组外周血中相应细胞数量(P<0.05)。
, 百拇医药
2.标志甲状腺内活化淋巴细胞的Ⅰ2细胞与外周血中抗甲状腺球蛋白抗体(TGA)，抗甲状腺微粒体抗体(MCA)进行相关分析，Ⅰ2细胞多少与TGA滴度不相关(r＝0.038，P>0.25)，而与MCA滴度显著相关(r＝0.44，P<0.005)。
三、讨论
本组以免疫组化方法同时观察GD患者甲状腺内及外周血中T淋巴细胞亚群。其中，GD患者外周血中T11、T4、T8细胞数量明显低于正常人血液中相应的细胞数。导致此结果的原因仍不明确。多数学者认为可能与GD患者存在遗传基础的特异性T抑制细胞和免疫稳定功能缺陷或与高T3、T4血症的影响有关，但其确切机制有待探讨。有学者〔Immunol Today,1990，11：406〕认为，外周血淋巴细胞的影响因素颇多，仅此测定尚难以准确反映病变器官的免疫状态，而直接观察病变部位的淋巴细胞变化才更有助于免疫紊乱程度的了解。本组GD患者甲状腺与外周血T淋巴细胞存在显著性差别的结果支持上述看法。此外，本组甲状腺内活化淋巴细胞(I2细胞)与外周血中MCA滴度密切正相关的结果进一步说明甲状腺内淋巴细胞与自身抗体的产生密切相关。
, 百拇医药
附表 甲状腺原位及外周血中T淋巴细胞亚群观察结果 组别
单克隆抗体(%，
±s)
T4
T8
T11
T4/T8
GD组
甲状腺
53.3±10.1*
, 百拇医药 29.1±7.1*
64.4±6.8*
1.88±0.3*
外周血
27.0±8.0△
21.1±7.4△
40.2±9.2△
1.44±0.5△
对照组
外周血
43.9±1.9
26.9±2.6
63.7±3.0
1.65±0.2
与患者外周血比P<0.01；△与对照外周血比P<0.05
(收稿：1992-05-25 修回：1992-12-16), 百拇医药
单位：710061西安医科大学第一附属医院内分泌科(李 健，高 慧)；西安医科大学病理教研室(苏 敏)
关键词：
中华医学杂志930316 为了了解Graves病(GD)患者淋巴细胞亚群的情况，我们采用单克隆抗体及免疫组化技术对其甲状腺原位及外周血中的T淋巴细胞亚群进行了观察。
一、对象及方法
1.对象：(1)我院内分泌专科门诊及住院活动性GD患者30例，男11例，女19例，平均年龄33±9岁。有甲亢典型临床表现，甲状腺Ⅱ度以上肿大，T3、T4、TSH、TGA、MCA及131Ⅰ摄取率测定支持诊断。部分患者所做TRH兴奋试验不被兴奋。(2)20例作为正常对照组，系我院献血员，无甲状腺病史及体征，化验检查正常。
, http://www.100md.com
2.方法：(1)甲状腺内浸润淋巴细胞亚群测定：30例GD患者采用粗针活检取材，标本用OCT包埋剂包埋，冰冻切片，厚5μm。取其中一张作常规病理诊断，免疫组化染色采用ABC过氧化物酶法〔Am J Clin Pathol,1981,75:816〕。所用单抗OKT系统、抗HLA-DR抗原单抗Ⅰ2及ABC药盒购自Coulter,Vector等公司(美国)。(2)外周血中T淋巴细胞亚群测定：穿刺活检当日取肘静脉抗凝血3ml，分离淋巴细胞，免疫组化染色同上，计数200个淋巴细胞中阳性细胞数，求出阳性细胞百分率。
二、结果
1.甲状腺及外周血中T淋巴细胞亚群观察结果。从附表中可见，GD患者外周血中T4、T8、T11细胞及T4/T8细胞比值均显著低于甲状腺内相应细胞数量(P<0.01)；也明显低于正常对照组外周血中相应细胞数量(P<0.05)。
, 百拇医药
2.标志甲状腺内活化淋巴细胞的Ⅰ2细胞与外周血中抗甲状腺球蛋白抗体(TGA)，抗甲状腺微粒体抗体(MCA)进行相关分析，Ⅰ2细胞多少与TGA滴度不相关(r＝0.038，P>0.25)，而与MCA滴度显著相关(r＝0.44，P<0.005)。
三、讨论
本组以免疫组化方法同时观察GD患者甲状腺内及外周血中T淋巴细胞亚群。其中，GD患者外周血中T11、T4、T8细胞数量明显低于正常人血液中相应的细胞数。导致此结果的原因仍不明确。多数学者认为可能与GD患者存在遗传基础的特异性T抑制细胞和免疫稳定功能缺陷或与高T3、T4血症的影响有关，但其确切机制有待探讨。有学者〔Immunol Today,1990，11：406〕认为，外周血淋巴细胞的影响因素颇多，仅此测定尚难以准确反映病变器官的免疫状态，而直接观察病变部位的淋巴细胞变化才更有助于免疫紊乱程度的了解。本组GD患者甲状腺与外周血T淋巴细胞存在显著性差别的结果支持上述看法。此外，本组甲状腺内活化淋巴细胞(I2细胞)与外周血中MCA滴度密切正相关的结果进一步说明甲状腺内淋巴细胞与自身抗体的产生密切相关。
, 百拇医药
附表 甲状腺原位及外周血中T淋巴细胞亚群观察结果 组别
单克隆抗体(%，
±s)T4
T8
T11
T4/T8
GD组
甲状腺
53.3±10.1*
, 百拇医药 29.1±7.1*
64.4±6.8*
1.88±0.3*
外周血
27.0±8.0△
21.1±7.4△
40.2±9.2△
1.44±0.5△
对照组
外周血
43.9±1.9
26.9±2.6
63.7±3.0
1.65±0.2
与患者外周血比P<0.01；△与对照外周血比P<0.05
(收稿：1992-05-25 修回：1992-12-16), 百拇医药