一种有希望的骨髓移植新方法
作者：何志洁 邹正辉 虞斐 傅晋翔 张毅 张学光
单位：215004苏州，江苏省血液研究所(何志洁，邹正辉，虞斐，傅普翔)苏州医学院免疫研究室(张毅，张学光)
关键词：
中华医学杂志930515 最近，利用我们建立的培养体系对10例急性白血病(AL)和5名正常进行了体外长期骨髓细胞培养，结果报告如下。
在培养的最初4周内，悬浮细胞逐渐减少，至第4周末时悬浮细胞全部死亡消失，同时大部分病例及正常人出现成片覆盖培养瓶底的贴壁基质细胞。从第5周以后，2例AL和1名正常人，从基质细胞上出现由圆形细胞组成的造血灶，并逐渐增大，部分细胞脱离基质细胞进入上清液中，往往由数百甚至上万个细胞组成许多大小不同的细胞团块。这些细胞转入另一空培养瓶中可继续增殖。目前，这3例细胞在体外均已传20代以上，仍生长很好。
, 百拇医药
采用活细胞间接免疫荧光法进行这些细胞的免疫表型分析，2例AL免疫表型均已分别由初诊时的CD+2、 CD+7和CD+57车为CD+34、 CD+11b、 CD+15、 CD+19、 CD+20、 CD+22，另一正常人培养后细胞表型也基本同上。染色体核型分析采用细胞培养后，进行G和R显带方法。具体结果见附表。
附表 2例AL和1例正常人细胞培养前后免疫表型及染色体核型结果 例号
免疫表型(荧光阳性百分率%)
, 百拇医药
染色体核型
(G和R显带)
CD2
CD7
CD10
CD11b
CD15
CD19
CD20
CD34
CD57
, http://www.100md.com
HI43(HLA-DP)
AL1
培养前
2
2
0
2
0
2
0
-
45
-
, 百拇医药
正常(46,XX)
培养后
0
0
0
46
76
65
70
62
0
100
正常(46,XX
, 百拇医药
AL2
培养前
75
3
3
0
2
0
0
-
0
-
45,X+,-4,7P+,+i(7q),-8,-9,-9,11q-,-12
, http://www.100md.com
,+mar1,+mar2,+mar3
,+mar4
培养后
0
0
0
90
82
30
55
52
0
, http://www.100md.com
100
正常(46,XX
正常人
培养前
42
46
8
38
33
12
6
2
0
95
, http://www.100md.com
正常(46,XX
培养后
0
0
0
58
70
76
74
36
0
100
正常(46,XX
, http://www.100md.com 注：免疫表型培养后测定时间为培养的第9周，染色体培养后检测时间分别
在培养后第9，第15周时进行
由于这些细胞的免疫表型已不具有初诊时白血病细胞表型，而都只表现为造血干细胞、髓细胞及B细胞表型，染色体也不具有初诊时的复杂异常，而皆出现正常核型结构，且在正常人骨髓细胞培养时也可出现这类细胞，所以从以上结果分析可以确定这些细胞为正常造血细胞。这些细胞在体外扩增3个月足够达到骨髓移植所需细胞数。我们认为这是骨髓移植今后发展的一个新方向，它不仅可以减少骨髓移植时所需骨髓(仅需2ml)，而且可以减少骨髓移植的并发症，如异基因骨髓移植时出现的移植物抗宿主反应和排斥反应以及解决自身骨髓移植的体外净化问题。
(收稿：1992-11-20 修回：1993-01-04), 百拇医药
单位：215004苏州，江苏省血液研究所(何志洁，邹正辉，虞斐，傅普翔)苏州医学院免疫研究室(张毅，张学光)
关键词：
中华医学杂志930515 最近，利用我们建立的培养体系对10例急性白血病(AL)和5名正常进行了体外长期骨髓细胞培养，结果报告如下。
在培养的最初4周内，悬浮细胞逐渐减少，至第4周末时悬浮细胞全部死亡消失，同时大部分病例及正常人出现成片覆盖培养瓶底的贴壁基质细胞。从第5周以后，2例AL和1名正常人，从基质细胞上出现由圆形细胞组成的造血灶，并逐渐增大，部分细胞脱离基质细胞进入上清液中，往往由数百甚至上万个细胞组成许多大小不同的细胞团块。这些细胞转入另一空培养瓶中可继续增殖。目前，这3例细胞在体外均已传20代以上，仍生长很好。
, 百拇医药
采用活细胞间接免疫荧光法进行这些细胞的免疫表型分析，2例AL免疫表型均已分别由初诊时的CD+2、 CD+7和CD+57车为CD+34、 CD+11b、 CD+15、 CD+19、 CD+20、 CD+22，另一正常人培养后细胞表型也基本同上。染色体核型分析采用细胞培养后，进行G和R显带方法。具体结果见附表。
附表 2例AL和1例正常人细胞培养前后免疫表型及染色体核型结果 例号
免疫表型(荧光阳性百分率%)
, 百拇医药
染色体核型
(G和R显带)
CD2
CD7
CD10
CD11b
CD15
CD19
CD20
CD34
CD57
, http://www.100md.com
HI43(HLA-DP)
AL1
培养前
2
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正常(46,XX)
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AL2
培养前
75
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45,X+,-4,7P+,+i(7q),-8,-9,-9,11q-,-12
, http://www.100md.com
,+mar1,+mar2,+mar3
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培养后
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正常(46,XX
正常人
培养前
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正常(46,XX
培养后
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58
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正常(46,XX
, http://www.100md.com 注：免疫表型培养后测定时间为培养的第9周，染色体培养后检测时间分别
在培养后第9，第15周时进行
由于这些细胞的免疫表型已不具有初诊时白血病细胞表型，而都只表现为造血干细胞、髓细胞及B细胞表型，染色体也不具有初诊时的复杂异常，而皆出现正常核型结构，且在正常人骨髓细胞培养时也可出现这类细胞，所以从以上结果分析可以确定这些细胞为正常造血细胞。这些细胞在体外扩增3个月足够达到骨髓移植所需细胞数。我们认为这是骨髓移植今后发展的一个新方向，它不仅可以减少骨髓移植时所需骨髓(仅需2ml)，而且可以减少骨髓移植的并发症，如异基因骨髓移植时出现的移植物抗宿主反应和排斥反应以及解决自身骨髓移植的体外净化问题。
(收稿：1992-11-20 修回：1993-01-04), 百拇医药