小儿急性淋巴细胞性白血病免疫分型与糖皮质激素受体的关系
作者：廖清奎 杨 平 罗春华 李钦伯 杨崇礼
单位：610041 成都 华西医科大学小儿血液及肿瘤研究室(廖清奎、罗春华、李饮伯、杨崇礼)，海军总医院(杨平)
关键词：
中华医学杂志930918 急性淋巴细胞性白血病(ALL)免疫分型可鉴别出白血病细胞来源及所属分化群，糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GCR)测定作为一项生化指标可用于指导 ALL 的化疗及判断预后〔1〕。但ALL免疫分型与GCR水平的内在联系还不清楚。我们在进行免疫分型的同时，应用放射配基结合分析法测定ALL患儿外周血淋巴细胞GCR水平，探讨不同免疫类型ALL的GCR水平及其对疗效的影响。
一、对象和方法
1.研究对象：1990年5月～1991年12月我院收治初发 ALL 患儿，共50例，男29例，女21例，年龄1岁2个月～12岁。诊断标准按1986年杭州会议制定的小儿急性白血病诊疗建议〔2〕。患儿入院前未接受化疗，两周内未曾使用过激素类药物。
, 百拇医药
2.实验方法：参考 Locabelli 等〔3〕和吴乃允〔4〕等的方法，并加以改进。早晨8时取患儿静脉血 4ml 并用肝素抗凝，用淋巴细胞分离液，以密度梯度离心法分离淋巴细胞，磷酸生理盐水缓冲液洗涤3次并去除内源性激素，将细胞数调至 5×106～10×106/ml。取 0.2ml 细胞悬液加放 3HDex 及PRMI-1640 培养液温浴，0～4℃PBS终止反应，并重复洗涤，用FJ-2015 型液体闪烁计数仪计数并求出每个细胞 GCR 值，单位以结合位点/细胞表示。ABC免疫酶法采用 Hsu 〔5〕ABC法，略加改良。
3.化疗方法及预后估测：所有患儿均使用含糖皮质激素的联合化疗方案(COAP、CODP等)，诱导缓解后加左旋一冬酰胺酶巩固两周。化疗4周骨髓未级解或病情恶化、死亡或半年内复发者列为预后差组，反之为预后好组。估测预后指标包括：年龄，血红蛋白，白细胞，血小板、骨髓涂片原(幼)淋巴细胞计数，肝、脾、淋巴结肿大情况，纵隔肿物存在与否、一般或高危，FAB分型类型，GCR及免疫分型共13项指标。
, 百拇医药
4.统计学处理：统计方法采用t检验、方差分析及Bayes判别分析。
二、结果与讨论
1.免疫类型与 GCR 值：(1)T-ALL型：完全缓解1例，GCR为9 287个结合位点/细胞(以下单位同)。不缓解 5例，GCR为4 270±4 023；(2)非T-ALL型：B细胞型：完全缓解1例，GCR为8 808。不缓解2例，GCR为3 288±1 515；Common型：完全缓解14例，GCR为8 673±4 624。不缓解3例，GCR为2 359±1 458。两者比较t=2.288，P<0.05；前B细胞型：完全缓解3例，GCR 为13 784±13 502。不缓解1例，GCR为1 840；未分化型：完全缓解1例，GCR为14 775±。不缓解1例，GCR为5 472。
2.预后估测：ALL预后好组30例，占60%；预后差组20例，占40%。对其中32例进行免疫分型，预后好组18例，占56%；预后差组14例，占44%。应用Bayes分析法，输入不包括 GCR 及免疫分型的估测预后指标11项，建立数学模型。根据判别公式估测预后，回代符合率为64%，估测效果不理想。在11项指标基础上加GCR值，根据判别公式，估测预后好组为29例，实际为26例预后好，3例预后差；估测预后差组为21例，实际为4例预后好，17例预后差。回代符合率达86%，估测效果理想。在12项指标基础上，加入免疫分型指标，则预测回代符合率达88%，效果更为理想。在13项指标中筛选出5项估测意义较大者，依次为 GCR、免疫分型、白细胞、骨髓原幼细胞和年龄，其回代符合率为84%。以GCR值中位数(5 795结合位点/细胞)为判断ALL预后好差的分界点，判断50例ALL预后，与实际预后比较，其敏感性为73%，特异性为85%，准确性为78%。
, 百拇医药
以上对32例小儿ALL免疫分型与GCR关系的研究表明，T-ALL型及B细胞型GCR明显低于未分化型、Common型及前B细胞型。此两型患者，预后亦差，此两型预后好组比率为17%和33%。而未分化型、Common型及前B细胞型预后好组比率分别为50%、82%和75%。各免疫亚型中预后好组GCR亦明显高于预后差组。
在估测ALL预后的各项指标中，经统计学分析，GCR意义最大，免疫分型次之。可见，ALL患儿外周血淋巴细胞 GCR 值对预测ALL预后有重要意义。因此，我们认为“小儿白血病诊疗建议。”〔2〕中关于标危及高危 ALL 的分类标准中应增加 GCR 一项。
本课题为高等院校博士点专项科研基金资助
参考文献
1 Locabelli S.Glucocorticoid receptors predict response to combination chemotheapy in patients with acute lymphoblastic leukemia.Oncology,1987,44∶13.
, 百拇医药
2 杨士元，李齐 ，朱吉民.小儿急性白血病诊疗建议.中华儿科杂志，1987,25∶177.
3 Locabelli S,Natoli V,Longo P.Glucocorticoid receptor determination in leukemia patients using cytosol and whole cell assays.Cancer Res,1981,41∶3979.
4 吴乃允.正常人周围血淋巴细胞糖皮质激素受体测定.中山医科大学学报，1988,9∶43.
5 Hsu SM.The use of antiavidin antibody and avidinbiotin-peroxidase complex in immunoperoxidase technics.Am J Clin Pathol,1981,75∶816.
(收稿：1992-12-24 修回：1993-05-30), http://www.100md.com
单位：610041 成都 华西医科大学小儿血液及肿瘤研究室(廖清奎、罗春华、李饮伯、杨崇礼)，海军总医院(杨平)
关键词：
中华医学杂志930918 急性淋巴细胞性白血病(ALL)免疫分型可鉴别出白血病细胞来源及所属分化群，糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GCR)测定作为一项生化指标可用于指导 ALL 的化疗及判断预后〔1〕。但ALL免疫分型与GCR水平的内在联系还不清楚。我们在进行免疫分型的同时，应用放射配基结合分析法测定ALL患儿外周血淋巴细胞GCR水平，探讨不同免疫类型ALL的GCR水平及其对疗效的影响。
一、对象和方法
1.研究对象：1990年5月～1991年12月我院收治初发 ALL 患儿，共50例，男29例，女21例，年龄1岁2个月～12岁。诊断标准按1986年杭州会议制定的小儿急性白血病诊疗建议〔2〕。患儿入院前未接受化疗，两周内未曾使用过激素类药物。
, 百拇医药
2.实验方法：参考 Locabelli 等〔3〕和吴乃允〔4〕等的方法，并加以改进。早晨8时取患儿静脉血 4ml 并用肝素抗凝，用淋巴细胞分离液，以密度梯度离心法分离淋巴细胞，磷酸生理盐水缓冲液洗涤3次并去除内源性激素，将细胞数调至 5×106～10×106/ml。取 0.2ml 细胞悬液加放 3HDex 及PRMI-1640 培养液温浴，0～4℃PBS终止反应，并重复洗涤，用FJ-2015 型液体闪烁计数仪计数并求出每个细胞 GCR 值，单位以结合位点/细胞表示。ABC免疫酶法采用 Hsu 〔5〕ABC法，略加改良。
3.化疗方法及预后估测：所有患儿均使用含糖皮质激素的联合化疗方案(COAP、CODP等)，诱导缓解后加左旋一冬酰胺酶巩固两周。化疗4周骨髓未级解或病情恶化、死亡或半年内复发者列为预后差组，反之为预后好组。估测预后指标包括：年龄，血红蛋白，白细胞，血小板、骨髓涂片原(幼)淋巴细胞计数，肝、脾、淋巴结肿大情况，纵隔肿物存在与否、一般或高危，FAB分型类型，GCR及免疫分型共13项指标。
, 百拇医药
4.统计学处理：统计方法采用t检验、方差分析及Bayes判别分析。
二、结果与讨论
1.免疫类型与 GCR 值：(1)T-ALL型：完全缓解1例，GCR为9 287个结合位点/细胞(以下单位同)。不缓解 5例，GCR为4 270±4 023；(2)非T-ALL型：B细胞型：完全缓解1例，GCR为8 808。不缓解2例，GCR为3 288±1 515；Common型：完全缓解14例，GCR为8 673±4 624。不缓解3例，GCR为2 359±1 458。两者比较t=2.288，P<0.05；前B细胞型：完全缓解3例，GCR 为13 784±13 502。不缓解1例，GCR为1 840；未分化型：完全缓解1例，GCR为14 775±。不缓解1例，GCR为5 472。
2.预后估测：ALL预后好组30例，占60%；预后差组20例，占40%。对其中32例进行免疫分型，预后好组18例，占56%；预后差组14例，占44%。应用Bayes分析法，输入不包括 GCR 及免疫分型的估测预后指标11项，建立数学模型。根据判别公式估测预后，回代符合率为64%，估测效果不理想。在11项指标基础上加GCR值，根据判别公式，估测预后好组为29例，实际为26例预后好，3例预后差；估测预后差组为21例，实际为4例预后好，17例预后差。回代符合率达86%，估测效果理想。在12项指标基础上，加入免疫分型指标，则预测回代符合率达88%，效果更为理想。在13项指标中筛选出5项估测意义较大者，依次为 GCR、免疫分型、白细胞、骨髓原幼细胞和年龄，其回代符合率为84%。以GCR值中位数(5 795结合位点/细胞)为判断ALL预后好差的分界点，判断50例ALL预后，与实际预后比较，其敏感性为73%，特异性为85%，准确性为78%。
, 百拇医药
以上对32例小儿ALL免疫分型与GCR关系的研究表明，T-ALL型及B细胞型GCR明显低于未分化型、Common型及前B细胞型。此两型患者，预后亦差，此两型预后好组比率为17%和33%。而未分化型、Common型及前B细胞型预后好组比率分别为50%、82%和75%。各免疫亚型中预后好组GCR亦明显高于预后差组。
在估测ALL预后的各项指标中，经统计学分析，GCR意义最大，免疫分型次之。可见，ALL患儿外周血淋巴细胞 GCR 值对预测ALL预后有重要意义。因此，我们认为“小儿白血病诊疗建议。”〔2〕中关于标危及高危 ALL 的分类标准中应增加 GCR 一项。
本课题为高等院校博士点专项科研基金资助
参考文献
1 Locabelli S.Glucocorticoid receptors predict response to combination chemotheapy in patients with acute lymphoblastic leukemia.Oncology,1987,44∶13.
, 百拇医药
2 杨士元，李齐 ，朱吉民.小儿急性白血病诊疗建议.中华儿科杂志，1987,25∶177.
3 Locabelli S,Natoli V,Longo P.Glucocorticoid receptor determination in leukemia patients using cytosol and whole cell assays.Cancer Res,1981,41∶3979.
4 吴乃允.正常人周围血淋巴细胞糖皮质激素受体测定.中山医科大学学报，1988,9∶43.
5 Hsu SM.The use of antiavidin antibody and avidinbiotin-peroxidase complex in immunoperoxidase technics.Am J Clin Pathol,1981,75∶816.
(收稿：1992-12-24 修回：1993-05-30), http://www.100md.com