兵豆化学成分的研究
作者：朱玉军△ 洪永福 郭学敏 杨根金 孙连娜
单位：
关键词：兵豆；β-谷甾醇；β-谷甾醇棕榈酸酯；胡萝卜苷；棕榈酸；9；10-二羟基硬脂酸；乙基-α-D-吡喃葡糖苷；3-O-甲基-D-手性肌醇；兵豆苷
第二军医大学学报980214 摘要 目的：研究云南产的兵豆(Lens culinaris Medic.)种子中的化学成分，为资源开发利用提供依据。方法：采用溶剂法和层析法分离、纯化兵豆化学成分，并通过理化鉴定与波谱分析，测定所分离出化合物的分子结构。结果与结论：从兵豆果实的乙醇提取物中分离到8个化合物，分别鉴定为β-谷甾醇( Ⅰ)、β-谷甾醇棕榈酸酯(Ⅱ)、胡萝卜苷(Ⅲ)、棕榈酸(Ⅳ)、9,10-二羟基硬脂酸(Ⅴ)、乙基-α-D-吡喃葡糖苷(Ⅵ)、3-O-甲基-D-手性肌醇(Ⅶ)和兵豆苷(Ⅷ)。所有化合物均是首次从该植物中分离得到，其中化合物Ⅷ为一新化合物，命名为兵豆苷。
, 百拇医药
中国图书资料分类法分类号 R 282.705
Studies on the chemical constituents of Lens culinaris Medic.
Zhu Yujun, Hong Yongfu, Guo Xueming, Yang Genjin，Sun Lianna (Division of Natural and Synthetic Drugs, College of Pharmacy, Second Military Medical University, Shanghai，200433)
Abstract Objective: To study the chemical constituents of seed of Lens culinaris Medic. produced from Yun Nan and provide the evidence for exploitation and utilization of this plant resources. Methods: Isolation and purification of chemical constituents of Lens culinaris Mcdic. by solvent extraction and chromatography, and their structures were identified by physicochemical properties and spectroscopic analysis. Results and Conclusion: Eight compounds were isolated from the seed of ethanol extract of Lens culinaris Mcdic. and identified as:SUB Ⅰ, β-sitosterol; SUB Ⅱ,β-sitosteryl palmitate; SUB Ⅲ, daucosterol; SUB Ⅳ, palmitic acid; SUB Ⅴ,9,10-dihydroxy-octadecanoic acid; SUB Ⅵ,ethyl-α-D-glucopyranoside; SUB Ⅶ, 3-O-methyl-D-chiroinositol; SUB Ⅷ,culinariside. These compounds were obtained from Lens culinaris Medic. for the first time. Among them,SUB Ⅷ is a new compound.
, 百拇医药
Key words Lens culinaris; β-sitosterol; β-sitosteryl palmitate; daucosterol; palmitic acid; 9,10-dihydro-xy-octadecanoic acid; ethyl-α-D-glucopyranoside; 3-O-methyl-D-chiroinositol; culinariside
兵豆(Lens culinaris Medic.)系豆科兵豆属植物，又名滨豆，小扁豆，为一年生草本。在我国分布较广[1]。国内外未见对兵豆化学成分的系统研究报道。本研究室曾从兵豆中提取、分离得到糖蛋白小扁豆凝集素(lentil lectin)，用于检测AFP异质体，诊断原发性早期肝癌取得良好效果[2]。本实验对兵豆的化学成分进行研究，从该植物中首次分离得到8个化合物，其中化合物Ⅷ是新化合物。
1 材料和方法
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1.1 仪器与试剂 日本Yanaco显微熔点测定仪，温度未经校正；日立270-50P红外光谱仪，Finnigar MAT95 型质谱仪，上海物理光学仪器厂WZZ-1型自动指示旋光仪，Bruker-Spectrospin Ac-300P和Bruker AMX-400型核磁共振仪。硅胶为青岛海洋化工厂生产。所有试剂均为AR级。兵豆采集于云南省元谋县，经本院生药教研室乔传卓教授鉴定确认。
1.2 提取和分离 兵豆60 kg经粉碎以95%乙醇回流提取，浓缩后得浸膏1.8 kg, 上粗硅胶柱，分别以苯(Ben)、乙酸乙酯(EtOAc)和甲醇(MeOH)洗脱得到相应的3部分，再反复上硅胶柱。从Ben部分得到化合物 Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，EtOAc部分得到化合物Ⅳ, MeOH部分得到化合物Ⅴ，Ⅵ，Ⅶ和Ⅷ。
1.3 鉴定 将所分离得到的8个化合物进行熔点、颜色反应、高效薄层酸水解、IR，1H-NMR，13C-NMR，DEPT谱、Inverse-gated -13C-NMR谱、C-H近程相关谱、HMBC谱、EI-MS，FAB-MS谱的测定，分析确认其化学结构。
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2 结 果
化合物 Ⅰ：无色片晶(CHCl3)；mp.139.0～140.0℃；其理化常数、化学反应及IR，EI-MS数据均与文献报道β-谷甾醇一致。
化合物Ⅱ：无色片晶(CHCl3)；mp.91.5～92℃。元素分析,C45H80O2, 理论值(%): C，82.75; H，12.35；实验值(%)：C，82.95; H，12.51。IR(KBr)cm-1: 2 925，2 860, 2 325, 1 742, 1 461, 1 380, 1 163, 1 008。EI-MS m/z, 414，396，382，361， 330， 255，245，213，149，81，69，57。CI-MS m/z, 637(M+-15)，397。13C-NMR(CDCl3, 300 MHz)δ, 173.32(>C=O), 139.74(>C=), 122.56(=CH), 73.67(-O-C<)。Inverse-gated-13C-NMR谱示有45个碳原子。DEPT谱示有7×CH3，25×CH2，9×CH，4×C。IR 和1H-NMR 谱与文献报道的β-谷甾醇-棕榈酸酯标准图谱一致[3]。
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化合物Ⅲ：为白色粉末(EtOH)；mp.287.0～289.0℃。α-萘酚反应和 L-B 反应阳性，水解后检出β-D-葡萄糖和β-谷甾醇，与胡萝卜苷标准品混合熔点不下降。IR, EI-MS数据与文献报道胡萝卜苷一致[4]。
化合物 Ⅳ：白色片晶(CHCl3)；mp.61.5～62℃。IR(KBr)cm-1：3 400，2 925，2 852，2 500，1 698(-COOH)，1 425(CH2)，720。1H-NMR(CDCl3)δ：0.89 (3H，t，J=6.7Hz,-CH3)，1.26(m, 12×CH2), 1.64(2H,m,CH*2-CH2-C=0)，2.35(2H,t, J=7.5 Hz, -CH2-C=O)。13C-NMR(CDCl3)δ:179.28(C=O)，14.01(-CH3)。EI-MS m/z:256(M+)，227，213,199,185，171，157，143，129，115，101，87，73，60，以上数据与棕榈酸文献报道一致。
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化合物Ⅴ：白色粒状结晶(MeOH)；mp.93.5～95.0℃。FAB-MS m/z： 317 (M++1), 339(M++Na)，355(M++K), 表明相对分子质量为316，结合元素分析得分子式为C18H36O4，理论值(%): C，68.31；H，11.47；实验值(%)：C，68.59；H，11.68；推测为二羟基硬脂酸。IR谱示有羟基(3 300 cm-1)，羰基(1 700 cm-1)，脂肪链(720 cm-1)。EI-MS m/z 173,143两个碎片离子说明两个羟基位于9，10位。1H-NMR(CD3OD) δ 0.89(3H，t, -CH3)，1.59(2H，m，3-CH2)，2.27(2H，t，J=7.38 Hz, 2-CH2)，3.35(m，2×CH)。HOMO谱显示，照射δ 2.27处时，δ 1.59处的多重峰简单化，而照射δ 1.59处时，δ 2.27处的三重峰变为单峰，由此判定δ 2.27为2-CH2，δ 1.59为3-CH2。13C-NMR谱示有羰基(δ 177.65),两个连氧次甲基(δ 75.29),共计18个碳原子。IR 与9,10-二羟基硬脂酸文献值一致，故此化合物鉴定为9，10-二羟基硬脂酸。
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化合物Ⅵ：白色粉末(CH3OH)；mp.142～143℃。α-萘酚反应显红色。元素分析C8H16O6，理论值(%)：C，46.15；H，7.75；实验值(%)：C，45.97；H，7.87。IR(KBr)cm-1：3 360，3 250，2 980，2 950， 1 480，1 150，1 070，800。1H-NMR(CD3OD)δ：4.82(1H，d，J=2.89，1-H)，3.48(1H，m，5-H)，1.23 (3H，t，-CH3)，3.67～3.87(7H，m)。13C-NMR(CD3OD)δ：100.134(1-C)，15.27(-CH3)，62.75～72.31有6个碳原子的吸收峰。高效薄层酸水解检出α-D-吡喃葡萄糖，由此鉴定此化合物为乙基-α-D-吡喃葡糖苷。
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化合物Ⅶ：白色无定形粉末(CH3OH)；mp.188～189℃。α-萘酚试验阴性。元素分析C7H14O6，理论值(%)：C，43.30；H，7.22；实验值(%)：C，42.91；H，7.45。旋光度[α]D=+64.5o(C=1，H2O)。IR(KBr)cm-1：3 410，3 330(-OH)，2 925，1 380(-CH3)，1 070(-C-O-C-)。EI-MS(m/z)：195(M++1)，176(M+-18)，158，144，103，87，73，60，57。1H-NMR(C5D5N)δ： 3.95(3H, s, -OCH3)，4.18(1H,t,J=9.3,3-H)，4.67(1H,t,J=9.3,4-H)，4.77(1H，dd，Jaa=9.3，Jae=2.8，2-H)，4.78((1H，dd，Jaa=9.3，Jae=2.8，5-H)，4.83(1H，t，Jae=Jee=2.9，1-H)，4.84(1H,t,Jae=Jee=2.9，6-H)。 13C-NMR(C5D5N)δ： 85.75(3-C)，60.68(-OCH3)。其理化性质及波谱数据与3-O-甲基-D-手肌醇文献值一致。
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化合物Ⅷ：无色粒状结晶(MeOH)；mp.149～150℃。元素分析C45H87NO10*3H2O，理论值(%)：C，63.12；H，10.95；N，1.64；实验值(%)：C，63.07；H，10.72；N，1.65。FAB-MS测得[M+]为801，得分子式为C45H87NO10。高效薄层酸水解检出葡萄糖。IR谱示有糖基(3 400, 1 078 cm-1),酰胺基(1 650, 1 540 cm-1), 脂肪链(720 cm-1)。1H-NMR(C5D5N) δ 7.53(1H, d，N-H),5.34(2H，d，H-C=C-H)，5.60～4.30(7H，OH)，4.12(1H，d，J=7.62 Hz，1″-H)，由此亦可知糖为β构型。13C-NMR显示有羰基、双键和糖端基碳(见表1)。DEPT谱显示有一个季碳(>C=O)，2×CH3，31×CH2，11×CH。Inverse-gated 13C-NMR谱表明该化合物共有45个碳原子。C-H 近程相关谱(表2)可见所有的碳与氢的连接。HMBC谱显示：1″-H(δ 4.12)与3″-C(δ 76.83)及1-C(δ 69.02)相关，1-H(δ 3.82)与1″-C (δ 103.44) 相关，由此可知糖是通过1″-C与1-C连接。1-H(δ 3.82)与2-C(CH2, δ 49.91)相关，N-H(δ 7.53)与2-C(CH, δ 49.91)及1′-C(>C=O,δ 173.74)相关，由此可得出碎片(1)。2′-H(CH, δ 3.82)与1′-C(>C=O, δ 173.74)，3′-C(CH2, δ 34.37)及4′-C(CH2, δ 29.08) 相关，2′-OH(δ 5.59)与2′-C(CH, δ 70.96)，1′-C (>C=O, δ 173.74)及3′-C(CH2, δ 34.37)相关，3′-H(CH2, δ 1.47)与2′-C(CH, δ 70.96)相关，由以上相关可得出碎片(2)。3-H(CH, δ 3.33)与1-C(CH2, δ 69.02)相关，3-OH(δ 4.76)与2-C(CH, δ 49.91)，3-C(CH,δ 73.91) 及4-C(CH,δ 70.51)相关，4-OH(δ 4.32)与3-C(CH,δ 73.91)，4-C(CH, δ 70.51)及5-C(CH2,δ 31.32)相关。由以上相关可得出碎片(3)(图1)。从以上3个结构片段可见该化合物为脑酰胺类化合物，其EI-MS(m/z): 520，478，449，421，393，365，337，323，309，294，281，267，253，239，225，211，197，183，169，155，127，113，99，85，71，57(基峰)，表明此化合物有长碳链，与文献中报道的类似物质光谱数据比较，其中m/z 281及其后一系列n-14片段来自侧链-(CH2)17CH3[5]。CI-MS(m/z) 636[M+-(glu+2)], 354(516-glu+1)，326(488-glu+1)及FAB-MS (m/z)636, 亦表明该化合物中含有葡萄糖基。CI-MS(m/z) 516(M+-283-2)及488(M+-311-2)可证明连接羰基的链为-(CH2)17CH3。FAB-MS (m/z) 552[M+-(glu+2)-84]，以及带双键侧链所产生的碎片离子峰m/z 85，139和麦氏重排产生的m/z 84，与文献中侧链含双键的脑酰胺化合物的FAB MS/MS数据比较,推断双键位置在C11位[6,7]。综上所述,可得出化合物Ⅷ的化学结
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表1 化合物Ⅷ的13C-NMR谱数据
Tab 1 13C-NMR spectral data for compound Ⅷ C
δ
C
δ
1″
103.44
2
49.91
2″
73.40
, 百拇医药 3
73.91
3″
76.83
4
70.51
4″
69.98
1′
173.74
5″
76.45
2′
, 百拇医药
70.96
6″
61.02
11
129.54
1
69.02
12
130.22
图1 碎片(1),(2),(3)以及化合物(4)的化学结构式
Fig 1 The chemical structures of fragment (1),(2),(3) and compound (4)
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表 2 化合物Ⅷ的1H-13C近程相关谱数据
Tab 2 Cross peak of proton to carbon in 1H-13C COSY of compound Ⅷ C
δ
H
δ
C
δ
H
δ
12
, 百拇医药 130.22
12
5.34
4
70.51
4
3.33
11
129.54
11
5.34
4″
69.98
, 百拇医药
4″
3.10
1″
103.44
1″
4.12
1
69.02
1
3.82
3″
76.83
3″
, 百拇医药
3.10
6″
61.02
6″
3.65
5″
76.45
5″
3.10
3′
34.37
3′
1.47
, 百拇医药
3
73.91
3
3.33
10
32.31
10
1.91
2″
73.40
2″
2.92
13
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32.06
13
1.91
2′
70.96
2′
3.82
构式(4)。该化合物未见文献报道，为一新化合物，命名为兵豆苷(culinariside)。
3 讨 论
世界上有8种兵豆属植物，主要分布于地中海地区和亚洲西部。我国栽培的只有一种，南北均有分布，资源丰富。目前对兵豆的化学成分与药理作用研究甚少。本研究从兵豆果实的乙醇提取物中分离得到8个化合物，均为首次从该植物中得到，其中化合物Ⅷ为一新化合物兵豆苷。这些化合物的分离与结构鉴定工作，为开发和利用兵豆资源提供参考。
, 百拇医药
致谢 本院精密仪器室、上海高桥石化研究院、上海药物所协助有关分析与检测，特此谢忱。
参 考 文 献
1 中国科学院西北植物研究所. 秦岭植物志(第1卷. 第2册). 北京: 科学出版社, 1981. 99～100
2 洪永福. 国产小扁豆凝集素用于诊断早期肝癌. 药学情报通讯, 1991, 9(4):96
3 岛越泰羲. おうばての成分研究. その1. 酸性成分および中性成分について. 药学杂志(日), 1965, 85(2):176
4 郭学敏, 周卓轮, 洪永福. 猫爪草化学成分的研究. 药学学报, 1995, 30(12):931
5 Karlsson KA, Leffer H, Samuelsson BE. Characterization of cerebroside from the sea anemone, Metridium senile. Identification of the major long-chain base as an unusual dienic base with a methyl branch at a double bond. Biochim Biophys Acta, 1979, 574(1):79
, 百拇医药
6 Yasuhiko Fujino, Masao Ohnishi. Structure of cerebroside in Aspergillus oryzae.Biochim Biophys Acta, 1977,486(1):161
7 Brarro D, Catherine EC. Structure elucidation of glycosphingolipids and ganglioside using High-Performance Tandem Mass Spectrometry. Biochemistry, 1988,27(5):1534
(1997-08-22收稿，1997-12-10修回), 百拇医药
单位：
关键词：兵豆；β-谷甾醇；β-谷甾醇棕榈酸酯；胡萝卜苷；棕榈酸；9；10-二羟基硬脂酸；乙基-α-D-吡喃葡糖苷；3-O-甲基-D-手性肌醇；兵豆苷
第二军医大学学报980214 摘要 目的：研究云南产的兵豆(Lens culinaris Medic.)种子中的化学成分，为资源开发利用提供依据。方法：采用溶剂法和层析法分离、纯化兵豆化学成分，并通过理化鉴定与波谱分析，测定所分离出化合物的分子结构。结果与结论：从兵豆果实的乙醇提取物中分离到8个化合物，分别鉴定为β-谷甾醇( Ⅰ)、β-谷甾醇棕榈酸酯(Ⅱ)、胡萝卜苷(Ⅲ)、棕榈酸(Ⅳ)、9,10-二羟基硬脂酸(Ⅴ)、乙基-α-D-吡喃葡糖苷(Ⅵ)、3-O-甲基-D-手性肌醇(Ⅶ)和兵豆苷(Ⅷ)。所有化合物均是首次从该植物中分离得到，其中化合物Ⅷ为一新化合物，命名为兵豆苷。
, 百拇医药
中国图书资料分类法分类号 R 282.705
Studies on the chemical constituents of Lens culinaris Medic.
Zhu Yujun, Hong Yongfu, Guo Xueming, Yang Genjin，Sun Lianna (Division of Natural and Synthetic Drugs, College of Pharmacy, Second Military Medical University, Shanghai，200433)
Abstract Objective: To study the chemical constituents of seed of Lens culinaris Medic. produced from Yun Nan and provide the evidence for exploitation and utilization of this plant resources. Methods: Isolation and purification of chemical constituents of Lens culinaris Mcdic. by solvent extraction and chromatography, and their structures were identified by physicochemical properties and spectroscopic analysis. Results and Conclusion: Eight compounds were isolated from the seed of ethanol extract of Lens culinaris Mcdic. and identified as:SUB Ⅰ, β-sitosterol; SUB Ⅱ,β-sitosteryl palmitate; SUB Ⅲ, daucosterol; SUB Ⅳ, palmitic acid; SUB Ⅴ,9,10-dihydroxy-octadecanoic acid; SUB Ⅵ,ethyl-α-D-glucopyranoside; SUB Ⅶ, 3-O-methyl-D-chiroinositol; SUB Ⅷ,culinariside. These compounds were obtained from Lens culinaris Medic. for the first time. Among them,SUB Ⅷ is a new compound.
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Key words Lens culinaris; β-sitosterol; β-sitosteryl palmitate; daucosterol; palmitic acid; 9,10-dihydro-xy-octadecanoic acid; ethyl-α-D-glucopyranoside; 3-O-methyl-D-chiroinositol; culinariside
兵豆(Lens culinaris Medic.)系豆科兵豆属植物，又名滨豆，小扁豆，为一年生草本。在我国分布较广[1]。国内外未见对兵豆化学成分的系统研究报道。本研究室曾从兵豆中提取、分离得到糖蛋白小扁豆凝集素(lentil lectin)，用于检测AFP异质体，诊断原发性早期肝癌取得良好效果[2]。本实验对兵豆的化学成分进行研究，从该植物中首次分离得到8个化合物，其中化合物Ⅷ是新化合物。
1 材料和方法
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1.1 仪器与试剂 日本Yanaco显微熔点测定仪，温度未经校正；日立270-50P红外光谱仪，Finnigar MAT95 型质谱仪，上海物理光学仪器厂WZZ-1型自动指示旋光仪，Bruker-Spectrospin Ac-300P和Bruker AMX-400型核磁共振仪。硅胶为青岛海洋化工厂生产。所有试剂均为AR级。兵豆采集于云南省元谋县，经本院生药教研室乔传卓教授鉴定确认。
1.2 提取和分离 兵豆60 kg经粉碎以95%乙醇回流提取，浓缩后得浸膏1.8 kg, 上粗硅胶柱，分别以苯(Ben)、乙酸乙酯(EtOAc)和甲醇(MeOH)洗脱得到相应的3部分，再反复上硅胶柱。从Ben部分得到化合物 Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，EtOAc部分得到化合物Ⅳ, MeOH部分得到化合物Ⅴ，Ⅵ，Ⅶ和Ⅷ。
1.3 鉴定 将所分离得到的8个化合物进行熔点、颜色反应、高效薄层酸水解、IR，1H-NMR，13C-NMR，DEPT谱、Inverse-gated -13C-NMR谱、C-H近程相关谱、HMBC谱、EI-MS，FAB-MS谱的测定，分析确认其化学结构。
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2 结 果
化合物 Ⅰ：无色片晶(CHCl3)；mp.139.0～140.0℃；其理化常数、化学反应及IR，EI-MS数据均与文献报道β-谷甾醇一致。
化合物Ⅱ：无色片晶(CHCl3)；mp.91.5～92℃。元素分析,C45H80O2, 理论值(%): C，82.75; H，12.35；实验值(%)：C，82.95; H，12.51。IR(KBr)cm-1: 2 925，2 860, 2 325, 1 742, 1 461, 1 380, 1 163, 1 008。EI-MS m/z, 414，396，382，361， 330， 255，245，213，149，81，69，57。CI-MS m/z, 637(M+-15)，397。13C-NMR(CDCl3, 300 MHz)δ, 173.32(>C=O), 139.74(>C=), 122.56(=CH), 73.67(-O-C<)。Inverse-gated-13C-NMR谱示有45个碳原子。DEPT谱示有7×CH3，25×CH2，9×CH，4×C。IR 和1H-NMR 谱与文献报道的β-谷甾醇-棕榈酸酯标准图谱一致[3]。
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化合物Ⅲ：为白色粉末(EtOH)；mp.287.0～289.0℃。α-萘酚反应和 L-B 反应阳性，水解后检出β-D-葡萄糖和β-谷甾醇，与胡萝卜苷标准品混合熔点不下降。IR, EI-MS数据与文献报道胡萝卜苷一致[4]。
化合物 Ⅳ：白色片晶(CHCl3)；mp.61.5～62℃。IR(KBr)cm-1：3 400，2 925，2 852，2 500，1 698(-COOH)，1 425(CH2)，720。1H-NMR(CDCl3)δ：0.89 (3H，t，J=6.7Hz,-CH3)，1.26(m, 12×CH2), 1.64(2H,m,CH*2-CH2-C=0)，2.35(2H,t, J=7.5 Hz, -CH2-C=O)。13C-NMR(CDCl3)δ:179.28(C=O)，14.01(-CH3)。EI-MS m/z:256(M+)，227，213,199,185，171，157，143，129，115，101，87，73，60，以上数据与棕榈酸文献报道一致。
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化合物Ⅴ：白色粒状结晶(MeOH)；mp.93.5～95.0℃。FAB-MS m/z： 317 (M++1), 339(M++Na)，355(M++K), 表明相对分子质量为316，结合元素分析得分子式为C18H36O4，理论值(%): C，68.31；H，11.47；实验值(%)：C，68.59；H，11.68；推测为二羟基硬脂酸。IR谱示有羟基(3 300 cm-1)，羰基(1 700 cm-1)，脂肪链(720 cm-1)。EI-MS m/z 173,143两个碎片离子说明两个羟基位于9，10位。1H-NMR(CD3OD) δ 0.89(3H，t, -CH3)，1.59(2H，m，3-CH2)，2.27(2H，t，J=7.38 Hz, 2-CH2)，3.35(m，2×CH)。HOMO谱显示，照射δ 2.27处时，δ 1.59处的多重峰简单化，而照射δ 1.59处时，δ 2.27处的三重峰变为单峰，由此判定δ 2.27为2-CH2，δ 1.59为3-CH2。13C-NMR谱示有羰基(δ 177.65),两个连氧次甲基(δ 75.29),共计18个碳原子。IR 与9,10-二羟基硬脂酸文献值一致，故此化合物鉴定为9，10-二羟基硬脂酸。
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化合物Ⅵ：白色粉末(CH3OH)；mp.142～143℃。α-萘酚反应显红色。元素分析C8H16O6，理论值(%)：C，46.15；H，7.75；实验值(%)：C，45.97；H，7.87。IR(KBr)cm-1：3 360，3 250，2 980，2 950， 1 480，1 150，1 070，800。1H-NMR(CD3OD)δ：4.82(1H，d，J=2.89，1-H)，3.48(1H，m，5-H)，1.23 (3H，t，-CH3)，3.67～3.87(7H，m)。13C-NMR(CD3OD)δ：100.134(1-C)，15.27(-CH3)，62.75～72.31有6个碳原子的吸收峰。高效薄层酸水解检出α-D-吡喃葡萄糖，由此鉴定此化合物为乙基-α-D-吡喃葡糖苷。
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化合物Ⅶ：白色无定形粉末(CH3OH)；mp.188～189℃。α-萘酚试验阴性。元素分析C7H14O6，理论值(%)：C，43.30；H，7.22；实验值(%)：C，42.91；H，7.45。旋光度[α]D=+64.5o(C=1，H2O)。IR(KBr)cm-1：3 410，3 330(-OH)，2 925，1 380(-CH3)，1 070(-C-O-C-)。EI-MS(m/z)：195(M++1)，176(M+-18)，158，144，103，87，73，60，57。1H-NMR(C5D5N)δ： 3.95(3H, s, -OCH3)，4.18(1H,t,J=9.3,3-H)，4.67(1H,t,J=9.3,4-H)，4.77(1H，dd，Jaa=9.3，Jae=2.8，2-H)，4.78((1H，dd，Jaa=9.3，Jae=2.8，5-H)，4.83(1H，t，Jae=Jee=2.9，1-H)，4.84(1H,t,Jae=Jee=2.9，6-H)。 13C-NMR(C5D5N)δ： 85.75(3-C)，60.68(-OCH3)。其理化性质及波谱数据与3-O-甲基-D-手肌醇文献值一致。
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化合物Ⅷ：无色粒状结晶(MeOH)；mp.149～150℃。元素分析C45H87NO10*3H2O，理论值(%)：C，63.12；H，10.95；N，1.64；实验值(%)：C，63.07；H，10.72；N，1.65。FAB-MS测得[M+]为801，得分子式为C45H87NO10。高效薄层酸水解检出葡萄糖。IR谱示有糖基(3 400, 1 078 cm-1),酰胺基(1 650, 1 540 cm-1), 脂肪链(720 cm-1)。1H-NMR(C5D5N) δ 7.53(1H, d，N-H),5.34(2H，d，H-C=C-H)，5.60～4.30(7H，OH)，4.12(1H，d，J=7.62 Hz，1″-H)，由此亦可知糖为β构型。13C-NMR显示有羰基、双键和糖端基碳(见表1)。DEPT谱显示有一个季碳(>C=O)，2×CH3，31×CH2，11×CH。Inverse-gated 13C-NMR谱表明该化合物共有45个碳原子。C-H 近程相关谱(表2)可见所有的碳与氢的连接。HMBC谱显示：1″-H(δ 4.12)与3″-C(δ 76.83)及1-C(δ 69.02)相关，1-H(δ 3.82)与1″-C (δ 103.44) 相关，由此可知糖是通过1″-C与1-C连接。1-H(δ 3.82)与2-C(CH2, δ 49.91)相关，N-H(δ 7.53)与2-C(CH, δ 49.91)及1′-C(>C=O,δ 173.74)相关，由此可得出碎片(1)。2′-H(CH, δ 3.82)与1′-C(>C=O, δ 173.74)，3′-C(CH2, δ 34.37)及4′-C(CH2, δ 29.08) 相关，2′-OH(δ 5.59)与2′-C(CH, δ 70.96)，1′-C (>C=O, δ 173.74)及3′-C(CH2, δ 34.37)相关，3′-H(CH2, δ 1.47)与2′-C(CH, δ 70.96)相关，由以上相关可得出碎片(2)。3-H(CH, δ 3.33)与1-C(CH2, δ 69.02)相关，3-OH(δ 4.76)与2-C(CH, δ 49.91)，3-C(CH,δ 73.91) 及4-C(CH,δ 70.51)相关，4-OH(δ 4.32)与3-C(CH,δ 73.91)，4-C(CH, δ 70.51)及5-C(CH2,δ 31.32)相关。由以上相关可得出碎片(3)(图1)。从以上3个结构片段可见该化合物为脑酰胺类化合物，其EI-MS(m/z): 520，478，449，421，393，365，337，323，309，294，281，267，253，239，225，211，197，183，169，155，127，113，99，85，71，57(基峰)，表明此化合物有长碳链，与文献中报道的类似物质光谱数据比较，其中m/z 281及其后一系列n-14片段来自侧链-(CH2)17CH3[5]。CI-MS(m/z) 636[M+-(glu+2)], 354(516-glu+1)，326(488-glu+1)及FAB-MS (m/z)636, 亦表明该化合物中含有葡萄糖基。CI-MS(m/z) 516(M+-283-2)及488(M+-311-2)可证明连接羰基的链为-(CH2)17CH3。FAB-MS (m/z) 552[M+-(glu+2)-84]，以及带双键侧链所产生的碎片离子峰m/z 85，139和麦氏重排产生的m/z 84，与文献中侧链含双键的脑酰胺化合物的FAB MS/MS数据比较,推断双键位置在C11位[6,7]。综上所述,可得出化合物Ⅷ的化学结
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表1 化合物Ⅷ的13C-NMR谱数据
Tab 1 13C-NMR spectral data for compound Ⅷ C
δ
C
δ
1″
103.44
2
49.91
2″
73.40
, 百拇医药 3
73.91
3″
76.83
4
70.51
4″
69.98
1′
173.74
5″
76.45
2′
, 百拇医药
70.96
6″
61.02
11
129.54
1
69.02
12
130.22
图1 碎片(1),(2),(3)以及化合物(4)的化学结构式
Fig 1 The chemical structures of fragment (1),(2),(3) and compound (4)
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表 2 化合物Ⅷ的1H-13C近程相关谱数据
Tab 2 Cross peak of proton to carbon in 1H-13C COSY of compound Ⅷ C
δ
H
δ
C
δ
H
δ
12
, 百拇医药 130.22
12
5.34
4
70.51
4
3.33
11
129.54
11
5.34
4″
69.98
, 百拇医药
4″
3.10
1″
103.44
1″
4.12
1
69.02
1
3.82
3″
76.83
3″
, 百拇医药
3.10
6″
61.02
6″
3.65
5″
76.45
5″
3.10
3′
34.37
3′
1.47
, 百拇医药
3
73.91
3
3.33
10
32.31
10
1.91
2″
73.40
2″
2.92
13
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32.06
13
1.91
2′
70.96
2′
3.82
构式(4)。该化合物未见文献报道，为一新化合物，命名为兵豆苷(culinariside)。
3 讨 论
世界上有8种兵豆属植物，主要分布于地中海地区和亚洲西部。我国栽培的只有一种，南北均有分布，资源丰富。目前对兵豆的化学成分与药理作用研究甚少。本研究从兵豆果实的乙醇提取物中分离得到8个化合物，均为首次从该植物中得到，其中化合物Ⅷ为一新化合物兵豆苷。这些化合物的分离与结构鉴定工作，为开发和利用兵豆资源提供参考。
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致谢 本院精密仪器室、上海高桥石化研究院、上海药物所协助有关分析与检测，特此谢忱。
参 考 文 献
1 中国科学院西北植物研究所. 秦岭植物志(第1卷. 第2册). 北京: 科学出版社, 1981. 99～100
2 洪永福. 国产小扁豆凝集素用于诊断早期肝癌. 药学情报通讯, 1991, 9(4):96
3 岛越泰羲. おうばての成分研究. その1. 酸性成分および中性成分について. 药学杂志(日), 1965, 85(2):176
4 郭学敏, 周卓轮, 洪永福. 猫爪草化学成分的研究. 药学学报, 1995, 30(12):931
5 Karlsson KA, Leffer H, Samuelsson BE. Characterization of cerebroside from the sea anemone, Metridium senile. Identification of the major long-chain base as an unusual dienic base with a methyl branch at a double bond. Biochim Biophys Acta, 1979, 574(1):79
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6 Yasuhiko Fujino, Masao Ohnishi. Structure of cerebroside in Aspergillus oryzae.Biochim Biophys Acta, 1977,486(1):161
7 Brarro D, Catherine EC. Structure elucidation of glycosphingolipids and ganglioside using High-Performance Tandem Mass Spectrometry. Biochemistry, 1988,27(5):1534
(1997-08-22收稿，1997-12-10修回), 百拇医药