乙型肝炎患者血中转化生长因子β1
作者：邬光惠 黄耀煊 范公忍 张桂霞
单位：北京军区总医院解放军肝病研究所 北京市 100700
关键词：肝炎，乙型，免疫学；转化生长因子β/遗传学；RNA，信使/代谢；肝炎病毒，乙型
华人消化杂志980615.htm Serum transformation growth factor β1 in patients with hepatitis B
WU Guang-Hui, HUANG Yao-Xuan, FAN Gong-Ren and ZHANG Gui-Xia
Institute of Hepatology, Chinese PLA General Hospital of Beijing Command Area, Beijing 100700, China
, 百拇医药
Subject headings hepatitis B/immunology; transforming growth factor beta/genetics; RNA, messenger/metabolism; hepatitis B virus
Abstract
AIM To measure TGFβ1 levels and HBV protein positive rate in the sera or patients with hepatitis B.
METHODS The serum samples from 24 patients with acute hepatitis B (AHB) and 24 patients with chronic hepatitis B(CHB) were measured for TGF β1 by using Promega＇s kit and HBX protein by anti-HBX antibody produced in our laboratory.
, 百拇医药
RESULTS The serum TGFβ1 levels (μg/L) in AHB and CHB patients were 23.6±7.7 and 19.7±8.9 respectively and both were significantly higher than those in normal controls (8.0±3.4，P<0.01). And HBX protein was present in 25.0% of the serum samples from patients with AHB, but 50% of those from patients with CHB. The TGFβ1 were higher than median value in 83% of the HBX positive serum from CHB patients.
CONCLUSION The serum levels of TGFβ1 were significantly increased in patients with AHB or CHB. Fifty percent of the serum samples from CHB patients were HBX protein positive and 83% of these patients show higher serum TGFβ1 level.
, 百拇医药
中国图书资料分类号 R512.62
摘 要
目的 分析急性乙型肝炎(AHB)和慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中有生物活性的TGF β1蛋白水平和HBX蛋白阳性率.
方法 AHB和CHB患者各24例，用Promega免疫分析试剂盒检测血清中TGFβ1浓度，并用自产的抗HBX单克隆抗体ELISA检测血清中HBX蛋白的存在.
结果 AHB组和CHB组的TGFβ1水平(μg/L)分别为23.6±7.7和19.7±8.9，均明显高于对照组8.0±3.4，P<0.01)，但两组之间区别不大. 血清中HBX阳性率AHB组为25.0%，CHB组达50.0%，HBX阳性的慢性肝炎患者15例中有10例(83%)TGFβ1血清水平高于中位值.
结论 AHB和CHB患者血清中TGFβ1水平明显升高，CHB组有半数患者血清呈HBX蛋白阳性，而这些HBX阳性患者中83%显示有较高的TGFβ1血清水平.
, 百拇医药
0 引言
转化生长因子β1(TGFβ1)是具有多种生物功能的细胞因子，在动物模型试验中证明在肝细胞增生中有重要作用. TGFβ1可抑制肝细胞增生，抑制肝细胞生长因子(HGF)对肝细胞有丝分裂的促进作用. Masuhara et al[1]报道肝炎患者肝组织中TGFβ1和HGF的mRNA表达明显增加. Yoo et al[2]报道，在能表达乙型肝炎病毒(HBV)X基因(HBx)的转基因小鼠中HBx基因可激活TGFβ1基因的转录. 为了解表达TGFβ1蛋白在血循环中的水平和HBV X蛋白(HBX)的存在，我们对急性和慢性乙型肝炎患者血清作TGFβ1和HBX蛋白的分析和比较.
1 对象和方法
1.1 对象 急性乙型肝炎患者30例，年龄18岁～77岁，男23例，女7例. 慢性乙型肝炎患者30例，年龄20岁～58岁，男21例，女9例. 对照组为健康供血者20例.
, http://www.100md.com
1.2 方法 用美国Promega公司产的TGFβ1免疫分析试剂盒，ELISA法测定患者血清中有生物活性的TGFβ1. 操作按说明书进行. 患者血清中HBX蛋白的检测系用本实验室以重组HBX蛋白研制成的抗HBX单克隆抗体，采用ELISA法测定的.
统计学处理 测定结果用±s表示，组间比较用t检验.
2 结果
2.1 乙型肝炎患者血清TGFβ1水平 急性和慢性乙型肝炎患者血清中的TGFβ1水平均明显高于对照组(P<0.01，表1).
表1 急慢性肝炎患者血清TGFβ1水平
(
±s, μg/L) 组别
, 百拇医药
n
TGFβ1
急性乙型肝炎
30
23.6±7.7b
慢性乙型肝炎
30
19.7±8.9b
对照
20
8.0±3.4
bP<0.01， vs 对照组.
, 百拇医药
2.2 乙型肝炎患者血清中HBX蛋白的阳性率 血清中有HBX蛋白22例，其中，急性肝炎7例，慢性肝炎15例，慢性肝炎HBX阳性率高于急性肝炎(表2).
表2 急慢性肝炎患者血清HBX阳性率 组别
n
HBX阳性率%
急性乙型肝炎
30
23.3
慢性乙型肝炎
30
50.0
对
, 百拇医药
20
0.0
2.3 血清TGFβ1水平和HBX阳性率的比较 在上述血清HBX阳性的慢性肝炎患者15例中，有10例(83%) 血清TGFβ1水平高于中位值.
3 讨论
TGFα，TGFβ1和HGF在动物模型试验中显示，在肝细胞增生中起有重要作用. TGFβ1可抑制间质细胞分泌HGF和HGF的促肝细胞分裂作用，抑制肝细胞的增生. HGF是强促细胞分裂剂. 当人肝脏受到损伤时，HGF分泌增加，血清中水平上升，故血清HGF水平可以反映肝细胞损伤及肝功能障碍的程度[3]. 暴发性肝炎患者血清HGF水平持续上升，预后不好. Masuhara et al[1]研究人肝内HGF，TGFα和TGFβ的mRNA表达及其与肝细胞增生的关系，发现急性肝炎患者肝中HGF mRNA水平明显高于慢性肝炎或慢性肝炎加重的患者，但3组患者肝组织中TGFβ1 mRNA的表达无明显区别. 研究者对这些患者的血清进行HGF水平的测定，结果急性肝炎比慢性肝炎的高，但无统计学意义. 我们对住院的急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎患者各30例进行血清TGFβ1测定，结果均明显高于对照组，两组之间比较，急性乙型肝炎亦略高于慢性乙型肝炎. 这些结果表明由于急性肝损伤，TGFβ1的表达与分泌增多. 但因TGFβ1是多功能的细胞因子，除有抑制肝细胞增生的作用外，如在肝损伤后的修复以及肝纤维化中也起重要作用，故在急性和慢性肝炎患者均表现血清水平明显上升. 本结果与Masuhara et al测定HGF结果联系起来看，这两种功能不同的细胞因子在肝炎患者血清中的水平均明显升高，这可能亦与TGFβ1具有调节细胞的生长与分化的多种功能有关.
, http://www.100md.com
近期国外文献报道HBx转基因小鼠的肝脏表达HBX蛋白和TGFβ1，并发现HBX可激活TGFβ1基因在转染的肝癌细胞中转录. 另有报道HBx基因表达可转染细胞对TGFB1抑制生长作用的反应(Oshikaara et al[4]. 本实验室曾用DNA重组技术获得重组HBX蛋白，并用其制备抗HBX抗体作免疫组化分析，检出乙型肝炎、肝硬变和肝癌患者肝组织中高表达的HBX蛋白. 同时观察到HBX蛋白在轻、重慢性乙型肝炎患者血清中的检出率分别为44%和66%，与HBV复制有密切关系[5]. 为了探究急性和慢性乙型肝炎患者血清中HBX蛋白与TGFβ1之间有无关系，我们测定血清TGFβ1的同时，用本实验室建立的方法检测HBX，结果血清TGFβ1水平急性肝炎略高于慢性肝炎，而血清HBX水平慢性肝炎略高于急性肝炎. 我们注意到慢性乙型肝炎患者血清HBX阳性率高达50%，在HBX呈阳性的患者中有2/3血清TGFβ1水平在中位值之上. 这似乎说明HBX呈阳性的患者血清TGFβ1水平有偏高的倾向. 对此还需要有更多的病例作进一步比较分析.
, 百拇医药
邬光惠，女，1934-06-20生，四川省宜宾市人，汉族. 1959年沈阳中国医科大学医疗系本科毕业，教授，主任医师. 主要从事肝病分子生物学研究，曾发表论文50篇，参加编审专著4部.
通讯作者 邬光惠，100700，北京军区总医院解放军肝病研究所，北京市东四南门仓5号.
Correspondence to:WU Guang-Hui, Institute of Hepatology, Chinese PLA General Hospital of Beijing Command Area, 5 Dongsi Nanmencang, Beijing 100700, China
Tel. +86*10*66721629-8233
收稿日期 1998-04-01
, 百拇医药
4 参考文献
1 Masuhara M, Yasunaga M, Tanigawa K, Tamura F, Yamashita S, Sakaida I et al. Expression of hepatocyte growth factor, transforming growth factor α and transforming growth factor β1 messenger RNA in various human liver diseases and correlation with hepatocyte proliferation. Hepatology, 1996;24(2):323-324
2 Yoo YD, Ueda H, Park K, Flanders KC, Lee YI, Jay G et al. Regulation of transforming growth factor β1 expression by the hepatitis B virus (HBV) X transactivator. Role in HBV pathogenesis. J Clin Invest, 1996;97(2):388-395
, 百拇医药
3 黄耀煊，邬光惠，王锡育，吴霞，范公忍，邓燕林 et al. 慢性乙型肝炎和肝硬化中乙型肝炎病毒x抗原表达的分析. 中华内科杂志，1995；34(4)：235-238
4 Shiota G, Okano J, Kawasaki H, Kawamoto T, Nakamura T. Serum hepatocyte growth factor levels in liver diseases: clinical implications. Hepatology, 1995;21(1):106-112
5 Oshikawa O, Tamura S, Kawata S, Ito N, Tsushima H, Kiso S. et al. The effect of hepatitis B virus x gene expression on response to growth inhibition by transforming growth factor β1. BBRC, 1996;222(3):770-773\@, 百拇医药
单位：北京军区总医院解放军肝病研究所 北京市 100700
关键词：肝炎，乙型，免疫学；转化生长因子β/遗传学；RNA，信使/代谢；肝炎病毒，乙型
华人消化杂志980615.htm Serum transformation growth factor β1 in patients with hepatitis B
WU Guang-Hui, HUANG Yao-Xuan, FAN Gong-Ren and ZHANG Gui-Xia
Institute of Hepatology, Chinese PLA General Hospital of Beijing Command Area, Beijing 100700, China
, 百拇医药
Subject headings hepatitis B/immunology; transforming growth factor beta/genetics; RNA, messenger/metabolism; hepatitis B virus
Abstract
AIM To measure TGFβ1 levels and HBV protein positive rate in the sera or patients with hepatitis B.
METHODS The serum samples from 24 patients with acute hepatitis B (AHB) and 24 patients with chronic hepatitis B(CHB) were measured for TGF β1 by using Promega＇s kit and HBX protein by anti-HBX antibody produced in our laboratory.
, 百拇医药
RESULTS The serum TGFβ1 levels (μg/L) in AHB and CHB patients were 23.6±7.7 and 19.7±8.9 respectively and both were significantly higher than those in normal controls (8.0±3.4，P<0.01). And HBX protein was present in 25.0% of the serum samples from patients with AHB, but 50% of those from patients with CHB. The TGFβ1 were higher than median value in 83% of the HBX positive serum from CHB patients.
CONCLUSION The serum levels of TGFβ1 were significantly increased in patients with AHB or CHB. Fifty percent of the serum samples from CHB patients were HBX protein positive and 83% of these patients show higher serum TGFβ1 level.
, 百拇医药
中国图书资料分类号 R512.62
摘 要
目的 分析急性乙型肝炎(AHB)和慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中有生物活性的TGF β1蛋白水平和HBX蛋白阳性率.
方法 AHB和CHB患者各24例，用Promega免疫分析试剂盒检测血清中TGFβ1浓度，并用自产的抗HBX单克隆抗体ELISA检测血清中HBX蛋白的存在.
结果 AHB组和CHB组的TGFβ1水平(μg/L)分别为23.6±7.7和19.7±8.9，均明显高于对照组8.0±3.4，P<0.01)，但两组之间区别不大. 血清中HBX阳性率AHB组为25.0%，CHB组达50.0%，HBX阳性的慢性肝炎患者15例中有10例(83%)TGFβ1血清水平高于中位值.
结论 AHB和CHB患者血清中TGFβ1水平明显升高，CHB组有半数患者血清呈HBX蛋白阳性，而这些HBX阳性患者中83%显示有较高的TGFβ1血清水平.
, 百拇医药
0 引言
转化生长因子β1(TGFβ1)是具有多种生物功能的细胞因子，在动物模型试验中证明在肝细胞增生中有重要作用. TGFβ1可抑制肝细胞增生，抑制肝细胞生长因子(HGF)对肝细胞有丝分裂的促进作用. Masuhara et al[1]报道肝炎患者肝组织中TGFβ1和HGF的mRNA表达明显增加. Yoo et al[2]报道，在能表达乙型肝炎病毒(HBV)X基因(HBx)的转基因小鼠中HBx基因可激活TGFβ1基因的转录. 为了解表达TGFβ1蛋白在血循环中的水平和HBV X蛋白(HBX)的存在，我们对急性和慢性乙型肝炎患者血清作TGFβ1和HBX蛋白的分析和比较.
1 对象和方法
1.1 对象 急性乙型肝炎患者30例，年龄18岁～77岁，男23例，女7例. 慢性乙型肝炎患者30例，年龄20岁～58岁，男21例，女9例. 对照组为健康供血者20例.
, http://www.100md.com
1.2 方法 用美国Promega公司产的TGFβ1免疫分析试剂盒，ELISA法测定患者血清中有生物活性的TGFβ1. 操作按说明书进行. 患者血清中HBX蛋白的检测系用本实验室以重组HBX蛋白研制成的抗HBX单克隆抗体，采用ELISA法测定的.
统计学处理 测定结果用±s表示，组间比较用t检验.
2 结果
2.1 乙型肝炎患者血清TGFβ1水平 急性和慢性乙型肝炎患者血清中的TGFβ1水平均明显高于对照组(P<0.01，表1).
表1 急慢性肝炎患者血清TGFβ1水平
(
±s, μg/L) 组别, 百拇医药
n
TGFβ1
急性乙型肝炎
30
23.6±7.7b
慢性乙型肝炎
30
19.7±8.9b
对照
20
8.0±3.4
bP<0.01， vs 对照组.
, 百拇医药
2.2 乙型肝炎患者血清中HBX蛋白的阳性率 血清中有HBX蛋白22例，其中，急性肝炎7例，慢性肝炎15例，慢性肝炎HBX阳性率高于急性肝炎(表2).
表2 急慢性肝炎患者血清HBX阳性率 组别
n
HBX阳性率%
急性乙型肝炎
30
23.3
慢性乙型肝炎
30
50.0
对
, 百拇医药
20
0.0
2.3 血清TGFβ1水平和HBX阳性率的比较 在上述血清HBX阳性的慢性肝炎患者15例中，有10例(83%) 血清TGFβ1水平高于中位值.
3 讨论
TGFα，TGFβ1和HGF在动物模型试验中显示，在肝细胞增生中起有重要作用. TGFβ1可抑制间质细胞分泌HGF和HGF的促肝细胞分裂作用，抑制肝细胞的增生. HGF是强促细胞分裂剂. 当人肝脏受到损伤时，HGF分泌增加，血清中水平上升，故血清HGF水平可以反映肝细胞损伤及肝功能障碍的程度[3]. 暴发性肝炎患者血清HGF水平持续上升，预后不好. Masuhara et al[1]研究人肝内HGF，TGFα和TGFβ的mRNA表达及其与肝细胞增生的关系，发现急性肝炎患者肝中HGF mRNA水平明显高于慢性肝炎或慢性肝炎加重的患者，但3组患者肝组织中TGFβ1 mRNA的表达无明显区别. 研究者对这些患者的血清进行HGF水平的测定，结果急性肝炎比慢性肝炎的高，但无统计学意义. 我们对住院的急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎患者各30例进行血清TGFβ1测定，结果均明显高于对照组，两组之间比较，急性乙型肝炎亦略高于慢性乙型肝炎. 这些结果表明由于急性肝损伤，TGFβ1的表达与分泌增多. 但因TGFβ1是多功能的细胞因子，除有抑制肝细胞增生的作用外，如在肝损伤后的修复以及肝纤维化中也起重要作用，故在急性和慢性肝炎患者均表现血清水平明显上升. 本结果与Masuhara et al测定HGF结果联系起来看，这两种功能不同的细胞因子在肝炎患者血清中的水平均明显升高，这可能亦与TGFβ1具有调节细胞的生长与分化的多种功能有关.
, http://www.100md.com
近期国外文献报道HBx转基因小鼠的肝脏表达HBX蛋白和TGFβ1，并发现HBX可激活TGFβ1基因在转染的肝癌细胞中转录. 另有报道HBx基因表达可转染细胞对TGFB1抑制生长作用的反应(Oshikaara et al[4]. 本实验室曾用DNA重组技术获得重组HBX蛋白，并用其制备抗HBX抗体作免疫组化分析，检出乙型肝炎、肝硬变和肝癌患者肝组织中高表达的HBX蛋白. 同时观察到HBX蛋白在轻、重慢性乙型肝炎患者血清中的检出率分别为44%和66%，与HBV复制有密切关系[5]. 为了探究急性和慢性乙型肝炎患者血清中HBX蛋白与TGFβ1之间有无关系，我们测定血清TGFβ1的同时，用本实验室建立的方法检测HBX，结果血清TGFβ1水平急性肝炎略高于慢性肝炎，而血清HBX水平慢性肝炎略高于急性肝炎. 我们注意到慢性乙型肝炎患者血清HBX阳性率高达50%，在HBX呈阳性的患者中有2/3血清TGFβ1水平在中位值之上. 这似乎说明HBX呈阳性的患者血清TGFβ1水平有偏高的倾向. 对此还需要有更多的病例作进一步比较分析.
, 百拇医药
邬光惠，女，1934-06-20生，四川省宜宾市人，汉族. 1959年沈阳中国医科大学医疗系本科毕业，教授，主任医师. 主要从事肝病分子生物学研究，曾发表论文50篇，参加编审专著4部.
通讯作者 邬光惠，100700，北京军区总医院解放军肝病研究所，北京市东四南门仓5号.
Correspondence to:WU Guang-Hui, Institute of Hepatology, Chinese PLA General Hospital of Beijing Command Area, 5 Dongsi Nanmencang, Beijing 100700, China
Tel. +86*10*66721629-8233
收稿日期 1998-04-01
, 百拇医药
4 参考文献
1 Masuhara M, Yasunaga M, Tanigawa K, Tamura F, Yamashita S, Sakaida I et al. Expression of hepatocyte growth factor, transforming growth factor α and transforming growth factor β1 messenger RNA in various human liver diseases and correlation with hepatocyte proliferation. Hepatology, 1996;24(2):323-324
2 Yoo YD, Ueda H, Park K, Flanders KC, Lee YI, Jay G et al. Regulation of transforming growth factor β1 expression by the hepatitis B virus (HBV) X transactivator. Role in HBV pathogenesis. J Clin Invest, 1996;97(2):388-395
, 百拇医药
3 黄耀煊，邬光惠，王锡育，吴霞，范公忍，邓燕林 et al. 慢性乙型肝炎和肝硬化中乙型肝炎病毒x抗原表达的分析. 中华内科杂志，1995；34(4)：235-238
4 Shiota G, Okano J, Kawasaki H, Kawamoto T, Nakamura T. Serum hepatocyte growth factor levels in liver diseases: clinical implications. Hepatology, 1995;21(1):106-112
5 Oshikawa O, Tamura S, Kawata S, Ito N, Tsushima H, Kiso S. et al. The effect of hepatitis B virus x gene expression on response to growth inhibition by transforming growth factor β1. BBRC, 1996;222(3):770-773\@, 百拇医药