哮喘患儿T辅助淋巴细胞功能失衡及影响因素
作者：符州 杨锡强 李成荣 王莉佳 张远维 张良吉
单位：400014，重庆医科大学儿童医院(符州、杨锡强、王莉佳、张远维、张良吉)；深圳市儿童医院(李成荣)
关键词：
中华医学杂志/980935
我们通过检测婴幼儿哮喘急性发作期T辅助淋巴细胞(TH)相关细胞因子分泌水平及其mRNA表达，以了解TH1或TH2亚群功能失衡在哮喘发病中的作用。同时探讨作为重要抗原提呈的单个核细胞(PBMC)或巨噬细胞(M0～Mφ)对TH亚群调节的影响。
一、对象与方法
1.对象：哮喘组：哮喘发作期患儿20例，均符合全国儿科哮喘协作组制订的诊断标准，男女各10例，年龄8月～3岁，平均2.2岁。健康对照组：15例健康婴幼儿，年龄和性别与哮喘组匹配，排除个人和(或)家族史。
, http://www.100md.com
2.方法：(1) 用常规方法收集标本、外周血PBMC培养及上清液制备。(2) 细胞因子及前列腺素E2(PGE2)分别采用ELISA和放射免疫法检测。(3) 提取培养细胞总RNA和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)参照文献[1]，分别测定TH源性γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4及M0～Mφ源性IL-10、IL-12 mRNA逆转录后的扩增产物量。
3.统计学处理：方差齐性检验及t检验。
二、结果
1.TH源性细胞因子含量及其mRNA
表1哮喘患儿PBMC上清液TH源性细胞因子浓度(ng/L,
±s)
组别
, 百拇医药
例数
IFN-r
IL-2
IL-4
IL-10
对照组
15
1575±784
1619±784
54±20
422±30
哮喘组
20
, http://www.100md.com
703±496
723±384
123±61
89±57
t值
4.63
4.59
3.89
2.25
p值
<0.01
<0.01
<0.01
, 百拇医药
<0.05
表2哮喘患儿PBMC上清液M0-Mψ源性细胞因子浓度(±s)
组别
例数
IL-10(ng/L)
IL-12(ng/L)
PGF2(ng/L)
对照组
15
216±130
90±48
, 百拇医药
6.0±2.4
哮喘组
20
636±301
48±16
9.2±2.8
值
4.82
3.13
3.92
值
<0.01
<0.01
, http://www.100md.com
<0.01
本课题为阿斯特拉儿童哮喘研究基金资助项目
表达：由表1可见，哮喘患儿PBMC经植物血凝素刺激后，与对照组比较，培养上清中IFN-γ、IL-2浓度明显降低，IL-4、IL-10水平明显增高。与此相一致，IFN-γ mRNA表达减弱，IL-4 mRNA表达增强。
2.M0～Mφ源性细胞因子水平及其mRNA表达：由表2可见，哮喘患儿PBMC经脂多糖刺激后，与对照组比较培养上清中IL-12浓度降低，IL-10、PGE2含量明显增高。基因转录水平，IL-12 mRNA表达减弱，而IL-10 mRNA表达增强。
三、讨论
本研究从基因转录和蛋白合成发现哮喘患儿TH1类细胞因子及其mRNA表达降低，TH2类因子及其mRNA表达增高，呈现TH1功能降低，TH2功能亢进，共同促进B细胞合成大量IgE，并对肥大细胞、嗜酸性粒细胞浸润和释放介质参与哮喘炎症有重要作用。本研究表明，哮喘患儿M0～Mφ源性IL-12水平及其mRNA表达减低，而IL-10及其mRNA表达增高，PGE2水平也明显升高。推测，哮喘患儿TH1/TH2失衡可能至少部分与M0～Mφ功能异常有关，即M0～Mφ参与了哮喘TH1/TH2功能的异常调节。
参考文献
1 Sandhya LD, Lagoo AS. A standardized approach to PCR-based semiquantitation of multiple cytokine gene transcripts from small cell samples. Lymphokine Cytokine Res, 1993, 12：59-68., http://www.100md.com
单位：400014，重庆医科大学儿童医院(符州、杨锡强、王莉佳、张远维、张良吉)；深圳市儿童医院(李成荣)
关键词：
中华医学杂志/980935
我们通过检测婴幼儿哮喘急性发作期T辅助淋巴细胞(TH)相关细胞因子分泌水平及其mRNA表达，以了解TH1或TH2亚群功能失衡在哮喘发病中的作用。同时探讨作为重要抗原提呈的单个核细胞(PBMC)或巨噬细胞(M0～Mφ)对TH亚群调节的影响。
一、对象与方法
1.对象：哮喘组：哮喘发作期患儿20例，均符合全国儿科哮喘协作组制订的诊断标准，男女各10例，年龄8月～3岁，平均2.2岁。健康对照组：15例健康婴幼儿，年龄和性别与哮喘组匹配，排除个人和(或)家族史。
, http://www.100md.com
2.方法：(1) 用常规方法收集标本、外周血PBMC培养及上清液制备。(2) 细胞因子及前列腺素E2(PGE2)分别采用ELISA和放射免疫法检测。(3) 提取培养细胞总RNA和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)参照文献[1]，分别测定TH源性γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4及M0～Mφ源性IL-10、IL-12 mRNA逆转录后的扩增产物量。
3.统计学处理：方差齐性检验及t检验。
二、结果
1.TH源性细胞因子含量及其mRNA
表1哮喘患儿PBMC上清液TH源性细胞因子浓度(ng/L,
±s)组别
, 百拇医药
例数
IFN-r
IL-2
IL-4
IL-10
对照组
15
1575±784
1619±784
54±20
422±30
哮喘组
20
, http://www.100md.com
703±496
723±384
123±61
89±57
t值
4.63
4.59
3.89
2.25
p值
<0.01
<0.01
<0.01
, 百拇医药
<0.05
表2哮喘患儿PBMC上清液M0-Mψ源性细胞因子浓度(
±s)组别
例数
IL-10(ng/L)
IL-12(ng/L)
PGF2(ng/L)
对照组
15
216±130
90±48
, 百拇医药
6.0±2.4
哮喘组
20
636±301
48±16
9.2±2.8
值
4.82
3.13
3.92
值
<0.01
<0.01
, http://www.100md.com
<0.01
本课题为阿斯特拉儿童哮喘研究基金资助项目
表达：由表1可见，哮喘患儿PBMC经植物血凝素刺激后，与对照组比较，培养上清中IFN-γ、IL-2浓度明显降低，IL-4、IL-10水平明显增高。与此相一致，IFN-γ mRNA表达减弱，IL-4 mRNA表达增强。
2.M0～Mφ源性细胞因子水平及其mRNA表达：由表2可见，哮喘患儿PBMC经脂多糖刺激后，与对照组比较培养上清中IL-12浓度降低，IL-10、PGE2含量明显增高。基因转录水平，IL-12 mRNA表达减弱，而IL-10 mRNA表达增强。
三、讨论
本研究从基因转录和蛋白合成发现哮喘患儿TH1类细胞因子及其mRNA表达降低，TH2类因子及其mRNA表达增高，呈现TH1功能降低，TH2功能亢进，共同促进B细胞合成大量IgE，并对肥大细胞、嗜酸性粒细胞浸润和释放介质参与哮喘炎症有重要作用。本研究表明，哮喘患儿M0～Mφ源性IL-12水平及其mRNA表达减低，而IL-10及其mRNA表达增高，PGE2水平也明显升高。推测，哮喘患儿TH1/TH2失衡可能至少部分与M0～Mφ功能异常有关，即M0～Mφ参与了哮喘TH1/TH2功能的异常调节。
参考文献
1 Sandhya LD, Lagoo AS. A standardized approach to PCR-based semiquantitation of multiple cytokine gene transcripts from small cell samples. Lymphokine Cytokine Res, 1993, 12：59-68., http://www.100md.com