胃癌前病变P21，P53蛋白表达及胃炎消的调节作用*
作者：胡 玲 劳绍贤
单位：广州中医药大学脾胃研究所 广东省广州市 510407
关键词：胃肿瘤/遗传学；胃肿瘤/中医药疗法；癌前状态/病理学；癌基因蛋白P21(ras)；p53，基因
华人消化杂志981016P21 and P53 protein expression in gastric precancerous lesions and regulating effect of Weiyanxiao*
HU Ling and LAO Shao-Xian
Piwei Institute, Guangzhou TCM University, Guangzhou 510407, Guangdong Province, China
, 百拇医药
Subject headings stomach neoplasms/genetics; stomach neoplasms/therapy; precancerous conditions/pathology; oncogene protein P21 (ras); p53 genes
Abstract
AIM To observe P21 and P53 proteins expression in gastric precancerous lesions (GPL), and regulating effect of Weiyanxiao (WYX).
METHODS Thirty-four patients with endoscopically and pathologically confirmed GPL were studied. Among them 19 patients were treated with WYX, and 15 patients with Weimeisu (WMS) as control. Expression of P21 and P53 proteins were detected by the LSAB immunohistochemical method before and after treatment.
, 百拇医药
RESULTS The therapeutic effect of clinical syndromes and moderate dysplasia in WYX group were better than that in WMS group. The overexpression of P21 and P53 proteins was found in GPL, and gradually increased with the progress of lesions. WYX reduced the overexpression of P21 protein in GPL tissues to some extent, but had no obvious regulating effect on the expression of P53 protein.
CONCLUSION WYX has better therapeutic effect on GPL, and regulating effect on the expression of P21 Protein to some extent.
, http://www.100md.com
中国图书资料分类号 R735.205.2
摘 要
目的 观察胃癌前病变(GPL)P21，P53蛋白的表达及胃炎消的调节作用.
方法 内镜病理证实为中、重度异型增生和不完全性结肠化生病例共34例，分为胃炎消治疗组19例，维酶素对照组15例，治疗前、后胃粘膜固定部位活检标本作P21，P53蛋白LSAB免疫组织化学染色.
结果 胃炎消组症状总有效率89.5%，对异型增生疗效尤以中度为好，作用优于对照药维酶素；P21及P53蛋白在GPL组织中有过度表达，且其表达随病变的进展而增高；胃炎消能使P21蛋白的表达明显减弱，但对P53蛋白表达作用不明显.
结论 胃炎消对GPL有良好的治疗作用；并对GPL组织中P21蛋白的表达有一定的调节作用.
, 百拇医药
0 引言
胃癌前病变(gastric precancerous lesions, GPL)主要指胃粘膜中、重度异型增生和(或)不完全性结肠化生而言. 长期的临床实践证明，中药治之有效，但机制未明. 本文观察GPL组织中P21ras和P53蛋白的表达及中药胃炎消的调节作用，以对其逆转获效的可能机制进行探讨.
1 对象和方法
1.1 对象 选择经病理证实，治疗前后有对照的GPL共34例，包括中度异型增生22例，重度7例，不完全性结肠化生5例；男29例，女5例；平均年龄52.3岁±11.1岁，病程<5a者22例，5a～10a者10例，>10a者2例；随机分为胃炎消组19例和维酶素对照组15例，组间一般资料具可比性(P>0.05).
1.2 方法
, 百拇医药
1.2.1 给药方法 采用随机双盲法，治疗组予胃炎消冲剂Ⅰ号(太子参、郁金、蛇舌草、莪术、田七等)和片剂Ⅰ号(淀粉)，10g/次，3次/d；对照组予胃炎消片剂Ⅱ号(维酶素)和冲剂Ⅱ号(麦芽和大枣)，0.8g/次，3次/d；疗程2.5mo.
1.2.2 P21，P53蛋白染色 采用LSAB免疫组化法，鼠抗人P21单克隆抗体、鼠抗人P53蛋白(DO-7)及LSAB试剂盒均为丹麦Dako产品；DAB为迈新产品. 用PBS替代一抗作阴性对照，阳性示棕黄色均细颗粒，P21位于细胞膜及胞质，P53位于细胞核；按显色强弱记录，阴性：-；弱阳性+；阳性:++；强阳性：+++.
统计学处理 分类资料用χ2检验，等级资料用Ridit分析，计量资料用t检验.
2 结果
2.1 临床疗效 胃炎消组显效(临床症状消失或基本消失)14例，有效(临床症状明显减轻)3例，无效(临床症状未见改善)2例，总有效率89.5%，优于维酶素组，其分别为5，5，5及66.7%(P<0.05). 胃炎消对异型增生疗效优于维酶素，尤其对中度异型增生效果明显(表1)；但对不完全性结肠化生的改善与维酶素组尚看不出明显差别，估计与病例过少有关.
, http://www.100md.com
表1 胃炎消对胃粘膜异型增生的疗效(n) 组别
n
中 度
重 度
显效
有效
无效
加重
显效
有效
无效
加重
胃炎消a
, http://www.100md.com
16
3
8
1
0
0
2
2
0
维酶素
13
1
3
6
, http://www.100md.com
0
0
1
2
0
aP<0.05，vs 维酶素.
2.2 P21和P53蛋白的表达 本研究P21表达主要定位于胞质，部分以腺腔缘明显，2例表达于细胞膜，中重度异型增生和不完全性结肠化生的阳性率分别为54.5%，71.4%和40.0%；胃炎消治疗后P21阳性表达明显减弱，维酶素治疗后稍见减弱，但不如胃炎消(表2). P53蛋白的表达主要定位于细胞核，少部分表达于胞质；中、重度异型增生和不完全性结肠化生阳性率分别为31.8%，42.9%和20.0%；胃炎消治疗后P53蛋白表达有所减弱，但治疗前、后差异无显著性；维酶素组则P53蛋白表达变化不大(表2).表2 胃炎消治疗后胃粘膜P21和 P53蛋白的表达(n) 组别
, 百拇医药
n
治 疗 前
治 疗 后
-
+
++
+++
-
+
++
+++
P21
胃炎消
19
, 百拇医药
8
1
7
3
14
3
1
1
维酶素
15
7
1
4
3
, 百拇医药
9
1
3
2
P53
胃炎消
19
13
3
2
1
15
2
2
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0
维酶素
15
10
3
1
1
11
2
1
1
P21: U1:2.04，aP<0.05，vs 胃炎消治疗后 U2:0.696
, 百拇医药
P53:U1:0.59 U2:0.274
3 讨论
本结果可以看出，胃炎消对GPL临床症状改善明显；病理疗效以中度异型增生效果为好，重度稍差；对不完全性结肠化生的治疗中，由于本组病例较少，尚看不出明显差别，有待今后扩大病例作进一步的观察. ras原癌基因位于染色体11p13，编码蛋白P21，分布于质膜内侧，参与传导细胞增殖信号调控系统，其突变可形成质量异常的p21. 有学者认为，p21的表达主要出现在细胞表型发生明显转化之前，其在一定水平持续过表达与肿瘤启动有关. 研究发现，p21在异型增生中有过表达，特别是重度异型增生其阳性率及表达强度几乎与早期胃癌接近，表明ras基因的活化和p21的放大表达发生于胃癌变早期，同时通过随访还发现，p21阳性的癌前病变较之阴性者更易发生癌变[1-3]. 本研究结果显示，P21蛋白在部分GPL病例中有过表达，其表达率与文献报道基本相符[3]；胃炎消能一定程度地降低其表达，表明其对之可能存在有一定的调节作用，但目前其具体作用环节尚不清楚，需进一步研究.
, http://www.100md.com
p53抑癌基因位于染色体17p13.1，编码393个氨基酸残基的胞核磷蛋白，为正常细胞生长和分裂的一个负调节因子，可因不同位点的错义突变或等位基因的缺失而失活. 有研究者指出，p53基因的突变和过表达不仅存在于胃癌各临床分期，在肿瘤的启动和进展期均起作用，且可发生于癌变前各阶段. 如Shiao et al[4]发现，60%胃癌及癌旁异型增生有p53高表达，PCR-SSCP和DNA测序示37.5%癌旁肠化生、58.3%癌旁异型增生和66.7%胃癌存在p53基因的结构异常，主要是碱基置换G∶C→A∶T引起的突变；郝莹et al[5]的研究也得出类似结论. 本研究在对P53蛋白的检测中，发现其在GPL组织中有过表达，主要位于细胞核，但也有少部分位于胞质，这种情况文献也见类似报道[6]，分析可能与组织标本经福尔马林固定，石蜡包埋有关；P53蛋白表达随病变的进展而升高，胃炎消对其表达无明显调节作用，出现此结果是因为疗程不够，还是其他原因，尚待探讨.
, 百拇医药
致谢 本校病理教研室徐勤老师热心帮助.
胡玲，女，1962-09-19生，贵州省贵阳市人，汉族. 1998-06广州中医药大学中西医结合内科临床专业毕业，获医学博士学位，讲师. 目前主要从事脾胃疾病的研究，发表论文15篇.
*广东省中医药管理局广东省科委基金资助课题，No.A-96126 No.A-970028.
通讯作者 胡玲，510407，广州中医药大学脾胃研究所，广东省广州市机场路12号.
*Supported by the TCM Management Bureau and Comittee of Science and Technology, Guangdong Province, No.A-96126, A-970028.
, 百拇医药
Correspondence to:HU Ling, Piwei Institute, Guangzhou TCM University, 12 Jichanglu, Guangzhou 510407, Guangdong Province, China
Tel. +86*20*86591233-2452(O)
收稿日期 1998-05-06
4 参考文献
1 郝莹，张锦坤，吕有勇，易粹琼. 应用多种方法检测胃癌演变过程中ras基因的突变. 中华内科杂志，1997；36(9)：595-598
2 于君，张锦坤. 胃癌变过程ras基因活化和DNA含量的综合研究. 中华内科杂志，1995；34(11)：739-742
, 百拇医药
3 王昭，殷慧君. 胃癌及胃粘膜非典型增生组织p21ras表达与DNA倍体关系的探讨. 实用癌症杂志，1996；11(2)：79-81
4 Shiao YH, Ruggs M, Correa P, Lehman HP, Scheer WD. P53 alteration in gastric precancerous lesions. Am J Pathol, 1994;144(3):511-517
5 郝莹，张锦坤，易粹琼. 应用流式细胞术对胃癌及癌前病变中P53蛋白表达的研究. 中华物理医学杂志，1997；19(2)：95-98
6 倪灿荣. 免疫组织化学实验新技术及应用. 北京：北京科学技术出版社，1993：318, 百拇医药
单位：广州中医药大学脾胃研究所 广东省广州市 510407
关键词：胃肿瘤/遗传学；胃肿瘤/中医药疗法；癌前状态/病理学；癌基因蛋白P21(ras)；p53，基因
华人消化杂志981016P21 and P53 protein expression in gastric precancerous lesions and regulating effect of Weiyanxiao*
HU Ling and LAO Shao-Xian
Piwei Institute, Guangzhou TCM University, Guangzhou 510407, Guangdong Province, China
, 百拇医药
Subject headings stomach neoplasms/genetics; stomach neoplasms/therapy; precancerous conditions/pathology; oncogene protein P21 (ras); p53 genes
Abstract
AIM To observe P21 and P53 proteins expression in gastric precancerous lesions (GPL), and regulating effect of Weiyanxiao (WYX).
METHODS Thirty-four patients with endoscopically and pathologically confirmed GPL were studied. Among them 19 patients were treated with WYX, and 15 patients with Weimeisu (WMS) as control. Expression of P21 and P53 proteins were detected by the LSAB immunohistochemical method before and after treatment.
, 百拇医药
RESULTS The therapeutic effect of clinical syndromes and moderate dysplasia in WYX group were better than that in WMS group. The overexpression of P21 and P53 proteins was found in GPL, and gradually increased with the progress of lesions. WYX reduced the overexpression of P21 protein in GPL tissues to some extent, but had no obvious regulating effect on the expression of P53 protein.
CONCLUSION WYX has better therapeutic effect on GPL, and regulating effect on the expression of P21 Protein to some extent.
, http://www.100md.com
中国图书资料分类号 R735.205.2
摘 要
目的 观察胃癌前病变(GPL)P21，P53蛋白的表达及胃炎消的调节作用.
方法 内镜病理证实为中、重度异型增生和不完全性结肠化生病例共34例，分为胃炎消治疗组19例，维酶素对照组15例，治疗前、后胃粘膜固定部位活检标本作P21，P53蛋白LSAB免疫组织化学染色.
结果 胃炎消组症状总有效率89.5%，对异型增生疗效尤以中度为好，作用优于对照药维酶素；P21及P53蛋白在GPL组织中有过度表达，且其表达随病变的进展而增高；胃炎消能使P21蛋白的表达明显减弱，但对P53蛋白表达作用不明显.
结论 胃炎消对GPL有良好的治疗作用；并对GPL组织中P21蛋白的表达有一定的调节作用.
, 百拇医药
0 引言
胃癌前病变(gastric precancerous lesions, GPL)主要指胃粘膜中、重度异型增生和(或)不完全性结肠化生而言. 长期的临床实践证明，中药治之有效，但机制未明. 本文观察GPL组织中P21ras和P53蛋白的表达及中药胃炎消的调节作用，以对其逆转获效的可能机制进行探讨.
1 对象和方法
1.1 对象 选择经病理证实，治疗前后有对照的GPL共34例，包括中度异型增生22例，重度7例，不完全性结肠化生5例；男29例，女5例；平均年龄52.3岁±11.1岁，病程<5a者22例，5a～10a者10例，>10a者2例；随机分为胃炎消组19例和维酶素对照组15例，组间一般资料具可比性(P>0.05).
1.2 方法
, 百拇医药
1.2.1 给药方法 采用随机双盲法，治疗组予胃炎消冲剂Ⅰ号(太子参、郁金、蛇舌草、莪术、田七等)和片剂Ⅰ号(淀粉)，10g/次，3次/d；对照组予胃炎消片剂Ⅱ号(维酶素)和冲剂Ⅱ号(麦芽和大枣)，0.8g/次，3次/d；疗程2.5mo.
1.2.2 P21，P53蛋白染色 采用LSAB免疫组化法，鼠抗人P21单克隆抗体、鼠抗人P53蛋白(DO-7)及LSAB试剂盒均为丹麦Dako产品；DAB为迈新产品. 用PBS替代一抗作阴性对照，阳性示棕黄色均细颗粒，P21位于细胞膜及胞质，P53位于细胞核；按显色强弱记录，阴性：-；弱阳性+；阳性:++；强阳性：+++.
统计学处理 分类资料用χ2检验，等级资料用Ridit分析，计量资料用t检验.
2 结果
2.1 临床疗效 胃炎消组显效(临床症状消失或基本消失)14例，有效(临床症状明显减轻)3例，无效(临床症状未见改善)2例，总有效率89.5%，优于维酶素组，其分别为5，5，5及66.7%(P<0.05). 胃炎消对异型增生疗效优于维酶素，尤其对中度异型增生效果明显(表1)；但对不完全性结肠化生的改善与维酶素组尚看不出明显差别，估计与病例过少有关.
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表1 胃炎消对胃粘膜异型增生的疗效(n) 组别
n
中 度
重 度
显效
有效
无效
加重
显效
有效
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加重
胃炎消a
, http://www.100md.com
16
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aP<0.05，vs 维酶素.
2.2 P21和P53蛋白的表达 本研究P21表达主要定位于胞质，部分以腺腔缘明显，2例表达于细胞膜，中重度异型增生和不完全性结肠化生的阳性率分别为54.5%，71.4%和40.0%；胃炎消治疗后P21阳性表达明显减弱，维酶素治疗后稍见减弱，但不如胃炎消(表2). P53蛋白的表达主要定位于细胞核，少部分表达于胞质；中、重度异型增生和不完全性结肠化生阳性率分别为31.8%，42.9%和20.0%；胃炎消治疗后P53蛋白表达有所减弱，但治疗前、后差异无显著性；维酶素组则P53蛋白表达变化不大(表2).表2 胃炎消治疗后胃粘膜P21和 P53蛋白的表达(n) 组别
, 百拇医药
n
治 疗 前
治 疗 后
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P21
胃炎消
19
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P21: U1:2.04，aP<0.05，vs 胃炎消治疗后 U2:0.696
, 百拇医药
P53:U1:0.59 U2:0.274
3 讨论
本结果可以看出，胃炎消对GPL临床症状改善明显；病理疗效以中度异型增生效果为好，重度稍差；对不完全性结肠化生的治疗中，由于本组病例较少，尚看不出明显差别，有待今后扩大病例作进一步的观察. ras原癌基因位于染色体11p13，编码蛋白P21，分布于质膜内侧，参与传导细胞增殖信号调控系统，其突变可形成质量异常的p21. 有学者认为，p21的表达主要出现在细胞表型发生明显转化之前，其在一定水平持续过表达与肿瘤启动有关. 研究发现，p21在异型增生中有过表达，特别是重度异型增生其阳性率及表达强度几乎与早期胃癌接近，表明ras基因的活化和p21的放大表达发生于胃癌变早期，同时通过随访还发现，p21阳性的癌前病变较之阴性者更易发生癌变[1-3]. 本研究结果显示，P21蛋白在部分GPL病例中有过表达，其表达率与文献报道基本相符[3]；胃炎消能一定程度地降低其表达，表明其对之可能存在有一定的调节作用，但目前其具体作用环节尚不清楚，需进一步研究.
, http://www.100md.com
p53抑癌基因位于染色体17p13.1，编码393个氨基酸残基的胞核磷蛋白，为正常细胞生长和分裂的一个负调节因子，可因不同位点的错义突变或等位基因的缺失而失活. 有研究者指出，p53基因的突变和过表达不仅存在于胃癌各临床分期，在肿瘤的启动和进展期均起作用，且可发生于癌变前各阶段. 如Shiao et al[4]发现，60%胃癌及癌旁异型增生有p53高表达，PCR-SSCP和DNA测序示37.5%癌旁肠化生、58.3%癌旁异型增生和66.7%胃癌存在p53基因的结构异常，主要是碱基置换G∶C→A∶T引起的突变；郝莹et al[5]的研究也得出类似结论. 本研究在对P53蛋白的检测中，发现其在GPL组织中有过表达，主要位于细胞核，但也有少部分位于胞质，这种情况文献也见类似报道[6]，分析可能与组织标本经福尔马林固定，石蜡包埋有关；P53蛋白表达随病变的进展而升高，胃炎消对其表达无明显调节作用，出现此结果是因为疗程不够，还是其他原因，尚待探讨.
, 百拇医药
致谢 本校病理教研室徐勤老师热心帮助.
胡玲，女，1962-09-19生，贵州省贵阳市人，汉族. 1998-06广州中医药大学中西医结合内科临床专业毕业，获医学博士学位，讲师. 目前主要从事脾胃疾病的研究，发表论文15篇.
*广东省中医药管理局广东省科委基金资助课题，No.A-96126 No.A-970028.
通讯作者 胡玲，510407，广州中医药大学脾胃研究所，广东省广州市机场路12号.
*Supported by the TCM Management Bureau and Comittee of Science and Technology, Guangdong Province, No.A-96126, A-970028.
, 百拇医药
Correspondence to:HU Ling, Piwei Institute, Guangzhou TCM University, 12 Jichanglu, Guangzhou 510407, Guangdong Province, China
Tel. +86*20*86591233-2452(O)
收稿日期 1998-05-06
4 参考文献
1 郝莹，张锦坤，吕有勇，易粹琼. 应用多种方法检测胃癌演变过程中ras基因的突变. 中华内科杂志，1997；36(9)：595-598
2 于君，张锦坤. 胃癌变过程ras基因活化和DNA含量的综合研究. 中华内科杂志，1995；34(11)：739-742
, 百拇医药
3 王昭，殷慧君. 胃癌及胃粘膜非典型增生组织p21ras表达与DNA倍体关系的探讨. 实用癌症杂志，1996；11(2)：79-81
4 Shiao YH, Ruggs M, Correa P, Lehman HP, Scheer WD. P53 alteration in gastric precancerous lesions. Am J Pathol, 1994;144(3):511-517
5 郝莹，张锦坤，易粹琼. 应用流式细胞术对胃癌及癌前病变中P53蛋白表达的研究. 中华物理医学杂志，1997；19(2)：95-98
6 倪灿荣. 免疫组织化学实验新技术及应用. 北京：北京科学技术出版社，1993：318, 百拇医药