醋纤膜电泳金染色检测体液微量蛋白
作者:顾宗夏
单位:解放军第八六医院(243100)
关键词:
实用医学杂志990141 体液(尿,脑脊液)微量蛋白电泳一般采用浓缩标本进行。然而,浓缩方法非常费时,并可能由于吸附、分离或蛋白变性而导致误差。本文介绍未浓缩标本直接电泳,用稍加改进的Rightti[1]金染色法染色,微量蛋白可现清晰电泳图谱。
1 材料与方法
1.1 胶体金染液配制 称10 mg氯化金,用适量蒸馏水溶解,加40 mg SnCl2,190 mg枸橼酸,溶后用蒸馏水补足到100 ml,加 T ween 20 0.1 ml,摇匀,贮4℃暗处。临用现配。
1.2 电泳 取体液标本(如为尿液则应先离心,取上清使用)按常规方法作醋纤膜蛋白电泳。
1.3 染色 电泳后,取膜在5%三氯醋酸溶液中固定10分钟,取出用蒸馏水洗两次,每次10分钟,取出膜放在金溶液中2小时,不时轻摇,以避免金微粒沉淀。延长染色时间效果更佳。取出膜条,用重蒸馏水洗两次,每次10分钟。肉眼观察。
2 结果
将正常人血清用生理盐水1 000倍稀释后电泳,用原法[1]与本法染色对照,两法均可见明显的紫红色带,深浅一致。取临床含微量蛋白的尿液标本,按本法电泳染色,均明显可见蛋白带。
3 讨论
到目前为止,胶体金在醋纤膜上的染色比其它任何染色技术,如考马斯亮蓝、银染色技术敏感度都高[1]。在临床化学中,这一技术显然是进步的,检测尿、脑脊液等体液标本时,不须浓缩标本,可直接电泳,染色,这给常规工作带来极大便利。
4 参考文献
1 Righetti PG,Casero P,DEL Campo GB. Gold staining in cellulose acetate membranes. Clin Chim Acta,1986,157(2):167., http://www.100md.com
单位:解放军第八六医院(243100)
关键词:
实用医学杂志990141 体液(尿,脑脊液)微量蛋白电泳一般采用浓缩标本进行。然而,浓缩方法非常费时,并可能由于吸附、分离或蛋白变性而导致误差。本文介绍未浓缩标本直接电泳,用稍加改进的Rightti[1]金染色法染色,微量蛋白可现清晰电泳图谱。
1 材料与方法
1.1 胶体金染液配制 称10 mg氯化金,用适量蒸馏水溶解,加40 mg SnCl2,190 mg枸橼酸,溶后用蒸馏水补足到100 ml,加 T ween 20 0.1 ml,摇匀,贮4℃暗处。临用现配。
1.2 电泳 取体液标本(如为尿液则应先离心,取上清使用)按常规方法作醋纤膜蛋白电泳。
1.3 染色 电泳后,取膜在5%三氯醋酸溶液中固定10分钟,取出用蒸馏水洗两次,每次10分钟,取出膜放在金溶液中2小时,不时轻摇,以避免金微粒沉淀。延长染色时间效果更佳。取出膜条,用重蒸馏水洗两次,每次10分钟。肉眼观察。
2 结果
将正常人血清用生理盐水1 000倍稀释后电泳,用原法[1]与本法染色对照,两法均可见明显的紫红色带,深浅一致。取临床含微量蛋白的尿液标本,按本法电泳染色,均明显可见蛋白带。
3 讨论
到目前为止,胶体金在醋纤膜上的染色比其它任何染色技术,如考马斯亮蓝、银染色技术敏感度都高[1]。在临床化学中,这一技术显然是进步的,检测尿、脑脊液等体液标本时,不须浓缩标本,可直接电泳,染色,这给常规工作带来极大便利。
4 参考文献
1 Righetti PG,Casero P,DEL Campo GB. Gold staining in cellulose acetate membranes. Clin Chim Acta,1986,157(2):167., http://www.100md.com