可溶性白细胞介素-2受体在肺癌表达的研究
作者：杜先智 张和生 张治 邓锋 张朝丽
单位：杜先智 张和生 张治 重庆医科大学附属第二医院肺科 400010； 邓锋 张朝丽 重庆医科大学附属第一医院
关键词：白细胞介素-2受体；肺癌
重庆医学990102
摘要 为了探讨可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)对肺癌诊断、分型及分期的价值，我们采用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测肺癌45例，对照者10例支气管冲洗液中sIL-2R和肺癌57例，肺部良性疾病20例，正常对照20例血清中sIL-2R水平。结果示 肺癌患者支气管冲洗液及血清中sIL-2R浓度高于对照组；肺癌血清sIL-2R水平与肺癌分期有关，而与病理组织学类型无关。
Research of the Soluble Interleukin-2 Receptor in Lung Cancer Patients
, http://www.100md.com
Du Xiang Zhi,Zhang Hesheng,Zhang zhi,et al.
The Second Affiliated Hospital,Chongqing University
of Medical sciences, Chongqing 400010
Abstract In order to evaluate the value of soluble interleukin-2 receptor(sIL-2R)in the diagnosis,tumor typing,and tumor staging in lung cancer,the concentration,of sIL-2R was tested by EILSA in bronchial lavage fluids(BWF) of 45 cases of lung Cancer patients, 10 cases of control,and in serum samples of 57 cases of lung cancer 20 caese of bengin lung diseases,20 cases of normal control.The results Showed that the levels of SIL-2R in BWF and serum samples of lung cancer patiens were was significantly higher than those of control,the levels of sIL-2R in serum were related to the stage of lung cancer,but not related to the patho-histologic subtype of lung cancer.
, 百拇医药
Key Words Receptor,Interleu Kin-2 Pulmonary Carcinoma
白细胞介素-2及其相应的白细胞介素-2受体在人体的免疫系统中占有重要的地位。白介素-2受体主要表达于激活的T细胞表面[1]。细胞膜上的膜白介素-2受体其χ链的膜外肽链脱落下来，形成可溶性白细胞介素-2受体(Soluble interleukin-2 receptor,sIL-2R)进入血循环，也可进入某些体液中。近年来国内外学者对肺癌患者sIL-2R的表达进行研究[2]，但对肺癌患者支气管冲洗液中sIL-2R的水平国内外尚未见报道。本文检测肺癌患者支气管冲洗液及血清中sIL-2R的浓度，探讨其对肺癌诊断、分型、分期的价值。
材料和方法
1 研究对象：
(1)支气管冲洗液的研究对象：①肺癌组(LC)：45例，男40例，女5例，平均年龄54.7岁。均有组织学或细胞学证据；鳞癌31例，腺癌6例，小细胞癌7例及肺泡细胞癌1例。按TNM标准42例能够分期：Ⅰ～Ⅱ期28例，Ⅲ期11例及Ⅳ期3例。②正常对照组(NC)：10例，男6例，女4例，平均年龄48.5岁。
, 百拇医药
(2)血清研究对象：①肺癌组(LC)：57例，男50例，女7例，平均年龄55.9岁；鳞癌39例，腺癌8例，小细胞肺癌9例，肺泡细胞癌1例。按TNM标准52例能够分期：Ⅰ～Ⅱ期31例，Ⅲ期18例，Ⅳ期3例。②肺部良性疾病组(BPD)：20例，慢性支气管炎伴感染10例，支气管扩张6例，干咳而无其它症状且相关检查无阳性发现的4例。男14例，女6例，平均年龄58.55岁。③正常对照组(NC)：20例，男14例，女6例，平均30.30岁，为重庆市中心血站献血员。
2 检测指标：
支气管冲洗液，血清中sIL-2R浓度。
3 试剂、材料与仪器：
(1)sIL-2R酶联免疫试剂盒(白求恩医科大学基础学院免疫教研室提供)。
(2)牛血清白蛋白(sigma公司提供)。
, 百拇医药
(3)55孔酶联吸附板(四川分析仪器厂)。
(4)酶联免疫检测仪GXM-202(四川仪表九厂)。
4 实验方法：
(1)标本采集：①采受试者肘静脉血5ml，离心3500转/分×15分钟，分装血清，标号贮于-20℃待测。②支气管冲洗液：以olympus纤支镜检查，常规操作，经鼻腔插入。肺癌组纤支镜物镜置于肺癌侵犯支气管的近心端，如镜下不能见到病变，则置于病变相应部位亚肺段支气管口，然后以0.9%生理盐水20ml分两次注入后立即回抽(吸引器负压为13.3～26.7kPa)，回抽量4～9ml，平均5.5ml，收集后离心3500转/分×15分钟，分装上清液，标号贮于-20℃待测。
(2)实验步骤：sIL-2R测定，采用双抗体夹心法(EILSA)，严格按照试剂盒要求操作。
, http://www.100md.com
5 统计学方法：
多组间比较采用完全随机设计方差分析和最小显著差法分析，组间比较采用t检验，率间比较采用χ2分析。
结果
1 支气管冲洗液肺癌组，正常对照组sIL-2R的表达。
(1)肺癌组及正常对照组支气管冲洗液中sIL-2R检出率，见表1。
表1 LC与NC支气管冲洗液sIL-2R检出率 组别
sIL-2R
合计
阳性例数
阴性例数
, http://www.100md.com
LC
31
14
45
NC
3
7
10
合计
34
21
55
LC与NC P<0.05
, 百拇医药 (2)肺癌组与正常对照组支气管冲洗液中可测出的sIL-2R的
+S(u/ml)见表2。
表2 LC与NC支气管冲洗液中可测出sIL-2R的+S(u/ml) 组别
N±S
LC
31
203.80±142.92
NC
3
, 百拇医药
30.44±11.73
LC与NC P<0.05
注：LC组14例，NC组7例未测出sIL-2R未平均在内二肺癌组、肺良性疾病组与正常对照组血清中sIL-2R水平。
2 LC、BPD、NC血清sIL-2R的±S(u/ml)见表3。
表3 LC、BPD、NC血清sIL-2R的±S(u/ml)
LC
BPD
NC
, 百拇医药
N
57
20
20±S
976±276
731±240
386±119
LC、BPD与NC之间P<0.05
LC与BPD之间P<0.05
3 肺鳞癌(Scc)、腺癌(Adc)、小细胞肺癌(Sclc)及肺泡细胞癌(Acc)血清sIL-2R的±S(u/ml)见表4。
, 百拇医药
表4 各型肺癌血清sIL-2R的±S(u/ml)
Scc
Adc
Sclc
Acc
N
39
8
9
1±S
, http://www.100md.com 971±286
1064±181
876±251
1564
Scc、Adc及Sclc各组之间P>0.05
4 肺癌血清sIL-2R与TNM分期的关系见表5。
表5 肺癌患者血清sIL-2R与TNM分期
Ⅰ～Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
N
31
, 百拇医药
18
3±S
889±227
1083±206
1168±182
Ⅲ与Ⅰ～Ⅱ、Ⅳ与Ⅰ～Ⅱ P<0.05
讨论
尽管本文肺癌患者支气管冲洗液中sIL-2R的检出率及测得活性均值与正常对照组比较差别有显著性(P<0.05)，然而肺癌患者支气管冲洗液中sIL-2R的检出率仅为68.8%，有31.2%的未能测出，且可测出的sIL-2R的均值远低于其血清均值，可能与肺癌病灶内血供较丰富，肿瘤相关抗原刺激机体免疫系统，激活的T淋巴细胞形成的sIL-2R直接进入血液中，且sIL-2R的分子量为45KDa，可能渗透到支气管腔内相对困难有关，这需进一步研究证实。
, 百拇医药
Yamaguchi[3]等报告小细胞性肺癌(SCLC)患者血清sIL-2R比正常人高3.8倍，比非小细胞肺癌(NSCLC)高1.9倍，认为sIL-2R可能主要由SCLC癌细胞分泌。本文肺癌患者sIL-2R浓度明显高于正常对照组和肺部良性疾病组；其血清sIL-2R活性肺泡细胞癌和腺癌最高，小细胞肺癌居其次，与Yamaguchi的意见并不一致。本组测得肺癌各组织学中，Scc、Adc及SCLC血清sIL-2R均值无明显的统计学意义，这与多数学者的研究大致相同[4、5]。Poulakis等[6]建议将sIL-2R用于肺癌细胞分型，但本文结果不支持这种观点。我们认为sIL-2R主要是由活性T淋巴细胞产生，而不是癌细胞分泌的。同时测得肺良性疾病sIL-2R偏高，可能与慢性炎症有关，故sIL-2R作为肺癌诊断指标之一的价值受到限制。
文献报道[7]：转移性强的瘤细胞株动物模型其血清sIL-2R浓度较高；出现转移的肿瘤病人血清sIL-2R浓度高于无转移者[8]。本文测得Ⅲ、Ⅳ期肺癌病人血清sIL-2R高于Ⅰ～Ⅱ期，尽管Ⅳ期肺癌患者例数少，但均有远处转移灶的出现，提示出现转移灶的肺癌患者血清sIL-2R水平较高，可能与癌细胞广泛激活T淋巴细胞产生更多的sIL-2R。陈琳等[9]同样测得肺癌血清sIL-2R水平在Ⅰ～Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期依次升高，并且差异显著。但也有持相反的意见者，Ginns等[10]报告肺鳞癌病人，肿瘤直径<3cm其血清sIL-2R水平比直径>3cm者明显高，最高者见于Ⅰ期鳞癌病人。
, 百拇医药
本文研究表明：支气管冲洗液中sIL-2R浓度在肺癌病人高于正常对照组，但有部分冲洗液中sIL-2R未能测出，故冲洗液中sIL-2R的测定临床意义不大。而肺癌患者血清sIL-2R明显高于正常对照组和肺部良性病组，并且其水平与疾病分期有关，但与组织学类型无关。
参考文献：
1 Rubin L A.,et al. J Immuno,1985;135(5):3172
2 Marino P., et al. Br J Cancer,1990;61:434
3 Yamaguchi K, et al. J Lab Clin Med,1990;116:457
4 Buccheri G, et al. Chest,1991;99:1433
, http://www.100md.com
5 Chan C.H., et al. Respir Med,1993;87:383
6 Poulakis N.,et al. Cancer,1991;68:1045
7 Schirrmacher V., et al. Br J Cancer,1987;55:583
8 Lissoni P., et al. Br J Cancer,1989;60:616
9 陈琳等.实用肿瘤杂志.1995;10(4):207
10 Ginns L C., et al. Am Rev Respir Dis,1990;142:398, http://www.100md.com
单位：杜先智 张和生 张治 重庆医科大学附属第二医院肺科 400010； 邓锋 张朝丽 重庆医科大学附属第一医院
关键词：白细胞介素-2受体；肺癌
重庆医学990102
摘要 为了探讨可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)对肺癌诊断、分型及分期的价值，我们采用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测肺癌45例，对照者10例支气管冲洗液中sIL-2R和肺癌57例，肺部良性疾病20例，正常对照20例血清中sIL-2R水平。结果示 肺癌患者支气管冲洗液及血清中sIL-2R浓度高于对照组；肺癌血清sIL-2R水平与肺癌分期有关，而与病理组织学类型无关。
Research of the Soluble Interleukin-2 Receptor in Lung Cancer Patients
, http://www.100md.com
Du Xiang Zhi,Zhang Hesheng,Zhang zhi,et al.
The Second Affiliated Hospital,Chongqing University
of Medical sciences, Chongqing 400010
Abstract In order to evaluate the value of soluble interleukin-2 receptor(sIL-2R)in the diagnosis,tumor typing,and tumor staging in lung cancer,the concentration,of sIL-2R was tested by EILSA in bronchial lavage fluids(BWF) of 45 cases of lung Cancer patients, 10 cases of control,and in serum samples of 57 cases of lung cancer 20 caese of bengin lung diseases,20 cases of normal control.The results Showed that the levels of SIL-2R in BWF and serum samples of lung cancer patiens were was significantly higher than those of control,the levels of sIL-2R in serum were related to the stage of lung cancer,but not related to the patho-histologic subtype of lung cancer.
, 百拇医药
Key Words Receptor,Interleu Kin-2 Pulmonary Carcinoma
白细胞介素-2及其相应的白细胞介素-2受体在人体的免疫系统中占有重要的地位。白介素-2受体主要表达于激活的T细胞表面[1]。细胞膜上的膜白介素-2受体其χ链的膜外肽链脱落下来，形成可溶性白细胞介素-2受体(Soluble interleukin-2 receptor,sIL-2R)进入血循环，也可进入某些体液中。近年来国内外学者对肺癌患者sIL-2R的表达进行研究[2]，但对肺癌患者支气管冲洗液中sIL-2R的水平国内外尚未见报道。本文检测肺癌患者支气管冲洗液及血清中sIL-2R的浓度，探讨其对肺癌诊断、分型、分期的价值。
材料和方法
1 研究对象：
(1)支气管冲洗液的研究对象：①肺癌组(LC)：45例，男40例，女5例，平均年龄54.7岁。均有组织学或细胞学证据；鳞癌31例，腺癌6例，小细胞癌7例及肺泡细胞癌1例。按TNM标准42例能够分期：Ⅰ～Ⅱ期28例，Ⅲ期11例及Ⅳ期3例。②正常对照组(NC)：10例，男6例，女4例，平均年龄48.5岁。
, 百拇医药
(2)血清研究对象：①肺癌组(LC)：57例，男50例，女7例，平均年龄55.9岁；鳞癌39例，腺癌8例，小细胞肺癌9例，肺泡细胞癌1例。按TNM标准52例能够分期：Ⅰ～Ⅱ期31例，Ⅲ期18例，Ⅳ期3例。②肺部良性疾病组(BPD)：20例，慢性支气管炎伴感染10例，支气管扩张6例，干咳而无其它症状且相关检查无阳性发现的4例。男14例，女6例，平均年龄58.55岁。③正常对照组(NC)：20例，男14例，女6例，平均30.30岁，为重庆市中心血站献血员。
2 检测指标：
支气管冲洗液，血清中sIL-2R浓度。
3 试剂、材料与仪器：
(1)sIL-2R酶联免疫试剂盒(白求恩医科大学基础学院免疫教研室提供)。
(2)牛血清白蛋白(sigma公司提供)。
, 百拇医药
(3)55孔酶联吸附板(四川分析仪器厂)。
(4)酶联免疫检测仪GXM-202(四川仪表九厂)。
4 实验方法：
(1)标本采集：①采受试者肘静脉血5ml，离心3500转/分×15分钟，分装血清，标号贮于-20℃待测。②支气管冲洗液：以olympus纤支镜检查，常规操作，经鼻腔插入。肺癌组纤支镜物镜置于肺癌侵犯支气管的近心端，如镜下不能见到病变，则置于病变相应部位亚肺段支气管口，然后以0.9%生理盐水20ml分两次注入后立即回抽(吸引器负压为13.3～26.7kPa)，回抽量4～9ml，平均5.5ml，收集后离心3500转/分×15分钟，分装上清液，标号贮于-20℃待测。
(2)实验步骤：sIL-2R测定，采用双抗体夹心法(EILSA)，严格按照试剂盒要求操作。
, http://www.100md.com
5 统计学方法：
多组间比较采用完全随机设计方差分析和最小显著差法分析，组间比较采用t检验，率间比较采用χ2分析。
结果
1 支气管冲洗液肺癌组，正常对照组sIL-2R的表达。
(1)肺癌组及正常对照组支气管冲洗液中sIL-2R检出率，见表1。
表1 LC与NC支气管冲洗液sIL-2R检出率 组别
sIL-2R
合计
阳性例数
阴性例数
, http://www.100md.com
LC
31
14
45
NC
3
7
10
合计
34
21
55
LC与NC P<0.05
, 百拇医药 (2)肺癌组与正常对照组支气管冲洗液中可测出的sIL-2R的
+S(u/ml)见表2。表2 LC与NC支气管冲洗液中可测出sIL-2R的
+S(u/ml) 组别N
±SLC
31
203.80±142.92
NC
3
, 百拇医药
30.44±11.73
LC与NC P<0.05
注：LC组14例，NC组7例未测出sIL-2R未平均在内二肺癌组、肺良性疾病组与正常对照组血清中sIL-2R水平。
2 LC、BPD、NC血清sIL-2R的
±S(u/ml)见表3。表3 LC、BPD、NC血清sIL-2R的
±S(u/ml)LC
BPD
NC
, 百拇医药
N
57
20
20
±S976±276
731±240
386±119
LC、BPD与NC之间P<0.05
LC与BPD之间P<0.05
3 肺鳞癌(Scc)、腺癌(Adc)、小细胞肺癌(Sclc)及肺泡细胞癌(Acc)血清sIL-2R的
±S(u/ml)见表4。, 百拇医药
表4 各型肺癌血清sIL-2R的
±S(u/ml)Scc
Adc
Sclc
Acc
N
39
8
9
1
±S, http://www.100md.com 971±286
1064±181
876±251
1564
Scc、Adc及Sclc各组之间P>0.05
4 肺癌血清sIL-2R与TNM分期的关系见表5。
表5 肺癌患者血清sIL-2R与TNM分期
Ⅰ～Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
N
31
, 百拇医药
18
3
±S889±227
1083±206
1168±182
Ⅲ与Ⅰ～Ⅱ、Ⅳ与Ⅰ～Ⅱ P<0.05
讨论
尽管本文肺癌患者支气管冲洗液中sIL-2R的检出率及测得活性均值与正常对照组比较差别有显著性(P<0.05)，然而肺癌患者支气管冲洗液中sIL-2R的检出率仅为68.8%，有31.2%的未能测出，且可测出的sIL-2R的均值远低于其血清均值，可能与肺癌病灶内血供较丰富，肿瘤相关抗原刺激机体免疫系统，激活的T淋巴细胞形成的sIL-2R直接进入血液中，且sIL-2R的分子量为45KDa，可能渗透到支气管腔内相对困难有关，这需进一步研究证实。
, 百拇医药
Yamaguchi[3]等报告小细胞性肺癌(SCLC)患者血清sIL-2R比正常人高3.8倍，比非小细胞肺癌(NSCLC)高1.9倍，认为sIL-2R可能主要由SCLC癌细胞分泌。本文肺癌患者sIL-2R浓度明显高于正常对照组和肺部良性疾病组；其血清sIL-2R活性肺泡细胞癌和腺癌最高，小细胞肺癌居其次，与Yamaguchi的意见并不一致。本组测得肺癌各组织学中，Scc、Adc及SCLC血清sIL-2R均值无明显的统计学意义，这与多数学者的研究大致相同[4、5]。Poulakis等[6]建议将sIL-2R用于肺癌细胞分型，但本文结果不支持这种观点。我们认为sIL-2R主要是由活性T淋巴细胞产生，而不是癌细胞分泌的。同时测得肺良性疾病sIL-2R偏高，可能与慢性炎症有关，故sIL-2R作为肺癌诊断指标之一的价值受到限制。
文献报道[7]：转移性强的瘤细胞株动物模型其血清sIL-2R浓度较高；出现转移的肿瘤病人血清sIL-2R浓度高于无转移者[8]。本文测得Ⅲ、Ⅳ期肺癌病人血清sIL-2R高于Ⅰ～Ⅱ期，尽管Ⅳ期肺癌患者例数少，但均有远处转移灶的出现，提示出现转移灶的肺癌患者血清sIL-2R水平较高，可能与癌细胞广泛激活T淋巴细胞产生更多的sIL-2R。陈琳等[9]同样测得肺癌血清sIL-2R水平在Ⅰ～Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期依次升高，并且差异显著。但也有持相反的意见者，Ginns等[10]报告肺鳞癌病人，肿瘤直径<3cm其血清sIL-2R水平比直径>3cm者明显高，最高者见于Ⅰ期鳞癌病人。
, 百拇医药
本文研究表明：支气管冲洗液中sIL-2R浓度在肺癌病人高于正常对照组，但有部分冲洗液中sIL-2R未能测出，故冲洗液中sIL-2R的测定临床意义不大。而肺癌患者血清sIL-2R明显高于正常对照组和肺部良性病组，并且其水平与疾病分期有关，但与组织学类型无关。
参考文献：
1 Rubin L A.,et al. J Immuno,1985;135(5):3172
2 Marino P., et al. Br J Cancer,1990;61:434
3 Yamaguchi K, et al. J Lab Clin Med,1990;116:457
4 Buccheri G, et al. Chest,1991;99:1433
, http://www.100md.com
5 Chan C.H., et al. Respir Med,1993;87:383
6 Poulakis N.,et al. Cancer,1991;68:1045
7 Schirrmacher V., et al. Br J Cancer,1987;55:583
8 Lissoni P., et al. Br J Cancer,1989;60:616
9 陈琳等.实用肿瘤杂志.1995;10(4):207
10 Ginns L C., et al. Am Rev Respir Dis,1990;142:398, http://www.100md.com