用肾图定量分析法评价系统性红斑狼疮患者的肾脏损害
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海峡药学990313 葡萄糖注射液热压灭菌后降温过程的热环境可促进5-羟甲基糠醛(5-HMF)的生成，成品贮存期间5-HMF亦在不断增加。本文应用动力学方法考察了该院葡萄糖注射液(500ml∶50g)受热条件对5-HMF的影响，并预测其室温贮存期。
1 仪器与药品 HH.W21.Cu600电热恒温水浴箱(上海跃进医疗器械一厂)；752型紫外/可见光栅分光光度计(山东高密分析仪器厂)。葡萄糖注射液(500ml∶50g，自制)。
2 方法与结果 工作实践中发现同锅灭菌柜热压灭菌的葡萄糖注射液，底层柜角位置者5-HMF为低，次上层柜中央位置者5-HMF为高。从该二位置抽取500ml∶50g规格葡萄糖注射液各1瓶，分别记为1、2，分装至洁净干燥的100ml盐水瓶中，具塞，同置60、70、80、87℃恒温水浴箱中水浴，定时精密量取10ml置100ml量瓶中，加水定容，在284nm波长处测定吸收度A值，记为5-HMF含量(见表1)。
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表1 葡萄糖注射液不同温度下5-HMFA值变化 温度(℃)
时 间(h)
0
2
4
6
8
10
60
1
0.044
0.045
0.048
, 百拇医药
0.049
0.052
0.055
2
0.147
0.152
0.154
0.155
0.158
0.159
70
1
0.044
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0.055
0.059
0.062
0.067
0.070
2
0.147
0.156
0.161
0.164
0.168
0.171
80
, 百拇医药
1
0.044
0.060
0.066
0.079
0.090
0.092
2
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0.176
0.187
0.198
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0.208
87
1
0.044
0.057
0.084
0.100
0.132
0.154
2
0.147
0.164
0.194
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0.220
0.249
0.274
以每瓶各水浴温度下5-HMFA值对水浴时间t作图，近似一直线，说明5-HMF生成系零级反应。该直线斜率即为速率常数k(见表2)。将k值视为温度与1、2瓶中5-HMF初值双因素作用的结果，行双因素试验方差分析(见表3)，结果说明温度对k值的影响有非常显著性(P<0.01)、5-HMF A初值对k值无明显影响(P>0.10)，为此认为1、2中5-HMF服从相同的零级动力学过程。将摄氏温度t(℃)转换为绝对温度T(k，T＝273.15+t)，以1nk对1/T回归得Arrhenius方程1nk＝-E/RT+1nA，将该方程外推至室温(25℃)可得室温速率常数K25℃，从而推算室温下5-HMF达到限值(0.32)的室温贮存期t25℃0.32(见表2)。表2 零级反应动力学数据表 温度(℃)
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A＝A0+kt回归方程
1nk
1/T
60
1△
A＝0.0433+0.001100tγ＝0.9876
-6.8124
3.0016×10-3
2*
A＝0.1485+0.001129tγ＝0.9696
-6.7864
, 百拇医药
70
1
A＝0.0474+0.002414tγ＝0.9702
-6.0265
2.9142×10-3
2
A＝0.1498+0.002271tγ＝0.9764
-6.0875
80
1
A＝0.0473+0.004900tγ＝0.9837
, http://www.100md.com
-5.3185
2.8316×10-3
2
A＝0.1490+0.006100tγ＝0.9968
-5.0995
87
1
A＝0.0387+0.011300tγ＝0.9943
-4.4830
2.7766×10-3
2
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A＝0.1426+0.013086tγ＝0.9980
-4.3362
1nk～1/T回归方程 1nk＝-10466.151/T+24.5342，γ＝-0.9908，n＝8
活化能EE＝-(-10466.151)×8.319×10-3＝87.1kJ/mol
室温反应速率常数K25℃K25℃＝e[-10466.151/(273.15+25)+24.5342]＝2.56891×10-5h-1
室温贮存期t25℃0.321△t25℃0.32＝(0.32-0.044)/K25℃＝14.7月2t25℃0.32＝(0.32-0.147)/K25℃＝9.2月表3 反应数率常数k的方差分析表 方差来源
, 百拇医药
离差平方和
自由度
均方
F值
临界值
显著性
温度
1.47636×10-4
3
4.9212×10-5
114.1
F0.01(3.3)＝29.5
, 百拇医药
P<0.01
5-HMFA初值
1.03104×10-6
1
1.03104×10-6
2.390
F0.10(1，3)＝5.54
P>0.10
误差
1.29395×10-6
3
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4.31317×10-7
总和
1.49961×10-4
7
3 讨 论
3.1 在动力学方法的选用上，一般认为药物的降解符合零级或一级过程。在一级动力学过程中，随着反应物浓度的递次减少，生成物的增幅递次减慢，即反应速率随着生成物浓度的增大而减慢。其速率过程应符合形如C＝M(1-e-kt)的方程，计算过程繁复。然而，当药物分解少于10%时，零级反应与一级反应实际上无法区分[1]，因此本文选用了易于处理的零级动力学模式。方差分析的结果显示5-HMF初始含量不同时其K值并未见明显差异(P>0.10)，亦说明了其5-HMF生成过程适宜于零级动力学模型拟合。
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3.2 显然地，热压灭菌后降温过程的快慢对5-HMF影响甚巨。依1nk～1/T回归方程可以很容易地计算出各个温度下受热1h所导致的5-HMFA值增加量：100℃，0.0298/h；90℃，0.0138/h，80℃，0.0061/h……工作中发现葡萄糖注射液热压灭菌后自然降温的速度甚慢，正是由于长时间的受热导致了5-HMF的异常升高。提醒我们：热压灭菌时在保障制剂热原质量的基础上，不仅应控制热压灭菌的温度与时间，灭菌完成时更应采取措施加快成品的降温速度，以控制5-HMF含量在较低水平。
3.3 实验结果预测该葡萄糖注射液室温贮存期约9～14月，如果成品5-HMFA值较大，则贮存期进一步缩短，指定医院自制的葡萄糖注射液保存期为6个月[2]，是合理的。5-HMF的生成与药液浓度、pH、灭菌温度、时间、灭菌后散热速度以及原料及注射用水质量等均有关，该诸多因素和条件同样影响成品稳定性。该院正常工艺条件下以上因素恒定，pH在4.0±0.2之间，本文实验仅在此基础上用动力学方法考察灭菌后受热条件对500ml∶50g规格葡萄糖注射液5-HMF稳定性的影响，更全面的考察或生产工艺更动后的影响有待于进一步研究。
参考文献
1.奚念朱等主编：药剂学，第2版，北京，人民卫生出版社，1992；118
2.卫生部药政局：中国医院制剂规范，第2版，北京，中国医药科技出版社，1995；205, 百拇医药
单位：
关键词：
海峡药学990313 葡萄糖注射液热压灭菌后降温过程的热环境可促进5-羟甲基糠醛(5-HMF)的生成，成品贮存期间5-HMF亦在不断增加。本文应用动力学方法考察了该院葡萄糖注射液(500ml∶50g)受热条件对5-HMF的影响，并预测其室温贮存期。
1 仪器与药品 HH.W21.Cu600电热恒温水浴箱(上海跃进医疗器械一厂)；752型紫外/可见光栅分光光度计(山东高密分析仪器厂)。葡萄糖注射液(500ml∶50g，自制)。
2 方法与结果 工作实践中发现同锅灭菌柜热压灭菌的葡萄糖注射液，底层柜角位置者5-HMF为低，次上层柜中央位置者5-HMF为高。从该二位置抽取500ml∶50g规格葡萄糖注射液各1瓶，分别记为1、2，分装至洁净干燥的100ml盐水瓶中，具塞，同置60、70、80、87℃恒温水浴箱中水浴，定时精密量取10ml置100ml量瓶中，加水定容，在284nm波长处测定吸收度A值，记为5-HMF含量(见表1)。
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表1 葡萄糖注射液不同温度下5-HMFA值变化 温度(℃)
时 间(h)
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0.044
0.045
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0.194
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0.220
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0.274
以每瓶各水浴温度下5-HMFA值对水浴时间t作图，近似一直线，说明5-HMF生成系零级反应。该直线斜率即为速率常数k(见表2)。将k值视为温度与1、2瓶中5-HMF初值双因素作用的结果，行双因素试验方差分析(见表3)，结果说明温度对k值的影响有非常显著性(P<0.01)、5-HMF A初值对k值无明显影响(P>0.10)，为此认为1、2中5-HMF服从相同的零级动力学过程。将摄氏温度t(℃)转换为绝对温度T(k，T＝273.15+t)，以1nk对1/T回归得Arrhenius方程1nk＝-E/RT+1nA，将该方程外推至室温(25℃)可得室温速率常数K25℃，从而推算室温下5-HMF达到限值(0.32)的室温贮存期t25℃0.32(见表2)。表2 零级反应动力学数据表 温度(℃)
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A＝A0+kt回归方程
1nk
1/T
60
1△
A＝0.0433+0.001100tγ＝0.9876
-6.8124
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2*
A＝0.1485+0.001129tγ＝0.9696
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A＝0.1426+0.013086tγ＝0.9980
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1nk～1/T回归方程 1nk＝-10466.151/T+24.5342，γ＝-0.9908，n＝8
活化能EE＝-(-10466.151)×8.319×10-3＝87.1kJ/mol
室温反应速率常数K25℃K25℃＝e[-10466.151/(273.15+25)+24.5342]＝2.56891×10-5h-1
室温贮存期t25℃0.321△t25℃0.32＝(0.32-0.044)/K25℃＝14.7月2t25℃0.32＝(0.32-0.147)/K25℃＝9.2月表3 反应数率常数k的方差分析表 方差来源
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离差平方和
自由度
均方
F值
临界值
显著性
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1.47636×10-4
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F0.01(3.3)＝29.5
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3.1 在动力学方法的选用上，一般认为药物的降解符合零级或一级过程。在一级动力学过程中，随着反应物浓度的递次减少，生成物的增幅递次减慢，即反应速率随着生成物浓度的增大而减慢。其速率过程应符合形如C＝M(1-e-kt)的方程，计算过程繁复。然而，当药物分解少于10%时，零级反应与一级反应实际上无法区分[1]，因此本文选用了易于处理的零级动力学模式。方差分析的结果显示5-HMF初始含量不同时其K值并未见明显差异(P>0.10)，亦说明了其5-HMF生成过程适宜于零级动力学模型拟合。
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3.2 显然地，热压灭菌后降温过程的快慢对5-HMF影响甚巨。依1nk～1/T回归方程可以很容易地计算出各个温度下受热1h所导致的5-HMFA值增加量：100℃，0.0298/h；90℃，0.0138/h，80℃，0.0061/h……工作中发现葡萄糖注射液热压灭菌后自然降温的速度甚慢，正是由于长时间的受热导致了5-HMF的异常升高。提醒我们：热压灭菌时在保障制剂热原质量的基础上，不仅应控制热压灭菌的温度与时间，灭菌完成时更应采取措施加快成品的降温速度，以控制5-HMF含量在较低水平。
3.3 实验结果预测该葡萄糖注射液室温贮存期约9～14月，如果成品5-HMFA值较大，则贮存期进一步缩短，指定医院自制的葡萄糖注射液保存期为6个月[2]，是合理的。5-HMF的生成与药液浓度、pH、灭菌温度、时间、灭菌后散热速度以及原料及注射用水质量等均有关，该诸多因素和条件同样影响成品稳定性。该院正常工艺条件下以上因素恒定，pH在4.0±0.2之间，本文实验仅在此基础上用动力学方法考察灭菌后受热条件对500ml∶50g规格葡萄糖注射液5-HMF稳定性的影响，更全面的考察或生产工艺更动后的影响有待于进一步研究。
参考文献
1.奚念朱等主编：药剂学，第2版，北京，人民卫生出版社，1992；118
2.卫生部药政局：中国医院制剂规范，第2版，北京，中国医药科技出版社，1995；205, 百拇医药