蒲元胃康胶囊对体外培养幽门螺旋杆菌的影响
作者：宫尚君 刘 健 刘希双 姜天福
单位：宫尚君(青岛医学院附属医院放射科(青岛 266003)；刘 健(中国人民解放军第135医院放射科)；刘希双(青岛医学院附属医院消化内科)；姜天福(青岛医学院附属医院病理科)
关键词：蒲元胃康胶囊；幽门螺旋杆菌；胃溃疡；小鼠
齐鲁医学杂志990107 【摘要】 ①目的 观察蒲元胃康胶囊煎煮液对体外培养幽门螺旋杆菌及小鼠小肠推进功能、自主活动的影响。②方法 向幽门螺旋杆菌培养液中加入灭菌蒲元胃康胶囊煎煮液，培养48h，观察最低抑菌和最低杀菌浓度；用0.6，1.2，2.4g/kg体质量蒲元胃康胶囊和6g/kg体质量胃苏冲剂给小鼠灌胃，连用7d.观察小鼠小肠炭末推进百分率；以同样剂量和给药方法，观察蒲元胃康胶囊对小鼠二甲苯性耳肿胀、醋酸性化学致痛及自主活动的影响。③结果 蒲元胃康煎煮液对体外培养幽门螺旋杆菌最低抑菌浓度(MIC)为1∶512，最低杀菌浓度(MBC)为1∶512，蒲元胃康胶囊能明显增加小鼠小肠炭末推进百分率， 并且具有镇痛和明显降低小鼠自主活动次数的作用。④结论蒲元胃康胶囊煎煮液对体外培养幽门螺旋杆菌有抑制和杀灭作用，同时有提高小肠推进功能和镇痛、安定作用。
, http://www.100md.com
中国图书资料分类法分类号 R285.5
EFFCTS OF PU YUAN WEI KANG ON
HELICOBACTERIA PYLI CULTURED IN VITRO
Gong Shangjun, Liu Jian, Liu Xishuang, et al
Department of Radiology, The Affiliated Hospital of Qingdao Medical College, Qingdao 266021
【ABSTRACT】 Objective To observe the effects of Pu Yuan Wei Kang on Helicobactia pyli cultured in vitro, on the pushing function of small intestine, and spontaneous activity in mice. Methods Sterilized and decocted liquid of Pu Yuan Wei Kang capsule was added into the culture of Helicobacteria pyli and cultured for 48h. MIC and MBC were determined; Pu Yuan Wei Kang capsule (0.6,1.2,2. 4g/kg) and Wei Su granule (6g/kg) were administrated ig to mice for 7d, the percentage of pushing carbonic powder in small intestine was tested. In the same way and same amount of administration, the effects of PuYuan Wei Kang on mice ear swelling induced by dimethylbenxene, chemical pain induced by accetic acid and spantaneous acts were tested. ResultsMIC and MBC of Pu Yuan Wei Kang on Helicobacteria pyli cultured in vitro was 1:512; Pu Yuan Wei Kang capsule could increase the percentage of pushing carbonic powder in small intestine, exert analgesia effect and decrease the count of spontaneous acts in mice. Conclusion Pu Yuan Wei Kang capsule had inhibiting and killing effects on Helicobacteria pyli cultured in vitro. It could increase the pushing movement of small intestine, exert analgesia and calming effects on mice.
, 百拇医药
【KEY WORDS】 Pu Yuan Wei Kang capsule;helicobacteria pyli; gastric ulcer; rat
胃溃疡发生的部分原因是由于幽门螺旋杆菌感染，因此，临床将抑制幽门螺旋杆菌作为治疗胃溃疡的重要措施之一。本文观察了蒲元胃康胶囊对体外培养幽门螺旋杆菌的影响，以探讨该药治疗胃溃疡的作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料
蒲元胃康胶囊由青岛医学院附属医院研制(批号971203)； 胃苏冲剂由江苏扬子江制药厂生产(批号980203)。
1.2 动物
昆明种小鼠，体质量(20±2)g，雌雄兼用， 由吉林省中医中药研究院动物室提供。
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1.3 蒲元胃康胶囊煎煮液的制备
取蒲元胃康胶囊内容物10g，加水100mL，文火煎煮2h， 放冷、 浸泡30min，过滤后，再加水50mL，文火煎煮30min，过滤，合并滤液，浓缩至10mL(每毫升含原药1g)，于115℃下灭菌20min，备用。
1.4 实验方法
1.4.1 蒲元胃康胶囊对体外培养幽门螺旋杆菌的影响 将胃溃疡组织(长春中医学院附属医院胃镜室提供)均匀涂沫于Skirrow双碟(灭菌后加5g/L TMP抗菌混合液，摇匀)上，置37℃微氧环境(德国BioMeerieux Generbox加入催化剂，制成体积分数为0.05～0.08 CO,0.05～0.08 O2，0.34 H2的微氧环境)，孵育48h后观察菌落形态、特征、染色及生化反应。 将分离鉴定后的幽门螺旋杆菌以布氏肉汤增菌48h后，用100g/L的葡萄糖溶液稀释至10-5(每毫升约含1 000个菌)。然后取无菌试管13支， 每管加入布氏肉汤1mL，第1支管加入上述煎煮药液1mL,摇匀，倍比稀释至第11支管，第12,13支管不加药液，作对照试验。各管加浓度为10-4菌液0.1mL约1 000个菌，混匀，置37℃微氧环境培养48h后观察结果。液体混浊者为抗菌， 清晰透明者为敏感，同时每管取1mL，加入双碟后注入Skirrow培养基，摇匀，置37℃微氧环境培养72h，观察最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)〔1〕。
, 百拇医药
1.4.2 小鼠小肠炭末推进功能模型的制备 50只小鼠，随机分为5组，用0.6，1.2，2.4g /kg体质量的(Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ组)蒲元胃康胶囊和6g/kg体质量胃苏冲剂给小鼠灌胃，每日1次，连用7d.实验前禁食16h， 末次给药后25min，对照组给予10mL/kg体质量生理盐水。上述5组均采用50g/L的炭末阿拉伯胶溶液10mL/kg体质量灌胃，35min后处死小鼠。计算小鼠小肠炭末推进百分率〔2〕。
1.4.3 蒲元胃康胶囊对二甲苯所致小鼠耳肿胀模型的影响 50只小鼠，随机分为5组，按1.4.2方法灌胃给药，末次给药后0.5h，将30μL二甲苯涂于每只鼠左侧耳片上，2h后处死小鼠，用6mm打孔器于左右耳廓相同部分打孔取下耳片，分别称质量， 以两耳质量差作为肿胀程度〔2〕。
1.4.4 蒲元胃康胶囊对小鼠镇痛作用的影响 50只小鼠，随机分为5组，按1.4.2方法灌胃给药，末次给药后1h，腹腔注射10g/L HAC 0.01mL，记录小鼠15min内身体扭体次数〔3〕。
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1.4.5 对小鼠自主活动的影响 50只小鼠，随机分5组，按1.4.2方法灌胃给药，末次给药后1h将小鼠放入XZC-4型小动物自主活动仪中记录小鼠5min活动次数。
1.5 统计学处理
本文所测结果以
±s表示，均数之间的比较采用方差分析及q检验。
2 结 果
2.1 蒲元胃康胶囊对体外培养幽门螺旋杆菌影响
蒲元胃康胶囊对体外培养幽门螺旋杆菌的MIC为1∶512，MBC为1∶512.
2.2 蒲元胃康胶囊对小鼠小肠炭末推进功能影响
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蒲元胃康胶囊能增加小鼠小肠炭末推进百分率，各剂量组与对照组比较,差异有显著性(F=6.57,q=3.61～7.21,P均<0.05)。见表1.
2.3 蒲元胃康胶囊对小鼠耳肿胀的影响
蒲元胃康能减少小鼠两耳片质量差，但与对照组比较，差异均无显著性(F=3.17,q=0.21～2.66,P均>0.05)。见表1.
2.4 蒲元胃康胶囊对小鼠的镇痛作用
蒲元胃康胶囊能明显降低小鼠身体的扭体次数，与对照组比较，差异均有显著性(F=7.03,q=5.01～6.85,P均<0.05)。见表1.
2.5 蒲元胃康胶囊对小鼠自主活动的影响
蒲元胃康胶囊能明显降低小鼠的自主活动次数，与对照组比较，差异均有显著性(F=6.58,q=3.61～7.21,P均<0.05)。见表1.
, 百拇医药
表1 蒲元胃康胶囊对小鼠小肠炭末推进功能、耳肿胀、镇痛及自主活动的影响(±s) 组 别
n
推进百分率(%)
两侧耳片质量
差(m/mg)
扭体次数
自主活动次数
对照组
10
56.56±9.88
18.8±2.3
, 百拇医药
36.3±10.4
191.2±36.1
胃苏冲剂组
10
67.82±11.73*
11.6±3.1
21.9±10.1**
187.8±38.7
蒲元胃康胶囊
, 百拇医药
Ⅰ组
10
79.04±7.38**
9.8±3.1
16.6±8.4**
134.2±31.6**
Ⅱ组
10
69.48±8.16*
10.8±3.3
19.7±5.0**
, 百拇医药
142.2±27.6**
Ⅲ组
10
69.26±11.41*
14.3±3.1
21.3±10.4**
154.4±25.4*
与对照组比较,F=3.17～7.03，q=3.61～7.21,P<0.05，0.01
3 讨 论
幽门螺旋杆菌与消化性溃疡的关系密切，研究表明消化性溃疡病灶中该菌的检出率高达80%～90%〔4,5〕.疾病活动时，菌量增多,细菌存在部位相应组织有中性粒细胞浸润。用能够能杀灭幽门螺旋杆菌的药物治疗，临床可获得明显效果。
, 百拇医药
胃、十二指肠溃疡，中医学认为属“胃脘痛”范畴，明代龚廷贤《寿世保元心胃痛》说：“胃脘痛者多是纵恣口腹，喜好辛酸，恣饮热酒煎煿，复食寒凉生冷，朝伤暮损，日积月深，自郁成积，自积成痰，痰失煎熬，血亦妄行，痰火相杂，妨碍升降，故胃脘疼痛，吞酸嗳气，嘈杂恶心”。胃失和降，气机郁阻，不通则痛，治则应理气和胃，为治疗的基本原则。
本文结果显示，蒲元胃康胶囊不仅对体外培养幽门螺旋杆菌有明显的抑菌和杀菌作用，而且对小鼠具有镇痛、促进小肠推进和安定等作用，从而有助于溃疡部位的愈合和炎症的消失及疼痛症状的改善，为临床治疗胃、十二指肠溃疡提供了实验依据。
本文为青岛市科委资助课题(青科计字1996年262号文)参考文献
1 陈 奇主编.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,1993. 469
2 李仪奎主编.中药药理实验方法学.上海科学技术出版社,1991. 320
3 陈 奇,毕 明,王明华,等.钻山风药理研究.中草药,1983,14(10):23
4 周吉民,温孚强,李雅浩,等.幽门弯曲菌与常见胃部溃疡的关系.中华消化杂志,1988,8(3): 155
5 张德源主编.医学微生物学.北京:人民卫生出版社出版,1994. 205
(1998-12-27收稿 1999-01-25修回), 百拇医药
单位：宫尚君(青岛医学院附属医院放射科(青岛 266003)；刘 健(中国人民解放军第135医院放射科)；刘希双(青岛医学院附属医院消化内科)；姜天福(青岛医学院附属医院病理科)
关键词：蒲元胃康胶囊；幽门螺旋杆菌；胃溃疡；小鼠
齐鲁医学杂志990107 【摘要】 ①目的 观察蒲元胃康胶囊煎煮液对体外培养幽门螺旋杆菌及小鼠小肠推进功能、自主活动的影响。②方法 向幽门螺旋杆菌培养液中加入灭菌蒲元胃康胶囊煎煮液，培养48h，观察最低抑菌和最低杀菌浓度；用0.6，1.2，2.4g/kg体质量蒲元胃康胶囊和6g/kg体质量胃苏冲剂给小鼠灌胃，连用7d.观察小鼠小肠炭末推进百分率；以同样剂量和给药方法，观察蒲元胃康胶囊对小鼠二甲苯性耳肿胀、醋酸性化学致痛及自主活动的影响。③结果 蒲元胃康煎煮液对体外培养幽门螺旋杆菌最低抑菌浓度(MIC)为1∶512，最低杀菌浓度(MBC)为1∶512，蒲元胃康胶囊能明显增加小鼠小肠炭末推进百分率， 并且具有镇痛和明显降低小鼠自主活动次数的作用。④结论蒲元胃康胶囊煎煮液对体外培养幽门螺旋杆菌有抑制和杀灭作用，同时有提高小肠推进功能和镇痛、安定作用。
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中国图书资料分类法分类号 R285.5
EFFCTS OF PU YUAN WEI KANG ON
HELICOBACTERIA PYLI CULTURED IN VITRO
Gong Shangjun, Liu Jian, Liu Xishuang, et al
Department of Radiology, The Affiliated Hospital of Qingdao Medical College, Qingdao 266021
【ABSTRACT】 Objective To observe the effects of Pu Yuan Wei Kang on Helicobactia pyli cultured in vitro, on the pushing function of small intestine, and spontaneous activity in mice. Methods Sterilized and decocted liquid of Pu Yuan Wei Kang capsule was added into the culture of Helicobacteria pyli and cultured for 48h. MIC and MBC were determined; Pu Yuan Wei Kang capsule (0.6,1.2,2. 4g/kg) and Wei Su granule (6g/kg) were administrated ig to mice for 7d, the percentage of pushing carbonic powder in small intestine was tested. In the same way and same amount of administration, the effects of PuYuan Wei Kang on mice ear swelling induced by dimethylbenxene, chemical pain induced by accetic acid and spantaneous acts were tested. ResultsMIC and MBC of Pu Yuan Wei Kang on Helicobacteria pyli cultured in vitro was 1:512; Pu Yuan Wei Kang capsule could increase the percentage of pushing carbonic powder in small intestine, exert analgesia effect and decrease the count of spontaneous acts in mice. Conclusion Pu Yuan Wei Kang capsule had inhibiting and killing effects on Helicobacteria pyli cultured in vitro. It could increase the pushing movement of small intestine, exert analgesia and calming effects on mice.
, 百拇医药
【KEY WORDS】 Pu Yuan Wei Kang capsule;helicobacteria pyli; gastric ulcer; rat
胃溃疡发生的部分原因是由于幽门螺旋杆菌感染，因此，临床将抑制幽门螺旋杆菌作为治疗胃溃疡的重要措施之一。本文观察了蒲元胃康胶囊对体外培养幽门螺旋杆菌的影响，以探讨该药治疗胃溃疡的作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料
蒲元胃康胶囊由青岛医学院附属医院研制(批号971203)； 胃苏冲剂由江苏扬子江制药厂生产(批号980203)。
1.2 动物
昆明种小鼠，体质量(20±2)g，雌雄兼用， 由吉林省中医中药研究院动物室提供。
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1.3 蒲元胃康胶囊煎煮液的制备
取蒲元胃康胶囊内容物10g，加水100mL，文火煎煮2h， 放冷、 浸泡30min，过滤后，再加水50mL，文火煎煮30min，过滤，合并滤液，浓缩至10mL(每毫升含原药1g)，于115℃下灭菌20min，备用。
1.4 实验方法
1.4.1 蒲元胃康胶囊对体外培养幽门螺旋杆菌的影响 将胃溃疡组织(长春中医学院附属医院胃镜室提供)均匀涂沫于Skirrow双碟(灭菌后加5g/L TMP抗菌混合液，摇匀)上，置37℃微氧环境(德国BioMeerieux Generbox加入催化剂，制成体积分数为0.05～0.08 CO,0.05～0.08 O2，0.34 H2的微氧环境)，孵育48h后观察菌落形态、特征、染色及生化反应。 将分离鉴定后的幽门螺旋杆菌以布氏肉汤增菌48h后，用100g/L的葡萄糖溶液稀释至10-5(每毫升约含1 000个菌)。然后取无菌试管13支， 每管加入布氏肉汤1mL，第1支管加入上述煎煮药液1mL,摇匀，倍比稀释至第11支管，第12,13支管不加药液，作对照试验。各管加浓度为10-4菌液0.1mL约1 000个菌，混匀，置37℃微氧环境培养48h后观察结果。液体混浊者为抗菌， 清晰透明者为敏感，同时每管取1mL，加入双碟后注入Skirrow培养基，摇匀，置37℃微氧环境培养72h，观察最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)〔1〕。
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1.4.2 小鼠小肠炭末推进功能模型的制备 50只小鼠，随机分为5组，用0.6，1.2，2.4g /kg体质量的(Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ组)蒲元胃康胶囊和6g/kg体质量胃苏冲剂给小鼠灌胃，每日1次，连用7d.实验前禁食16h， 末次给药后25min，对照组给予10mL/kg体质量生理盐水。上述5组均采用50g/L的炭末阿拉伯胶溶液10mL/kg体质量灌胃，35min后处死小鼠。计算小鼠小肠炭末推进百分率〔2〕。
1.4.3 蒲元胃康胶囊对二甲苯所致小鼠耳肿胀模型的影响 50只小鼠，随机分为5组，按1.4.2方法灌胃给药，末次给药后0.5h，将30μL二甲苯涂于每只鼠左侧耳片上，2h后处死小鼠，用6mm打孔器于左右耳廓相同部分打孔取下耳片，分别称质量， 以两耳质量差作为肿胀程度〔2〕。
1.4.4 蒲元胃康胶囊对小鼠镇痛作用的影响 50只小鼠，随机分为5组，按1.4.2方法灌胃给药，末次给药后1h，腹腔注射10g/L HAC 0.01mL，记录小鼠15min内身体扭体次数〔3〕。
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1.4.5 对小鼠自主活动的影响 50只小鼠，随机分5组，按1.4.2方法灌胃给药，末次给药后1h将小鼠放入XZC-4型小动物自主活动仪中记录小鼠5min活动次数。
1.5 统计学处理
本文所测结果以
±s表示，均数之间的比较采用方差分析及q检验。2 结 果
2.1 蒲元胃康胶囊对体外培养幽门螺旋杆菌影响
蒲元胃康胶囊对体外培养幽门螺旋杆菌的MIC为1∶512，MBC为1∶512.
2.2 蒲元胃康胶囊对小鼠小肠炭末推进功能影响
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蒲元胃康胶囊能增加小鼠小肠炭末推进百分率，各剂量组与对照组比较,差异有显著性(F=6.57,q=3.61～7.21,P均<0.05)。见表1.
2.3 蒲元胃康胶囊对小鼠耳肿胀的影响
蒲元胃康能减少小鼠两耳片质量差，但与对照组比较，差异均无显著性(F=3.17,q=0.21～2.66,P均>0.05)。见表1.
2.4 蒲元胃康胶囊对小鼠的镇痛作用
蒲元胃康胶囊能明显降低小鼠身体的扭体次数，与对照组比较，差异均有显著性(F=7.03,q=5.01～6.85,P均<0.05)。见表1.
2.5 蒲元胃康胶囊对小鼠自主活动的影响
蒲元胃康胶囊能明显降低小鼠的自主活动次数，与对照组比较，差异均有显著性(F=6.58,q=3.61～7.21,P均<0.05)。见表1.
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表1 蒲元胃康胶囊对小鼠小肠炭末推进功能、耳肿胀、镇痛及自主活动的影响(
±s) 组 别n
推进百分率(%)
两侧耳片质量
差(m/mg)
扭体次数
自主活动次数
对照组
10
56.56±9.88
18.8±2.3
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36.3±10.4
191.2±36.1
胃苏冲剂组
10
67.82±11.73*
11.6±3.1
21.9±10.1**
187.8±38.7
蒲元胃康胶囊
, 百拇医药
Ⅰ组
10
79.04±7.38**
9.8±3.1
16.6±8.4**
134.2±31.6**
Ⅱ组
10
69.48±8.16*
10.8±3.3
19.7±5.0**
, 百拇医药
142.2±27.6**
Ⅲ组
10
69.26±11.41*
14.3±3.1
21.3±10.4**
154.4±25.4*
与对照组比较,F=3.17～7.03，q=3.61～7.21,P<0.05，0.01
3 讨 论
幽门螺旋杆菌与消化性溃疡的关系密切，研究表明消化性溃疡病灶中该菌的检出率高达80%～90%〔4,5〕.疾病活动时，菌量增多,细菌存在部位相应组织有中性粒细胞浸润。用能够能杀灭幽门螺旋杆菌的药物治疗，临床可获得明显效果。
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胃、十二指肠溃疡，中医学认为属“胃脘痛”范畴，明代龚廷贤《寿世保元心胃痛》说：“胃脘痛者多是纵恣口腹，喜好辛酸，恣饮热酒煎煿，复食寒凉生冷，朝伤暮损，日积月深，自郁成积，自积成痰，痰失煎熬，血亦妄行，痰火相杂，妨碍升降，故胃脘疼痛，吞酸嗳气，嘈杂恶心”。胃失和降，气机郁阻，不通则痛，治则应理气和胃，为治疗的基本原则。
本文结果显示，蒲元胃康胶囊不仅对体外培养幽门螺旋杆菌有明显的抑菌和杀菌作用，而且对小鼠具有镇痛、促进小肠推进和安定等作用，从而有助于溃疡部位的愈合和炎症的消失及疼痛症状的改善，为临床治疗胃、十二指肠溃疡提供了实验依据。
本文为青岛市科委资助课题(青科计字1996年262号文)参考文献
1 陈 奇主编.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,1993. 469
2 李仪奎主编.中药药理实验方法学.上海科学技术出版社,1991. 320
3 陈 奇,毕 明,王明华,等.钻山风药理研究.中草药,1983,14(10):23
4 周吉民,温孚强,李雅浩,等.幽门弯曲菌与常见胃部溃疡的关系.中华消化杂志,1988,8(3): 155
5 张德源主编.医学微生物学.北京:人民卫生出版社出版,1994. 205
(1998-12-27收稿 1999-01-25修回), 百拇医药