浙贝母提取工艺的优化选择

http://www.100md.com 《中草药》 1999年第1期

     作者：苏碧茹^* 程艳阳 陈斌

    单位：苏碧茹 程艳阳 陈斌广州中药一厂(510130)

    关键词：浙贝母；总生物碱；提取工艺；正交试验

    中草药/990112 摘 要 以总生物碱含量为指标，采用正交试验法考察提取溶媒、溶媒浓度、药材处理方法、提取次数等因素对总生物碱提取效果的影响。结果表明，浙贝母的最佳提取工艺条件为以95%乙醇提取2次，每次1 h，整粒提取，溶媒量6倍，药材不需碱处理。

    浙贝母的功效是清热润肺、化痰止咳，其主要有效成分贝母碱具有化痰镇咳的作用^〔1〕。为了制定科学合理的提取工艺，保证有效成分的提取效率，特以总生物碱含量为指标，用正交试验法作最佳提取工艺的研究。

    1 仪器与试药
, 百拇医药
    华里安CARY-1型紫外分光光度计，浙贝母药材购自广州市药材公司，贝母素甲对照品由中国药品生物制品检定所提供，所用试剂均为分析纯。

    2 方法与结果

    2.1 样品的提取：取浙贝母药材8份，每份30 g，按表1条件进行药材处理及提取，测定提取液的最后体积，作为供试品溶液。

    2.2 总生物碱的测定^〔2〕

    2.2.1 标准曲线制备：精密称取贝母素甲对照品5.1 mg，置50 mL容量瓶中，加氯仿溶解至刻度，摇匀，作为对照品溶液。分别精密吸取5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL至25 mL容量瓶中，加缓冲液(pH＝5.0)5 mL，溴麝香草酚蓝试液2 mL，摇匀，再加氯仿至刻度，充分摇匀，移入分液漏斗中，放置分层，取下层液作测试液。以氯仿同法操作作空白对照，先用350～450 nm波长进行扫描，得λ_max为410 nm，测定吸收度值，得回归方程为：A＝1.9595C+0.0122，r＝0.9992。
, 百拇医药
    2.2.2 样品的测定：分别精密吸取供试品溶液2 mL，置25 mL容量瓶中，加缓冲液(pH＝5.0)5 mL，溴麝香草酚蓝试液2 mL，摇匀，再加氯仿至刻度，充分摇匀，移入分液漏斗中，放置分层，取下层液比色测定。另取蒸馏水2.0 mL同法操作，作为空白溶液。在410 nm波长处测定吸收度值，并按回归方程计算样品液中总生物碱含量。

    2.3 正交试验及结果：根据有关资料及经验，拟定7个因素，每个因素选择2个水平(表1)，按L₈(2⁷)正交设计表对总生物碱进行提取和测定，结果见表2，方差分析见表3。

    表1 因素水平 水平

    溶媒

    A

    浓度

, 百拇医药     B(%)

    药材处理

    C

    提取次数

    D

    提取时间

    E(h)

    粒度

    F

    溶媒量

    G

    1

    乙醇

    60
, 百拇医药
    10%Na₂CO₃

    浸30 min

    2

    1

    碎粒

    6倍

    2

    水

    95

    不处理

    3

    2

    整粒
, http://www.100md.com
    9倍

    表2 试验方案与结果 试验号

    A

    B

    C

    因素

    D

    E

    F

    G

    试验指标

    总生物碱含量(%)

    1
, 百拇医药
    1

    1

    1

    1

    1

    1

    1

    0.163

    2

    1

    1

    1

    2

    2
, 百拇医药
    2

    2

    0.240

    3

    1

    2

    2

    1

    1

    2

    2

    0.280

    4

    1
, 百拇医药
    2

    2

    2

    2

    1

    1

    0.310

    5

    2

    1

    2

    1

    2

    1
, http://www.100md.com
    2

    0.148

    6

    2

    1

    2

    2

    1

    2

    1

    0.128

    7

    2

    2
, http://www.100md.com
    1

    1

    2

    2

    1

    0.095

    8

    2

    2

    1

    2

    1

    1

    2
, 百拇医药
    0.126

    Ⅰ

    0.993

    0.679

    0.624

    0.606

    0.697

    0.747

    0.696

    Ⅱ

    0.497

    0.811

    0.866
, 百拇医药
    0.884

    0.793

    0.743

    0.794

    T＝1.49

    R

    0.496

    0.132

    0.242

    0.110

    0.096

    0.004

    0.898
, 百拇医药
    表3 方差分析 方差来源

    偏差平方和

    自由度

    均方

    F值

    P

    A

    0.0307

    1

    0.0307

    74.70

    <0.01

    B
, 百拇医药
    4.375×10^-3

    1

    4.375×10^-3

    10.63

    <0.05

    C

    7.325×10^-3

    1

    7.325×10^-5

    17.81

    <0.05

, http://www.100md.com     D

    1.738×10^-3

    1

    1.738×10^-3

    4.22

    >0.05

    E

    3.25×10^-5

    1

    3.25×10^-5

    0.079

    >0.05
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    F

    2.0×10^-6

    1

    2.0×10^-6

    0.0049

    >0.05

    G

    1.2×10^-3

    1

    1.2×10^-3

    2.91

    >0.05
, 百拇医药
    e(误差)

    1.235×10^-3

    3

    1.235×10^-3

    F_0.01(1，3)＝34.11 F_0.05(1，3)＝10.133 小结

    3.1 方差分析表明，提取溶媒对贝母碱的提取效果影响极显著，溶媒浓度、药材处理次之，提取时间、提取次数、粒度、溶媒量对结果几乎无影响。

    3.2 从表2结果表明，提取效果最佳的第4号(A₁B₂C₂D₂E₁F₁G₁)，即以95%乙醇提取3次，每次2 h，碎粒提取，溶媒量6倍，药材不需10%Na₂CO₃处理。计算选优为A₁B₂C₂
, 百拇医药
    D₂E₂F₁G₂，即除溶媒9倍外，其余相同，但从表3看，溶媒量等对结果几乎无影响，可任取其一水平，从节约成本考虑，选择最佳提取工艺为A₁B₂C₂D₁E₁F₂G₁，即以95%乙醇提取2次，每次1h，整粒提取，溶媒量6倍，药材不需10%Na₂CO₃处理。

    *Address:Su Biru,Guangzhou No.1Factory of Chinese Mateia Medica ,Guangzhou

    参 考 文 献

    [1] 中国医学科学院药物研究所等编.中药志(Ⅰ).北京：人民卫生出版社，1982：93

    [2] 刘舞霞，等.药物分析杂志，1990，10(2)：114

    (1998-07-17 收稿), http://www.100md.com(苏碧茹* 程艳阳 陈斌)

    百拇医药网 http://www.100md.com/html/analecta/1999/01/01/30/925.htm