Etest方法测试145株革兰阴性杆菌的耐药性
作者：许锦民
单位：许锦民 广州呼吸疾病研究所，广州 510120
关键词：耐药性；最低抑菌浓度；头孢哌酮/舒巴坦；头孢他啶；环丙；沙星
Etest方法测试145株革兰阴性杆菌的耐药性
提要 目的：了解革兰阴性杆菌对常用的3种抗生素的耐药性，以指导临床用药。方法：采用Etest药敏实验测定145株菌对3种抗生素的最低抑菌浓度(MIC)。结果：3种抗生素总的耐药率分别为头孢哌酮/舒巴坦17%、头孢他啶39%和环丙沙星42%。结论：Etest方法测定MIC简便精确，革兰阴性杆菌对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低。
中图分类号 R969.3
Analysis of Drug Resistance of 145 Strains of Gram-negative Bacilli in Guangzhou Area to Antibiotics by Using Method of Etest
, http://www.100md.com
Xu Jinmin
(Guangzhou Institute of Respiratory Diseases,Gungzhou 510020)
Objective:To investigate the situation of resistance of Gram-negative bacilli found in Guangzhou area to three commonly used antibiotics for the purpose of providing instruction for clinical practice.Method:The minimal inbibition concentrations(MIC) of the three antibiotics to 145 strains of Gram-negative bacilli were detected by using method of Etest.Results:The overall resistant rates in group of Cefoperazone/sulbactam,Ceftazidime and Ciprofloxacin were 17%,39% and 42%,respectively.Conclusion:Etest appeared to be an easy and accurate method for the detection of MIC ,and the three strains of Gram-negative bacili manifested the lowest resistance to Cefoperazone/sulbactam.
, http://www.100md.com
Key words Drugresistance;Minimal inbibition concentration (MIC);Cefoperazone/sulbactam;Ce ftazidine;Ciprofloxacin
随着广谱抗生素的广泛应用，抗生素的耐药问题日趋严重，因此监测细菌对常用抗生素的耐药性是非常必要的，我们采用Etest方法测定了145株细菌对3种抗生素的最低抑菌浓度(MIC)，并分析其耐药性供实验室和临床参与以指导合理使用抗生素。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 菌株来源 145株细菌分离自痰、尿液和血液等临床标本(1997年6月 ～12月)。
1.1.2 菌株鉴定 采用美国BD公司的Sceptor半自动微生物分析仪或法国VITEK全自动微生物分析仪将分离株鉴定到种。
, http://www.100md.com
1.1.3 抗生素来源 Etest条为ABBiodisk公司产品。抗生素为环丙沙星(C IP)、头孢他啶(CAZ)和头孢哌酮/舒巴坦(CPS)。
1.1.4 药敏培养基为Biodisk公司生产的MH药敏培养基(150mm,4mm)。
1.2 方法
1.2.1 药敏实验 采用1997年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐使 用的琼脂扩散法(1)。从椭圆形的抑菌环与Etest试条交界处的刻度上读出MIC，单位为μg/ml，结果按NCCLS规定判断为敏感或耐药，同时每周用大肠杆菌ATCC25992，绿脓杆菌ATCC27853作质控监测 。
1.2.2 数据分析 数据输入WHONET4软件并分析。
2 结果
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Etest法测定145株细菌对3种抗生素的耐药率见表1。
表1 145株细菌对3种抗生素的耐药率(%) 菌种名
株数
CIP
CAZ
CPS
R
I
S
R
I
S
, 百拇医药 R
I
S
绿脓假单胞菌
40
35
2
63
35
20
45
20
15
65
, http://www.100md.com
肺炎克雷伯菌
33
24
6
70
39
0
61
10
6
84
不动杆菌属
25
64
, http://www.100md.com
4
32
52
4
44
20
8
72
大肠杆菌
25
62
4
34
16
, 百拇医药
4
80
8
4
88
阴沟肠杆菌
12
50
8
42
70
16
14
41
, 百拇医药
0
59
嗜麦芽窄食单胞菌
10
50
0
50
40
0
60
10
0
90
总耐药率
, 百拇医药
42
39
17
3 讨论
头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶和环丙沙星是目前治疗院内中度至重度感染常用的抗生素。145株菌对他们的耐药率分别为17%、39%和42%。
肺炎克雷伯菌和大肠杆菌是质粒介导的超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-l actamase，ESBL)的代表菌株， ESBL的特点是通常能被β-内酰胺酶酶抑制 剂抑制，头孢他啶是识别ESBL的最佳底物之一[2]。肺炎克雷伯菌对头孢他啶的耐药率为39%，大肠杆菌对头孢他啶的耐药率为20%(包括中介)，故 ESBL的发生率不低于上述值。舒巴坦作为β-内酰胺酶的抑制剂，其特点为对质粒介导的β-内酰胺酶作用最好，故头孢哌酮/舒巴坦对肺炎克雷伯菌和大肠杆菌敏感率最高。大肠杆菌对环丙沙星的耐药率高达62%，主要与近年喹诺酮类药物广泛应用引起抗菌药物介导的耐药性基因突变有关，编码 DNA旋转酶的 gyrA或gyrB基因发生点突变被认为是产生耐药性的主要原因[3]。
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绿脓假单孢菌分离率居首位，对头孢他啶的耐药率高达35%，头孢他啶常被认为是抗绿脓假单孢菌的首选药物之一，其耐药形成可能主要与我院长期大量使用有关。
嗜麦芽窄食单孢菌对头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低为10%。另研究表明此种菌对亚胺培南天然耐受，亚胺培南的应用将敏感菌杀死有可能将此种菌选择出来。
不动杆菌属对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低为20%，此菌属的耐药是由多种机制控制的，包括细胞膜渗透力降低和多种β-内酰胺酶等机制。
阴沟肠杆菌是多重耐药菌株，其对头孢他啶的耐药率高达75%，它的耐药机理主要为产诱导型β-内酰胺酶。
细菌耐药性的形成和抗生素的应用有着极为密切的关系，抗生素可以诱导细菌产生耐药性或者将敏感菌杀灭而将耐药菌株选择出来；临床上只有严格掌握抗生素使用指征或者减少抗生素的应用才能降低其耐药的产生。
, http://www.100md.com
参考文献
1 National Comittee for Clinical Laboratory Standards. Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests-Sixth Edition;M2-A6:NCCLS, 1997; 17(1)
2 Katsanis GP,Sporgo J,Ferraro MJ,et al. Detection of klebsiella pneumonia and Escherichia coli stains producing extended-spectrum β-lactame. J Clin Microbiol,1994;32:691
3 Acar JF,Goldstein FW. Trends in bacterial resistance to fluoroquinolones. Clin Infect Dis,1997;24(suppl1):67～73
(收稿：1998-01-19), 百拇医药
单位：许锦民 广州呼吸疾病研究所，广州 510120
关键词：耐药性；最低抑菌浓度；头孢哌酮/舒巴坦；头孢他啶；环丙；沙星
Etest方法测试145株革兰阴性杆菌的耐药性
提要 目的：了解革兰阴性杆菌对常用的3种抗生素的耐药性，以指导临床用药。方法：采用Etest药敏实验测定145株菌对3种抗生素的最低抑菌浓度(MIC)。结果：3种抗生素总的耐药率分别为头孢哌酮/舒巴坦17%、头孢他啶39%和环丙沙星42%。结论：Etest方法测定MIC简便精确，革兰阴性杆菌对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低。
中图分类号 R969.3
Analysis of Drug Resistance of 145 Strains of Gram-negative Bacilli in Guangzhou Area to Antibiotics by Using Method of Etest
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Xu Jinmin
(Guangzhou Institute of Respiratory Diseases,Gungzhou 510020)
Objective:To investigate the situation of resistance of Gram-negative bacilli found in Guangzhou area to three commonly used antibiotics for the purpose of providing instruction for clinical practice.Method:The minimal inbibition concentrations(MIC) of the three antibiotics to 145 strains of Gram-negative bacilli were detected by using method of Etest.Results:The overall resistant rates in group of Cefoperazone/sulbactam,Ceftazidime and Ciprofloxacin were 17%,39% and 42%,respectively.Conclusion:Etest appeared to be an easy and accurate method for the detection of MIC ,and the three strains of Gram-negative bacili manifested the lowest resistance to Cefoperazone/sulbactam.
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Key words Drugresistance;Minimal inbibition concentration (MIC);Cefoperazone/sulbactam;Ce ftazidine;Ciprofloxacin
随着广谱抗生素的广泛应用，抗生素的耐药问题日趋严重，因此监测细菌对常用抗生素的耐药性是非常必要的，我们采用Etest方法测定了145株细菌对3种抗生素的最低抑菌浓度(MIC)，并分析其耐药性供实验室和临床参与以指导合理使用抗生素。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 菌株来源 145株细菌分离自痰、尿液和血液等临床标本(1997年6月 ～12月)。
1.1.2 菌株鉴定 采用美国BD公司的Sceptor半自动微生物分析仪或法国VITEK全自动微生物分析仪将分离株鉴定到种。
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1.1.3 抗生素来源 Etest条为ABBiodisk公司产品。抗生素为环丙沙星(C IP)、头孢他啶(CAZ)和头孢哌酮/舒巴坦(CPS)。
1.1.4 药敏培养基为Biodisk公司生产的MH药敏培养基(150mm,4mm)。
1.2 方法
1.2.1 药敏实验 采用1997年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐使 用的琼脂扩散法(1)。从椭圆形的抑菌环与Etest试条交界处的刻度上读出MIC，单位为μg/ml，结果按NCCLS规定判断为敏感或耐药，同时每周用大肠杆菌ATCC25992，绿脓杆菌ATCC27853作质控监测 。
1.2.2 数据分析 数据输入WHONET4软件并分析。
2 结果
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Etest法测定145株细菌对3种抗生素的耐药率见表1。
表1 145株细菌对3种抗生素的耐药率(%) 菌种名
株数
CIP
CAZ
CPS
R
I
S
R
I
S
, 百拇医药 R
I
S
绿脓假单胞菌
40
35
2
63
35
20
45
20
15
65
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肺炎克雷伯菌
33
24
6
70
39
0
61
10
6
84
不动杆菌属
25
64
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4
32
52
4
44
20
8
72
大肠杆菌
25
62
4
34
16
, 百拇医药
4
80
8
4
88
阴沟肠杆菌
12
50
8
42
70
16
14
41
, 百拇医药
0
59
嗜麦芽窄食单胞菌
10
50
0
50
40
0
60
10
0
90
总耐药率
, 百拇医药
42
39
17
3 讨论
头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶和环丙沙星是目前治疗院内中度至重度感染常用的抗生素。145株菌对他们的耐药率分别为17%、39%和42%。
肺炎克雷伯菌和大肠杆菌是质粒介导的超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-l actamase，ESBL)的代表菌株， ESBL的特点是通常能被β-内酰胺酶酶抑制 剂抑制，头孢他啶是识别ESBL的最佳底物之一[2]。肺炎克雷伯菌对头孢他啶的耐药率为39%，大肠杆菌对头孢他啶的耐药率为20%(包括中介)，故 ESBL的发生率不低于上述值。舒巴坦作为β-内酰胺酶的抑制剂，其特点为对质粒介导的β-内酰胺酶作用最好，故头孢哌酮/舒巴坦对肺炎克雷伯菌和大肠杆菌敏感率最高。大肠杆菌对环丙沙星的耐药率高达62%，主要与近年喹诺酮类药物广泛应用引起抗菌药物介导的耐药性基因突变有关，编码 DNA旋转酶的 gyrA或gyrB基因发生点突变被认为是产生耐药性的主要原因[3]。
, http://www.100md.com
绿脓假单孢菌分离率居首位，对头孢他啶的耐药率高达35%，头孢他啶常被认为是抗绿脓假单孢菌的首选药物之一，其耐药形成可能主要与我院长期大量使用有关。
嗜麦芽窄食单孢菌对头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低为10%。另研究表明此种菌对亚胺培南天然耐受，亚胺培南的应用将敏感菌杀死有可能将此种菌选择出来。
不动杆菌属对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低为20%，此菌属的耐药是由多种机制控制的，包括细胞膜渗透力降低和多种β-内酰胺酶等机制。
阴沟肠杆菌是多重耐药菌株，其对头孢他啶的耐药率高达75%，它的耐药机理主要为产诱导型β-内酰胺酶。
细菌耐药性的形成和抗生素的应用有着极为密切的关系，抗生素可以诱导细菌产生耐药性或者将敏感菌杀灭而将耐药菌株选择出来；临床上只有严格掌握抗生素使用指征或者减少抗生素的应用才能降低其耐药的产生。
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参考文献
1 National Comittee for Clinical Laboratory Standards. Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests-Sixth Edition;M2-A6:NCCLS, 1997; 17(1)
2 Katsanis GP,Sporgo J,Ferraro MJ,et al. Detection of klebsiella pneumonia and Escherichia coli stains producing extended-spectrum β-lactame. J Clin Microbiol,1994;32:691
3 Acar JF,Goldstein FW. Trends in bacterial resistance to fluoroquinolones. Clin Infect Dis,1997;24(suppl1):67～73
(收稿：1998-01-19), 百拇医药