瓜蒌提取物对离体家兔胸主动脉条收缩的影响
作者：吴 波 王敏伟 陈思维 曹 虹 王乃利 姚新生
单位：吴 波 中国医科大学第一临床学院急诊科，沈阳 110001；王敏伟 陈思维 曹 虹 王乃利 姚新生 沈阳药科大学药学系，沈阳 110015
关键词：瓜蒌；主动脉条；戊脉安
沈阳药科大学学报990106 摘 要 以兔离体主动脉条为实验材料，观察EFT对去甲肾上腺素(NE)、氯化钾(KCl)和氯化钙(CaCl2)的剂量-效应曲线的影响及主动脉条的α受体及β受体的作用.观察了EFT对NE引起的兔主动脉条2种收缩成分的影响.结果EFT能舒张已被氯化钙、高钾和去甲肾上腺素收缩的兔主动脉条，使NE、KCl、CaCl2的剂量-效应曲线非平行右移，最大效应降低.EFT松驰血管平滑肌的作用不依赖于阻断α受体或β受体.而与戊脉安(Ver)相似，是通过阻断钙通道实现的.但它们阻断钙通道的方式不同.EFT可能无选择性阻断电位依赖性钙通道和受体操纵性钙通道，而Ver则只选择性阻断.因此，EFT的扩血管机制与其对钙通道阻断作用有关.
, 百拇医药
分类号 R961.1
Effect of Extract of Fructus Trichosanthis on the Tension of Isolated Rabbit Aortic Strips
Wu Bo,Wang Minwei,Chen Siwei,Cao Hong,Wang Naili,Yao Xinsheng
The Emergency Department of the First Hospital of China Medical University,Shenyang 110001
Abstract To evaluate the effect of extract of Fructus Trichosanthis(EFT) on aortic strip's tension,the fluctuation of the dose-response curves for NE,KCl and CaCl2 induced by EFT was observed with isolated rabbit aortic strips.Effect of EFT on α-adrenoceptor or β-adrenoceptor and influence of EFT on the 2 components of NE-evoked contraction were studied.EFT inhibited the contractions evoked by CaCl2,high K+ or NE in rabbit thoracic aortic strips.EFT shifted the dose-response curves of NE,KCl and CaCl2 to the right,and depressed their maximal responses.EFT produced neither α-adrenoceptic blocking nor β-adrenoceptic stimulating effects.EFT-induced relaxation on vascular smooth muscle resulted from its antagonistic effect to Ca2+ and the mode of this antagonism differed from that of Verapamil.EFT inhibited both the receptor operated channel and potential dependent channel.On the contrary,Ver inhibited the potential dependent channel only.The mechanism of vasodlatation of EFT is related to its antagonistic effect on calcium ion.
, 百拇医药
Key words Fructus Trichosanthis;aortic strip;Verapamil
瓜蒌提取物(extract of Fructus Trichosanthis,EFT)是从瓜蒌实中通过特殊工艺提取出来的，具有扩血管、抑制血小板聚集等多种作用.而目前有关EFT扩血管作用机制尚不清楚.本实验以兔离体主动脉条为标本，对EFT的扩血管作用机制进行探讨.
1 材料与方法
1.1 试剂
EFT(沈阳药科大学天然药物化学教研室提供)用前以5%乙醇配成不同浓度悬浮液，置放两天后取上清液进行试验；戊脉安(Ver)，天丰药厂产品；酚妥拉明(Phe)，瑞士Ciba公司产品；重酒石酸去甲肾上腺素(NE)，武汉制药股份有限公司产品；心得安(Pro)，北京制药厂产品；其余试剂均为国产AR级；Krebs-Henseleit营养液(K-H液)及其它营养液组成如下：正常K-H液(mmol/L)NaCl 119，KCl 4.7，MgSO4 1.2，KH2PO4 1.2，NaHCO3 25，Gluose 5.5.无Ca2+K-H液按正常K-H液除去CaCl2，无Ca2+高K+(40 mmol/L)液在无Ca2+液中加KCl 40 mmol/L替换同量NaCl.
, 百拇医药
1.2 动物
家兔，2.5～3.5 kg，雌雄兼用，沈阳药科大学动物室提供.
1.3 方法
将兔击头致昏，迅速剥取胸主动脉条，剪成2 mm×30 mm螺旋形肌条，悬挂于盛有20 mL K-H液(37±0.5)℃的离体器官测定仪的浴槽中，通纯氧，pH为7.2～7.4.肌条连于肌力换能器上，前负荷2 g，用台式平衡记录仪记录收缩反应，平衡2 h后，开始实验〔1〕.按累积给药法〔2〕制作兔胸主动脉条对NE(0.04～10 μmol/L)，KCl(10～80 mmol/L)和CaCl2(0.1～3 mmol/L)的剂量-效应曲线.作CaCl2的剂量-效应曲线时，先用无Ca2+的K-H液冲洗后，再平衡30 min，然后换入无Ca2+高K+(40 mmol/L)液使肌条去极化，20分钟后加入CaCl2.给EFT 15后重复作剂量-效应曲线.
, 百拇医药
2 结果
2.1 EET对NE、KCl和CaCl2剂量-效应曲线的影响
EFT使这3种激动剂的剂量-效应曲线非平行右移，最大反应降低.右移和降低的程度随EFT浓度的增加而加大.此外，观察了Ver对NE、KCl和CaCl2剂量-效应曲线的影响.结果表明，两药的作用相似(如图1～3).
图1 EFT(A)和Ver(B)对NE诱导的兔主动脉条量效曲线的影响n=10,x±s
1—Control; 2—0.039 6 g.mL-1； 3—0.079 2 g\5mL-1;4—0.158 4 g\5mL-1
, 百拇医药
图2 EFT(A)和Ver(B)对KCl诱导的兔主动脉条量效曲线的影响n=10,x±s
1—Control; 2—0.039 6 g.mL-1； 3—0.079 2 g\5mL-1;4—0.158 4 g\5mL-1
图3 EFT(A)和Ver(B)对CaCl2诱导的兔主动脉条量效曲线的影响n=10,x±s
1—Control; 2—0.039 6 g.mL-1； 3—0.079 2 g\5mL-1;4—0.158 4 g\5mL-1
, 百拇医药
2.2 EFT和Ver对NE引起的兔主动脉条2种收缩成分的影响
按文献方法进行实验〔3〕.结果显示，EFT对依NE(1.6 μmol/L)两种收缩成分均有抑制，而Ver只抑制依赖细胞内Ca2+的反应，不影响依赖细胞外Ca2+的反应(如表1).
表1 EFT和Ver对NE诱导主动脉条依细胞
内钙与外钙收缩的影响n=10,x±s 药物
依内钙收缩
依外钙收缩
对照
67±12
, 百拇医药 31±10
EFT 0.158 4 g\5mL-1
19±7
17±8
Ver 2×10-3 mol\5L-1
20±6
29±11
P<0.01 与溶剂对照比较2.3 EFT对兔主动脉条α受体或β受体的影响
用10-5 mol/L的酚妥拉明处理30分钟后和未用酚妥拉明处理的兔主动脉条对40 mmol/L KCl引起的收缩反应基本相同.在有无酚妥拉明存在的情况下，EFT对40 mmol/L KCl收缩的兔主动脉条的松驰作用无显著差异(如表2).用心得安前和用心得安(10-4 mol/L)30分钟后，EFT对NE(10 μmol/L)引起收缩的兔主动脉条的松驰作用相同.而异丙肾上腺素(Iso)对肌条的松驰作用在用心得安后显著降低〔4〕(如表2).表2 EFT对兔主动脉条α受体或β受体的影响n=10,x±s 组别
, 百拇医药
剂量/g\5mL-1
α受体
β受体
给Phe前
给Phe后
给Pro前
给Pro后
Iso
15 μmol\5L-1
1.262±0.560
2.088±0.041
, 百拇医药 EFT
0.079 2
0.298±0.044
0.296±0.065
0.510±0.560
0.520±0.145
0.158 4
0.064±0.013
0.065±0.018
0.174±0.096
0.174±0.189
P<0.05，与对照给药前比较
, http://www.100md.com
3 讨论
离体血管平滑肌实验中发现瓜蒌提取物乙醇溶解成分具有很强的扩血管作用，其水溶性成分却有抑制血管扩张的作用.故本文主要进行了其低醇溶解成分扩血管机制的探讨.高钾引起的肌条收缩不依赖于神经末梢释放递质〔5〕或α受体兴奋，而是由于跨膜Ca2+内流增加所致.EFT能使KCl引起收缩的动脉条松驰，用酚妥拉明后这一松驰作用与未用酚妥拉明相同.心得安亦不影响EFT松驰血管平滑肌的作用.这提示EFT的作用与α受体和β受体无关.EFT对NE和CaCl2剂量-效应曲线的影响与已知钙拮抗剂Ver相似，因此EFT可能也有钙拮抗作用.高钾去极化时CaCl2引起的收缩主要依赖外钙内流〔6〕；NE引起的收缩除有外钙内流，还有内钙释放〔7〕.因此推测EFT可能既抑制内钙释放，又抑制外钙内流.Ver除抑制内钙释放外，主要是选择性地抑制外钙内流.然而，NE引起的依细胞内和细胞外钙的反应均可被EFT所抑制，而Ver只抑制前者却不影响后者.目前公认，平滑肌细胞膜上对药物敏感的钙通道至少有两种.一种是受体操纵性钙通道(ROC)，另一种是电位依赖性钙通道(PDC)，分别为NE和高钾所激活〔8〕，Ver很低浓度就能抑制高钾去极化时CaCl2的剂量-效应曲线，很高浓度却不抑制NE引起的依外钙的收缩，这与Ver不易阻断ROC却能阻断PDC的报道一致.EFT可能对两种通道均抑制.80年代初对EFT研究有一些报道，观察到的扩血管作用与我们的实验结果一致，但对EFT的扩血管机制的研究则尚未进行.本实验证明了EFT的扩血管作用主要是通过阻滞钙通道实现的，与阻滞α受体和兴奋β受体无关.但由于EFT有效成分的分离工作尚在进行，故其具有钙拮抗作用的成分，但具体为何种物质有待进一步研究.
, 百拇医药
参考文献
[1] Kanamori M,Naka M,Asano M,et al.Effects of N-(6-Aminohexyl)-5-Chloro-1-Naphthalenc-Sulfonamide and other calmodulin antagonists(Calmodulin Interacting Agents) on Calcium induced contraction of rabbit aortic strips.J pharmacol Exp Ther,1981，217(2)：494～502
[2] 李汉青，陈维洲，丁光生.常唑啉对去甲肾上腺素、氯化钾和氯化钙引起兔主动脉环收缩的拮抗作用.中国药理学报，1985，6(2)：91～96
[3] 李乐，庄斐尔，赵更生.蛇床子素对家兔主动脉条的钙拮抗作用.中国药理学通报，1992，6(3)：227～231
, 百拇医药
[4] 张炜，刘国雄，黄燮南.钩滕碱对兔主动脉收缩反应的影响.中国药理学报，1987，8(5)：425～429
[5] Nayler WG,Poole-wilson PH.Calcium antagonists definition and mode of action.Basic Res Cardiol,1981,76(1):1～12
[6] Spedding M,Cavero I.Calcium antagonists,a class of drugs with a bright future.Life Sci,1984,35(5):575～587
[7] Hudgins PM,Weiss GB.Differential effects of calcium removal upon vascular smooth muscle contraction induced by norepinephrines histamine and potassium.J Pharmacol Exp Ther,1968,159(1):91～97
[8] Paoletti R,Govonis.Classification of calcium antagonists:proposal of the WHO comittee.pharmacol.Res Comun,1987，19(2)：195～204
收稿日期:1998-07-09, 百拇医药
单位：吴 波 中国医科大学第一临床学院急诊科，沈阳 110001；王敏伟 陈思维 曹 虹 王乃利 姚新生 沈阳药科大学药学系，沈阳 110015
关键词：瓜蒌；主动脉条；戊脉安
沈阳药科大学学报990106 摘 要 以兔离体主动脉条为实验材料，观察EFT对去甲肾上腺素(NE)、氯化钾(KCl)和氯化钙(CaCl2)的剂量-效应曲线的影响及主动脉条的α受体及β受体的作用.观察了EFT对NE引起的兔主动脉条2种收缩成分的影响.结果EFT能舒张已被氯化钙、高钾和去甲肾上腺素收缩的兔主动脉条，使NE、KCl、CaCl2的剂量-效应曲线非平行右移，最大效应降低.EFT松驰血管平滑肌的作用不依赖于阻断α受体或β受体.而与戊脉安(Ver)相似，是通过阻断钙通道实现的.但它们阻断钙通道的方式不同.EFT可能无选择性阻断电位依赖性钙通道和受体操纵性钙通道，而Ver则只选择性阻断.因此，EFT的扩血管机制与其对钙通道阻断作用有关.
, 百拇医药
分类号 R961.1
Effect of Extract of Fructus Trichosanthis on the Tension of Isolated Rabbit Aortic Strips
Wu Bo,Wang Minwei,Chen Siwei,Cao Hong,Wang Naili,Yao Xinsheng
The Emergency Department of the First Hospital of China Medical University,Shenyang 110001
Abstract To evaluate the effect of extract of Fructus Trichosanthis(EFT) on aortic strip's tension,the fluctuation of the dose-response curves for NE,KCl and CaCl2 induced by EFT was observed with isolated rabbit aortic strips.Effect of EFT on α-adrenoceptor or β-adrenoceptor and influence of EFT on the 2 components of NE-evoked contraction were studied.EFT inhibited the contractions evoked by CaCl2,high K+ or NE in rabbit thoracic aortic strips.EFT shifted the dose-response curves of NE,KCl and CaCl2 to the right,and depressed their maximal responses.EFT produced neither α-adrenoceptic blocking nor β-adrenoceptic stimulating effects.EFT-induced relaxation on vascular smooth muscle resulted from its antagonistic effect to Ca2+ and the mode of this antagonism differed from that of Verapamil.EFT inhibited both the receptor operated channel and potential dependent channel.On the contrary,Ver inhibited the potential dependent channel only.The mechanism of vasodlatation of EFT is related to its antagonistic effect on calcium ion.
, 百拇医药
Key words Fructus Trichosanthis;aortic strip;Verapamil
瓜蒌提取物(extract of Fructus Trichosanthis,EFT)是从瓜蒌实中通过特殊工艺提取出来的，具有扩血管、抑制血小板聚集等多种作用.而目前有关EFT扩血管作用机制尚不清楚.本实验以兔离体主动脉条为标本，对EFT的扩血管作用机制进行探讨.
1 材料与方法
1.1 试剂
EFT(沈阳药科大学天然药物化学教研室提供)用前以5%乙醇配成不同浓度悬浮液，置放两天后取上清液进行试验；戊脉安(Ver)，天丰药厂产品；酚妥拉明(Phe)，瑞士Ciba公司产品；重酒石酸去甲肾上腺素(NE)，武汉制药股份有限公司产品；心得安(Pro)，北京制药厂产品；其余试剂均为国产AR级；Krebs-Henseleit营养液(K-H液)及其它营养液组成如下：正常K-H液(mmol/L)NaCl 119，KCl 4.7，MgSO4 1.2，KH2PO4 1.2，NaHCO3 25，Gluose 5.5.无Ca2+K-H液按正常K-H液除去CaCl2，无Ca2+高K+(40 mmol/L)液在无Ca2+液中加KCl 40 mmol/L替换同量NaCl.
, 百拇医药
1.2 动物
家兔，2.5～3.5 kg，雌雄兼用，沈阳药科大学动物室提供.
1.3 方法
将兔击头致昏，迅速剥取胸主动脉条，剪成2 mm×30 mm螺旋形肌条，悬挂于盛有20 mL K-H液(37±0.5)℃的离体器官测定仪的浴槽中，通纯氧，pH为7.2～7.4.肌条连于肌力换能器上，前负荷2 g，用台式平衡记录仪记录收缩反应，平衡2 h后，开始实验〔1〕.按累积给药法〔2〕制作兔胸主动脉条对NE(0.04～10 μmol/L)，KCl(10～80 mmol/L)和CaCl2(0.1～3 mmol/L)的剂量-效应曲线.作CaCl2的剂量-效应曲线时，先用无Ca2+的K-H液冲洗后，再平衡30 min，然后换入无Ca2+高K+(40 mmol/L)液使肌条去极化，20分钟后加入CaCl2.给EFT 15后重复作剂量-效应曲线.
, 百拇医药
2 结果
2.1 EET对NE、KCl和CaCl2剂量-效应曲线的影响
EFT使这3种激动剂的剂量-效应曲线非平行右移，最大反应降低.右移和降低的程度随EFT浓度的增加而加大.此外，观察了Ver对NE、KCl和CaCl2剂量-效应曲线的影响.结果表明，两药的作用相似(如图1～3).
图1 EFT(A)和Ver(B)对NE诱导的兔主动脉条量效曲线的影响n=10,x±s
1—Control; 2—0.039 6 g.mL-1； 3—0.079 2 g\5mL-1;4—0.158 4 g\5mL-1
, 百拇医药
图2 EFT(A)和Ver(B)对KCl诱导的兔主动脉条量效曲线的影响n=10,x±s
1—Control; 2—0.039 6 g.mL-1； 3—0.079 2 g\5mL-1;4—0.158 4 g\5mL-1
图3 EFT(A)和Ver(B)对CaCl2诱导的兔主动脉条量效曲线的影响n=10,x±s
1—Control; 2—0.039 6 g.mL-1； 3—0.079 2 g\5mL-1;4—0.158 4 g\5mL-1
, 百拇医药
2.2 EFT和Ver对NE引起的兔主动脉条2种收缩成分的影响
按文献方法进行实验〔3〕.结果显示，EFT对依NE(1.6 μmol/L)两种收缩成分均有抑制，而Ver只抑制依赖细胞内Ca2+的反应，不影响依赖细胞外Ca2+的反应(如表1).
表1 EFT和Ver对NE诱导主动脉条依细胞
内钙与外钙收缩的影响n=10,x±s 药物
依内钙收缩
依外钙收缩
对照
67±12
, 百拇医药 31±10
EFT 0.158 4 g\5mL-1
19±7
17±8
Ver 2×10-3 mol\5L-1
20±6
29±11
P<0.01 与溶剂对照比较2.3 EFT对兔主动脉条α受体或β受体的影响
用10-5 mol/L的酚妥拉明处理30分钟后和未用酚妥拉明处理的兔主动脉条对40 mmol/L KCl引起的收缩反应基本相同.在有无酚妥拉明存在的情况下，EFT对40 mmol/L KCl收缩的兔主动脉条的松驰作用无显著差异(如表2).用心得安前和用心得安(10-4 mol/L)30分钟后，EFT对NE(10 μmol/L)引起收缩的兔主动脉条的松驰作用相同.而异丙肾上腺素(Iso)对肌条的松驰作用在用心得安后显著降低〔4〕(如表2).表2 EFT对兔主动脉条α受体或β受体的影响n=10,x±s 组别
, 百拇医药
剂量/g\5mL-1
α受体
β受体
给Phe前
给Phe后
给Pro前
给Pro后
Iso
15 μmol\5L-1
1.262±0.560
2.088±0.041
, 百拇医药 EFT
0.079 2
0.298±0.044
0.296±0.065
0.510±0.560
0.520±0.145
0.158 4
0.064±0.013
0.065±0.018
0.174±0.096
0.174±0.189
P<0.05，与对照给药前比较
, http://www.100md.com
3 讨论
离体血管平滑肌实验中发现瓜蒌提取物乙醇溶解成分具有很强的扩血管作用，其水溶性成分却有抑制血管扩张的作用.故本文主要进行了其低醇溶解成分扩血管机制的探讨.高钾引起的肌条收缩不依赖于神经末梢释放递质〔5〕或α受体兴奋，而是由于跨膜Ca2+内流增加所致.EFT能使KCl引起收缩的动脉条松驰，用酚妥拉明后这一松驰作用与未用酚妥拉明相同.心得安亦不影响EFT松驰血管平滑肌的作用.这提示EFT的作用与α受体和β受体无关.EFT对NE和CaCl2剂量-效应曲线的影响与已知钙拮抗剂Ver相似，因此EFT可能也有钙拮抗作用.高钾去极化时CaCl2引起的收缩主要依赖外钙内流〔6〕；NE引起的收缩除有外钙内流，还有内钙释放〔7〕.因此推测EFT可能既抑制内钙释放，又抑制外钙内流.Ver除抑制内钙释放外，主要是选择性地抑制外钙内流.然而，NE引起的依细胞内和细胞外钙的反应均可被EFT所抑制，而Ver只抑制前者却不影响后者.目前公认，平滑肌细胞膜上对药物敏感的钙通道至少有两种.一种是受体操纵性钙通道(ROC)，另一种是电位依赖性钙通道(PDC)，分别为NE和高钾所激活〔8〕，Ver很低浓度就能抑制高钾去极化时CaCl2的剂量-效应曲线，很高浓度却不抑制NE引起的依外钙的收缩，这与Ver不易阻断ROC却能阻断PDC的报道一致.EFT可能对两种通道均抑制.80年代初对EFT研究有一些报道，观察到的扩血管作用与我们的实验结果一致，但对EFT的扩血管机制的研究则尚未进行.本实验证明了EFT的扩血管作用主要是通过阻滞钙通道实现的，与阻滞α受体和兴奋β受体无关.但由于EFT有效成分的分离工作尚在进行，故其具有钙拮抗作用的成分，但具体为何种物质有待进一步研究.
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参考文献
[1] Kanamori M,Naka M,Asano M,et al.Effects of N-(6-Aminohexyl)-5-Chloro-1-Naphthalenc-Sulfonamide and other calmodulin antagonists(Calmodulin Interacting Agents) on Calcium induced contraction of rabbit aortic strips.J pharmacol Exp Ther,1981，217(2)：494～502
[2] 李汉青，陈维洲，丁光生.常唑啉对去甲肾上腺素、氯化钾和氯化钙引起兔主动脉环收缩的拮抗作用.中国药理学报，1985，6(2)：91～96
[3] 李乐，庄斐尔，赵更生.蛇床子素对家兔主动脉条的钙拮抗作用.中国药理学通报，1992，6(3)：227～231
, 百拇医药
[4] 张炜，刘国雄，黄燮南.钩滕碱对兔主动脉收缩反应的影响.中国药理学报，1987，8(5)：425～429
[5] Nayler WG,Poole-wilson PH.Calcium antagonists definition and mode of action.Basic Res Cardiol,1981,76(1):1～12
[6] Spedding M,Cavero I.Calcium antagonists,a class of drugs with a bright future.Life Sci,1984,35(5):575～587
[7] Hudgins PM,Weiss GB.Differential effects of calcium removal upon vascular smooth muscle contraction induced by norepinephrines histamine and potassium.J Pharmacol Exp Ther,1968,159(1):91～97
[8] Paoletti R,Govonis.Classification of calcium antagonists:proposal of the WHO comittee.pharmacol.Res Comun,1987，19(2)：195～204
收稿日期:1998-07-09, 百拇医药