乳腺癌nm23表达与淋巴结转移和预后的关系
作者：黄 耀1 李岩松2 谢 谦1
单位：广东医学院附属医院 1外科， 2病理科 (524001)
关键词：nm23基因；乳腺肿瘤；免疫组织化学；淋巴转移
广东医学990113 【摘要】 目的 探讨乳腺癌nm23表达与淋巴结转移和预后的关系。方法 应用免疫组织化学SP法，研究52例不同进展期乳腺癌手术标本中nm23的表达。结果 nm23高表达的乳腺癌区域淋巴结转移发生率明显低于nm23低表达者(P<0.05)；组织学分型中非浸润乳腺癌nm23的表达水平明显高于浸润癌(P<0.05)；nm23表达与原发肿瘤的大小无显著性关系；随着临床病理分期的进展，乳腺癌原发灶中nm23的表达水平逐渐下降(P<0.05)；nm23低表达患者，手术后局部复发，转移发生率较高，预后差。结论 nm23的检测对于判断乳腺癌的恶性程度，淋巴结转移趋势及预后，指导临床治疗有重要价值。
, 百拇医药
临床上判断恶性肿瘤的程度和预后，一般根据肿瘤大小，病理组织学分级、临床分期等指标，但往往存在差异。部分原发肿瘤不大，分化程度高的患者，术后不久则出现复发、转移，预后差。反之，部分肿瘤较大，分化程度低的患者，预后则较好。上述判断指标显然不足。近年来转移抑制基因nm23最令人注目，该基因的突变及低表达与肿瘤的转移有关，在肿瘤的转移过程中起着负性调控作用[1，2]。我们用免疫组织化学SP法检测乳腺癌中nm23表达，观察nm23表达与肿瘤的分类、临床分期、肿瘤大小、淋巴结转移和预后的关系。
1 资料与方法
1.1 一般资料 来自我院1996年3月～1997年12月乳腺癌患者52例，均为女性，年龄26～68岁，平均48.1岁。按WHO国际肿瘤分类标准，导管内癌7例，单纯癌12例，浸润性导管癌21例，粘液腺癌4例，湿疹样癌4例，髓样癌3例，乳头状癌1例。按国际TNM临床分期：Ⅰ期8例，Ⅱ期20例，Ⅲ期24例，本组无Ⅳ期患者。
, 百拇医药
1.2 方法 乳腺癌新鲜标本常规用10%福尔马林液固定24 h，石腊包埋，连续切片。nm23免疫组化染色，采用链霉菌毒-生物素(SP)免疫组化技术，试剂盒购自美国Maxim公司，具体操作按说明书进行。每批染色均设立阴性和阳性对照(以PBS液代替第一抗体作阴性对照)。根据免疫组化染色后，切片中癌细胞着色有无及程度分为两组：①切片中癌细胞无着色或<20%癌细胞着色为nm23低表达组；②切片中癌细胞均着色为nm23高表达组。
1.3 统计分析 采用χ2检验和t检验。
2 结果
本组52例乳腺癌，27例(51.9%)nm23为低表达，25例(48.1%)为高表达。nm23表达与乳腺癌的生物学行为的关系见表1。nm23高表达乳腺癌淋巴结转移率40.0%(10/25)，低表达组淋巴结转移率为77.8%(21/27)，两组比较P<0.05。全组共检查淋巴结327个，低表达组检查193个，有癌转移157个，占81.3%；高表达组检查134个淋巴结，有癌转移58个，占43.3%。两组比较差异有显著性意义(P<0.01)。nm23的表达与原发肿瘤的大小无显著相关性，而与临床病理分期的进展呈负相关，两组间比较P<0.05。我们共随访37例患者，随访率为71.2%，时间6～24个月。低表达21例，有局部复发或远处转移者7例，死亡4例。高表达患者16例，有复发或转移者3例，死亡1例。在随访的21例低表达患者中，行放疗、化疗等综合治疗者10例，仅1例肝转移死亡，其余未见复发和转移。
, 百拇医药
表1 nm23表达与临床病理的关系 临床病理指标
例数
nm23染色
低表达
高表达
总数
52
27
25
病理类型
非浸润癌
7
1
, 百拇医药
6
浸润癌
45
26
19
原发肿瘤
T1
9
5
4
T2
24
11
, 百拇医药
13
T3
13
7
6
T4
6
4
2
临床病理分期
Ⅰ
8
1
, 百拇医药
7
Ⅱ
20
9
11
Ⅲ
24
17
7
淋巴结转移
无
21
6
15
, 百拇医药
有
31
21
10
3 讨论
nm23基因首次是从小鼠K-1735黑色素瘤的不同转移潜力细胞系中，经差示杂交分离出来的[3]，经体细胞杂交分析，确定nm23基因位于人17号染色体长臂远端(1721，q，22)[4]。研究表明nm23基因的蛋白产物是二磷酸核苷激酶(NDPK)，此酶参与微管的集合和分解，进而影响细胞的活动、粘连和附着[5]。这可部分地解释nm23基因及蛋白产物具有抑制肿瘤转移的作用。但作用机制尚未明确。
本组使用免疫组织化学方法研究乳腺癌手术标本中nm23低表达者淋巴结转移的例数和个数均明显增加。本研究还发现，nm23低表达患者手术后复发远处转移发生率比高表达组发生率高。低表达者手术后经放疗、化疗等综合治疗后，肿瘤局部复发和远处转移减少，提示综合治疗对低表达者预防复发和远处转移有一定疗效。本研究也发现，非浸润癌中nm23的表达水平明显高于浸润癌者。nm23的表达水平与临床病理分期的进展呈负相关，与肿瘤的大小差异无显著性。
, 百拇医药
综上所述，乳腺癌患者nm23低表达提示肿瘤的恶性程度高。发生淋巴结转移、手术后复发和远处转移的可能性较大。不论哪一期，nm23低表达者，手术后应采用放疗、化疗等综合治疗。
4 参考文献
1 Stabi JA. Identification of a sencond human nm23 gane, nm23-H2. Cancer Res, 191, 51:45
2 Gilles Am. Nucleoside diphosphate Kinase from human arthrocytes:strutural charcterization of the two polypeptide chains responsible for heterogenerty of the hexumeric euzyme. J Bial chem, 1991, 266:8784
, 百拇医药
3 Steeg PS. Evidence for a novelgane assonciated with low tumor metastatic potential. J Natl Cancer Iast, 1988, 80:200
4 Leone A. Somatic allelic deletion of nm23 in Human Cancer. Cancer Res, 1991, 51(9):2490
5 Nickerson JA, Wells WW. The microtubule-associated nucleoside diphosphate Kinase. J Biol Chem, 1984, 259:11297, http://www.100md.com(黄 耀1 李岩松2 谢 谦1)
单位：广东医学院附属医院 1外科， 2病理科 (524001)
关键词：nm23基因；乳腺肿瘤；免疫组织化学；淋巴转移
广东医学990113 【摘要】 目的 探讨乳腺癌nm23表达与淋巴结转移和预后的关系。方法 应用免疫组织化学SP法，研究52例不同进展期乳腺癌手术标本中nm23的表达。结果 nm23高表达的乳腺癌区域淋巴结转移发生率明显低于nm23低表达者(P<0.05)；组织学分型中非浸润乳腺癌nm23的表达水平明显高于浸润癌(P<0.05)；nm23表达与原发肿瘤的大小无显著性关系；随着临床病理分期的进展，乳腺癌原发灶中nm23的表达水平逐渐下降(P<0.05)；nm23低表达患者，手术后局部复发，转移发生率较高，预后差。结论 nm23的检测对于判断乳腺癌的恶性程度，淋巴结转移趋势及预后，指导临床治疗有重要价值。
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临床上判断恶性肿瘤的程度和预后，一般根据肿瘤大小，病理组织学分级、临床分期等指标，但往往存在差异。部分原发肿瘤不大，分化程度高的患者，术后不久则出现复发、转移，预后差。反之，部分肿瘤较大，分化程度低的患者，预后则较好。上述判断指标显然不足。近年来转移抑制基因nm23最令人注目，该基因的突变及低表达与肿瘤的转移有关，在肿瘤的转移过程中起着负性调控作用[1，2]。我们用免疫组织化学SP法检测乳腺癌中nm23表达，观察nm23表达与肿瘤的分类、临床分期、肿瘤大小、淋巴结转移和预后的关系。
1 资料与方法
1.1 一般资料 来自我院1996年3月～1997年12月乳腺癌患者52例，均为女性，年龄26～68岁，平均48.1岁。按WHO国际肿瘤分类标准，导管内癌7例，单纯癌12例，浸润性导管癌21例，粘液腺癌4例，湿疹样癌4例，髓样癌3例，乳头状癌1例。按国际TNM临床分期：Ⅰ期8例，Ⅱ期20例，Ⅲ期24例，本组无Ⅳ期患者。
, 百拇医药
1.2 方法 乳腺癌新鲜标本常规用10%福尔马林液固定24 h，石腊包埋，连续切片。nm23免疫组化染色，采用链霉菌毒-生物素(SP)免疫组化技术，试剂盒购自美国Maxim公司，具体操作按说明书进行。每批染色均设立阴性和阳性对照(以PBS液代替第一抗体作阴性对照)。根据免疫组化染色后，切片中癌细胞着色有无及程度分为两组：①切片中癌细胞无着色或<20%癌细胞着色为nm23低表达组；②切片中癌细胞均着色为nm23高表达组。
1.3 统计分析 采用χ2检验和t检验。
2 结果
本组52例乳腺癌，27例(51.9%)nm23为低表达，25例(48.1%)为高表达。nm23表达与乳腺癌的生物学行为的关系见表1。nm23高表达乳腺癌淋巴结转移率40.0%(10/25)，低表达组淋巴结转移率为77.8%(21/27)，两组比较P<0.05。全组共检查淋巴结327个，低表达组检查193个，有癌转移157个，占81.3%；高表达组检查134个淋巴结，有癌转移58个，占43.3%。两组比较差异有显著性意义(P<0.01)。nm23的表达与原发肿瘤的大小无显著相关性，而与临床病理分期的进展呈负相关，两组间比较P<0.05。我们共随访37例患者，随访率为71.2%，时间6～24个月。低表达21例，有局部复发或远处转移者7例，死亡4例。高表达患者16例，有复发或转移者3例，死亡1例。在随访的21例低表达患者中，行放疗、化疗等综合治疗者10例，仅1例肝转移死亡，其余未见复发和转移。
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表1 nm23表达与临床病理的关系 临床病理指标
例数
nm23染色
低表达
高表达
总数
52
27
25
病理类型
非浸润癌
7
1
, 百拇医药
6
浸润癌
45
26
19
原发肿瘤
T1
9
5
4
T2
24
11
, 百拇医药
13
T3
13
7
6
T4
6
4
2
临床病理分期
Ⅰ
8
1
, 百拇医药
7
Ⅱ
20
9
11
Ⅲ
24
17
7
淋巴结转移
无
21
6
15
, 百拇医药
有
31
21
10
3 讨论
nm23基因首次是从小鼠K-1735黑色素瘤的不同转移潜力细胞系中，经差示杂交分离出来的[3]，经体细胞杂交分析，确定nm23基因位于人17号染色体长臂远端(1721，q，22)[4]。研究表明nm23基因的蛋白产物是二磷酸核苷激酶(NDPK)，此酶参与微管的集合和分解，进而影响细胞的活动、粘连和附着[5]。这可部分地解释nm23基因及蛋白产物具有抑制肿瘤转移的作用。但作用机制尚未明确。
本组使用免疫组织化学方法研究乳腺癌手术标本中nm23低表达者淋巴结转移的例数和个数均明显增加。本研究还发现，nm23低表达患者手术后复发远处转移发生率比高表达组发生率高。低表达者手术后经放疗、化疗等综合治疗后，肿瘤局部复发和远处转移减少，提示综合治疗对低表达者预防复发和远处转移有一定疗效。本研究也发现，非浸润癌中nm23的表达水平明显高于浸润癌者。nm23的表达水平与临床病理分期的进展呈负相关，与肿瘤的大小差异无显著性。
, 百拇医药
综上所述，乳腺癌患者nm23低表达提示肿瘤的恶性程度高。发生淋巴结转移、手术后复发和远处转移的可能性较大。不论哪一期，nm23低表达者，手术后应采用放疗、化疗等综合治疗。
4 参考文献
1 Stabi JA. Identification of a sencond human nm23 gane, nm23-H2. Cancer Res, 191, 51:45
2 Gilles Am. Nucleoside diphosphate Kinase from human arthrocytes:strutural charcterization of the two polypeptide chains responsible for heterogenerty of the hexumeric euzyme. J Bial chem, 1991, 266:8784
, 百拇医药
3 Steeg PS. Evidence for a novelgane assonciated with low tumor metastatic potential. J Natl Cancer Iast, 1988, 80:200
4 Leone A. Somatic allelic deletion of nm23 in Human Cancer. Cancer Res, 1991, 51(9):2490
5 Nickerson JA, Wells WW. The microtubule-associated nucleoside diphosphate Kinase. J Biol Chem, 1984, 259:11297, http://www.100md.com(黄 耀1 李岩松2 谢 谦1)