白细胞直方图中间型细胞异常情况浅析
作者：林军 黄宇烽 孟泽
单位：南京军区南京总医院检验科，南京210002
关键词：白细胞直方图；中间型细胞；目测分类；假阳性；假阴性
白细胞直方图中间型细胞异常情况浅析 目前，自动血细胞计数已普遍使用于各医院实验室，尤其是三分类的血球计数仪更为普遍。这种计数仪的原理是电阻抗法，此原理是基于细胞在测试系统中产生的脉冲大小，与仪器内设定的阈值比较而得出的数据。这些仪器不仅能检测更多的血细胞学实验结果，而且也还能提供相应的白细胞直方图，以便对细胞进行分类，但由于各型仪器内设置的参数不同，使用试剂不同，因而直方图的图形也有差异，图形所示异常的情况也不尽相同。本文就Coulter JT-IR型血细胞分析仪和Medonic CA 610型血细胞分析仪所示直方图的中间细胞异常结果与目测分类结果进行了比较分析。
1 材料与方法
, http://www.100md.com
1.1 材料
1.1.1 美国Coulter公司产Coulter JT-IR型血细胞分析仪；使用Coulter 公司原装配套试剂，稀释液：ISOTON Ⅲ diluent,溶血剂：Lyse S Ⅲ diff。
1.1.2 瑞典Medonic 公司CA 610型血细胞分析仪。试剂由荷兰BAKER公司生产，等渗稀释液：Diluent 610,溶血剂Cymet 610。
1.1.3 标本 用EDTA.K2抗凝静脉血，其含量为1.5 mg/ml全血。将EDTA.K2配成150 g/L的溶液，预先制备具塞塑料抗凝管，于每日清晨抽静脉血0.5 ml混匀抗凝，室温放置，并于0.5～5.0 h内测定[1]。
, 百拇医药
1.1.4 将在Coulter JT-IR分析仪上测得白细胞直方图中MO(单个核细胞,即中间细胞)异常的23份标本用Medonic CA 610进行测定,后者中间型称MID。并同时目测分类,每份标本分片三次取均值。
2 结果
2.1 将23份Coulter JT-IR分析仪所示直方图中MO异常标本用CA 610分析仪测定，并用目测分类结果见表1。
表1 23例标本两台仪器测定和目测分类结果
直方图情况
例数
目测分类
正常例数
目测分类异常例数
, 百拇医药
嗜酸↑
单核↑
异淋↑
MO MID均异常
7
2
4
1
1
MO异常MID正常
16
6
8
, 百拇医药 2
3
注：部分标本有两种以上异常情况
2.2 典型例图分析
2.2.1 将目测分类所得嗜酸细胞增高的标本在两台分析仪上测得白细胞直方图如图1A、1B。目测分类结果：淋巴细胞20%，嗜酸细胞35%，单核细胞1%，中性粒细胞44%。
图1 (1A、1B)嗜酸细胞增高直方图
2.2.2 将目测分类所得异型淋巴细胞和嗜酸细胞同时增高的标本在两台分析仪上测得白细胞直方图如图2A、2B。分类结果：淋巴40%，异淋9%，嗜酸11%，单核6%，中性34%。
, 百拇医药
图2 (2A、2B)异型淋巴细胞和嗜酸细胞同时增高直方图
2.2.3 目测分类所得单核细胞增高且嗜酸细胞也增高的标本在两台分析仪上测得直方图见图3A、3B。分类结果：淋巴48%，单核10%，嗜酸8%，中性34%。
图3 (3A、3B)单核细胞和嗜酸细胞同时增高直方图
2.2.4 将目测分类正常而Coulter JT-IR直方图MO异常的标本用CA 610测定，所得直方图见图4A、4B。分类结果：淋巴29%，单核2%，嗜酸1%，中性68%。
, 百拇医药
图4 (4A、4B)目测分类正常直方图
2.3 随机抽检Coulter JT-IR分析仪测定的1 000份住院病人(包括血液病人)血常规，将白细胞直方图MO区提示有各种异常情况的标本进行复检。其Coulter提示异常的阳性率为37.4%，而经过目测分类镜检所得阳性率为8.2%。
3 讨论
3.1 Coulter JT-IR 型血细胞计数仪和CA 610分析仪均为三分类仪器，即将血细胞分成三大类型。Coulter JT-IR 分析仪采用库尔特直方图分类法，将白细胞分成淋巴细胞群(LY)，大单个核细胞群(MO)及粒细胞群(GR)。其中LY群在35～90 fl，包括成熟淋巴细胞，异型淋巴细胞和不典型淋巴细胞。MO群在90～160 fl，可包括单核细胞，原母细胞，早、中幼粒细胞，幼稚淋巴细胞，幼稚单核细胞和浆细胞。而GR群在160～450 fl，可包括晚幼粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞，带状和分叶状中性粒细胞。
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根据我们对多例MO区提示各种异常情况或MO结果提示过高(H)者进行目测分类对比，发现单核细胞及异淋在MO区域，即90～160 fl，与丛玉隆的论述相符[2]。而嗜酸细胞大多数也在MO区，这与陈军浩的报道一致[3]。
3.2 Medonic CA 610型血细胞分析仪对白细胞的分类，是通过数学曲线拟合方法产生三项分类。CA 610全自动血细胞分析仪使用手册介绍用真正的浮动介标法，而非固定点法，称这三部分分别为LYMF(淋巴)，MID(中值)和GRAN(粒细胞)。MID型细胞是一些不同类型细胞的混合物，MID部分与LYMF和GRAN区的曲线重叠区段太大，则CA 610将自动切换到两项分类方式。参数MID将显示为空白且打上ABN标记，以提示异常。
由于血细胞计数仪对每个细胞检测时显示的脉冲大小除与细胞大小有关外(如粒细胞最大，淋巴细胞最小)，还与溶血剂的种类、稀释液的渗透压、离子强度、电导率、仪器出厂时仪器内固定的孔电流和脉冲增益等诸多因素有关。所Coulter JT-IR分析仪与CA 610分析仪两者对同一份标本所得白细胞直方图有很大差异。如图1、图2、图3所示，在Coulter上的白细胞直方图中提示MO区域异常(嗜酸、单核或异淋异常)，目测分类也证明有异常情况，而CA 610上MID区却正常；图4所示，当MO异常时，目测分类正常，MID也正常。
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我们将23份Coulter JT-IR分析仪所测MO区异常，且根据以往经验判定可能异常的标本用CA 610进行测定，并同时目测分类，其结果显示：经对直方图分析认为，MO异常的23份Coulter MO区异常者，目测分类有15例异常，占65.2%，而CA 610异常者只有7例，占30.4%。说明CA 610所反映MID异常的阳性率偏低，假阴性过高；而Coulter JT-IR型分析仪的阳性率则太高。这正如我们分析所得结果证实的：Coulter JT-IR提示MO区异常的阳性率(包括真阳性和假阳性)约为37.4%，而经目测分类镜检的阳性率仅为8.2%。
鉴于以上情况，当测定结果出来后，不但要严格检查分析白细胞直方图及阅读仪器提示，对有提示MO或MID异常的标本进行复片，还要善于查出假性增高和假阴性结果并予以纠正，及时准确地为临床提供可靠的诊治依据。
参考文献
1 Coulter Universal Data Terminal Instruction Manual 4235641-D B-3.
2 丛玉隆，王淑娟主编.今日临床检验学.北京：中国科学技术出版社，1997.52～53
3 陈军浩，顾可梁.白细胞直方图观察嗜酸性粒细胞增多的探讨.临床检验杂志，1997，15(5)∶304～305
(1998-06-18收稿，1998-10-31修回), 百拇医药
单位：南京军区南京总医院检验科，南京210002
关键词：白细胞直方图；中间型细胞；目测分类；假阳性；假阴性
白细胞直方图中间型细胞异常情况浅析 目前，自动血细胞计数已普遍使用于各医院实验室，尤其是三分类的血球计数仪更为普遍。这种计数仪的原理是电阻抗法，此原理是基于细胞在测试系统中产生的脉冲大小，与仪器内设定的阈值比较而得出的数据。这些仪器不仅能检测更多的血细胞学实验结果，而且也还能提供相应的白细胞直方图，以便对细胞进行分类，但由于各型仪器内设置的参数不同，使用试剂不同，因而直方图的图形也有差异，图形所示异常的情况也不尽相同。本文就Coulter JT-IR型血细胞分析仪和Medonic CA 610型血细胞分析仪所示直方图的中间细胞异常结果与目测分类结果进行了比较分析。
1 材料与方法
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1.1 材料
1.1.1 美国Coulter公司产Coulter JT-IR型血细胞分析仪；使用Coulter 公司原装配套试剂，稀释液：ISOTON Ⅲ diluent,溶血剂：Lyse S Ⅲ diff。
1.1.2 瑞典Medonic 公司CA 610型血细胞分析仪。试剂由荷兰BAKER公司生产，等渗稀释液：Diluent 610,溶血剂Cymet 610。
1.1.3 标本 用EDTA.K2抗凝静脉血，其含量为1.5 mg/ml全血。将EDTA.K2配成150 g/L的溶液，预先制备具塞塑料抗凝管，于每日清晨抽静脉血0.5 ml混匀抗凝，室温放置，并于0.5～5.0 h内测定[1]。
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1.1.4 将在Coulter JT-IR分析仪上测得白细胞直方图中MO(单个核细胞,即中间细胞)异常的23份标本用Medonic CA 610进行测定,后者中间型称MID。并同时目测分类,每份标本分片三次取均值。
2 结果
2.1 将23份Coulter JT-IR分析仪所示直方图中MO异常标本用CA 610分析仪测定，并用目测分类结果见表1。
表1 23例标本两台仪器测定和目测分类结果
直方图情况
例数
目测分类
正常例数
目测分类异常例数
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嗜酸↑
单核↑
异淋↑
MO MID均异常
7
2
4
1
1
MO异常MID正常
16
6
8
, 百拇医药 2
3
注：部分标本有两种以上异常情况
2.2 典型例图分析
2.2.1 将目测分类所得嗜酸细胞增高的标本在两台分析仪上测得白细胞直方图如图1A、1B。目测分类结果：淋巴细胞20%，嗜酸细胞35%，单核细胞1%，中性粒细胞44%。
图1 (1A、1B)嗜酸细胞增高直方图
2.2.2 将目测分类所得异型淋巴细胞和嗜酸细胞同时增高的标本在两台分析仪上测得白细胞直方图如图2A、2B。分类结果：淋巴40%，异淋9%，嗜酸11%，单核6%，中性34%。
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图2 (2A、2B)异型淋巴细胞和嗜酸细胞同时增高直方图
2.2.3 目测分类所得单核细胞增高且嗜酸细胞也增高的标本在两台分析仪上测得直方图见图3A、3B。分类结果：淋巴48%，单核10%，嗜酸8%，中性34%。
图3 (3A、3B)单核细胞和嗜酸细胞同时增高直方图
2.2.4 将目测分类正常而Coulter JT-IR直方图MO异常的标本用CA 610测定，所得直方图见图4A、4B。分类结果：淋巴29%，单核2%，嗜酸1%，中性68%。
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图4 (4A、4B)目测分类正常直方图
2.3 随机抽检Coulter JT-IR分析仪测定的1 000份住院病人(包括血液病人)血常规，将白细胞直方图MO区提示有各种异常情况的标本进行复检。其Coulter提示异常的阳性率为37.4%，而经过目测分类镜检所得阳性率为8.2%。
3 讨论
3.1 Coulter JT-IR 型血细胞计数仪和CA 610分析仪均为三分类仪器，即将血细胞分成三大类型。Coulter JT-IR 分析仪采用库尔特直方图分类法，将白细胞分成淋巴细胞群(LY)，大单个核细胞群(MO)及粒细胞群(GR)。其中LY群在35～90 fl，包括成熟淋巴细胞，异型淋巴细胞和不典型淋巴细胞。MO群在90～160 fl，可包括单核细胞，原母细胞，早、中幼粒细胞，幼稚淋巴细胞，幼稚单核细胞和浆细胞。而GR群在160～450 fl，可包括晚幼粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞，带状和分叶状中性粒细胞。
, http://www.100md.com
根据我们对多例MO区提示各种异常情况或MO结果提示过高(H)者进行目测分类对比，发现单核细胞及异淋在MO区域，即90～160 fl，与丛玉隆的论述相符[2]。而嗜酸细胞大多数也在MO区，这与陈军浩的报道一致[3]。
3.2 Medonic CA 610型血细胞分析仪对白细胞的分类，是通过数学曲线拟合方法产生三项分类。CA 610全自动血细胞分析仪使用手册介绍用真正的浮动介标法，而非固定点法，称这三部分分别为LYMF(淋巴)，MID(中值)和GRAN(粒细胞)。MID型细胞是一些不同类型细胞的混合物，MID部分与LYMF和GRAN区的曲线重叠区段太大，则CA 610将自动切换到两项分类方式。参数MID将显示为空白且打上ABN标记，以提示异常。
由于血细胞计数仪对每个细胞检测时显示的脉冲大小除与细胞大小有关外(如粒细胞最大，淋巴细胞最小)，还与溶血剂的种类、稀释液的渗透压、离子强度、电导率、仪器出厂时仪器内固定的孔电流和脉冲增益等诸多因素有关。所Coulter JT-IR分析仪与CA 610分析仪两者对同一份标本所得白细胞直方图有很大差异。如图1、图2、图3所示，在Coulter上的白细胞直方图中提示MO区域异常(嗜酸、单核或异淋异常)，目测分类也证明有异常情况，而CA 610上MID区却正常；图4所示，当MO异常时，目测分类正常，MID也正常。
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我们将23份Coulter JT-IR分析仪所测MO区异常，且根据以往经验判定可能异常的标本用CA 610进行测定，并同时目测分类，其结果显示：经对直方图分析认为，MO异常的23份Coulter MO区异常者，目测分类有15例异常，占65.2%，而CA 610异常者只有7例，占30.4%。说明CA 610所反映MID异常的阳性率偏低，假阴性过高；而Coulter JT-IR型分析仪的阳性率则太高。这正如我们分析所得结果证实的：Coulter JT-IR提示MO区异常的阳性率(包括真阳性和假阳性)约为37.4%，而经目测分类镜检的阳性率仅为8.2%。
鉴于以上情况，当测定结果出来后，不但要严格检查分析白细胞直方图及阅读仪器提示，对有提示MO或MID异常的标本进行复片，还要善于查出假性增高和假阴性结果并予以纠正，及时准确地为临床提供可靠的诊治依据。
参考文献
1 Coulter Universal Data Terminal Instruction Manual 4235641-D B-3.
2 丛玉隆，王淑娟主编.今日临床检验学.北京：中国科学技术出版社，1997.52～53
3 陈军浩，顾可梁.白细胞直方图观察嗜酸性粒细胞增多的探讨.临床检验杂志，1997，15(5)∶304～305
(1998-06-18收稿，1998-10-31修回), 百拇医药