慢性乙型肝炎患者中庚型肝炎病毒检测
作者：卢桥生 张明霞 梁炽森 骆抗先
单位：510515 广州,第一军医大学南方医院
关键词：肝炎病毒，庚型；肝炎病毒，乙型；交叉感染
中华传染病杂志990106 【摘要】 目的 了解慢性乙型肝炎中庚型肝炎病毒(HGV)的感染率及其对病变程度和HBV复制的影响。方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测65例经肝活检证实的慢性乙型肝炎患者血清中HGV RNA。结果 有8例(12.3%)慢性乙型肝炎患者合并HGV感染，轻度、中度和重度患者中的HGV检出率统计学处理差异无显著性，HGV混合感染与其临床表现无相关性，HGV阳性组与阴性组患者的肝功能改变相近。HBeAg阳性组和HBeAg阴性组患者的HGV检出率亦相当。结论在慢性乙型肝炎患者中，HGV混合感染对慢性乙型肝炎的病变程度及病毒复制无明显影响。
Hepatitis G virus infection in the patients with chronic hepatitis B
, 百拇医药
LU Qiaosheng, ZHANG Mingxia, LIANG Zhisen, et al.
Department of Infectious Diseases, Nanfang Hospital, The First Military Me-dical University, Guangzhou 510515
【Abstract】 Objective To detect the prevalence of hepatitis G virus(HGV) in the patients with chronic hepatitis B, and its influence to the severity of liver disease, clinical presentation, as well as hepatitis B virus(HBV) replication. Methods HGV RNA was detected by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) in 65 biopsy confirmed consecutive chronic hepatitis B patients.Results HGV RNA was found in 8 of the 65 (12.3%) patients. There was no statistic difference in HGV infection between mild, middle and severe chronic hepatitis patients. Neither ages or sex of the patients nor serum liver function tests differed between HGV positive and HGV negative groups. There was no statistic difference in HGV prevalence between HBeAg positive and HBeAg negative groups.Conclusion The results showed that HGV infection does not lead to a significant change in clinical manefestation, severity of liver disease, or HBV replication.
, 百拇医药
【Key words】 Hepatitis G virus Hepatitis B virus Cross infection
庚型肝炎病毒(HGV)[1-3]与丙型肝炎病毒(HCV)同属黄病毒科，主要经血液途径传播。HGV在自然人群中有较高的感染率，在健康献血员中可高达0.5%～3%。然而单纯庚型肝炎的病例并不多，在非甲～戊型肝炎患者中HGV的检出率只占10%～30%[3-5]，而HGV与乙型肝炎病毒(HBV)、HCV混合感染的病例不少，因此可以通过研究丙型肝炎或乙型肝炎中的HGV混合感染来为研究庚型肝炎提供方便。为查明HGV在我国各类慢性乙型肝炎中的存在状况，HGV混合感染或重叠感染对于HBV的复制、致病性和对慢性乙型肝炎临床表现的影响，我们用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测了各类型慢性乙型肝炎患者65例，现将结果报告如下。
材料和方法
, http://www.100md.com
一、病例来源
65例均为我科1995～1996年住院的慢性乙型肝炎患者，男性58例，女性7例，年龄13～63岁，其中慢性肝炎轻度25例，中度20例，重度20例，除个别慢性肝炎重型患者在病后因治疗曾输过血外，其他患者均无明确输血史。全部患者的诊断均经肝活检确定，诊断标准符合1995年第五届全国传染病与寄生虫病学术会议修订的方案。
二、RT-PCR[6]
参照本室HCV RNA检测的RT-PCR修订。根据国外报道的HGV序列(Genebank Accession No.U44402)设计5′非编码区序列如下：
5′NCR-1 5′GTGGTGGATGGGTGATGACA
5′NCR-2 5′AGACATTGAAGGGCGACGTG
, 百拇医药
5′NCR-3 5′GTAAATCCCGGTCACCTTGGTAG
5′NCR-4 5′CGTGGGCGTCGTTTGCCCAG
三、肝炎病毒标志的血清学诊断
HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc、抗-HCV均用试剂盒检测(广东省中山生物工程公司或天津普生科技有限公司)，严格按说明书操作。
四、统计学处理
采用t检验，t′检验和χ2检验。
结果
一、不同病理改变的慢性乙型肝炎患者中HGV的检出率
, 百拇医药 65例慢性乙型肝炎患者中，病理诊断为慢性肝炎轻度、中度和重度者分别为25例、20例和20例，其HGV RNA的检出率见表1。经χ2检验，各组间HGV RNA检出率统计学处理差异无显著性。
表1 慢性肝炎患者血清中的HGV RNA检测结果 病理诊断
例数
HGV RNA阳性
轻度
25
3(12.0%)
中度
20
3(15.0%)
, http://www.100md.com
重度
20
2(10.0%)
合计
65
8(12.3%)
注：各组之间χ2检验P均>0.05。
二、HGV感染与慢性乙型肝炎患者临床表现的关系
65例慢性乙型肝炎患者的临床表现与是否合并HGV感染的关系见表2。两组患者年龄、性别无统计学差异，ALT、AST、γ-GT和ALP改变也无明显区别，但HGV阳性组的血清胆红素要明显高于HGV阴性组。
表2 慢性乙型肝炎患者中HGV感染及临床表现比较(
,U/L) 组别
, http://www.100md.com
ALT
AST
γ-GT
ALP
TBIL
HGV RNA(+)
374.3±191.8
279.5±269.2
61.6±24.6
116.5±82.2
73.3±40.8
HGV RNA(-)
, http://www.100md.com
241.0±203.1
145.6±152.2
61.6±31.9
80.1±44.5
36.4±45.5*
三、HGV对HBV复制的影响
65例患者中血清乙型肝炎病毒标志呈HBsAg阳性、HBeAg阳性者30例，HBsAg阳性、HBeAg阴性和/或抗-HBe阳性者35例，两组的HGV RNA检出例数均为4例，统计学处理，差异无显著性。
讨论
HGV呈世界性分布，可以感染多种人群。但单纯庚型肝炎的病例并不多，为研究工作带来了较大的困难。然而乙型肝炎、丙型肝炎和庚型肝炎都以肠道外途径传播为主，因此混合感染的现象在临床上十分常见。研究HGV与HBV或HCV混合感染的病例可以为研究HGV和庚型肝炎提供方便。
, http://www.100md.com
本研究在慢性乙型肝炎患者中检出HGV感染者8例(12.3%)，和国外报道的结果相似[4]。
在慢性乙型肝炎轻度、中度和重度各组间HGV RNA的检出率相当，各型间无统计学差异。除个别慢性肝炎重型病例患病后曾因治疗需要而输血外，所有慢性肝炎轻度和中度以及大部分的慢性肝炎重度病例在患病前后并未输血，因此也可除外因患病后接受输血而感染HGV。提示HGV感染对慢性乙型肝炎的病变程度无明显影响。这个结果和Marrone等[7]的观察一致，作者观察的104例慢性乙型肝炎患者中18例(17%)同时为HGV RNA阳性，两组患者在临床表现、肝功能改变和肝组织表现方面没有差异，用bDNA法分别检测两组患者的血清HBV DNA含量也没有统计学差异。
一般来说两种或两种以上的病毒感染可能导致某种程度的干扰或抑制。如在HBV感染者中合并HCV感染时，HBV DNA的滴度将降低[8]；同样在合并HDV感染时HGV DNA的含量也会降低[9]。本研究显示HGV的检出率在慢性乙型肝炎患者HBeAg阳性组和阴性组间无统计学差异。由于HBeAg阳性一般代表HBV高水平复制，而HBeAg阴性一般代表HBV低水平复制，这个结果似可提示HGV对HBV的复制既无抑制作用，也未增强HBV的复制。
, 百拇医药
结果提示：在我国慢性乙型肝炎患者中，HGV是一种常见的混合感染病原体。HGV感染对慢性乙型肝炎的病理变化和临床表现无明显影响，HGV的存在似不影响HBV的复制。
本课题获广东省自然科学基金(96344)和全军医药卫生青年基金资助(96Q0501)
参考文献
1 Simons JN, Leary TP, Dawson GJ, et al. Isolation of novel virus-like sequences associated with human hepatitis. Nature Medicine, 1995,1:564-569.
2 Leary TP, Muerhoff AS, Simons JN, et al. Sequence and geno-mic organization of GBV-C: A novel member of the flaviviridae associated with human non-A-E hepatitis. J Med Virol, 1996,48:60-67.
, http://www.100md.com
3 Linnen J, Wages JJ, Zhang-Keck ZY, et al. Molecular cloning and disease association of hepatitis G virus: A transfusion-transmissible agent. Science, 1996,271:505-508.
4 Nakatsuji Y, Wait-Kuo SJ, Tanaka E, et al. Prevalence and disease association of hepatitis G virus infection in Japan. J Virol Hepat, 1996, 3:307-316.
5 Dawson GJ, Schlauder GG, Pilot-Matias TJ, et al. Prevalence studies of GB virus-C using reversr-transcriptase-polymerase chain reaction, J Med Virol, 1996,50:97-103.
, 百拇医药
6 卢桥生，张明霞，冯筱榕，等.庚型肝炎病毒的RT-PCR法检测.第一军医大学学报，1996，16：69-70.
7 Marrone A, Shih JWK, Nakatsuji Y, et al. Hepatitis G virus (HGV) among patients with chronic hepatitis B. Hepatology, 1996,24:225A.
8 Fong TL, Di-Bisceglie AM, Waggoner JG, et al. The significance of antibody to hepatitis C virus in patients with chronic hepatitis B. Hepatology, 1991,14:64-67.
9 Liaw YF, Chien RN, Chen TJ, et al. Concurrent hepatitis C virus and hepatitis delta virus superinfection in patients with chronic hepatitis B virus infection. J Med Virol, 1992,37:294-297.
(收稿：1997-11-24 修回：1998-05-04), 百拇医药
单位：510515 广州,第一军医大学南方医院
关键词：肝炎病毒，庚型；肝炎病毒，乙型；交叉感染
中华传染病杂志990106 【摘要】 目的 了解慢性乙型肝炎中庚型肝炎病毒(HGV)的感染率及其对病变程度和HBV复制的影响。方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测65例经肝活检证实的慢性乙型肝炎患者血清中HGV RNA。结果 有8例(12.3%)慢性乙型肝炎患者合并HGV感染，轻度、中度和重度患者中的HGV检出率统计学处理差异无显著性，HGV混合感染与其临床表现无相关性，HGV阳性组与阴性组患者的肝功能改变相近。HBeAg阳性组和HBeAg阴性组患者的HGV检出率亦相当。结论在慢性乙型肝炎患者中，HGV混合感染对慢性乙型肝炎的病变程度及病毒复制无明显影响。
Hepatitis G virus infection in the patients with chronic hepatitis B
, 百拇医药
LU Qiaosheng, ZHANG Mingxia, LIANG Zhisen, et al.
Department of Infectious Diseases, Nanfang Hospital, The First Military Me-dical University, Guangzhou 510515
【Abstract】 Objective To detect the prevalence of hepatitis G virus(HGV) in the patients with chronic hepatitis B, and its influence to the severity of liver disease, clinical presentation, as well as hepatitis B virus(HBV) replication. Methods HGV RNA was detected by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) in 65 biopsy confirmed consecutive chronic hepatitis B patients.Results HGV RNA was found in 8 of the 65 (12.3%) patients. There was no statistic difference in HGV infection between mild, middle and severe chronic hepatitis patients. Neither ages or sex of the patients nor serum liver function tests differed between HGV positive and HGV negative groups. There was no statistic difference in HGV prevalence between HBeAg positive and HBeAg negative groups.Conclusion The results showed that HGV infection does not lead to a significant change in clinical manefestation, severity of liver disease, or HBV replication.
, 百拇医药
【Key words】 Hepatitis G virus Hepatitis B virus Cross infection
庚型肝炎病毒(HGV)[1-3]与丙型肝炎病毒(HCV)同属黄病毒科，主要经血液途径传播。HGV在自然人群中有较高的感染率，在健康献血员中可高达0.5%～3%。然而单纯庚型肝炎的病例并不多，在非甲～戊型肝炎患者中HGV的检出率只占10%～30%[3-5]，而HGV与乙型肝炎病毒(HBV)、HCV混合感染的病例不少，因此可以通过研究丙型肝炎或乙型肝炎中的HGV混合感染来为研究庚型肝炎提供方便。为查明HGV在我国各类慢性乙型肝炎中的存在状况，HGV混合感染或重叠感染对于HBV的复制、致病性和对慢性乙型肝炎临床表现的影响，我们用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测了各类型慢性乙型肝炎患者65例，现将结果报告如下。
材料和方法
, http://www.100md.com
一、病例来源
65例均为我科1995～1996年住院的慢性乙型肝炎患者，男性58例，女性7例，年龄13～63岁，其中慢性肝炎轻度25例，中度20例，重度20例，除个别慢性肝炎重型患者在病后因治疗曾输过血外，其他患者均无明确输血史。全部患者的诊断均经肝活检确定，诊断标准符合1995年第五届全国传染病与寄生虫病学术会议修订的方案。
二、RT-PCR[6]
参照本室HCV RNA检测的RT-PCR修订。根据国外报道的HGV序列(Genebank Accession No.U44402)设计5′非编码区序列如下：
5′NCR-1 5′GTGGTGGATGGGTGATGACA
5′NCR-2 5′AGACATTGAAGGGCGACGTG
, 百拇医药
5′NCR-3 5′GTAAATCCCGGTCACCTTGGTAG
5′NCR-4 5′CGTGGGCGTCGTTTGCCCAG
三、肝炎病毒标志的血清学诊断
HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc、抗-HCV均用试剂盒检测(广东省中山生物工程公司或天津普生科技有限公司)，严格按说明书操作。
四、统计学处理
采用t检验，t′检验和χ2检验。
结果
一、不同病理改变的慢性乙型肝炎患者中HGV的检出率
, 百拇医药 65例慢性乙型肝炎患者中，病理诊断为慢性肝炎轻度、中度和重度者分别为25例、20例和20例，其HGV RNA的检出率见表1。经χ2检验，各组间HGV RNA检出率统计学处理差异无显著性。
表1 慢性肝炎患者血清中的HGV RNA检测结果 病理诊断
例数
HGV RNA阳性
轻度
25
3(12.0%)
中度
20
3(15.0%)
, http://www.100md.com
重度
20
2(10.0%)
合计
65
8(12.3%)
注：各组之间χ2检验P均>0.05。
二、HGV感染与慢性乙型肝炎患者临床表现的关系
65例慢性乙型肝炎患者的临床表现与是否合并HGV感染的关系见表2。两组患者年龄、性别无统计学差异，ALT、AST、γ-GT和ALP改变也无明显区别，但HGV阳性组的血清胆红素要明显高于HGV阴性组。
表2 慢性乙型肝炎患者中HGV感染及临床表现比较(
,U/L) 组别, http://www.100md.com
ALT
AST
γ-GT
ALP
TBIL
HGV RNA(+)
374.3±191.8
279.5±269.2
61.6±24.6
116.5±82.2
73.3±40.8
HGV RNA(-)
, http://www.100md.com
241.0±203.1
145.6±152.2
61.6±31.9
80.1±44.5
36.4±45.5*
三、HGV对HBV复制的影响
65例患者中血清乙型肝炎病毒标志呈HBsAg阳性、HBeAg阳性者30例，HBsAg阳性、HBeAg阴性和/或抗-HBe阳性者35例，两组的HGV RNA检出例数均为4例，统计学处理，差异无显著性。
讨论
HGV呈世界性分布，可以感染多种人群。但单纯庚型肝炎的病例并不多，为研究工作带来了较大的困难。然而乙型肝炎、丙型肝炎和庚型肝炎都以肠道外途径传播为主，因此混合感染的现象在临床上十分常见。研究HGV与HBV或HCV混合感染的病例可以为研究HGV和庚型肝炎提供方便。
, http://www.100md.com
本研究在慢性乙型肝炎患者中检出HGV感染者8例(12.3%)，和国外报道的结果相似[4]。
在慢性乙型肝炎轻度、中度和重度各组间HGV RNA的检出率相当，各型间无统计学差异。除个别慢性肝炎重型病例患病后曾因治疗需要而输血外，所有慢性肝炎轻度和中度以及大部分的慢性肝炎重度病例在患病前后并未输血，因此也可除外因患病后接受输血而感染HGV。提示HGV感染对慢性乙型肝炎的病变程度无明显影响。这个结果和Marrone等[7]的观察一致，作者观察的104例慢性乙型肝炎患者中18例(17%)同时为HGV RNA阳性，两组患者在临床表现、肝功能改变和肝组织表现方面没有差异，用bDNA法分别检测两组患者的血清HBV DNA含量也没有统计学差异。
一般来说两种或两种以上的病毒感染可能导致某种程度的干扰或抑制。如在HBV感染者中合并HCV感染时，HBV DNA的滴度将降低[8]；同样在合并HDV感染时HGV DNA的含量也会降低[9]。本研究显示HGV的检出率在慢性乙型肝炎患者HBeAg阳性组和阴性组间无统计学差异。由于HBeAg阳性一般代表HBV高水平复制，而HBeAg阴性一般代表HBV低水平复制，这个结果似可提示HGV对HBV的复制既无抑制作用，也未增强HBV的复制。
, 百拇医药
结果提示：在我国慢性乙型肝炎患者中，HGV是一种常见的混合感染病原体。HGV感染对慢性乙型肝炎的病理变化和临床表现无明显影响，HGV的存在似不影响HBV的复制。
本课题获广东省自然科学基金(96344)和全军医药卫生青年基金资助(96Q0501)
参考文献
1 Simons JN, Leary TP, Dawson GJ, et al. Isolation of novel virus-like sequences associated with human hepatitis. Nature Medicine, 1995,1:564-569.
2 Leary TP, Muerhoff AS, Simons JN, et al. Sequence and geno-mic organization of GBV-C: A novel member of the flaviviridae associated with human non-A-E hepatitis. J Med Virol, 1996,48:60-67.
, http://www.100md.com
3 Linnen J, Wages JJ, Zhang-Keck ZY, et al. Molecular cloning and disease association of hepatitis G virus: A transfusion-transmissible agent. Science, 1996,271:505-508.
4 Nakatsuji Y, Wait-Kuo SJ, Tanaka E, et al. Prevalence and disease association of hepatitis G virus infection in Japan. J Virol Hepat, 1996, 3:307-316.
5 Dawson GJ, Schlauder GG, Pilot-Matias TJ, et al. Prevalence studies of GB virus-C using reversr-transcriptase-polymerase chain reaction, J Med Virol, 1996,50:97-103.
, 百拇医药
6 卢桥生，张明霞，冯筱榕，等.庚型肝炎病毒的RT-PCR法检测.第一军医大学学报，1996，16：69-70.
7 Marrone A, Shih JWK, Nakatsuji Y, et al. Hepatitis G virus (HGV) among patients with chronic hepatitis B. Hepatology, 1996,24:225A.
8 Fong TL, Di-Bisceglie AM, Waggoner JG, et al. The significance of antibody to hepatitis C virus in patients with chronic hepatitis B. Hepatology, 1991,14:64-67.
9 Liaw YF, Chien RN, Chen TJ, et al. Concurrent hepatitis C virus and hepatitis delta virus superinfection in patients with chronic hepatitis B virus infection. J Med Virol, 1992,37:294-297.
(收稿：1997-11-24 修回：1998-05-04), 百拇医药