牙齿发育中c-myc mRNA转录及蛋白表达的意义
作者：赵书芳 赵 皿 金 岩 吴补领
单位：第四军医大学口腔医学院，陕西 西安 710032
关键词：c-myc基因；牙胚；发育；细胞凋亡
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摘要 目的：观察牙胚发育过程中c-myc mRNA转录及蛋白表达的变化，探讨c-myc基因在牙齿发育中的作用。方法：利用原位杂交技术、免疫组织化学技术检测SD大鼠牙胚发育不同时期c-myc mRNA转录及蛋白的表达情况。结果：c-myc mRNA及蛋白的表达在蕾状和帽状期明显，钟状期减弱，而牙体组织形成期成釉细胞、成牙本质细胞及间充质牙乳头细胞表达又增强。c-myc蛋白表达和分布与c-myc mRNA转录基本一致。结论：c-myc在牙齿发育过程中对细胞增殖、分化、成熟及凋亡发挥着重要的调控作用。
, 百拇医药 中图号：R780.2 文献标识码：A 文章编号：1005-2593(1999)01-0061-02
[牙体牙髓牙周病学杂志，1999，9(1)：61]
Expression of c-myc mRNA and c-myc protein
in the tooth development
Zhao Shufang, Zhao Min, Jin Yan et al
Shcool of Stomatology, The Fourth Military Medical University, Xi'an 710032
Abstract Aim: To investigate the role of c-myc gene in the different stages of tooth Development. Methods: The expression of both mRNA and protein of c-myc were detected by in situ hybridization and immunohistochemical staining in different stages of tooth development of SD rats. Results: The expression of both mRNA and protein of c-myc were obvious in the bud and cap stages,while decreased in the bell stage, then increased in ameloblast and dentinoblast when dentin formation. The expressions of c-myc were stronger in mesenchymal cells than in epithelial cells. The expression and distribution of c-myc mRNA is consistent with that of c-myc protein. Conclusion: c-myc is of great importance in the cell proliferation and differentiation and apoptosis in the tooth development.
, 百拇医药
Key words c-myc gene； apoptosis； tooth germ；tooth development
[Chinese Journal of Conservative Dentistry, 1999,9(1):61]
c-myc是一个功能甚多的核内癌基因，可作为转录因子影响着细胞的生长、增殖、分化、凋亡和细胞周期的进行，已成为在胚胎发育、肿瘤发生、转移等重要的生理病理过程的研究热点[1，2]。那么，具有刺激细胞生长及诱导细胞凋亡双重功能的c-myc的表达是否在牙齿发育中发挥重要作用，尚未见此方面的报道。为此，本研究通过观察SD大鼠牙胚发育中的c-myc基因的表达，探讨牙齿发育中c-myc基因的内在调控作用。
1 材料和方法
同参考文献[3]
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 c-myc原位杂交检测结果
c-myc mRNA阳性反应可出现于细胞浆和细胞核，为紫蓝色颗粒或团块。牙胚发育的各期均有程度不一的c-myc mRNA表达。蕾状期成釉器中央的细胞及周围的外胚间充质细胞为强阳性表达，帽状期成釉器以内釉上皮凹面中心为主的原发性釉结节处、颈环处及牙乳头细胞阳性表达明显。在钟状期c-myc的表达方式基本同帽状期，但是表达程度减弱。进入牙体组织形成期，开始时在成釉细胞、成牙本质细胞、星网层、牙乳头细胞中表达增强；随着基质分泌，星网层、牙乳头细胞中表达逐渐减弱，但成釉细胞、成牙本质细胞仍有散在表达。
2.2 c-myc的免疫组织化学染色结果
c-myc 阳性细胞细胞核着棕黄色。c-myc蛋白表达、分布与c-myc mRNA基因基本一致(附图)。只是牙乳头与上皮性成釉器的表达强弱无明显差异。
, http://www.100md.com
附图 牙体组织形成期成釉细胞、成牙本质细胞中c-myc蛋白表达阳性 (40×10)
3 讨论
myc基因家族属核蛋白类，目前已知的 myc家族成员有三个：c-myc (cell myc)、N-myc (human neuroblastomas)和 L-myc (small cell lung carcinomas)，其中c-myc的作用是myc家族成员中最强的。正常时c-myc基因位于染色体8q24位点，是细胞周期的主要调节基因。 研究表明：c-myc是一种“快速早期反应”的细胞内信使，在细胞由G0期进入G1期，即由静止状态进入增殖状态前表达大增。认为c-myc对促进细胞进入S期完成DNA合成具有关键意义，可使细胞提早进入S期，即能促进细胞从G0/ G1期向S期移行[2]。c-myc 作为细胞周期相关早期反应基因和转录促进因子之一，具有促进细胞增殖和刺激细胞凋亡的双重作用。它在增殖期细胞中表达较高，在静止期不表达，而细胞分化时明显下降，c-myc基因表达失调也是细胞凋亡的主要诱因，细胞发生凋亡的速度及其对诱导因素的敏感性均依赖于细胞c-myc蛋白的表达量[2]。同时，c-myc基因具有的双重功能依赖于生长因子的存在和其它因子的调控。例如，bcl-2可抑制c-myc的死亡令，促使细胞增殖，培养细胞在缺乏血清等刺激因子情况下，细胞周期完成受阻，进入细胞凋亡[1，3]。
, http://www.100md.com
本实验结果显示：牙齿发育早期蕾状突起的中央星形细胞及突起周围的牙乳头细胞为强阳性表达，帽状成釉器以内釉上皮凹面中心为主的生长中心(原发性釉结节)处内釉上皮细胞为阳性表达，相邻的间充质牙乳头细胞为强阳性表达。说明，c-myc在发育早期的高表达促进细胞增殖，这一作用在细胞发育的生长中心及间充质细胞中明显。钟状期的表达明显减弱。钟状期进入成牙本质细胞、成釉细胞分化阶段，所以此期的上皮及间充质细胞的表达都弱。提示c-myc 表达下调可能是细胞分化的原因。进入牙体组织形成期，开始时成釉细胞、成牙本质细胞、星网层、牙乳头细胞中表达增强；随着基质分泌，星网层、牙乳头细胞中表达逐渐减弱，但成釉细胞、成牙本质细胞仍有散在表达。这可能是开始时细胞尚处于增殖状态，c-myc 表达增强，随着基质分泌，成釉器逐渐萎缩，细胞生长需要的生长因子及其它的调节因子表达失调，诱导细胞凋亡的信号出现，在其它调控基因参与下，此时可能不断通过细胞凋亡，来消除多余的、衰老的、异常的细胞和星网层等暂时性结构[4，5]。
由此可见，c-myc基因参与了牙齿发育过程，在发育的早期可能调节细胞的增殖，钟状期调节细胞的分化，牙体组织形成后主要诱导细胞凋亡的发生。说明c-myc基因是牙齿发育过程的重要调控基因之一，确切的调控机制还有待于深入研究。
, 百拇医药
参考文献
1 Evan GI,Littlewood TD.The role of c-myc in cell growth.Curr opin Genet Devel，1993，3:44
2 Thompson CB, Challoner PB,Neiman PE et al. Levels of c-myc oncogene mRNA are invariant throughout the cell cycle.Nature, 1985,314:363
3 赵书芳，赵皿，金岩等. 程序性细胞死亡及其相关基因bcl-2,bax在牙齿发育中的作用. 实用口腔医学杂志，1999, 15(1):7
4 赵书芳，金岩,赵皿等. 牙齿发育中程序性细胞死亡的研究. 牙体牙髓牙周病学杂志，1999,9(1):58
收稿日期：1998-11-30
, 百拇医药
单位：第四军医大学口腔医学院，陕西 西安 710032
关键词：c-myc基因；牙胚；发育；细胞凋亡
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摘要 目的：观察牙胚发育过程中c-myc mRNA转录及蛋白表达的变化，探讨c-myc基因在牙齿发育中的作用。方法：利用原位杂交技术、免疫组织化学技术检测SD大鼠牙胚发育不同时期c-myc mRNA转录及蛋白的表达情况。结果：c-myc mRNA及蛋白的表达在蕾状和帽状期明显，钟状期减弱，而牙体组织形成期成釉细胞、成牙本质细胞及间充质牙乳头细胞表达又增强。c-myc蛋白表达和分布与c-myc mRNA转录基本一致。结论：c-myc在牙齿发育过程中对细胞增殖、分化、成熟及凋亡发挥着重要的调控作用。
, 百拇医药 中图号：R780.2 文献标识码：A 文章编号：1005-2593(1999)01-0061-02
[牙体牙髓牙周病学杂志，1999，9(1)：61]
Expression of c-myc mRNA and c-myc protein
in the tooth development
Zhao Shufang, Zhao Min, Jin Yan et al
Shcool of Stomatology, The Fourth Military Medical University, Xi'an 710032
Abstract Aim: To investigate the role of c-myc gene in the different stages of tooth Development. Methods: The expression of both mRNA and protein of c-myc were detected by in situ hybridization and immunohistochemical staining in different stages of tooth development of SD rats. Results: The expression of both mRNA and protein of c-myc were obvious in the bud and cap stages,while decreased in the bell stage, then increased in ameloblast and dentinoblast when dentin formation. The expressions of c-myc were stronger in mesenchymal cells than in epithelial cells. The expression and distribution of c-myc mRNA is consistent with that of c-myc protein. Conclusion: c-myc is of great importance in the cell proliferation and differentiation and apoptosis in the tooth development.
, 百拇医药
Key words c-myc gene； apoptosis； tooth germ；tooth development
[Chinese Journal of Conservative Dentistry, 1999,9(1):61]
c-myc是一个功能甚多的核内癌基因，可作为转录因子影响着细胞的生长、增殖、分化、凋亡和细胞周期的进行，已成为在胚胎发育、肿瘤发生、转移等重要的生理病理过程的研究热点[1，2]。那么，具有刺激细胞生长及诱导细胞凋亡双重功能的c-myc的表达是否在牙齿发育中发挥重要作用，尚未见此方面的报道。为此，本研究通过观察SD大鼠牙胚发育中的c-myc基因的表达，探讨牙齿发育中c-myc基因的内在调控作用。
1 材料和方法
同参考文献[3]
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 c-myc原位杂交检测结果
c-myc mRNA阳性反应可出现于细胞浆和细胞核，为紫蓝色颗粒或团块。牙胚发育的各期均有程度不一的c-myc mRNA表达。蕾状期成釉器中央的细胞及周围的外胚间充质细胞为强阳性表达，帽状期成釉器以内釉上皮凹面中心为主的原发性釉结节处、颈环处及牙乳头细胞阳性表达明显。在钟状期c-myc的表达方式基本同帽状期，但是表达程度减弱。进入牙体组织形成期，开始时在成釉细胞、成牙本质细胞、星网层、牙乳头细胞中表达增强；随着基质分泌，星网层、牙乳头细胞中表达逐渐减弱，但成釉细胞、成牙本质细胞仍有散在表达。
2.2 c-myc的免疫组织化学染色结果
c-myc 阳性细胞细胞核着棕黄色。c-myc蛋白表达、分布与c-myc mRNA基因基本一致(附图)。只是牙乳头与上皮性成釉器的表达强弱无明显差异。
, http://www.100md.com
附图 牙体组织形成期成釉细胞、成牙本质细胞中c-myc蛋白表达阳性 (40×10)
3 讨论
myc基因家族属核蛋白类，目前已知的 myc家族成员有三个：c-myc (cell myc)、N-myc (human neuroblastomas)和 L-myc (small cell lung carcinomas)，其中c-myc的作用是myc家族成员中最强的。正常时c-myc基因位于染色体8q24位点，是细胞周期的主要调节基因。 研究表明：c-myc是一种“快速早期反应”的细胞内信使，在细胞由G0期进入G1期，即由静止状态进入增殖状态前表达大增。认为c-myc对促进细胞进入S期完成DNA合成具有关键意义，可使细胞提早进入S期，即能促进细胞从G0/ G1期向S期移行[2]。c-myc 作为细胞周期相关早期反应基因和转录促进因子之一，具有促进细胞增殖和刺激细胞凋亡的双重作用。它在增殖期细胞中表达较高，在静止期不表达，而细胞分化时明显下降，c-myc基因表达失调也是细胞凋亡的主要诱因，细胞发生凋亡的速度及其对诱导因素的敏感性均依赖于细胞c-myc蛋白的表达量[2]。同时，c-myc基因具有的双重功能依赖于生长因子的存在和其它因子的调控。例如，bcl-2可抑制c-myc的死亡令，促使细胞增殖，培养细胞在缺乏血清等刺激因子情况下，细胞周期完成受阻，进入细胞凋亡[1，3]。
, http://www.100md.com
本实验结果显示：牙齿发育早期蕾状突起的中央星形细胞及突起周围的牙乳头细胞为强阳性表达，帽状成釉器以内釉上皮凹面中心为主的生长中心(原发性釉结节)处内釉上皮细胞为阳性表达，相邻的间充质牙乳头细胞为强阳性表达。说明，c-myc在发育早期的高表达促进细胞增殖，这一作用在细胞发育的生长中心及间充质细胞中明显。钟状期的表达明显减弱。钟状期进入成牙本质细胞、成釉细胞分化阶段，所以此期的上皮及间充质细胞的表达都弱。提示c-myc 表达下调可能是细胞分化的原因。进入牙体组织形成期，开始时成釉细胞、成牙本质细胞、星网层、牙乳头细胞中表达增强；随着基质分泌，星网层、牙乳头细胞中表达逐渐减弱，但成釉细胞、成牙本质细胞仍有散在表达。这可能是开始时细胞尚处于增殖状态，c-myc 表达增强，随着基质分泌，成釉器逐渐萎缩，细胞生长需要的生长因子及其它的调节因子表达失调，诱导细胞凋亡的信号出现，在其它调控基因参与下，此时可能不断通过细胞凋亡，来消除多余的、衰老的、异常的细胞和星网层等暂时性结构[4，5]。
由此可见，c-myc基因参与了牙齿发育过程，在发育的早期可能调节细胞的增殖，钟状期调节细胞的分化，牙体组织形成后主要诱导细胞凋亡的发生。说明c-myc基因是牙齿发育过程的重要调控基因之一，确切的调控机制还有待于深入研究。
, 百拇医药
参考文献
1 Evan GI,Littlewood TD.The role of c-myc in cell growth.Curr opin Genet Devel，1993，3:44
2 Thompson CB, Challoner PB,Neiman PE et al. Levels of c-myc oncogene mRNA are invariant throughout the cell cycle.Nature, 1985,314:363
3 赵书芳，赵皿，金岩等. 程序性细胞死亡及其相关基因bcl-2,bax在牙齿发育中的作用. 实用口腔医学杂志，1999, 15(1):7
4 赵书芳，金岩,赵皿等. 牙齿发育中程序性细胞死亡的研究. 牙体牙髓牙周病学杂志，1999,9(1):58
收稿日期：1998-11-30
, 百拇医药