束缚应激对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响
作者：孙 莉 韩耀辉 赵彩虹 徐仲崎 孔 彦 王 辉
单位：孙莉 韩耀辉 赵彩虹 徐仲崎 孔彦 王辉(大连经济技术开发区 大连大学医院生理教研室)
关键词：应激；巨噬细胞[Mφ]；吞噬作用
中国行为医学科学990112 【摘要】 目的 研究束缚应激对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。方法 40只小鼠，随机等分对照组和应激组，用巨噬细胞体内吞噬法， 测其吞噬率、吞噬指数及消化指数。 结果 对照组与应激组比较，应激组吞噬率明显降低(P<0.001)，吞噬指数亦明显降低(P<0.02)，消化指数为0， 而正常组消化指数为0.0783±0.0525。 结论 束缚应激对巨噬细胞吞噬功能具有明显抑制作用。
An effect of restraint stress on macrophage phagocytosis of mice. Sun Li,Han Yaohui,Zhao Caihong,et al Department of Physiology , Medical College, Dalian University, Dalian 116622.
, 百拇医药
【Abstract】 Objective To study the effect of restraint stress on macrophage phagocytosis of mice. Method Fourty mice were divided randomly into control group and stress group,detected phogocytic rate,phagocytic index and ingestive index by mice phagocytic method within body. Results Phagocytic rate of the stress group decreased(P<0.00 1),phagocytic index decreased(P<0.02) and ingestive index is 0, while ingestive index of the control group is 0.0783± 0. 0525. Conclusion The restaint stress has obvious inhibition on macrophge phagocytosis.
, 百拇医药
【Key words】 Stress Macrophage Phagocytosis
近年来的一些实验表明应激对免疫系统功能可以产生明显影响，例如抑制血中T淋巴细胞对分裂原植物血凝素(PHA)刺激的反应[1]， 抑制B淋巴细胞的抗体生成反应[2,3]，抑制NK细胞产生细胞毒作用[4]等。Mφ是免疫系统中一类重要的防御和调节细胞，有学者曾用电击的方法研究其对大鼠Mφ功能的影响[5]，但是，至今尚未见到有关束缚应激对小鼠Mφ吞噬功能影响的系统报道，本实验采用束缚应激的方法，观察对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。
材料和方法
一、实验动物：采用昆明品系雄性小鼠40只，鼠龄6～8周，随机分为两组：对照组、应激组。
二、应激方法[6]：将应激组小鼠置于特制的园柱形筒内，两后肢伸出筒外，并用胶布固定，室温下维持20h。对照组动物留置原饲养笼中不予惊动。 对照组及应激组在实验期间均禁食、禁水。
, 百拇医药
三、Mφ吞噬功能测定方法
(一)测定方法
将液体石蜡按1ml/只注入小鼠腹腔，24h后，腹腔注入5%鸡红细胞(CRBC)1ml。在30min后，小鼠断髓，固定在解剖板上，腹部消毒后，向腹腔注入0. 2ml(5u/ml)肝素盐水，揉动腹部数分钟。然后在腹部中央将皮肤剪一小口， 并向上下撕开，暴露腹膜，用毛细滴管吸取腹腔液。以此液制成薄涂片，用 Wright-Giemsa液染色，镜检。
(二)计算公式
(三)统计学处理吞噬指数及消化指数采用t检验，吞噬百分率采用u检验。
结果
一、束缚应激对小鼠Mφ的吞噬功能影响，见下表。
, 百拇医药
应激组小鼠Mφ的吞噬指数、消化指数和吞噬率明显低于对照组。
附表 各组Mφ的吞噬指数、消化指数、吞噬率 分组
例数
吞噬指数
(
±s)
消化指数
(±s)
吞噬率(%)
对照组
, 百拇医药 20
0.3667±0.0775
0.0783±0.0525
23.88
应激组
20
0.0601±0.0326*
0
4.71**
*经t检验 P<0.02， **经u检验P<0.001。
二、束缚应激对小鼠Mφ吞噬功能影响的显微镜观察清晰可见。
, 百拇医药
应激组吞噬CRBC数少的涂片较多，而对照组吞噬CRBC数目多的较多；应激组未见消化CRBC的涂片，对照组可见一定数量消化CRBC的涂片。
讨论
大量临床和实验资料表明，应激可影响机体的免疫功能。其中巨噬细胞吞噬功能的影响在人体及大鼠也均有报导[7]。关于应激的研究方法也多种多样， 如电击、游泳、冷水浴等。本实验通过束缚的方法成功地观察了对小鼠Mφ吞噬功能的影响。实验结果可见，应激组与对照组比较，吞噬率P<0.001，吞噬指数P<0.02， 说明这两个指标有显著差异。 其中显微镜照片可见， 对照组吞噬多个CRBC的Mφ远多于应激组，消化指数对照组为0.0783±0.0525，而应激组没有查见，说明应激后Mφ消化能力明显下降。
束缚是研究心理应激的一个可靠方法，束缚应激对小鼠Mφ吞噬功能有明显影响。机制可能与垂体—肾上腺皮质系统的调节作用有关。因为，实验表明， 应激反应可刺激机体血中ACTH浓度明显增加，其增加对Mφ功能有明显抑制作用[7]。
, 百拇医药
研究表明，免疫功能的改变与疾病的发生发展有着密切的关系，现代社会中人们在日常生活、工作中面临竞争会越来越激烈，由于心理应激而致的心身疾病会日益增多[8]。显然，我们应重视这一方面的研究，进而有益于其预防及治疗。
参考文献
[1] Kerller SE.Suppression of immunity by stress: effect of a graded series of stressor on lymphocyte stimulation in the rat. Science, 1981,213(4514):1397～1400.
[2] Gisler RHH.Stress and the hormonal regulation of the immune response in mice. Psychother Psychosmat 1975,23(1～6):197～208.
, 百拇医药
[3] Monjan AA.Stress-induced modulation of the immune system. Science，1977,19(4287):307～308.
[4] Shavit YIW.Opioid peptides mediate the suppressive effect of stress on natural killer cell cytotoxicity.Science，1984,223:188～190.
[5] 丁玄宙,丁桂凤,范少光. 肾上腺皮质系统在应激反应中对大鼠巨噬细胞释放H2O2功能的抑制作用. 中国应用生理学杂志，1989,5(1):1～6.
[6] 汪静雪,陈薇,梅林,等. 束缚应激动物血清中免疫抑制因子产生部位的初步研究.生理学报，1992,44(6):541～548.
[7] 范少光,丁桂凤. 神经内分泌与免疫系统之间相互作用的介导物质：共用的生物学语言.生理科学进展，1995,26(2):175～183.
[8] 徐斌,王效道.心身医学.第一版.北京:中国医学科技出版社,1990,56.
(收稿日期：1998-07-20), 百拇医药
单位：孙莉 韩耀辉 赵彩虹 徐仲崎 孔彦 王辉(大连经济技术开发区 大连大学医院生理教研室)
关键词：应激；巨噬细胞[Mφ]；吞噬作用
中国行为医学科学990112 【摘要】 目的 研究束缚应激对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。方法 40只小鼠，随机等分对照组和应激组，用巨噬细胞体内吞噬法， 测其吞噬率、吞噬指数及消化指数。 结果 对照组与应激组比较，应激组吞噬率明显降低(P<0.001)，吞噬指数亦明显降低(P<0.02)，消化指数为0， 而正常组消化指数为0.0783±0.0525。 结论 束缚应激对巨噬细胞吞噬功能具有明显抑制作用。
An effect of restraint stress on macrophage phagocytosis of mice. Sun Li,Han Yaohui,Zhao Caihong,et al Department of Physiology , Medical College, Dalian University, Dalian 116622.
, 百拇医药
【Abstract】 Objective To study the effect of restraint stress on macrophage phagocytosis of mice. Method Fourty mice were divided randomly into control group and stress group,detected phogocytic rate,phagocytic index and ingestive index by mice phagocytic method within body. Results Phagocytic rate of the stress group decreased(P<0.00 1),phagocytic index decreased(P<0.02) and ingestive index is 0, while ingestive index of the control group is 0.0783± 0. 0525. Conclusion The restaint stress has obvious inhibition on macrophge phagocytosis.
, 百拇医药
【Key words】 Stress Macrophage Phagocytosis
近年来的一些实验表明应激对免疫系统功能可以产生明显影响，例如抑制血中T淋巴细胞对分裂原植物血凝素(PHA)刺激的反应[1]， 抑制B淋巴细胞的抗体生成反应[2,3]，抑制NK细胞产生细胞毒作用[4]等。Mφ是免疫系统中一类重要的防御和调节细胞，有学者曾用电击的方法研究其对大鼠Mφ功能的影响[5]，但是，至今尚未见到有关束缚应激对小鼠Mφ吞噬功能影响的系统报道，本实验采用束缚应激的方法，观察对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。
材料和方法
一、实验动物：采用昆明品系雄性小鼠40只，鼠龄6～8周，随机分为两组：对照组、应激组。
二、应激方法[6]：将应激组小鼠置于特制的园柱形筒内，两后肢伸出筒外，并用胶布固定，室温下维持20h。对照组动物留置原饲养笼中不予惊动。 对照组及应激组在实验期间均禁食、禁水。
, 百拇医药
三、Mφ吞噬功能测定方法
(一)测定方法
将液体石蜡按1ml/只注入小鼠腹腔，24h后，腹腔注入5%鸡红细胞(CRBC)1ml。在30min后，小鼠断髓，固定在解剖板上，腹部消毒后，向腹腔注入0. 2ml(5u/ml)肝素盐水，揉动腹部数分钟。然后在腹部中央将皮肤剪一小口， 并向上下撕开，暴露腹膜，用毛细滴管吸取腹腔液。以此液制成薄涂片，用 Wright-Giemsa液染色，镜检。
(二)计算公式
(三)统计学处理吞噬指数及消化指数采用t检验，吞噬百分率采用u检验。
结果
一、束缚应激对小鼠Mφ的吞噬功能影响，见下表。
, 百拇医药
应激组小鼠Mφ的吞噬指数、消化指数和吞噬率明显低于对照组。
附表 各组Mφ的吞噬指数、消化指数、吞噬率 分组
例数
吞噬指数
(
±s)消化指数
(
±s)吞噬率(%)
对照组
, 百拇医药 20
0.3667±0.0775
0.0783±0.0525
23.88
应激组
20
0.0601±0.0326*
0
4.71**
*经t检验 P<0.02， **经u检验P<0.001。
二、束缚应激对小鼠Mφ吞噬功能影响的显微镜观察清晰可见。
, 百拇医药
应激组吞噬CRBC数少的涂片较多，而对照组吞噬CRBC数目多的较多；应激组未见消化CRBC的涂片，对照组可见一定数量消化CRBC的涂片。
讨论
大量临床和实验资料表明，应激可影响机体的免疫功能。其中巨噬细胞吞噬功能的影响在人体及大鼠也均有报导[7]。关于应激的研究方法也多种多样， 如电击、游泳、冷水浴等。本实验通过束缚的方法成功地观察了对小鼠Mφ吞噬功能的影响。实验结果可见，应激组与对照组比较，吞噬率P<0.001，吞噬指数P<0.02， 说明这两个指标有显著差异。 其中显微镜照片可见， 对照组吞噬多个CRBC的Mφ远多于应激组，消化指数对照组为0.0783±0.0525，而应激组没有查见，说明应激后Mφ消化能力明显下降。
束缚是研究心理应激的一个可靠方法，束缚应激对小鼠Mφ吞噬功能有明显影响。机制可能与垂体—肾上腺皮质系统的调节作用有关。因为，实验表明， 应激反应可刺激机体血中ACTH浓度明显增加，其增加对Mφ功能有明显抑制作用[7]。
, 百拇医药
研究表明，免疫功能的改变与疾病的发生发展有着密切的关系，现代社会中人们在日常生活、工作中面临竞争会越来越激烈，由于心理应激而致的心身疾病会日益增多[8]。显然，我们应重视这一方面的研究，进而有益于其预防及治疗。
参考文献
[1] Kerller SE.Suppression of immunity by stress: effect of a graded series of stressor on lymphocyte stimulation in the rat. Science, 1981,213(4514):1397～1400.
[2] Gisler RHH.Stress and the hormonal regulation of the immune response in mice. Psychother Psychosmat 1975,23(1～6):197～208.
, 百拇医药
[3] Monjan AA.Stress-induced modulation of the immune system. Science，1977,19(4287):307～308.
[4] Shavit YIW.Opioid peptides mediate the suppressive effect of stress on natural killer cell cytotoxicity.Science，1984,223:188～190.
[5] 丁玄宙,丁桂凤,范少光. 肾上腺皮质系统在应激反应中对大鼠巨噬细胞释放H2O2功能的抑制作用. 中国应用生理学杂志，1989,5(1):1～6.
[6] 汪静雪,陈薇,梅林,等. 束缚应激动物血清中免疫抑制因子产生部位的初步研究.生理学报，1992,44(6):541～548.
[7] 范少光,丁桂凤. 神经内分泌与免疫系统之间相互作用的介导物质：共用的生物学语言.生理科学进展，1995,26(2):175～183.
[8] 徐斌,王效道.心身医学.第一版.北京:中国医学科技出版社,1990,56.
(收稿日期：1998-07-20), 百拇医药