复方参七汤对MNNG致癌剂诱发Wistar大鼠胃腺癌抑制作用的实验研究*
作者：沈洪薰 陈 莉 周树军 陈玉泉 陆丽萍 于 秀 樊 勇 朱建伟
单位：南通医学院附属医院(南通 226001)
关键词：复方参七汤；MNNG致癌剂；大鼠；胃肿瘤；癌，腺
肿瘤990118 中医中药治疗胃癌临床研究多见，实验研究较少见。近年来，单味中草药体外抑癌试验，移植瘤和诱发瘤的实验研究逐渐增多[1，2]。而复方汤剂对化学致癌剂诱发动物胃癌的抑制试验尚未见报告。作者应用复方参七汤长期治疗胃癌术后病人35例，五年生存率为80%(16/20)，比对照组58.6%(17/29)为高。作者曾研究复方参七汤对人胃癌细胞株体外抑制试验，发现有抑制胃癌细胞作用[3]。本实验研究复方参七汤对MNNG致癌剂诱发Wistar大鼠胃腺癌的抑制作用。现报告如下：
材料和方法
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1.实验动物 纯系Wistar大鼠，雄性，6周龄，体重45 g左右，共100只，分成复方参七汤组和对照组各50只。
2.化学致癌剂 N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N′-Nitro-N-Nitrosoguanidine，简称MNNG)淡黄色结晶，日本东京化成试剂公司产品。
3.复方参七汤 由参三七、人参、黄芪、当归、制川乌、制草乌、半枝莲、半边莲、陈皮、木香、甘草、谷麦芽组成。每剂中药煎成200 ml药液备用。
4.氯化钠 为市售精制食盐。每周1次用1 ml饱和氯化钠溶液灌胃，前6周连续使用。
5.饲养Wistar大鼠条件 本院实验动物中心楼内饲养，室温18℃～25℃，湿度30%～50%，每笼大鼠5只，标记饲养，喂以颗粒饲料。
, 百拇医药 6.复方参七汤组 大鼠50只，自由摄取MNNG 100 μg/ml溶液。连续9个月，前6周，每周1次用1 ml饱和氯化钠溶液灌胃。自由喂给含复方参七汤(按3.6 ml/200 g大鼠体重)颗粒饲料，每日1次，连续喂给9个月。
7.对照组 大鼠50只，自由摄取MNNG 100 μg/ml，连续9个月，前6周，每周1次用1 ml饱和氯化钠溶液灌胃。
8.实验期间观察 每天观察2次，每1～2月测量大鼠体重1次。在实验期间自然死亡大鼠均作尸检，观察病理学改变和胃肠道癌发生率。
9.两组生存大鼠分批杀死 取胃十二指肠，大肠和小肠，心、肝、肺等脏器。胃十二指肠沿大弯侧切开，观察粘膜病变，作组织切片HE染色。观察病理学改变及胃肠道癌发生率。
结 果
复方参七汤组 50只大鼠实验期间6个月自然死亡7只，自然死亡率为14%(7/50)，均无胃十二指肠癌肿。喂养9个月生存大鼠43只，分批将其处死。结果43只大鼠中，大鼠胃组织呈正常74.4%(32/43)；异型增生18.6%(8/43)；胃腺癌6.9%(3/43)，癌肿位于胃窦小弯侧2只，分别为1.0 cm×0.3 cm和0.8 cm×0.8 cm之结节，胃窦部0.5 cm×0.5 cm溃疡1只，病理诊断分别为管状腺癌，低分化腺癌和粘液腺癌。
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对照组 50只大鼠实验期间自然死亡11只，自然死亡率为22%(11/50)，其中6个月内自然死亡7只，未发现胃腺癌，7～9个月死亡4只，1只见胃窦部有5 cm×3.5 cm×3 cm肿瘤，病理诊断为未分化癌。喂养9个月，生存大鼠39只，分批杀死。结果39只大鼠中，异型增生41%(16/39)，其中胃呈腺瘤样增生5只，再生性异型增生11只，胃腺癌58.9%(23/39)。癌肿位于胃窦小弯侧19只，胃窦大弯侧2只和全胃2只。大体形态呈肿块型11只，内有2只胃内有4个肿瘤，1只胃内有2个肿瘤，8只胃内各有一个肿瘤。肿瘤最大者3.3 cm×3.0 cm，最小者0.8 cm×0.9 cm，>2 cm肿瘤有7个，1 cm～2 cm者有9个，<1 cm者有2个；呈菜花样4只，内有1只胃内有3个肿瘤，3只胃内各有1个肿瘤。肿瘤最大者2.5 cm×2.5 cm，最小者0.5×0.5 cm，>2 cm肿瘤2个，<1 cm肿瘤4个；呈溃疡型4只，溃疡直径均<1 cm；呈结节样改变3只，直径均<1 cm；呈粘膜糜烂1只1.0 cm×0.6 cm。合并十二指肠肿瘤者5只，癌肿直径介于0.8 cm～2.6 cm之间。病理诊断管状腺癌17只，低分化腺癌2只，未分化癌3只和粘液腺癌1只。其中合并十二指肠癌5只中，腺癌3只和粘液腺癌2只(见附表)。
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附表 两组大鼠胃和十二指肠病理改变 组别
生存数
正常
异 型 增 生
胃 癌
十二指肠癌
再生性增生
腺瘤样增生
管状腺癌
低分化腺癌
未分化癌
粘液腺癌
腺癌
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粘液腺癌
复方参七汤组
43
32
8
0
2
0
0
1
0
0
对照组
39
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0
11
5
17
2
3
1
3
2
讨 论
一、胃癌模型 1.动物选择十分重要。文献报道实验动物有小鼠、大鼠和犬等。选用小鼠胃腺癌模型致癌时间长达19个月，致癌率为41.3%[4]。选用犬的胃癌模型[5]，因胃的容量与人相似，可长期随访和反复定期进行纤维胃镜，胃粘膜活检等检查，可发现实验犬投药后胃粘膜最初病变为充血，继而红白相间伴糜烂等，显微镜下示腺体萎缩和程度不同的不典型增生，最后发生胃癌。但经费耗资大。本组选用纯系雄性Wistar大鼠胃腺癌模型，致癌时间为9个月，对照组胃腺癌发生率为58.9%。
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2.本组选用亚硝胺类化学致癌剂。不同结构的亚硝基胺有不同的器官亲和性，本组选用化学致癌剂MNNG成功地诱发Wistar大鼠胃腺癌，在诱发胃腺癌的同时，还诱发十二指肠腺癌。
3.本组在大鼠胃腺癌模型中，前6周加用每周1次1 ml饱和氯化钠溶液灌胃。目的在于促进胃癌模型的成功。因氯化钠可破坏胃粘膜屏障，便于MNNG的作用，加速胃癌的发生。
4.在胃腺癌标准方面，张宗显[8]提出凡已有明显癌变的细胞及腺组织，并浸润至粘膜下层即可定为癌。本实验的对照组MNNG诱发大鼠胃腺癌发生率为58.9%，复方参七汤组大鼠胃腺癌发生率为6.9%。
二、抑癌机制 本组实验结果胃腺癌发生率为6.9%显著低于对照组58.9%。说明中药复方参七汤对MNNG致癌剂诱发大鼠胃腺癌有抑制作用。机制可能：1.复方参七汤具有保护大鼠胃粘膜作用，避免化学致癌剂MNNG对胃粘膜损害作用。对照组大鼠胃无1只呈正常表现，轻者呈现胃粘膜上皮异型增生，重者呈胃腺癌，而复方参七汤组，有74.4%大鼠胃呈正常表现。2.复方参七汤长期服用，可以减轻胃粘膜病变程度。对照组大鼠胃粘膜病变有41%而复方参七汤组大鼠胃粘膜病变18.6%，两者有显著差异(P<0.05)。3.复方参七汤长期服用可抑制大鼠胃癌前期病变向胃腺癌转变，降低MNNG诱发大鼠胃腺癌的发生率，对照组为58.9%而复方参七汤组为6.9%，(P<0.01)。
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江苏省卫生厅中医管理局资助课题：苏中医科字(93)第6号
第一作者简介 沈洪薰，男，大学本科，主任医师，教授，硕士生导师。
参 考 文 献
1 胡品津.大蒜天然提取物二烯丙基硫醚对亚硝基胍诱发的大鼠腺胃粘膜损害的保护作用.中华肿瘤杂志，1990，12(6)：429
2 史桂芝，李吉友，纪新华，等.甘草、白屈菜阻断亚硝基胍致胃癌作用的研究.中华预防医学杂志，1992，26(3)：165
3 沈洪薰，周树军，陆丽萍，等.复方参七汤对人胃癌细胞株体外抑制作用的观察.南通医学院学报，1995，4：5
4 张宗显，李玉琼，李光蓉，等.亚硝基胍诱发小鼠胃癌及幽门腺区上皮细胞超微结构的改变.中华肿瘤杂志，1982，3：161
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5 江绍基，萧树东，胡运彪，等.实验性犬胃癌模型建立的研究.肿瘤，1985，5：145
6 林炳水，窦桂荣，崔振环.中药大枣对MNNG大鼠胃癌抑制作用的初步观察.天津医药，肿瘤学附刊，1982，1：62
7 朱正纲，燕 敏，尹浩然，等.甲硝基胍诱发大鼠胃癌的实验研究.上海第二医科大学学报，1992，2：121
8 张宗显.小动物实验性胃癌的研究.见萧树东，江绍基主编《胃癌》.上海：上海科学技术文献出版社，1987：118
(收稿：1997-08-11 修回：1997-09-29), 百拇医药
单位：南通医学院附属医院(南通 226001)
关键词：复方参七汤；MNNG致癌剂；大鼠；胃肿瘤；癌，腺
肿瘤990118 中医中药治疗胃癌临床研究多见，实验研究较少见。近年来，单味中草药体外抑癌试验，移植瘤和诱发瘤的实验研究逐渐增多[1，2]。而复方汤剂对化学致癌剂诱发动物胃癌的抑制试验尚未见报告。作者应用复方参七汤长期治疗胃癌术后病人35例，五年生存率为80%(16/20)，比对照组58.6%(17/29)为高。作者曾研究复方参七汤对人胃癌细胞株体外抑制试验，发现有抑制胃癌细胞作用[3]。本实验研究复方参七汤对MNNG致癌剂诱发Wistar大鼠胃腺癌的抑制作用。现报告如下：
材料和方法
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1.实验动物 纯系Wistar大鼠，雄性，6周龄，体重45 g左右，共100只，分成复方参七汤组和对照组各50只。
2.化学致癌剂 N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N′-Nitro-N-Nitrosoguanidine，简称MNNG)淡黄色结晶，日本东京化成试剂公司产品。
3.复方参七汤 由参三七、人参、黄芪、当归、制川乌、制草乌、半枝莲、半边莲、陈皮、木香、甘草、谷麦芽组成。每剂中药煎成200 ml药液备用。
4.氯化钠 为市售精制食盐。每周1次用1 ml饱和氯化钠溶液灌胃，前6周连续使用。
5.饲养Wistar大鼠条件 本院实验动物中心楼内饲养，室温18℃～25℃，湿度30%～50%，每笼大鼠5只，标记饲养，喂以颗粒饲料。
, 百拇医药 6.复方参七汤组 大鼠50只，自由摄取MNNG 100 μg/ml溶液。连续9个月，前6周，每周1次用1 ml饱和氯化钠溶液灌胃。自由喂给含复方参七汤(按3.6 ml/200 g大鼠体重)颗粒饲料，每日1次，连续喂给9个月。
7.对照组 大鼠50只，自由摄取MNNG 100 μg/ml，连续9个月，前6周，每周1次用1 ml饱和氯化钠溶液灌胃。
8.实验期间观察 每天观察2次，每1～2月测量大鼠体重1次。在实验期间自然死亡大鼠均作尸检，观察病理学改变和胃肠道癌发生率。
9.两组生存大鼠分批杀死 取胃十二指肠，大肠和小肠，心、肝、肺等脏器。胃十二指肠沿大弯侧切开，观察粘膜病变，作组织切片HE染色。观察病理学改变及胃肠道癌发生率。
结 果
复方参七汤组 50只大鼠实验期间6个月自然死亡7只，自然死亡率为14%(7/50)，均无胃十二指肠癌肿。喂养9个月生存大鼠43只，分批将其处死。结果43只大鼠中，大鼠胃组织呈正常74.4%(32/43)；异型增生18.6%(8/43)；胃腺癌6.9%(3/43)，癌肿位于胃窦小弯侧2只，分别为1.0 cm×0.3 cm和0.8 cm×0.8 cm之结节，胃窦部0.5 cm×0.5 cm溃疡1只，病理诊断分别为管状腺癌，低分化腺癌和粘液腺癌。
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对照组 50只大鼠实验期间自然死亡11只，自然死亡率为22%(11/50)，其中6个月内自然死亡7只，未发现胃腺癌，7～9个月死亡4只，1只见胃窦部有5 cm×3.5 cm×3 cm肿瘤，病理诊断为未分化癌。喂养9个月，生存大鼠39只，分批杀死。结果39只大鼠中，异型增生41%(16/39)，其中胃呈腺瘤样增生5只，再生性异型增生11只，胃腺癌58.9%(23/39)。癌肿位于胃窦小弯侧19只，胃窦大弯侧2只和全胃2只。大体形态呈肿块型11只，内有2只胃内有4个肿瘤，1只胃内有2个肿瘤，8只胃内各有一个肿瘤。肿瘤最大者3.3 cm×3.0 cm，最小者0.8 cm×0.9 cm，>2 cm肿瘤有7个，1 cm～2 cm者有9个，<1 cm者有2个；呈菜花样4只，内有1只胃内有3个肿瘤，3只胃内各有1个肿瘤。肿瘤最大者2.5 cm×2.5 cm，最小者0.5×0.5 cm，>2 cm肿瘤2个，<1 cm肿瘤4个；呈溃疡型4只，溃疡直径均<1 cm；呈结节样改变3只，直径均<1 cm；呈粘膜糜烂1只1.0 cm×0.6 cm。合并十二指肠肿瘤者5只，癌肿直径介于0.8 cm～2.6 cm之间。病理诊断管状腺癌17只，低分化腺癌2只，未分化癌3只和粘液腺癌1只。其中合并十二指肠癌5只中，腺癌3只和粘液腺癌2只(见附表)。
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附表 两组大鼠胃和十二指肠病理改变 组别
生存数
正常
异 型 增 生
胃 癌
十二指肠癌
再生性增生
腺瘤样增生
管状腺癌
低分化腺癌
未分化癌
粘液腺癌
腺癌
, http://www.100md.com
粘液腺癌
复方参七汤组
43
32
8
0
2
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0
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对照组
39
, http://www.100md.com
0
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讨 论
一、胃癌模型 1.动物选择十分重要。文献报道实验动物有小鼠、大鼠和犬等。选用小鼠胃腺癌模型致癌时间长达19个月，致癌率为41.3%[4]。选用犬的胃癌模型[5]，因胃的容量与人相似，可长期随访和反复定期进行纤维胃镜，胃粘膜活检等检查，可发现实验犬投药后胃粘膜最初病变为充血，继而红白相间伴糜烂等，显微镜下示腺体萎缩和程度不同的不典型增生，最后发生胃癌。但经费耗资大。本组选用纯系雄性Wistar大鼠胃腺癌模型，致癌时间为9个月，对照组胃腺癌发生率为58.9%。
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2.本组选用亚硝胺类化学致癌剂。不同结构的亚硝基胺有不同的器官亲和性，本组选用化学致癌剂MNNG成功地诱发Wistar大鼠胃腺癌，在诱发胃腺癌的同时，还诱发十二指肠腺癌。
3.本组在大鼠胃腺癌模型中，前6周加用每周1次1 ml饱和氯化钠溶液灌胃。目的在于促进胃癌模型的成功。因氯化钠可破坏胃粘膜屏障，便于MNNG的作用，加速胃癌的发生。
4.在胃腺癌标准方面，张宗显[8]提出凡已有明显癌变的细胞及腺组织，并浸润至粘膜下层即可定为癌。本实验的对照组MNNG诱发大鼠胃腺癌发生率为58.9%，复方参七汤组大鼠胃腺癌发生率为6.9%。
二、抑癌机制 本组实验结果胃腺癌发生率为6.9%显著低于对照组58.9%。说明中药复方参七汤对MNNG致癌剂诱发大鼠胃腺癌有抑制作用。机制可能：1.复方参七汤具有保护大鼠胃粘膜作用，避免化学致癌剂MNNG对胃粘膜损害作用。对照组大鼠胃无1只呈正常表现，轻者呈现胃粘膜上皮异型增生，重者呈胃腺癌，而复方参七汤组，有74.4%大鼠胃呈正常表现。2.复方参七汤长期服用，可以减轻胃粘膜病变程度。对照组大鼠胃粘膜病变有41%而复方参七汤组大鼠胃粘膜病变18.6%，两者有显著差异(P<0.05)。3.复方参七汤长期服用可抑制大鼠胃癌前期病变向胃腺癌转变，降低MNNG诱发大鼠胃腺癌的发生率，对照组为58.9%而复方参七汤组为6.9%，(P<0.01)。
, 百拇医药
江苏省卫生厅中医管理局资助课题：苏中医科字(93)第6号
第一作者简介 沈洪薰，男，大学本科，主任医师，教授，硕士生导师。
参 考 文 献
1 胡品津.大蒜天然提取物二烯丙基硫醚对亚硝基胍诱发的大鼠腺胃粘膜损害的保护作用.中华肿瘤杂志，1990，12(6)：429
2 史桂芝，李吉友，纪新华，等.甘草、白屈菜阻断亚硝基胍致胃癌作用的研究.中华预防医学杂志，1992，26(3)：165
3 沈洪薰，周树军，陆丽萍，等.复方参七汤对人胃癌细胞株体外抑制作用的观察.南通医学院学报，1995，4：5
4 张宗显，李玉琼，李光蓉，等.亚硝基胍诱发小鼠胃癌及幽门腺区上皮细胞超微结构的改变.中华肿瘤杂志，1982，3：161
, 百拇医药
5 江绍基，萧树东，胡运彪，等.实验性犬胃癌模型建立的研究.肿瘤，1985，5：145
6 林炳水，窦桂荣，崔振环.中药大枣对MNNG大鼠胃癌抑制作用的初步观察.天津医药，肿瘤学附刊，1982，1：62
7 朱正纲，燕 敏，尹浩然，等.甲硝基胍诱发大鼠胃癌的实验研究.上海第二医科大学学报，1992，2：121
8 张宗显.小动物实验性胃癌的研究.见萧树东，江绍基主编《胃癌》.上海：上海科学技术文献出版社，1987：118
(收稿：1997-08-11 修回：1997-09-29), 百拇医药