电针对佐剂性关节炎大鼠炎区炎症介质含量的影响
作者：杨金蓉 宋开源 梁繁荣 赵仓焕 杨介宾
单位：杨金蓉 宋开源 梁繁荣 赵仓焕 杨介宾(成都中医药大学，四川 成都 610075)
关键词：佐剂性关节炎；炎症；炎症介质；电针；大鼠；&127；实验研究
成都中医药大学学报990122 摘 要：研究针刺抗炎镇痛的机理，通过在大鼠右后足垫部向踝关节方向注入Freund's 完全佐剂造模，然后取其“昆仑”、“悬钟”穴电针治疗，对照观察炎症局部组胺、5-羟色胺、前列腺素E2的含量变化，结果显示：电针治疗后大鼠痛阈明显升高，治疗组与模型组比较有高度统计学意义(P<0.01)，接近于正常组(P>0.05)，提示电针治疗能使炎症症状减轻。电针治疗能明显降低组胺、5-HT及PGE2的含量，治疗组与模型组比较，有高度统计学意义(P<0.05)，其中组胺、5-HT含量接近正常组(P>0.05。观察结果还显示，电针在改善炎症症状的同时，炎症局部组织中炎症介质的含量明显减少(尤以组胺、5-HT明显)，而对正常大鼠却无明显影响。由此认为电针抗炎镇痛作用可能与电针减少了局部组织中上述炎症介质的含量有关。
, 百拇医药
中图分类号：R245;R684 文献标识码：B 文章编号：1004-0668(1999)01-0047-02
大鼠佐剂性关节炎模型是一种较为理想的接近临床的炎症痛模型。近年来许多学者以该模型进行针刺镇痛原理的研究。尽管关于针刺对佐剂性关节炎的治疗作用及针刺对中枢和外周镇痛机制研究方面都已有报道，但涉及针刺治疗对其局部炎症介质含量影响的报道甚少。为此我们进行了通过测定炎症局部组胺、5-羟色胺(5-HT)、前列腺素E2(PGE2)的含量变化来探索针刺抗炎镇痛的机理的研究，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 动物：选用健康SD成年大鼠，体重200g±2g，雌雄各半，由四川省抗生素工业研究所实验动物中心提供。
, http://www.100md.com
1.1.2 试剂：PGE2药盒，由中国医学科学院基础医学研究所提供。
1.2 方法
1.2.1 分组方法：将动物随机分为4组，每组8只，并分别给以相应处理。
(1)正常对照组：除每天按其它各组同样方法固定1次，每次20分钟外，余不作任何处理。
(2)模型组：于实验第一天在大鼠右后足垫部向踝关节方向注入福氏(Freund's)完全佐剂[1]，其它处理同正常组。
(3)电针治疗组：于实验第1天按模型组方法造模，第2天开始电针治疗，每日1次，连续6天。
(4)正常电针组：动物不经造型模处理，于实验第二天开始电针刺激，其方法同电针治疗组。
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1.2.2 电针方法：取大鼠右后肢的“昆仑”、“悬钟”穴，用毫针直刺0.3～0.5cm，固定后连接WQ-10C型电针仪，选用疏密波型，频率变动为20～100Hz(波型间动频为30次/min)；正常电针2～4V，强度由小逐渐增大，电针时间20min；共治疗6天，末次治疗后分别检测各组动物痛阈、局部皮温、肿胀度，检测后立即处死动物并从右后足踝关节0.5cm处剪下鼠足，分别取下组织块作相应处理后保存，用以检测组胺、5-HT、PGE2。
1.2.2 检测方法：
(1)痛阈测定：参照文献[2]，以辐射灯照射“昆仑”穴引起缩腿反应潜伏期来计算，共测3次，每次间隔5min，取其平均值。
(2)皮温测定：参照文献[2]，用半导体测温仪测定炎症局部皮肤温度。室温为26℃。
(3)肿胀度检测：参照文献[1]，用排水法测定足跖部容积和变化，以毫升(mL)为单位。
, 百拇医药
(4)组胺测定：参照吴氏方法[3]，测定波长为345/470nm。
(5)5-HT测定：按王氏等[4，5]所用方法，在波长364/480nm测定其含量。
(6)PGE2测定：由华西医科大学基础医学院同位素室运用放免法，以PGE2药盒测定。
1.2.2 统计方法：采用华西医科大学PEMS软件选用多组资料均数比较及两两比较处理。
2 结果
2.1 致炎效果
注射佐剂后第2天，右后肢足踝及足跖部出现红肿，活动减少，跛行或跷腿，局部皮温明显升高，肿胀，痛阈明显降低等典型炎症症状。表明炎症痛的实验动物模型已建成。
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2.2 电针对炎症大鼠痛阈、皮温、足容积的影响
电针治疗后大鼠痛阈明显升高，治疗组与模型组比较有高度统计学意义(P<0.01)，接近于正常组(P>0.05)，说明电针治疗能使炎症症状减轻。同时，对正常大鼠无明显影响。结果见表1。
表1 电针对炎症大鼠足部痛阈、皮温、足容积的影响(
±s) 组 别
痛阈(s)
皮温(℃)
肿胀度(mL)
正常对照组
7.41±0.38
, 百拇医药
29.31±0.53
1.03±0.13
正常电针组
7.74±1.01
30.06±0.90
1.04±0.11
模型组
4.29±0.40**
32.88±0.88**
2.63±0.33**
电针治疗组
, 百拇医药
6.84±0.67△△
31.63±0.83*△△
2.08±0.43*△△
与正常对照组比较：**P<0.01；△△与模型组比较，P<0.01
2.3 电针对大鼠炎症组织中组胺、5-HT、PGE2等介质含量的影响
电针治疗能明显降低组胺、5-HT及PGE2的含量，治疗组与模型组比较有高度统计学意义(P<0.05)，其中组胺、5-HT接近正常组(P>0.05)，结果见表2。
表2 电针对大鼠炎症组织中组胺、5HT、PGE的影响(±s) 组 别
, 百拇医药
组胺(μg/g)
5-HT(μg/g)
PGE2(μg/mg)
正常对照组
338.23±80.87
246.45±37.30
8.24±1.35
正常电针组
324.89±90.96
240.00±107.37
8.40±1.60
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模型组
639.27±194.21**
550.38±130.29**
11.92±1.89**
电针治疗组
408.59±118.08△△
353.59±144.01*△△
10.05±1.87*△△
与正常对照组比较：*P<0.05，**P<0.01；
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与模型组比较，△P<0.05，△△P<0.01，3 讨论
实验表明，由福氏佐剂所致炎症的局部具备红、肿、热、痛的典型特征，是一种确定的炎症。通常认为在致炎因子作用下局部组织产生和释放各种具有致痛作用的炎症介质，它们激活或致敏伤害性感受器从而产生痛敏[6，7]。其中组胺在炎症时释放增加，刺激并兴奋痛觉感受器成为外周致痛物质之一，并且它能舒张血管，增强其通透性，从而加重炎症反应；炎症时，血小板释放出5-HT，引起血管通透性增加而致炎症的肿痛加重；局部巨噬细胞在炎症时释放前列腺素，其中PGE2 可引起局部血管扩张，通透性增加，出现红斑和痛觉过敏，引起水肿和发热[6，8]，这些炎症介质在局部的产生和释放均能使局部小血管扩张，通透性增强，兴奋痛觉感受器而使炎症反应加重，所以其含量减少将减轻炎症的局部反应。本实验观察到,电针在改善炎症症状的同时，炎症局部组织中炎症介质的含量明显减少(尤以组胺、5-HT明显)，而对正常大鼠却无明显影响。由此我们认为电针抗炎镇痛作用可能与电针减少了局部组织中上述炎症介质的含量有关。
, 百拇医药
基金项目：四川省教委科研基金资助项目
作者简介：杨金蓉，女，1970年12月生；医学硕士；讲师；中西医结合(基础)专业；研究方向：中医药与生物化学的实验研究。
参考文献
[1]李仪奎主编.中药药理实验方法学.上海：上海科学技术出版社，1991.305
[2]赵飞跃，朱丽霞，李艳华.电针对大鼠急性实验性关节炎的治疗作用.针刺研究，1990，(3)：197
[3]吴其夏.体液因素和血液循环病理生理学.北京医科大学-中国协和医科大学联合出版社，1991.33
[4]王孝媛，顾萱娣，张建伟.鼠脑和脊髓中5-羟色胺、5-羟吲哚醋酸、去甲肾上腺素和多巴胺的快速测定方法.苏州医学院学报，1985.(1)：10
[5]徐淑云，卞如濂，陈修主编.药理实验方法学.北京：人民卫生出版社，1985.302
[6]毕河，高骥主编.炎症与抗炎药物.北京：人民卫生出版社，1992.1
[7]郑谋信.痛与镇痛.广州：广东科技出版社，1988.11
[8]李楚杰，卢兴，赵修竹.临床病理生理学(上册).广州：广东科技出版社，1990.60
(收稿日期:1998-03-15), 百拇医药
单位：杨金蓉 宋开源 梁繁荣 赵仓焕 杨介宾(成都中医药大学，四川 成都 610075)
关键词：佐剂性关节炎；炎症；炎症介质；电针；大鼠；&127；实验研究
成都中医药大学学报990122 摘 要：研究针刺抗炎镇痛的机理，通过在大鼠右后足垫部向踝关节方向注入Freund's 完全佐剂造模，然后取其“昆仑”、“悬钟”穴电针治疗，对照观察炎症局部组胺、5-羟色胺、前列腺素E2的含量变化，结果显示：电针治疗后大鼠痛阈明显升高，治疗组与模型组比较有高度统计学意义(P<0.01)，接近于正常组(P>0.05)，提示电针治疗能使炎症症状减轻。电针治疗能明显降低组胺、5-HT及PGE2的含量，治疗组与模型组比较，有高度统计学意义(P<0.05)，其中组胺、5-HT含量接近正常组(P>0.05。观察结果还显示，电针在改善炎症症状的同时，炎症局部组织中炎症介质的含量明显减少(尤以组胺、5-HT明显)，而对正常大鼠却无明显影响。由此认为电针抗炎镇痛作用可能与电针减少了局部组织中上述炎症介质的含量有关。
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中图分类号：R245;R684 文献标识码：B 文章编号：1004-0668(1999)01-0047-02
大鼠佐剂性关节炎模型是一种较为理想的接近临床的炎症痛模型。近年来许多学者以该模型进行针刺镇痛原理的研究。尽管关于针刺对佐剂性关节炎的治疗作用及针刺对中枢和外周镇痛机制研究方面都已有报道，但涉及针刺治疗对其局部炎症介质含量影响的报道甚少。为此我们进行了通过测定炎症局部组胺、5-羟色胺(5-HT)、前列腺素E2(PGE2)的含量变化来探索针刺抗炎镇痛的机理的研究，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 动物：选用健康SD成年大鼠，体重200g±2g，雌雄各半，由四川省抗生素工业研究所实验动物中心提供。
, http://www.100md.com
1.1.2 试剂：PGE2药盒，由中国医学科学院基础医学研究所提供。
1.2 方法
1.2.1 分组方法：将动物随机分为4组，每组8只，并分别给以相应处理。
(1)正常对照组：除每天按其它各组同样方法固定1次，每次20分钟外，余不作任何处理。
(2)模型组：于实验第一天在大鼠右后足垫部向踝关节方向注入福氏(Freund's)完全佐剂[1]，其它处理同正常组。
(3)电针治疗组：于实验第1天按模型组方法造模，第2天开始电针治疗，每日1次，连续6天。
(4)正常电针组：动物不经造型模处理，于实验第二天开始电针刺激，其方法同电针治疗组。
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1.2.2 电针方法：取大鼠右后肢的“昆仑”、“悬钟”穴，用毫针直刺0.3～0.5cm，固定后连接WQ-10C型电针仪，选用疏密波型，频率变动为20～100Hz(波型间动频为30次/min)；正常电针2～4V，强度由小逐渐增大，电针时间20min；共治疗6天，末次治疗后分别检测各组动物痛阈、局部皮温、肿胀度，检测后立即处死动物并从右后足踝关节0.5cm处剪下鼠足，分别取下组织块作相应处理后保存，用以检测组胺、5-HT、PGE2。
1.2.2 检测方法：
(1)痛阈测定：参照文献[2]，以辐射灯照射“昆仑”穴引起缩腿反应潜伏期来计算，共测3次，每次间隔5min，取其平均值。
(2)皮温测定：参照文献[2]，用半导体测温仪测定炎症局部皮肤温度。室温为26℃。
(3)肿胀度检测：参照文献[1]，用排水法测定足跖部容积和变化，以毫升(mL)为单位。
, 百拇医药
(4)组胺测定：参照吴氏方法[3]，测定波长为345/470nm。
(5)5-HT测定：按王氏等[4，5]所用方法，在波长364/480nm测定其含量。
(6)PGE2测定：由华西医科大学基础医学院同位素室运用放免法，以PGE2药盒测定。
1.2.2 统计方法：采用华西医科大学PEMS软件选用多组资料均数比较及两两比较处理。
2 结果
2.1 致炎效果
注射佐剂后第2天，右后肢足踝及足跖部出现红肿，活动减少，跛行或跷腿，局部皮温明显升高，肿胀，痛阈明显降低等典型炎症症状。表明炎症痛的实验动物模型已建成。
, http://www.100md.com
2.2 电针对炎症大鼠痛阈、皮温、足容积的影响
电针治疗后大鼠痛阈明显升高，治疗组与模型组比较有高度统计学意义(P<0.01)，接近于正常组(P>0.05)，说明电针治疗能使炎症症状减轻。同时，对正常大鼠无明显影响。结果见表1。
表1 电针对炎症大鼠足部痛阈、皮温、足容积的影响(
±s) 组 别痛阈(s)
皮温(℃)
肿胀度(mL)
正常对照组
7.41±0.38
, 百拇医药
29.31±0.53
1.03±0.13
正常电针组
7.74±1.01
30.06±0.90
1.04±0.11
模型组
4.29±0.40**
32.88±0.88**
2.63±0.33**
电针治疗组
, 百拇医药
6.84±0.67△△
31.63±0.83*△△
2.08±0.43*△△
与正常对照组比较：**P<0.01；△△与模型组比较，P<0.01
2.3 电针对大鼠炎症组织中组胺、5-HT、PGE2等介质含量的影响
电针治疗能明显降低组胺、5-HT及PGE2的含量，治疗组与模型组比较有高度统计学意义(P<0.05)，其中组胺、5-HT接近正常组(P>0.05)，结果见表2。
表2 电针对大鼠炎症组织中组胺、5HT、PGE的影响(
±s) 组 别, 百拇医药
组胺(μg/g)
5-HT(μg/g)
PGE2(μg/mg)
正常对照组
338.23±80.87
246.45±37.30
8.24±1.35
正常电针组
324.89±90.96
240.00±107.37
8.40±1.60
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模型组
639.27±194.21**
550.38±130.29**
11.92±1.89**
电针治疗组
408.59±118.08△△
353.59±144.01*△△
10.05±1.87*△△
与正常对照组比较：*P<0.05，**P<0.01；
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与模型组比较，△P<0.05，△△P<0.01，3 讨论
实验表明，由福氏佐剂所致炎症的局部具备红、肿、热、痛的典型特征，是一种确定的炎症。通常认为在致炎因子作用下局部组织产生和释放各种具有致痛作用的炎症介质，它们激活或致敏伤害性感受器从而产生痛敏[6，7]。其中组胺在炎症时释放增加，刺激并兴奋痛觉感受器成为外周致痛物质之一，并且它能舒张血管，增强其通透性，从而加重炎症反应；炎症时，血小板释放出5-HT，引起血管通透性增加而致炎症的肿痛加重；局部巨噬细胞在炎症时释放前列腺素，其中PGE2 可引起局部血管扩张，通透性增加，出现红斑和痛觉过敏，引起水肿和发热[6，8]，这些炎症介质在局部的产生和释放均能使局部小血管扩张，通透性增强，兴奋痛觉感受器而使炎症反应加重，所以其含量减少将减轻炎症的局部反应。本实验观察到,电针在改善炎症症状的同时，炎症局部组织中炎症介质的含量明显减少(尤以组胺、5-HT明显)，而对正常大鼠却无明显影响。由此我们认为电针抗炎镇痛作用可能与电针减少了局部组织中上述炎症介质的含量有关。
, 百拇医药
基金项目：四川省教委科研基金资助项目
作者简介：杨金蓉，女，1970年12月生；医学硕士；讲师；中西医结合(基础)专业；研究方向：中医药与生物化学的实验研究。
参考文献
[1]李仪奎主编.中药药理实验方法学.上海：上海科学技术出版社，1991.305
[2]赵飞跃，朱丽霞，李艳华.电针对大鼠急性实验性关节炎的治疗作用.针刺研究，1990，(3)：197
[3]吴其夏.体液因素和血液循环病理生理学.北京医科大学-中国协和医科大学联合出版社，1991.33
[4]王孝媛，顾萱娣，张建伟.鼠脑和脊髓中5-羟色胺、5-羟吲哚醋酸、去甲肾上腺素和多巴胺的快速测定方法.苏州医学院学报，1985.(1)：10
[5]徐淑云，卞如濂，陈修主编.药理实验方法学.北京：人民卫生出版社，1985.302
[6]毕河，高骥主编.炎症与抗炎药物.北京：人民卫生出版社，1992.1
[7]郑谋信.痛与镇痛.广州：广东科技出版社，1988.11
[8]李楚杰，卢兴，赵修竹.临床病理生理学(上册).广州：广东科技出版社，1990.60
(收稿日期:1998-03-15), 百拇医药