网织红细胞计数的方法探讨
作者：刘伣 侯淑智
单位：哈尔滨市242医院检验科,150066
关键词：
网织红细胞计数的方法探讨 网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜硷性的RYA物质，经煌焦细兰或新亚早兰活体染色后呈浅兰或深兰色网状结构。经多年临床经验摸索发现染色剂的pH值对检测结果有很大影响，当pH值调至7.4～7.8之间时可提高网织红细胞的检出率，为临床提供了可靠的依据。
试剂：
1.煌焦细兰 1克
2.枸椽酸纳 0.4克
将上述二试剂溶于pH值调于7.4～7.8(最好7.6)的生理盐水100ml中
1 方法：
取口径10mm试管一支，分别加试剂约0.1ml，未梢血2滴(贫血严重者加血4滴)充分混合，置室温，(冬季放37℃水浴箱或其它温暖处)20分钟，然后制片，要求头、体、尾清楚，在体尾部计数1000个红细胞中网织红细胞数，折算百分率报告之一。
特点：①染色时间长，着色均匀
②含有抗凝剂，防止血液凝固便于计数：
2 结果
网织红细胞的检查是对各种贫血的鉴别诊断和抗贫血药物的疗效观察主要依据。增生性贫血的网织红细胞，经改变血液浓度或调试溶液的pH后，明显提高网织红细胞数。这可能与红细胞带氧不足所致pH改变有关。
调与未调试剂pH结果观察：
pH6.5时(一般生理盐水pH为6.5)网织红细胞
±SD＝1.18±0.594%。
pH7.6时(调试后)+SD＝1.404±0.86%
经统计学处理t＝20.37，p<0.017，调与未调pH比较差异非常显著。
3 讨论
正常人血液pH为7.35～7.45，血液pH大于血红蛋白等电点，红细胞带负电，网织红细胞是尚未成熟的红细胞，其特点是胞浆内残存着多少不等的RNA为嗜硷性物质，显变性，贫血病人血液pH小于血液pH和血红蛋白等电点时，红细胞中残系RNA的羧基游离相对受抑制，影响红细胞中RNA与染料结合，使网织红细胞检出率降低。适当增加血与试剂比例可提高染色中的pH，或把试剂的pH值调至7.4～7.8之间，使其大于血红蛋白等电点，活体染色时，游离的羧基可与煌焦油兰充分结合，能提高网织红细胞检出率。
几点注意事项：
1.试剂pH超过7.8时可出现部分红细胞溶解。
2.室温低时，可延长染色时间，反之缩短染色时间。
3.用氢氧化钠调试剂pH，可用pH试纸测之。
4.网织红细胞比一般红细胞略大，故在涂片的尾部和两边分布较多，因此在计数时要兼顾到这些区域。
参考文献：
1 叶应妩，王毓三主编.全国临床检验操作规程.第一版.东京大学出版社，1991,10.
2 朱忠勇.陈之航主编.临床医学检验.第一版.上海科学出版社，1978.4，12.
3 朱忠勇.美国医学检验学.第一版.人民军医出版社，1992.11，17.
1996年5月收稿, 百拇医药
单位：哈尔滨市242医院检验科,150066
关键词：
网织红细胞计数的方法探讨 网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜硷性的RYA物质，经煌焦细兰或新亚早兰活体染色后呈浅兰或深兰色网状结构。经多年临床经验摸索发现染色剂的pH值对检测结果有很大影响，当pH值调至7.4～7.8之间时可提高网织红细胞的检出率，为临床提供了可靠的依据。
试剂：
1.煌焦细兰 1克
2.枸椽酸纳 0.4克
将上述二试剂溶于pH值调于7.4～7.8(最好7.6)的生理盐水100ml中
1 方法：
取口径10mm试管一支，分别加试剂约0.1ml，未梢血2滴(贫血严重者加血4滴)充分混合，置室温，(冬季放37℃水浴箱或其它温暖处)20分钟，然后制片，要求头、体、尾清楚，在体尾部计数1000个红细胞中网织红细胞数，折算百分率报告之一。
特点：①染色时间长，着色均匀
②含有抗凝剂，防止血液凝固便于计数：
2 结果
网织红细胞的检查是对各种贫血的鉴别诊断和抗贫血药物的疗效观察主要依据。增生性贫血的网织红细胞，经改变血液浓度或调试溶液的pH后，明显提高网织红细胞数。这可能与红细胞带氧不足所致pH改变有关。
调与未调试剂pH结果观察：
pH6.5时(一般生理盐水pH为6.5)网织红细胞
±SD＝1.18±0.594%。pH7.6时(调试后)
+SD＝1.404±0.86%经统计学处理t＝20.37，p<0.017，调与未调pH比较差异非常显著。
3 讨论
正常人血液pH为7.35～7.45，血液pH大于血红蛋白等电点，红细胞带负电，网织红细胞是尚未成熟的红细胞，其特点是胞浆内残存着多少不等的RNA为嗜硷性物质，显变性，贫血病人血液pH小于血液pH和血红蛋白等电点时，红细胞中残系RNA的羧基游离相对受抑制，影响红细胞中RNA与染料结合，使网织红细胞检出率降低。适当增加血与试剂比例可提高染色中的pH，或把试剂的pH值调至7.4～7.8之间，使其大于血红蛋白等电点，活体染色时，游离的羧基可与煌焦油兰充分结合，能提高网织红细胞检出率。
几点注意事项：
1.试剂pH超过7.8时可出现部分红细胞溶解。
2.室温低时，可延长染色时间，反之缩短染色时间。
3.用氢氧化钠调试剂pH，可用pH试纸测之。
4.网织红细胞比一般红细胞略大，故在涂片的尾部和两边分布较多，因此在计数时要兼顾到这些区域。
参考文献：
1 叶应妩，王毓三主编.全国临床检验操作规程.第一版.东京大学出版社，1991,10.
2 朱忠勇.陈之航主编.临床医学检验.第一版.上海科学出版社，1978.4，12.
3 朱忠勇.美国医学检验学.第一版.人民军医出版社，1992.11，17.
1996年5月收稿, 百拇医药