抗肿瘤坏死因子抗体对胰腺炎时肺组织的保护作用
作者：罗昆仑 何振平 李昆 段恒春 马宽生
单位：第三军医大学西南医院肝胆外科(Ⅱ)
关键词：急性出血坏死性胰腺炎 急性肺损伤 肿瘤坏死因子α单克隆抗体 大鼠
江苏医药990202 摘要 目的：为了解TNFαMAb对大鼠AHNP时ALI是否具有防治作用。方法：利用AHNP并发ALI大鼠模型，将实验大鼠随机分为三组：假手术组、AHNP组和TNFαMAb预处理组，动态观察大鼠24小时存活情况、PaO2和PaCO2、肺组织MPO活性变化、肺含水量改变以及胰、肺组织的病理改变。结果：TNFαMAb尽管没有明显改变胰腺组织的病变，但能明显降低AHNP大鼠24小时死亡率(TNFαMAb预处理组10%，AHNP组50%，P<0.05)，减少肺脏PMN的聚集，减轻肺组织的损伤程度。结论：TNFα是AHNP引起ALI发生的重要炎症介质，TNFαMAb通过阻断TNFα的作用和减少肺内PMN的聚集，对AHNP时肺组织起保护作用。
, http://www.100md.com
Protective Effects of Tumor Necrosis Factor α Monoclonal Antibody on Lung Tissue with Acute Hemorrhagic and Necrotic Pancreatitis
Luo Kunlen et al
Clinical Center of Hepatobiliary Surgery， Southwestern Hospital，the 3rd Military Medical University， Chongqing
Abstract Objectives： To study the effects of tumor necrosis factor α monoclonal antibody (TNFαMAb) on acute lung injury (ALI) induced by acute hemorrhagic and necrotic pancreatitis (AHNP) in rats. Methods： Adopting an model of rat AHNP-induced ALI， experimental rats were divided into three groups： control group， AHNP group and TNFαMAb group. The changes of 24-hour-rat death rate， PaO2 and PaCO2， pulmonary myeloperoxidase (MPO) activity， lung water contents and pathological changes in lung were examined. Results： Although TNFαMAb didn?t change the injury degree of pancreas， TNFαMAb significantly decreased the 24-hour-rat death rats (TNFαMAb group： 10%， AHNP group： 50%，P<0.05)， reduced the pulmonary polymorphonuclear neutrophil (PMN)， improved the pulmonary injury degrees. Conclusions： TNFα is an important inflammatory medium for AHNP-induced ALI. TNFαMAb can neutralize TNFα activity and reduce the PMN accumulation in lung tissue， which preserve the lung tissue with AHNP.
, 百拇医药
Key words Acute hemorrhagic and necrotic pancreatitis Acute lung injury Rat Tumor necrosis factor α monoclonal antibody
急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)发病凶险，病死率高达50%，在发病一周内死亡者，多由于急性肺损伤(ALI)所致[1]。可见ALI是影响AHNP患者预后的关键。近年来的研究表明，肿瘤坏死因子α(TNFα)与AHNP时ALI的发生有重要关联，是AHNP时诱导ALI发生的重要介质[2]。本实验应用肿瘤坏死因子α单克隆抗体(TNFαMAb)，意在阻断AHNP时TNFα的作用，以期达到防止ALI发生的目的。
材料与方法
一、实验动物与分组
, http://www.100md.com
Wistar大鼠110只，体重200±20g，雌雄不限，由四川省中药研究所提供，随机将大鼠分为：假手术组(Ⅰ)：n＝30只，AHNP组(Ⅱ)：n＝40只，和TNFαMAb预处理组(Ⅲ)：n＝40只，各组动物又随机均分入1、3、6、12、24小时5个时相点，即时活杀取材，检测有关指标。另取Wistar大鼠40只，要求同上，随机均分入两组：AHNP组和TNFαMAb治疗组，动物模型制作后连续观察24小时，计算其动物死亡率。
二、动物模型制备
参照Milani等报道的模型稍加改进制作AHNP并发ALI大鼠模型[3]。即大鼠术前12小时禁食，不禁水。10%戊巴比妥钠30mg/kg麻醉动物后，正中切口入腹，于肝十二指肠韧带肝门侧用小动脉夹暂时阻闭胆管，由十二指肠前壁进针，经乳头部插进入胆胰管内，夹闭胆胰管出口，以0.1ml/min匀速注入5%牛磺胆酸钠(0.1ml/kg.Sigma)，10分钟后去除动脉夹，关腹。TNFαMAb预处理组：在模型制作前15分钟自鼠尾静脉注入TNFαMAb(5mg/kg，第四军医大学免疫教研室惠赠)，其余步骤同AHNP组。假手术组：除胆管内不注入5%牛磺胆酸钠外，余同AHNP组。
, 百拇医药
三、观察指标及方法
1.血气分析
动物活杀前抽取腹主动脉血，立即在AVL-990自动分析仪(美国)进行测定。
2.肺组织髓过氧酶(MPO)活性测定
各组动物活杀后，取肺组织0.1g，按罗武生等建立的方法测定[4]。
3.肺含水量的测定
动物活杀后，取左肺组织用分析天平称湿重，置90℃的电热干燥箱(武汉)内烘烤72小时，再称干重，结果以肺组织湿/干比重＝(肺湿重-肺干重)÷肺干重来表示肺含水量变化。
4.病理观察
按时相点活杀动物，取胰腺及右肺下叶各1块组织，10%甲醛固定，脱水，石腊包埋，切片，光镜下观察。
, http://www.100md.com
5.统计学处理
实验数据均以
±s表示。采用华西医大PEMS医用统计程序包处理，再根据不同情况分别采用χ2检验、单因素方差分析及线性相关分析。
结 果
一、动脉血气分析
AHNP组模型制作后PaO2呈进行性下降，至24小时达最低点，与假手术组比较差异非常显著(P<0.01)。PaCO2则在6、12和24小时升高，较假手术组差异非常显著(P<0.01)。TNFαMAb预处理组能明显抑制PaO2的下降和PaCO2的升高。结果见表1、2。
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表1 动脉血PaO2的变化(mmHg) 组别
模型制作后时相点(小时)
1
3
6
12
24
Ⅰ
98.9±5.7
94.3±4.8
95.6±8.5
96.2±5.5
, 百拇医药
95.0±7.8
Ⅱ
89.7±2.9**
85.6±6.1**
80.8±5.2**
75.5±7.8**
62.2±6.2**
Ⅲ
95.6±3.5△△
96.1±3.9△△
, 百拇医药
87.9±5.3**△
85.9±7.2**△
77.1±7.6**△△
*(**)：与Ⅰ组比较P<0.05(P<0.01)；△(△△)：与Ⅱ组比较P<0.05(P<0.01)表2 动脉血PaCO2的变化(mmHg) 组别
模型制作后时相点(小时)
1
3
6
12
, 百拇医药
24
Ⅰ
41.6±3.1
40.1±4.5
41.2±2.7
40.3±3.3
39.5±2.2
Ⅱ
42.3±4.4
41.8±4.1
48.7±2.8**
57.1±5.1**
, 百拇医药
59.3±4.5**
Ⅲ
39.2±2.8
40.2±2.6
44.4±3.2**△
50.2±4.4**△
51.0±3.5**△△
*(**)与Ⅰ组比较P<0.05(P<0.01)；△(△△)与Ⅱ组比较P<0.05(P<0.01)
二、肺组织MPO活性变化
, 百拇医药
AHNP组肺组织中MPO活性呈逐渐升高趋势，12小时达高峰，较假手术组差异非常显著(P<0.01)。TNFαMAb预处理组肺中MPO活性升高幅较AHNP组显著降低(P<0.01)，结果见表3。
表3 肺组织MPO活性的变化(u) 组别
模型制作后时相点(小时)
1
3
6
12
24
Ⅰ
1.42±0.62
, 百拇医药
1.31±0.58
1.43±0.71
1.68±0.50
1.47±0.57
Ⅱ
2.05±0.79*
2.14±0.60**
4.22±0.80**
7.71±0.73**
7.62±1.05**
, http://www.100md.com
Ⅲ
1.13±0.62△
1.18±0.63△
2.98±1.04**△
3.43±1.13**△
3.31±1.02**△△
*(**)与Ⅰ组比较P<0.05(P<0.01)；△(△△)与Ⅱ组比较P<0.05(P<0.01)
三、肺组织含水量变化
AHNP组模型制作后，肺含水量呈逐渐增加趋势，以12小时最为显著，与假手术组比较差异非常显著(P<0.01)。TNFαMAb预处理组仅在模型制作后6小时肺含水量开始明显增加，至12小时达高峰，随后下降，但到24小时仍显著高于假手术组(P<0.05)，但较AHNP组的升高幅度明显降低。结果见表4。
, 百拇医药
表4 肺含水量的变化 组别
模型制作后时相点(小时)
1
3
6
12
24
Ⅰ
3.37±0.22
3.42±0.19
3.45±0.14
3.46±0.20
, 百拇医药 3.40±0.15
Ⅱ
3.58±0.18
3.69±0.26*
3.86±0.13**
4.05±0.18**
3.89±0.17**
Ⅲ
3.43±0.22
3.48±0.33
3.62±0.16*△
, 百拇医药
3.80±0.12**△
3.66±0.21*
*(**)与Ⅰ组比较P<0.05(P<0.01)；△(△△)与Ⅱ组比较P<0.05(P<0.01)
四、病理观察结果
胰腺：光镜下，AHNP组各时相点动物胰腺组织均可见出血坏死灶、间质水肿、炎细胞浸润和胰腺及胰周组织脂肪坏死，呈典型的AHNP病理改变；TNFαMAb预处理组胰腺病理改变较AHNP组无明显变化。
肺脏：光镜下，AHNP组随时相点延长，肺脏病理改变逐渐加重，呈不同程度的肺泡和肺间质出血、水肿，灶性或大片肺不张，大量炎细胞浸润，肺组织结构紊乱等典型的ALI病理改变。TNFαMAb预处理组模型制作6小时开始出现轻度肺水肿，肺组织有少量PMN浸润，12～24小时仅见局灶性肺泡腔出血、少量炎细胞浸润、灶性肺不张，病变较AHNP组相应各时间点明显减轻。
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五、动物死亡率
假手术组长期存活。AHNP组24小时动物死亡率为50%(10/20)；TNFαMAb预处理组则为10%(2/20)，两组差异显著(P<0.05)。
六、线性相关分析
AHNP组肺组织MPO活性与肺损伤性指标PaO2和肺含水量分别呈显著负、正相关(r＝-0.8799，P<0.05；r＝0.9019，P<0.05)；TNFαMAb组MPO活性与PaO2和肺含水量分别呈显著负、正相关(r＝-0.8787，P<0.05；r＝0.9735，P<0.01)。
讨 论
AHNP并发ALI是AHNP患者死亡的主要原因之一，其机理十分复杂。新近的实验研究提示[5]：可能与其它疾病如休克、脓毒症、缺血再灌注所引起的肺损伤的发病机制相似，也是由炎症介质参与并介导的多步骤的继发性损伤过程：①损伤或炎症部位释放的前炎症介质如血小板活化因子、细胞因子等启动和激活中性粒细胞；②增加中性粒细胞在肺内的聚集；③激活的中性粒细胞与血管内皮细胞相粘附；④粘附的中性粒细胞释放损伤性介质如弹性蛋白酶和氧自由基；⑤损伤血管内皮细胞导致肺微血管壁通透性增加；⑥肺水肿进一步增加。
, 百拇医药
我们利用牛磺胆酸钠诱导的AHNP并发ALI大鼠模型，观察发现随模型制作后时相延长，大鼠PaCO2、肺含水量以及作为中性粒细胞聚集程度指标的髓过氧化酶(MPO)活性均逐渐增加，肺脏病理改变明显，PaO2逐渐下降。肺内中性粒细胞的聚集程度与肺损伤严重程度呈显著正相关。结果表明：AHNP时肺脏大量聚集的中性粒细胞是引起ALI发生的重要原因。
TNFα主要由单核巨噬细胞产生，是一类重要的炎症、免疫调节物，具有双重作用：适量释放可提高白细胞对病原体清除能力，促进组织的修复；但过量释放对机体具有强烈的毒性作用[6]。Guice等在急性胰腺炎动物模型中首先发现：在胰腺炎诱发的早期即有血浆TNFα水平的升高[7]。Bank等发现急性胰腺炎病人血浆TNFα的升高与胰外器官功能失常密切相关。由此，人们认为：TNFα是AHNP诱发胰外器官功能失调的重要启动介质，阻断TNFα作用途径可能能防治胰腺炎时肺组织的损伤[2]。
, 百拇医药
本实验预先应用TNFαMAb后，发现：胰腺病变变化不明显，但能明显降低PaCO2、肺含水量以及MPO活性的升高幅度，减缓PaO2的下降，明显减轻肺脏病理改变，同时也明显减少肺内中性粒细胞的聚集，动物24小时死亡率从AHNP组的50%降至10%。结果表明：TNFαMAb对AHNP时肺组织具有保护作用，其机理可能是，TNFαMAb通过阻断TNFα的作用和减少肺内PMN的聚集，以及PMN所释放的氧自由基等损伤性介质，对AHNP肺组织起保护作用[8]。
邮政编码：400038
参考文献
[1] Steinberg W， et al. N Engl J Med 1994；330(17)：1198.
, http://www.100md.com
[2] Formela LJ， et al. Br J Surg 1995；82：6.
[3] Milani R， et al. Crit Care Med 1995；23：1882.
[4] 罗武生，等.中国药理学通报 1990；6：264.
[5] Yamanaka K， et al. Am J physiol 1997；(1ptl)：G23.
[6] Weiss SJ. N Engl J Med 1989；320：365.
[7] Guice KS， et al. Ann Surg 1989；210(6)：740.
[8] Tsujimoto M， et al. Biochem Biophys Res 1986；137：1094.
(1998年3月24日收稿 同年6月25日修回), http://www.100md.com
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关键词：急性出血坏死性胰腺炎 急性肺损伤 肿瘤坏死因子α单克隆抗体 大鼠
江苏医药990202 摘要 目的：为了解TNFαMAb对大鼠AHNP时ALI是否具有防治作用。方法：利用AHNP并发ALI大鼠模型，将实验大鼠随机分为三组：假手术组、AHNP组和TNFαMAb预处理组，动态观察大鼠24小时存活情况、PaO2和PaCO2、肺组织MPO活性变化、肺含水量改变以及胰、肺组织的病理改变。结果：TNFαMAb尽管没有明显改变胰腺组织的病变，但能明显降低AHNP大鼠24小时死亡率(TNFαMAb预处理组10%，AHNP组50%，P<0.05)，减少肺脏PMN的聚集，减轻肺组织的损伤程度。结论：TNFα是AHNP引起ALI发生的重要炎症介质，TNFαMAb通过阻断TNFα的作用和减少肺内PMN的聚集，对AHNP时肺组织起保护作用。
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Protective Effects of Tumor Necrosis Factor α Monoclonal Antibody on Lung Tissue with Acute Hemorrhagic and Necrotic Pancreatitis
Luo Kunlen et al
Clinical Center of Hepatobiliary Surgery， Southwestern Hospital，the 3rd Military Medical University， Chongqing
Abstract Objectives： To study the effects of tumor necrosis factor α monoclonal antibody (TNFαMAb) on acute lung injury (ALI) induced by acute hemorrhagic and necrotic pancreatitis (AHNP) in rats. Methods： Adopting an model of rat AHNP-induced ALI， experimental rats were divided into three groups： control group， AHNP group and TNFαMAb group. The changes of 24-hour-rat death rate， PaO2 and PaCO2， pulmonary myeloperoxidase (MPO) activity， lung water contents and pathological changes in lung were examined. Results： Although TNFαMAb didn?t change the injury degree of pancreas， TNFαMAb significantly decreased the 24-hour-rat death rats (TNFαMAb group： 10%， AHNP group： 50%，P<0.05)， reduced the pulmonary polymorphonuclear neutrophil (PMN)， improved the pulmonary injury degrees. Conclusions： TNFα is an important inflammatory medium for AHNP-induced ALI. TNFαMAb can neutralize TNFα activity and reduce the PMN accumulation in lung tissue， which preserve the lung tissue with AHNP.
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Key words Acute hemorrhagic and necrotic pancreatitis Acute lung injury Rat Tumor necrosis factor α monoclonal antibody
急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)发病凶险，病死率高达50%，在发病一周内死亡者，多由于急性肺损伤(ALI)所致[1]。可见ALI是影响AHNP患者预后的关键。近年来的研究表明，肿瘤坏死因子α(TNFα)与AHNP时ALI的发生有重要关联，是AHNP时诱导ALI发生的重要介质[2]。本实验应用肿瘤坏死因子α单克隆抗体(TNFαMAb)，意在阻断AHNP时TNFα的作用，以期达到防止ALI发生的目的。
材料与方法
一、实验动物与分组
, http://www.100md.com
Wistar大鼠110只，体重200±20g，雌雄不限，由四川省中药研究所提供，随机将大鼠分为：假手术组(Ⅰ)：n＝30只，AHNP组(Ⅱ)：n＝40只，和TNFαMAb预处理组(Ⅲ)：n＝40只，各组动物又随机均分入1、3、6、12、24小时5个时相点，即时活杀取材，检测有关指标。另取Wistar大鼠40只，要求同上，随机均分入两组：AHNP组和TNFαMAb治疗组，动物模型制作后连续观察24小时，计算其动物死亡率。
二、动物模型制备
参照Milani等报道的模型稍加改进制作AHNP并发ALI大鼠模型[3]。即大鼠术前12小时禁食，不禁水。10%戊巴比妥钠30mg/kg麻醉动物后，正中切口入腹，于肝十二指肠韧带肝门侧用小动脉夹暂时阻闭胆管，由十二指肠前壁进针，经乳头部插进入胆胰管内，夹闭胆胰管出口，以0.1ml/min匀速注入5%牛磺胆酸钠(0.1ml/kg.Sigma)，10分钟后去除动脉夹，关腹。TNFαMAb预处理组：在模型制作前15分钟自鼠尾静脉注入TNFαMAb(5mg/kg，第四军医大学免疫教研室惠赠)，其余步骤同AHNP组。假手术组：除胆管内不注入5%牛磺胆酸钠外，余同AHNP组。
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三、观察指标及方法
1.血气分析
动物活杀前抽取腹主动脉血，立即在AVL-990自动分析仪(美国)进行测定。
2.肺组织髓过氧酶(MPO)活性测定
各组动物活杀后，取肺组织0.1g，按罗武生等建立的方法测定[4]。
3.肺含水量的测定
动物活杀后，取左肺组织用分析天平称湿重，置90℃的电热干燥箱(武汉)内烘烤72小时，再称干重，结果以肺组织湿/干比重＝(肺湿重-肺干重)÷肺干重来表示肺含水量变化。
4.病理观察
按时相点活杀动物，取胰腺及右肺下叶各1块组织，10%甲醛固定，脱水，石腊包埋，切片，光镜下观察。
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5.统计学处理
实验数据均以
±s表示。采用华西医大PEMS医用统计程序包处理，再根据不同情况分别采用χ2检验、单因素方差分析及线性相关分析。结 果
一、动脉血气分析
AHNP组模型制作后PaO2呈进行性下降，至24小时达最低点，与假手术组比较差异非常显著(P<0.01)。PaCO2则在6、12和24小时升高，较假手术组差异非常显著(P<0.01)。TNFαMAb预处理组能明显抑制PaO2的下降和PaCO2的升高。结果见表1、2。
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表1 动脉血PaO2的变化(mmHg) 组别
模型制作后时相点(小时)
1
3
6
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24
Ⅰ
98.9±5.7
94.3±4.8
95.6±8.5
96.2±5.5
, 百拇医药
95.0±7.8
Ⅱ
89.7±2.9**
85.6±6.1**
80.8±5.2**
75.5±7.8**
62.2±6.2**
Ⅲ
95.6±3.5△△
96.1±3.9△△
, 百拇医药
87.9±5.3**△
85.9±7.2**△
77.1±7.6**△△
*(**)：与Ⅰ组比较P<0.05(P<0.01)；△(△△)：与Ⅱ组比较P<0.05(P<0.01)表2 动脉血PaCO2的变化(mmHg) 组别
模型制作后时相点(小时)
1
3
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, 百拇医药
24
Ⅰ
41.6±3.1
40.1±4.5
41.2±2.7
40.3±3.3
39.5±2.2
Ⅱ
42.3±4.4
41.8±4.1
48.7±2.8**
57.1±5.1**
, 百拇医药
59.3±4.5**
Ⅲ
39.2±2.8
40.2±2.6
44.4±3.2**△
50.2±4.4**△
51.0±3.5**△△
*(**)与Ⅰ组比较P<0.05(P<0.01)；△(△△)与Ⅱ组比较P<0.05(P<0.01)
二、肺组织MPO活性变化
, 百拇医药
AHNP组肺组织中MPO活性呈逐渐升高趋势，12小时达高峰，较假手术组差异非常显著(P<0.01)。TNFαMAb预处理组肺中MPO活性升高幅较AHNP组显著降低(P<0.01)，结果见表3。
表3 肺组织MPO活性的变化(u) 组别
模型制作后时相点(小时)
1
3
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Ⅰ
1.42±0.62
, 百拇医药
1.31±0.58
1.43±0.71
1.68±0.50
1.47±0.57
Ⅱ
2.05±0.79*
2.14±0.60**
4.22±0.80**
7.71±0.73**
7.62±1.05**
, http://www.100md.com
Ⅲ
1.13±0.62△
1.18±0.63△
2.98±1.04**△
3.43±1.13**△
3.31±1.02**△△
*(**)与Ⅰ组比较P<0.05(P<0.01)；△(△△)与Ⅱ组比较P<0.05(P<0.01)
三、肺组织含水量变化
AHNP组模型制作后，肺含水量呈逐渐增加趋势，以12小时最为显著，与假手术组比较差异非常显著(P<0.01)。TNFαMAb预处理组仅在模型制作后6小时肺含水量开始明显增加，至12小时达高峰，随后下降，但到24小时仍显著高于假手术组(P<0.05)，但较AHNP组的升高幅度明显降低。结果见表4。
, 百拇医药
表4 肺含水量的变化 组别
模型制作后时相点(小时)
1
3
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Ⅰ
3.37±0.22
3.42±0.19
3.45±0.14
3.46±0.20
, 百拇医药 3.40±0.15
Ⅱ
3.58±0.18
3.69±0.26*
3.86±0.13**
4.05±0.18**
3.89±0.17**
Ⅲ
3.43±0.22
3.48±0.33
3.62±0.16*△
, 百拇医药
3.80±0.12**△
3.66±0.21*
*(**)与Ⅰ组比较P<0.05(P<0.01)；△(△△)与Ⅱ组比较P<0.05(P<0.01)
四、病理观察结果
胰腺：光镜下，AHNP组各时相点动物胰腺组织均可见出血坏死灶、间质水肿、炎细胞浸润和胰腺及胰周组织脂肪坏死，呈典型的AHNP病理改变；TNFαMAb预处理组胰腺病理改变较AHNP组无明显变化。
肺脏：光镜下，AHNP组随时相点延长，肺脏病理改变逐渐加重，呈不同程度的肺泡和肺间质出血、水肿，灶性或大片肺不张，大量炎细胞浸润，肺组织结构紊乱等典型的ALI病理改变。TNFαMAb预处理组模型制作6小时开始出现轻度肺水肿，肺组织有少量PMN浸润，12～24小时仅见局灶性肺泡腔出血、少量炎细胞浸润、灶性肺不张，病变较AHNP组相应各时间点明显减轻。
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五、动物死亡率
假手术组长期存活。AHNP组24小时动物死亡率为50%(10/20)；TNFαMAb预处理组则为10%(2/20)，两组差异显著(P<0.05)。
六、线性相关分析
AHNP组肺组织MPO活性与肺损伤性指标PaO2和肺含水量分别呈显著负、正相关(r＝-0.8799，P<0.05；r＝0.9019，P<0.05)；TNFαMAb组MPO活性与PaO2和肺含水量分别呈显著负、正相关(r＝-0.8787，P<0.05；r＝0.9735，P<0.01)。
讨 论
AHNP并发ALI是AHNP患者死亡的主要原因之一，其机理十分复杂。新近的实验研究提示[5]：可能与其它疾病如休克、脓毒症、缺血再灌注所引起的肺损伤的发病机制相似，也是由炎症介质参与并介导的多步骤的继发性损伤过程：①损伤或炎症部位释放的前炎症介质如血小板活化因子、细胞因子等启动和激活中性粒细胞；②增加中性粒细胞在肺内的聚集；③激活的中性粒细胞与血管内皮细胞相粘附；④粘附的中性粒细胞释放损伤性介质如弹性蛋白酶和氧自由基；⑤损伤血管内皮细胞导致肺微血管壁通透性增加；⑥肺水肿进一步增加。
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我们利用牛磺胆酸钠诱导的AHNP并发ALI大鼠模型，观察发现随模型制作后时相延长，大鼠PaCO2、肺含水量以及作为中性粒细胞聚集程度指标的髓过氧化酶(MPO)活性均逐渐增加，肺脏病理改变明显，PaO2逐渐下降。肺内中性粒细胞的聚集程度与肺损伤严重程度呈显著正相关。结果表明：AHNP时肺脏大量聚集的中性粒细胞是引起ALI发生的重要原因。
TNFα主要由单核巨噬细胞产生，是一类重要的炎症、免疫调节物，具有双重作用：适量释放可提高白细胞对病原体清除能力，促进组织的修复；但过量释放对机体具有强烈的毒性作用[6]。Guice等在急性胰腺炎动物模型中首先发现：在胰腺炎诱发的早期即有血浆TNFα水平的升高[7]。Bank等发现急性胰腺炎病人血浆TNFα的升高与胰外器官功能失常密切相关。由此，人们认为：TNFα是AHNP诱发胰外器官功能失调的重要启动介质，阻断TNFα作用途径可能能防治胰腺炎时肺组织的损伤[2]。
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本实验预先应用TNFαMAb后，发现：胰腺病变变化不明显，但能明显降低PaCO2、肺含水量以及MPO活性的升高幅度，减缓PaO2的下降，明显减轻肺脏病理改变，同时也明显减少肺内中性粒细胞的聚集，动物24小时死亡率从AHNP组的50%降至10%。结果表明：TNFαMAb对AHNP时肺组织具有保护作用，其机理可能是，TNFαMAb通过阻断TNFα的作用和减少肺内PMN的聚集，以及PMN所释放的氧自由基等损伤性介质，对AHNP肺组织起保护作用[8]。
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参考文献
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[8] Tsujimoto M， et al. Biochem Biophys Res 1986；137：1094.
(1998年3月24日收稿 同年6月25日修回), http://www.100md.com