新生儿高胆红素血症细胞因子的研究
作者：赵 萍 王 琳 冯小三 黄绍敏
单位：同济医科大学附属协和医院儿科 武汉 430022
关键词：高胆红素血症；新生儿；细胞因子
医学新知杂志990203 摘要 高胆红素血症是新生儿期最常见症状之一，本研究探讨了感染性黄疸和非感染性黄疸与细胞因子肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)的关系。结果显示感染性黄疸患儿的IL-6、TNFα均极显著高于非感染性患儿组(P<0.01)，TL-8的水平显著高于非感染组(P<0.05)，表明感染性黄疸患儿机体免疫系统产生了积极反应，上述细胞因子均参与了机体的炎症反应过程，而IL-8的产生没有IL-6和TNFα升高显著，可能与IL-8主要参与局部炎症反应有关。提示感染性黄疸患儿血清中上述细胞因子显著增高时，可指导临床积极预防核黄疸发生。
A Study of Cytokines in Neonates
, http://www.100md.com
with Hyperbilirubinemia
Zhao Ping， Wang Lin， Feng Xiaosan，et al
Department of Pediatrics. Union Hospitel. Tong Ji Medical Uni. Wuhan 430022
Abstract Hyperbilirubinemia is one of the most common symptoms in neonate. This study investigated the relationship between infectious jaundice or non-infectious jaundice and cytokines, including tumor necorosis fector α(TNFα), interleukin 6(IL-6), interleukin 8(IL-8). The result showed that the level of IL-6, IL-8 and TNFα from the neonates with infectious jaundice were significantly higher than that of the neonates with non-infectious jaundice (for IL-6, TNFα, P<0.01, for IL-8, P<0.05. These results indicated that the immune response was activated in those neonates with infectious jaundice, and the above cytokines were involved. The increasing of IL-8 was lower than IL-6 and TNFα may reflect the difference of their function, since IL-8 mainly involved in the local immune response. The level of IL-6, TNFα and IL-8 might be helpful to decide whether the treatment and preventions of kernicterus is necesary.
, 百拇医药
Key words Hyperbilirubinemia; Infant; Newborn; Cytokines
高胆红素血症是新生儿期最常见症状之一，而病理性黄疸又分感染性和非感染性两类。近年来，随着免疫学的迅速发展，感染性疾病和细胞因子的研究已越来越多，研究发现TNF、IL-6和IL-8在新生儿感染性疾病中有重要作用，是机体抗感染的重要炎性细胞因子[1]。因此，我们检测了感染性黄疸和非感染性黄疸患儿血清中TNFα、IL-6和IL-8的水平，以探讨细胞因子和新生儿高胆红素血症之间的关系。
1 材料和方法
1.1 研究对象及实验分组 将1995年10月～1996年12月在我院新生儿科诊断为病理性黄疸，血清总胆红素均大于256.50 μmol/L 的患儿39例，分为两组。感染性黄疸患儿组16例：临床诊断为新生儿急性病毒性肝炎2例、新生儿败血症4例、脓疤疱、脐炎10例。非感染性黄疸患儿组23例：包括母乳性黄疸、溶血性黄疸、非感染性疾病因素导致的黄疸等。两组间患儿胎龄、日龄、红细胞压积、出生体重无明显差异。另设健康对照组：本院出生健康新生儿30例(早产儿组和足月儿组各15例)；成人组：本院血库健康成人志愿者16例。
, http://www.100md.com
1.2 实验方法 凡血清总胆红素>256.50 μmol/L患儿入院后立即采静脉血，采血前均无使用丙种球蛋白、激素、全血、血浆史，然后取血清冻存于-70℃低温冰箱待测。血清TNFα、IL-6和IL-8测定：采用双抗体夹心法(ELISA)，操作过程严格按说明书进行，试剂盒由第四军医大学免疫教研室提供。
1.3 统计学处理 数据以
±s表示，采用Wilcoxon法、Spearman等级相关法处理。
2 结果
2.1 健康新生儿与成人的TNFα、IL-6 IL-8的水平比较 结果见表1。
表1 健康新生儿与成人IL-6、TNFα以及IL-8水平的比较 组 别
, 百拇医药 例 数
IL-6(ng/L)
TNFα(ng/L)
IL-8(ng/L)
早产儿组
15
76.4±32.1
80.2±31.4
86.7±40.9
足月儿组
15
59.4±37.8
, http://www.100md.com
91.1±27.6
121.3±63.3
成人组
16
81.5±46.7
62.8±18.3
91.2±72.6
经统计学处理，各个细胞因子三组之间比较P>0.05，差异无显著性。
2.2 感染性黄疸和非感染性黄疸患儿TNFα、IL-6和IL-8的水平比较 结果见表2。表2 感染性黄疸与非感染性黄疸患儿IL-6、TNF和IL-8水平的比较 组 别
例 数
, 百拇医药
IL-6(ng/L)
TNFα(ng/L)
IL-8(ng/L)
感染组
16
19 710.90±1367.4
2 827.23±295.7
141.5±52.7
非感染组
23
73.82±34.6
113.83±41.3
, http://www.100md.com
85.7±28.9
经统计学处理，感染性黄疸患儿的TNFα、IL-6水平均极显著高于非感染性黄疸患儿组(P<0.01)，IL-8的水平显著高于非感染性组(P<0.05)。
2.3 感染性黄疸患儿和健康新生儿及成人的TNFα、IL-6和IL-8水平比较 经统计学处理，TNFα和IL-6两组比较，P<0.01，有极显著性差异，而感染性黄疸患儿的IL-8与健康对照组之间，P<0.05，有显著性差异，数据见表1、表2。
2.4 非感染性黄疸患儿和健康新生儿及成人TNFα、IL-6和IL-8水平比较 经统计学处理，P>0.05，无显著性差异。数据见表1、表2。
2.5 TNFα、IL-6和IL-8之间的关系 经Spearman等级相关分析，TNFα与IL-6有相关关系，(rs=0.536, P<0.05)。而TNFα、IL-6和IL-8无相关关系。
, http://www.100md.com
3 讨论
细胞因子[1]是由活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的小分子多肽，可介导和调节免疫及炎症反应，是一类非特异性免疫效应物质。TNFα、IL-6和IL-8均是介导天然免疫的细胞因子，是重要的炎性介质，它们在新生儿感染性疾病中所起的作用与其固有的生物学功能相一致，IL-6可刺激T细胞，活化B细胞，刺激肝细胞合成肝细胞急性反应蛋白，如C反应蛋白；TNFα可介导白细胞粘附于血管内皮细胞，激活炎性细胞杀死微生物，激活T细胞，刺激B细胞产生抗体，刺激单核细胞产生其它细胞因子，还有抗病毒作用。IL-8是一种中性粒细胞趋化因子，与T细胞向炎症部位趋化有关。
近年来，对新生儿高胆红素血症的病因及临床治疗研究较多，但它与上述细胞因子之间的关系研究、报道并不多见。本实验研究表明，新生儿感染性黄疸患儿的TNFα、IL-6水平均极显著高于健康对照组和非感染组，与国外报道一致[2，3]。表明新生儿感染后机体免疫系统产生了积极反应，TNFα、IL-6均参与了机体的炎症反应过程。而IL-8的产生没有TNFα、IL-6升高显著，可能与IL-8主要参与局部炎症反应有关，也与其产生时间及有无封闭IL-8基因启动子的物质有关。但非感染性黄疸患儿与健康对照组之间TNFα、IL-6和IL-8水平比较，差异无显著性，说明非感染性黄疸产生的病因与上述细胞因子无关。
, 百拇医药
实验结果显示TNFα、IL-6存在相关关系，提示TNFα对IL-6的产生起一定的作用，与Cohen等[4，5]报道一致，其认为TNFα可有力地刺激免疫细胞和组织细胞产生IL-6，与我们的结果相符。
综上所述，TNFα、IL-6和IL-8可在新生儿感染时显著升高，因而我们认为当新生儿出现高胆红素血症时，其血清中TNFα、IL-6和IL-8显著增高时，提示机体存在感染，可作为新生儿感染性黄疸的明确诊断的灵敏指标，并对临床治疗起重要的指导作用。另外，感染性黄疸患儿机体存在感染，其血脑屏障变得薄弱，容易导致核黄疸的产生。因此，上述细胞因子显著增高时，可提示临床积极预防核黄疸、减少后遗症的发生。
参考文献
1 毕爱华主编.医学免疫学.北京：人民军医出版社，1995.60～78
2 Buck C, Bundschu J, Gallati H, et al. Interleukin-6: a sensitive parameter for the early diagnosis of neonatal bacterial infection. Pediatrics, 1994， 93(1):54～58
, http://www.100md.com
3 De Bent ESJM, Martens A, Van Raan JV, et al. Tumor necrosis factor-α, interleukin-1, and interleukin-6 plasma levels in neonatal sepsis. Pediatr Res, 1993, 33(4):380～383
4 Cohen-Kaminsky S, Delatlre R M, Devergne O, et al. Synergistic induction of interleukin-6 production and gene ex-pression in human thymic epithelial cells by LPS and cytokines. CELL Immunol, 1991, 138(1):79～93
5 Shalaby M R, Waage A, Espevik T. Cytokine regulation of interleukin-6 production by human endothelial cells. Cell Immunol, 1989, 121(4):372～382
(1999-01-10 收稿), 百拇医药
单位：同济医科大学附属协和医院儿科 武汉 430022
关键词：高胆红素血症；新生儿；细胞因子
医学新知杂志990203 摘要 高胆红素血症是新生儿期最常见症状之一，本研究探讨了感染性黄疸和非感染性黄疸与细胞因子肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)的关系。结果显示感染性黄疸患儿的IL-6、TNFα均极显著高于非感染性患儿组(P<0.01)，TL-8的水平显著高于非感染组(P<0.05)，表明感染性黄疸患儿机体免疫系统产生了积极反应，上述细胞因子均参与了机体的炎症反应过程，而IL-8的产生没有IL-6和TNFα升高显著，可能与IL-8主要参与局部炎症反应有关。提示感染性黄疸患儿血清中上述细胞因子显著增高时，可指导临床积极预防核黄疸发生。
A Study of Cytokines in Neonates
, http://www.100md.com
with Hyperbilirubinemia
Zhao Ping， Wang Lin， Feng Xiaosan，et al
Department of Pediatrics. Union Hospitel. Tong Ji Medical Uni. Wuhan 430022
Abstract Hyperbilirubinemia is one of the most common symptoms in neonate. This study investigated the relationship between infectious jaundice or non-infectious jaundice and cytokines, including tumor necorosis fector α(TNFα), interleukin 6(IL-6), interleukin 8(IL-8). The result showed that the level of IL-6, IL-8 and TNFα from the neonates with infectious jaundice were significantly higher than that of the neonates with non-infectious jaundice (for IL-6, TNFα, P<0.01, for IL-8, P<0.05. These results indicated that the immune response was activated in those neonates with infectious jaundice, and the above cytokines were involved. The increasing of IL-8 was lower than IL-6 and TNFα may reflect the difference of their function, since IL-8 mainly involved in the local immune response. The level of IL-6, TNFα and IL-8 might be helpful to decide whether the treatment and preventions of kernicterus is necesary.
, 百拇医药
Key words Hyperbilirubinemia; Infant; Newborn; Cytokines
高胆红素血症是新生儿期最常见症状之一，而病理性黄疸又分感染性和非感染性两类。近年来，随着免疫学的迅速发展，感染性疾病和细胞因子的研究已越来越多，研究发现TNF、IL-6和IL-8在新生儿感染性疾病中有重要作用，是机体抗感染的重要炎性细胞因子[1]。因此，我们检测了感染性黄疸和非感染性黄疸患儿血清中TNFα、IL-6和IL-8的水平，以探讨细胞因子和新生儿高胆红素血症之间的关系。
1 材料和方法
1.1 研究对象及实验分组 将1995年10月～1996年12月在我院新生儿科诊断为病理性黄疸，血清总胆红素均大于256.50 μmol/L 的患儿39例，分为两组。感染性黄疸患儿组16例：临床诊断为新生儿急性病毒性肝炎2例、新生儿败血症4例、脓疤疱、脐炎10例。非感染性黄疸患儿组23例：包括母乳性黄疸、溶血性黄疸、非感染性疾病因素导致的黄疸等。两组间患儿胎龄、日龄、红细胞压积、出生体重无明显差异。另设健康对照组：本院出生健康新生儿30例(早产儿组和足月儿组各15例)；成人组：本院血库健康成人志愿者16例。
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1.2 实验方法 凡血清总胆红素>256.50 μmol/L患儿入院后立即采静脉血，采血前均无使用丙种球蛋白、激素、全血、血浆史，然后取血清冻存于-70℃低温冰箱待测。血清TNFα、IL-6和IL-8测定：采用双抗体夹心法(ELISA)，操作过程严格按说明书进行，试剂盒由第四军医大学免疫教研室提供。
1.3 统计学处理 数据以
±s表示，采用Wilcoxon法、Spearman等级相关法处理。2 结果
2.1 健康新生儿与成人的TNFα、IL-6 IL-8的水平比较 结果见表1。
表1 健康新生儿与成人IL-6、TNFα以及IL-8水平的比较 组 别
, 百拇医药 例 数
IL-6(ng/L)
TNFα(ng/L)
IL-8(ng/L)
早产儿组
15
76.4±32.1
80.2±31.4
86.7±40.9
足月儿组
15
59.4±37.8
, http://www.100md.com
91.1±27.6
121.3±63.3
成人组
16
81.5±46.7
62.8±18.3
91.2±72.6
经统计学处理，各个细胞因子三组之间比较P>0.05，差异无显著性。
2.2 感染性黄疸和非感染性黄疸患儿TNFα、IL-6和IL-8的水平比较 结果见表2。表2 感染性黄疸与非感染性黄疸患儿IL-6、TNF和IL-8水平的比较 组 别
例 数
, 百拇医药
IL-6(ng/L)
TNFα(ng/L)
IL-8(ng/L)
感染组
16
19 710.90±1367.4
2 827.23±295.7
141.5±52.7
非感染组
23
73.82±34.6
113.83±41.3
, http://www.100md.com
85.7±28.9
经统计学处理，感染性黄疸患儿的TNFα、IL-6水平均极显著高于非感染性黄疸患儿组(P<0.01)，IL-8的水平显著高于非感染性组(P<0.05)。
2.3 感染性黄疸患儿和健康新生儿及成人的TNFα、IL-6和IL-8水平比较 经统计学处理，TNFα和IL-6两组比较，P<0.01，有极显著性差异，而感染性黄疸患儿的IL-8与健康对照组之间，P<0.05，有显著性差异，数据见表1、表2。
2.4 非感染性黄疸患儿和健康新生儿及成人TNFα、IL-6和IL-8水平比较 经统计学处理，P>0.05，无显著性差异。数据见表1、表2。
2.5 TNFα、IL-6和IL-8之间的关系 经Spearman等级相关分析，TNFα与IL-6有相关关系，(rs=0.536, P<0.05)。而TNFα、IL-6和IL-8无相关关系。
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3 讨论
细胞因子[1]是由活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的小分子多肽，可介导和调节免疫及炎症反应，是一类非特异性免疫效应物质。TNFα、IL-6和IL-8均是介导天然免疫的细胞因子，是重要的炎性介质，它们在新生儿感染性疾病中所起的作用与其固有的生物学功能相一致，IL-6可刺激T细胞，活化B细胞，刺激肝细胞合成肝细胞急性反应蛋白，如C反应蛋白；TNFα可介导白细胞粘附于血管内皮细胞，激活炎性细胞杀死微生物，激活T细胞，刺激B细胞产生抗体，刺激单核细胞产生其它细胞因子，还有抗病毒作用。IL-8是一种中性粒细胞趋化因子，与T细胞向炎症部位趋化有关。
近年来，对新生儿高胆红素血症的病因及临床治疗研究较多，但它与上述细胞因子之间的关系研究、报道并不多见。本实验研究表明，新生儿感染性黄疸患儿的TNFα、IL-6水平均极显著高于健康对照组和非感染组，与国外报道一致[2，3]。表明新生儿感染后机体免疫系统产生了积极反应，TNFα、IL-6均参与了机体的炎症反应过程。而IL-8的产生没有TNFα、IL-6升高显著，可能与IL-8主要参与局部炎症反应有关，也与其产生时间及有无封闭IL-8基因启动子的物质有关。但非感染性黄疸患儿与健康对照组之间TNFα、IL-6和IL-8水平比较，差异无显著性，说明非感染性黄疸产生的病因与上述细胞因子无关。
, 百拇医药
实验结果显示TNFα、IL-6存在相关关系，提示TNFα对IL-6的产生起一定的作用，与Cohen等[4，5]报道一致，其认为TNFα可有力地刺激免疫细胞和组织细胞产生IL-6，与我们的结果相符。
综上所述，TNFα、IL-6和IL-8可在新生儿感染时显著升高，因而我们认为当新生儿出现高胆红素血症时，其血清中TNFα、IL-6和IL-8显著增高时，提示机体存在感染，可作为新生儿感染性黄疸的明确诊断的灵敏指标，并对临床治疗起重要的指导作用。另外，感染性黄疸患儿机体存在感染，其血脑屏障变得薄弱，容易导致核黄疸的产生。因此，上述细胞因子显著增高时，可提示临床积极预防核黄疸、减少后遗症的发生。
参考文献
1 毕爱华主编.医学免疫学.北京：人民军医出版社，1995.60～78
2 Buck C, Bundschu J, Gallati H, et al. Interleukin-6: a sensitive parameter for the early diagnosis of neonatal bacterial infection. Pediatrics, 1994， 93(1):54～58
, http://www.100md.com
3 De Bent ESJM, Martens A, Van Raan JV, et al. Tumor necrosis factor-α, interleukin-1, and interleukin-6 plasma levels in neonatal sepsis. Pediatr Res, 1993, 33(4):380～383
4 Cohen-Kaminsky S, Delatlre R M, Devergne O, et al. Synergistic induction of interleukin-6 production and gene ex-pression in human thymic epithelial cells by LPS and cytokines. CELL Immunol, 1991, 138(1):79～93
5 Shalaby M R, Waage A, Espevik T. Cytokine regulation of interleukin-6 production by human endothelial cells. Cell Immunol, 1989, 121(4):372～382
(1999-01-10 收稿), 百拇医药