恶性血液病患者血清中可溶性Fas水平的测定①
作者：柳 昕 齐振华 罗良学② 张新华
单位：附属湘雅医院血液科 长沙 410008
关键词：抗原类；CD95；脱噬作用；白血病；淋巴细胞性；急性；白血病；非淋巴细胞性；急性；淋巴瘤；非Hodgkin's；病理生理学
湖南医科大学学报990225 提 要 用ELISA法测定68例恶性血液病患者血清可溶性48kD跨膜糖蛋白(sFas)水平，用免疫组织化学SABC法检测其中46例急性白血病患者骨髓单个核细胞膜Fas(mFas)阳性表达细胞数。以患者不同病期及其他临床资料分组，比较各组sFas水平，并对5例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者进行治疗前后的sFas随访。结果显示，ALL组和Hodgkin's淋巴瘤组血清sFas高于正常对照组，且与疾病的发展和病期可能相关。提示sFas可作为临床监测和判断预后的有效指标。急性非淋巴细胞白血病患者(ANLL)血清sFas水平与正常对照差异无显著性。
, 百拇医药
Measurement of soluble Fas in patients with hematological malignancy
Liu Xin Qi Zhenhua Luo Liangxue Zhang Xinhua
(Department of Hematology, Xiangya Hospital, Hunan Medical University, Changsha 410008)
We measured serum levels of soluble Fas(sFas) in 68 patients with hematological malignancy by using sandwich ELISA and detected bone marrow mononuclear cell membrane Fas(mFas) positive cells in 46 patients with acute leukemias by immunohistochemical technic. It was found that sFas levels were significantly higher in acute lymphoblastic leukemia(ALL) patients(median 10.48±5.89ng*ml-1) and non-Hodgkin's lymphoma(NHL) patients(median 18.26±16.47ng*ml-1) than those in healthy donors(median 0.92±0.88ng*ml-1)(P<0.05). Elevated sFas levels were correlated with the disease stage and progress, but not with other clinical parameters. According to the follow-up of five ALL patients, their serum sFas levels decreased after complete remissions. We conclude that sFas has prognostic value and is an effective clinical parameter with ALL or NHL patients. In addition, sFas levels in the sera of acute non-lymphoblastic leukemia patients were also found to be unchanged compared with those in the normal control.
, 百拇医药
Key words antigens,CD95; apoptosis; leukemia,lymphocytic,acute; leukemia,nonlymphocytic,acute; lymphoma,non-Hodgkin's; physiopathology
Fas(Apo-1/CD95)是一种分子量为48kD的跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子/神经生长因子(TNF/NGF)受体超家族，以膜分子形式(mFas)或可溶性形式(sFas)存在。mFas可在各种正常组织、不同血液细胞系列以及不同组织类型肿瘤细胞中表达；mFas阳性的敏感态细胞在被Fas天然配体(FasL)或抗Fas特异性单抗激活后迅速凋亡。故Fas可视为一种介导凋亡信号的受体。sFas是Fas mRNA发生变异剪接后编译的蛋白质产物[1]。有关恶性血液病发病机制中对sFas的研究在我国尚未见报道。本文旨在分析血清中sFas的改变对恶性血液病的发生所起的作用及其临床意义。
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1 材料与方法
1.1 对象 初治或复发无感染症状恶性血液病患者68例；男38例，女30例，年龄3～71(平均34)岁。按文献[2]标准对68例进行诊断、分型与分期。急性淋巴细胞白血病(ALL)25例；L1型13例，L2型10例，L3型2例。按照ABC-AP免疫组织化学染色法将ALL分型分为T淋巴细胞白血病11例，非T淋巴细胞白血病14例。急性非淋巴细胞白血病(ANLL)21例，其中M1 2例，M2 8例，M3 3例，M4 4例，M5 4例。非Hodgkin's淋巴瘤(NHL)22例；按Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ病期分3组，Ⅱ期7例，Ⅲ期6例，Ⅳ期9例。正常对照组系健康献血员14例，男9例，女5例，年龄19～55(平均36)岁。10例正常对照骨髓取自湘雅医院骨科髂骨移植无感染症状患者，男8例，女2例，年龄17～58(平均32)岁。
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1.2 标本采集 空腹抽取非化疗期患者静脉血1ml，室温自然凝固，经3?!000r*min-1离心20min，收集血清，分装后-70℃冻存。取出标本一次融解后测定sFas。急性白血病患者同时抽取骨髓2ml，肝素抗凝，加淋巴细胞分离液(D=1.077)后2?!000r*min-1离心20min；分离出单个核细胞，以RPMI-1640液洗涤三次；调整细胞数1～2×106*ml-1；用Apes胶处理过的玻片滴片，纯丙酮室温固定20min；-20℃保存，以备免疫组化检测mFas。
1.3 血清sFas水平测定 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)法(试剂盒由深圳晶美公司提供)。从4℃冰箱中取出96孔抗sFas单抗预包被板条平衡至室温；加入标准品和标本稀释液100μl至空白孔和零孔，加入已稀释的不同浓度的标准品100μl至相应孔中；在各样本孔中加入标准品和标本稀释液50μl，再加标本50μl稀释，混匀，用封板胶纸封住反应孔，37℃ 90min；洗板后除空白孔外，每孔加已稀释的生物素标记二抗100μl，封住板孔37℃ 60min；洗板后除空白孔外，每孔加稀释好的酶联物100μl，封住板孔37℃ 30min；洗板后每孔加底物TMB和0.02% H2O2各50μl，避光37℃ 20min；每孔加终止液4N H2SO4 50μl，混匀终止反应，测A值(波长450nm)；绘出标准曲线，在曲线上查所测样品的sFas含量。
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1.4 mFas的测定 采取免疫组化SABC法(试剂盒由武汉博士德公司提供)。冰冻切片室温风扇吹干，蒸馏水洗2min 3次；纯甲醇加3% H2O2至0.3%，室温处理30min；蒸馏水洗2min 3次；滴加正常山羊血清封闭室温10min；甩去多余液体，滴加兔抗Fas蛋白抗体，室温孵育1～2h或4℃过夜；0.5mol.L-1 PBS洗2min 3次，滴加生物素化山羊抗兔IgG，室温20min；0.5mol.L-1 PBS洗2min 3次，滴加试剂SABC，室温20min；0.5mol.L-1 PBS洗5min 4次。1ml蒸馏水加50μl DAB显色剂，50μl H2O2，50μl TBS浓缩缓冲液混匀加至标本上；避光显色10～30min，蒸馏水充分洗涤以终止反应；苏木素复染1min水洗；中性树胶封片；油镜观察200个单个核细胞，胞浆或胞膜显色为棕黄色判为阳性细胞；计算阳性细胞率。
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1.5 统计学分析 所有数据均以
±s表示；根据方差分析或t检验分析各个均数，均数之间是否有相关性用相关分析。以上数据均采用SPSS软件处理。
2 结果
2.1 ALL，ANLL，NHL与正常人血清sFas浓度的比较 ALL和NHL患者血清sFas水平比正常对照高；ANLL患者血清sFas水平和正常对照差异无显著性(表1)。
表1 恶性血液病患者与正常对照血清sFas浓度比较(±s) 组别
例数
sFas浓度(ng.ml-1)
, 百拇医药
P①
正常对照
14
0.92±0.88
ALL
25
10.48±5.89
<0.05
ANLL
21
5.86±14.84
>0.05
, http://www.100md.com NHL
22
18.26±16.47
<0.05
①各组与正常对照组比较
2.2 ALL，ANLL与正常对照mFas阳性表达细胞百分率的比较 ALL与ANLL mFas阳性表达细胞百分率高于正常人，以正常人mFas阳性表达细胞百分率为标准，其中76%(19/25)ALL患者mFas阳性，71%(15/21)ANLL患者mFas阳性(表2)。
表2 ALL，ANLL患者与正常人mFas阳性表达细胞百分率比较(±s) 组别
, 百拇医药 例数
mFas(%)
P①
正常对照
10
23.20±19.34
ALL
25
53.81±37.62
<0.05
ANLL
21
67.42±34.37
, 百拇医药
<0.05
①各组与正常对照组比较
2.3 血清sFas水平与mFas的相关性分析 急性白血病患者血清sFas与骨髓单个核细胞膜mFas表达，经相关分析，两者之间未显示显著相关性(r=-0.061,P>0.05)。
2.4 血清sFas水平与ALL，ANLL患者临床资料的关系 血清sFas水平在ALL，ANLL患者的各年龄组、性别、FAB分型、免疫分型、血红蛋白值、血小板数、外周血白细胞数、有无浸润症状(包括胸骨压痛、淋巴结肿大、肝脾肿大等)及完全缓解所需时间(天)等各组内指标之间差异均无显著性(均为P>0.05)。5例初治ALL患者和完全缓解时相比较，后者sFas浓度明显降低(P=0.01)(表3)。
表3 5例ALL患者初治和完全缓解后sFas浓度比较 ALL患者序号
, 百拇医药
sFas浓度(ng.ml-1)
初治
完全缓解
1
23.823
3.171
2
7.047
2.354
3
12.866
1.375
, http://www.100md.com
4
15.456
0.907
5
5.121
1.342
2.5 血清sFas水平和NHL患者临床资料的关系 血清sFas水平在NHL患者的各年龄组、性别、病理学分型，是否有B组症状(发热、出汗或6个月内体重降1/10或更多)及完全缓解所需时间(天)等各组内之间均无显著性差异(均为P>0.05)。表4示，NHL不同病期之间sFas水平差异有显著性(均为P<0.05)；Ⅲ期高于Ⅱ期，Ⅳ期高于Ⅲ期。表4 NHL不同病期sFas的水平(±s) NHL病期
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例数
sFas浓度(ng.ml-1)
Ⅱ
7
1.82±0.39①
Ⅲ
6
17.90±2.12②
Ⅳ
9
31.15±16.91
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①与Ⅲ期及与Ⅳ期比均为P<0.05;②与Ⅳ期比P<0.05
3 讨论
Cheng等[1]首次报道用分子克隆和核酸测序法鉴认出人类Fas mRNA变异型(Fas△TM)，乃因Fas mRNA发生变异剪接(alternative splicing)而编码跨膜区的外显子缺失所致；它比膜型Fas mRNA短63bp，从而编译一种缺乏跨膜区的可溶性Fas分子。体外凋亡抑制试验证实Fas△TM蛋白质分子与Fas特异性抗体发生中和而抑制Fas特异性抗体介导的凋亡。
为何肿瘤细胞不能进行正常凋亡呢?
Nguyen[3]等用免疫组化方法研究67例NHL患者冰冻切片，发现29例(43%)mFas表达阳性。本文发现76% ALL和71% ANLL患者骨髓单个核细胞mFas均有较高的表达。
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Knipping等[4]发现人B细胞和T细胞性白血病细胞系上清液存在可溶性Fas，并发现各种T细胞、B细胞性白血病和淋巴瘤患者血清中sFas水平增高，本文结果与之相符。可以推测，ALL和NHL患者血清中sFas在体内可竞争性地与表达在免疫效应细胞上的FasL结合，干扰FasL与mFas阳性细胞的结合，导致“凋亡缺损”，使肿瘤细胞逃逸机体通过Fas系统途径的免疫清除机制，成为肿瘤产生、存活及进展的重要的潜在生物学因素。
Sughara等[5]用流式细胞仪测急性T细胞淋巴细胞白血病(ATL)的mFas，用ELISA方法测sFas水平，RT-PCR方法测Fas mRNA/Fas△TM比值，发现Fas mRNA及Fas△TM与其蛋白产物mFas及sFas表达是平行的。提示白血病细胞可能是ATL患者血清sFas的来源。
本资料揭示，ALL和NHL等恶性淋巴增殖性疾病血清sFas水平与mFas无关，而可能与淋巴系统的异常增殖有关；并发现sFas随着ALL患者的病情完全缓解而下降，随NHL的病期发展而升高，但与患者的各年龄组、性别、FAB分型、免疫分型、血红蛋白值、血小板数、外周血白细胞数、是否有浸润症状、是否有B组症状及完全缓解所需时间等临床资料无关。提示sFas可作为一个有效的临床监测及判断预后的指标，但因病例数有限，尚须进一步扩大样本数观察。
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本文ANLL患者血清中sFas水平大致正常，与Munker等[6]报道一致。此现象提示可能有别的发病机制参与逃逸Fas系统途径的免疫清除过程。该研究小组还发现ANLL患者若合并严重感染如败血症则sFas可能升高。说明sFas并非来源于白血病细胞而可能由反应性细胞或基质细胞所分泌。
sFas究竟系何种细胞产生?此问题尚待探讨。
①本课题部分由CMB基金资助(98-4)
②附属湘雅医院传染科实验室
中国图书分类号 R329.25
参考文献
[1]Cheng JH, Zhou T, Liu CD, et al. Protection from Fas mediated apoptosis by a soluble form of the Fas molecule. Science, 1994,263:1759-1762
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[2]张之南主编.血液病诊断及疗效标准.天津：天津科学技术出版社，1998：168-171，350-357
[3]Nguyen PL, Harris NL, Ritz J, et al. Expression of CD95 antigen and Bcl-2 protein in non-Hodgkin's lymphomas and Hodgkin's diseases. A J Pathol, 1996,148:847-853
[4]Knipping E, Debatin KM, Stricker K, et al. Identification of soluble APO-1 in supernatants of human B- and T-cell lines and increased serum levels in B- and T-cell leukemias. Blood, 1995,85:1562-1569
, 百拇医药
[5]Sugahara K, Yamada Y, Hiragata Y, et al. Soluble and membrane isoforms of Fas/CD95 in fresh adult T-cell leukemia(ATL) cells and ATL-cell lines. Int J Cancer, 1997,72:128-132
[6]Munker R, Midis G, Owen-Schanb L, et al. Soluble Fas(CD95) is not elevated in the serum of patients with myeloid leukemias, myeloproliferative and myelodysplastic syndromes. Leukemia, 1996,10:1531-1533
收稿日期：1998-12-23, http://www.100md.com(柳 昕 齐振华 罗良学② 张新华)
单位：附属湘雅医院血液科 长沙 410008
关键词：抗原类；CD95；脱噬作用；白血病；淋巴细胞性；急性；白血病；非淋巴细胞性；急性；淋巴瘤；非Hodgkin's；病理生理学
湖南医科大学学报990225 提 要 用ELISA法测定68例恶性血液病患者血清可溶性48kD跨膜糖蛋白(sFas)水平，用免疫组织化学SABC法检测其中46例急性白血病患者骨髓单个核细胞膜Fas(mFas)阳性表达细胞数。以患者不同病期及其他临床资料分组，比较各组sFas水平，并对5例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者进行治疗前后的sFas随访。结果显示，ALL组和Hodgkin's淋巴瘤组血清sFas高于正常对照组，且与疾病的发展和病期可能相关。提示sFas可作为临床监测和判断预后的有效指标。急性非淋巴细胞白血病患者(ANLL)血清sFas水平与正常对照差异无显著性。
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Measurement of soluble Fas in patients with hematological malignancy
Liu Xin Qi Zhenhua Luo Liangxue Zhang Xinhua
(Department of Hematology, Xiangya Hospital, Hunan Medical University, Changsha 410008)
We measured serum levels of soluble Fas(sFas) in 68 patients with hematological malignancy by using sandwich ELISA and detected bone marrow mononuclear cell membrane Fas(mFas) positive cells in 46 patients with acute leukemias by immunohistochemical technic. It was found that sFas levels were significantly higher in acute lymphoblastic leukemia(ALL) patients(median 10.48±5.89ng*ml-1) and non-Hodgkin's lymphoma(NHL) patients(median 18.26±16.47ng*ml-1) than those in healthy donors(median 0.92±0.88ng*ml-1)(P<0.05). Elevated sFas levels were correlated with the disease stage and progress, but not with other clinical parameters. According to the follow-up of five ALL patients, their serum sFas levels decreased after complete remissions. We conclude that sFas has prognostic value and is an effective clinical parameter with ALL or NHL patients. In addition, sFas levels in the sera of acute non-lymphoblastic leukemia patients were also found to be unchanged compared with those in the normal control.
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Key words antigens,CD95; apoptosis; leukemia,lymphocytic,acute; leukemia,nonlymphocytic,acute; lymphoma,non-Hodgkin's; physiopathology
Fas(Apo-1/CD95)是一种分子量为48kD的跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子/神经生长因子(TNF/NGF)受体超家族，以膜分子形式(mFas)或可溶性形式(sFas)存在。mFas可在各种正常组织、不同血液细胞系列以及不同组织类型肿瘤细胞中表达；mFas阳性的敏感态细胞在被Fas天然配体(FasL)或抗Fas特异性单抗激活后迅速凋亡。故Fas可视为一种介导凋亡信号的受体。sFas是Fas mRNA发生变异剪接后编译的蛋白质产物[1]。有关恶性血液病发病机制中对sFas的研究在我国尚未见报道。本文旨在分析血清中sFas的改变对恶性血液病的发生所起的作用及其临床意义。
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1 材料与方法
1.1 对象 初治或复发无感染症状恶性血液病患者68例；男38例，女30例，年龄3～71(平均34)岁。按文献[2]标准对68例进行诊断、分型与分期。急性淋巴细胞白血病(ALL)25例；L1型13例，L2型10例，L3型2例。按照ABC-AP免疫组织化学染色法将ALL分型分为T淋巴细胞白血病11例，非T淋巴细胞白血病14例。急性非淋巴细胞白血病(ANLL)21例，其中M1 2例，M2 8例，M3 3例，M4 4例，M5 4例。非Hodgkin's淋巴瘤(NHL)22例；按Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ病期分3组，Ⅱ期7例，Ⅲ期6例，Ⅳ期9例。正常对照组系健康献血员14例，男9例，女5例，年龄19～55(平均36)岁。10例正常对照骨髓取自湘雅医院骨科髂骨移植无感染症状患者，男8例，女2例，年龄17～58(平均32)岁。
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1.2 标本采集 空腹抽取非化疗期患者静脉血1ml，室温自然凝固，经3?!000r*min-1离心20min，收集血清，分装后-70℃冻存。取出标本一次融解后测定sFas。急性白血病患者同时抽取骨髓2ml，肝素抗凝，加淋巴细胞分离液(D=1.077)后2?!000r*min-1离心20min；分离出单个核细胞，以RPMI-1640液洗涤三次；调整细胞数1～2×106*ml-1；用Apes胶处理过的玻片滴片，纯丙酮室温固定20min；-20℃保存，以备免疫组化检测mFas。
1.3 血清sFas水平测定 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)法(试剂盒由深圳晶美公司提供)。从4℃冰箱中取出96孔抗sFas单抗预包被板条平衡至室温；加入标准品和标本稀释液100μl至空白孔和零孔，加入已稀释的不同浓度的标准品100μl至相应孔中；在各样本孔中加入标准品和标本稀释液50μl，再加标本50μl稀释，混匀，用封板胶纸封住反应孔，37℃ 90min；洗板后除空白孔外，每孔加已稀释的生物素标记二抗100μl，封住板孔37℃ 60min；洗板后除空白孔外，每孔加稀释好的酶联物100μl，封住板孔37℃ 30min；洗板后每孔加底物TMB和0.02% H2O2各50μl，避光37℃ 20min；每孔加终止液4N H2SO4 50μl，混匀终止反应，测A值(波长450nm)；绘出标准曲线，在曲线上查所测样品的sFas含量。
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1.4 mFas的测定 采取免疫组化SABC法(试剂盒由武汉博士德公司提供)。冰冻切片室温风扇吹干，蒸馏水洗2min 3次；纯甲醇加3% H2O2至0.3%，室温处理30min；蒸馏水洗2min 3次；滴加正常山羊血清封闭室温10min；甩去多余液体，滴加兔抗Fas蛋白抗体，室温孵育1～2h或4℃过夜；0.5mol.L-1 PBS洗2min 3次，滴加生物素化山羊抗兔IgG，室温20min；0.5mol.L-1 PBS洗2min 3次，滴加试剂SABC，室温20min；0.5mol.L-1 PBS洗5min 4次。1ml蒸馏水加50μl DAB显色剂，50μl H2O2，50μl TBS浓缩缓冲液混匀加至标本上；避光显色10～30min，蒸馏水充分洗涤以终止反应；苏木素复染1min水洗；中性树胶封片；油镜观察200个单个核细胞，胞浆或胞膜显色为棕黄色判为阳性细胞；计算阳性细胞率。
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1.5 统计学分析 所有数据均以
±s表示；根据方差分析或t检验分析各个均数，均数之间是否有相关性用相关分析。以上数据均采用SPSS软件处理。2 结果
2.1 ALL，ANLL，NHL与正常人血清sFas浓度的比较 ALL和NHL患者血清sFas水平比正常对照高；ANLL患者血清sFas水平和正常对照差异无显著性(表1)。
表1 恶性血液病患者与正常对照血清sFas浓度比较(
±s) 组别例数
sFas浓度(ng.ml-1)
, 百拇医药
P①
正常对照
14
0.92±0.88
ALL
25
10.48±5.89
<0.05
ANLL
21
5.86±14.84
>0.05
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22
18.26±16.47
<0.05
①各组与正常对照组比较
2.2 ALL，ANLL与正常对照mFas阳性表达细胞百分率的比较 ALL与ANLL mFas阳性表达细胞百分率高于正常人，以正常人mFas阳性表达细胞百分率为标准，其中76%(19/25)ALL患者mFas阳性，71%(15/21)ANLL患者mFas阳性(表2)。
表2 ALL，ANLL患者与正常人mFas阳性表达细胞百分率比较(
±s) 组别, 百拇医药 例数
mFas(%)
P①
正常对照
10
23.20±19.34
ALL
25
53.81±37.62
<0.05
ANLL
21
67.42±34.37
, 百拇医药
<0.05
①各组与正常对照组比较
2.3 血清sFas水平与mFas的相关性分析 急性白血病患者血清sFas与骨髓单个核细胞膜mFas表达，经相关分析，两者之间未显示显著相关性(r=-0.061,P>0.05)。
2.4 血清sFas水平与ALL，ANLL患者临床资料的关系 血清sFas水平在ALL，ANLL患者的各年龄组、性别、FAB分型、免疫分型、血红蛋白值、血小板数、外周血白细胞数、有无浸润症状(包括胸骨压痛、淋巴结肿大、肝脾肿大等)及完全缓解所需时间(天)等各组内指标之间差异均无显著性(均为P>0.05)。5例初治ALL患者和完全缓解时相比较，后者sFas浓度明显降低(P=0.01)(表3)。
表3 5例ALL患者初治和完全缓解后sFas浓度比较 ALL患者序号
, 百拇医药
sFas浓度(ng.ml-1)
初治
完全缓解
1
23.823
3.171
2
7.047
2.354
3
12.866
1.375
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4
15.456
0.907
5
5.121
1.342
2.5 血清sFas水平和NHL患者临床资料的关系 血清sFas水平在NHL患者的各年龄组、性别、病理学分型，是否有B组症状(发热、出汗或6个月内体重降1/10或更多)及完全缓解所需时间(天)等各组内之间均无显著性差异(均为P>0.05)。表4示，NHL不同病期之间sFas水平差异有显著性(均为P<0.05)；Ⅲ期高于Ⅱ期，Ⅳ期高于Ⅲ期。表4 NHL不同病期sFas的水平(
±s) NHL病期, http://www.100md.com
例数
sFas浓度(ng.ml-1)
Ⅱ
7
1.82±0.39①
Ⅲ
6
17.90±2.12②
Ⅳ
9
31.15±16.91
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①与Ⅲ期及与Ⅳ期比均为P<0.05;②与Ⅳ期比P<0.05
3 讨论
Cheng等[1]首次报道用分子克隆和核酸测序法鉴认出人类Fas mRNA变异型(Fas△TM)，乃因Fas mRNA发生变异剪接(alternative splicing)而编码跨膜区的外显子缺失所致；它比膜型Fas mRNA短63bp，从而编译一种缺乏跨膜区的可溶性Fas分子。体外凋亡抑制试验证实Fas△TM蛋白质分子与Fas特异性抗体发生中和而抑制Fas特异性抗体介导的凋亡。
为何肿瘤细胞不能进行正常凋亡呢?
Nguyen[3]等用免疫组化方法研究67例NHL患者冰冻切片，发现29例(43%)mFas表达阳性。本文发现76% ALL和71% ANLL患者骨髓单个核细胞mFas均有较高的表达。
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Knipping等[4]发现人B细胞和T细胞性白血病细胞系上清液存在可溶性Fas，并发现各种T细胞、B细胞性白血病和淋巴瘤患者血清中sFas水平增高，本文结果与之相符。可以推测，ALL和NHL患者血清中sFas在体内可竞争性地与表达在免疫效应细胞上的FasL结合，干扰FasL与mFas阳性细胞的结合，导致“凋亡缺损”，使肿瘤细胞逃逸机体通过Fas系统途径的免疫清除机制，成为肿瘤产生、存活及进展的重要的潜在生物学因素。
Sughara等[5]用流式细胞仪测急性T细胞淋巴细胞白血病(ATL)的mFas，用ELISA方法测sFas水平，RT-PCR方法测Fas mRNA/Fas△TM比值，发现Fas mRNA及Fas△TM与其蛋白产物mFas及sFas表达是平行的。提示白血病细胞可能是ATL患者血清sFas的来源。
本资料揭示，ALL和NHL等恶性淋巴增殖性疾病血清sFas水平与mFas无关，而可能与淋巴系统的异常增殖有关；并发现sFas随着ALL患者的病情完全缓解而下降，随NHL的病期发展而升高，但与患者的各年龄组、性别、FAB分型、免疫分型、血红蛋白值、血小板数、外周血白细胞数、是否有浸润症状、是否有B组症状及完全缓解所需时间等临床资料无关。提示sFas可作为一个有效的临床监测及判断预后的指标，但因病例数有限，尚须进一步扩大样本数观察。
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本文ANLL患者血清中sFas水平大致正常，与Munker等[6]报道一致。此现象提示可能有别的发病机制参与逃逸Fas系统途径的免疫清除过程。该研究小组还发现ANLL患者若合并严重感染如败血症则sFas可能升高。说明sFas并非来源于白血病细胞而可能由反应性细胞或基质细胞所分泌。
sFas究竟系何种细胞产生?此问题尚待探讨。
①本课题部分由CMB基金资助(98-4)
②附属湘雅医院传染科实验室
中国图书分类号 R329.25
参考文献
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收稿日期：1998-12-23, http://www.100md.com(柳 昕 齐振华 罗良学② 张新华)