器官移植病人HHV-6和HCMV感染的追踪研究①
作者：罗敏华 肖扬名 戴 橄 邬国军 陈淑珍
单位：微生物学教研室 长沙 410078
关键词：器官移植；感染；巨细胞病毒；疱疹病毒6型
湖南医科大学学报990207 提 要 用病毒分离、PCR和血清学方法追踪研究31例器官移植病人HCMV和HHV-6感染情况及其对移植的影响。结果显示：HCMV和HHV-6分离率分别为35.5%和45.2%。术后DNA阳性率分别为25.8%和32.3%；术前相应的IgM阳性率分别为0%和3.2%，术后IgM阳性率分别为19.4%和25.8%；术前DNA阳性率分别为35.0%和45.2%。术后DNA阳性率分别高达45.2%和61.3%，并在3个月内维持高水平。早期死亡病例100%有HCMV和/或HHV-6感染。活动性HHV-6和HCMV感染率分别为32.3%和25.8%，多为复发性，术后2周出现，3～4周达高峰，3月内均可发生。提示术后HHV-6和/或HCMV感染是移植成败的关键之一。
, 百拇医药
Follow-up study of human herpesvirus 6 and human cytomegalovirus
infection in organ transplantation recipients
Luo Minhua, Xiao Yangming, Dai Gan, et al
(Department of Microbiology and Immunology, Hunan Medical University, Changsha 410078)
Objective: To trace the study of the prevalence and adverse factors of human herpesvirus 6(HHV-6) and human cytomegalovirus(HCMV) infection in organ transplantation recipients. Method: Blood and urine specimens were detected by virus isolation, polymerase chain reaction(PCR), and indirect immunofluorescent assay. Result: HCMV and HHV-6 isolation rate were 25.8% and 32.3%, respectively. Anti-HCMV IgM and anti-HHV-6 IgM positive rates before operation were 0% and 3.2%, their positive rates after operation were 19.4% and 25.8%, respectively. HCMV-DNA and HHV-6-DNA positive rates before operation were 35.5% and 45.2%; their positive rates after operation were 45.2% and 61.3%, and kept the high positive rates for a long period. The patients who died within 3 months were all complicated by HCMV and/or HHV-6 productive infection. The productive infection rates of HCMV and HHV-6 were 25.8% and 32.2%, respectively. Conclusion: The majority of HCMV and HHV-6 infection are reactivation. Productive infection attacke at 2 weeks after operation, reaches the peak at 3～4 weeks after operation, and attacks at anytime within 3 months. HCMV and/or HHV-6 productive infection are fatal to recipients.
, 百拇医药
Key words organ transplantation; infection; human herpesvirus 6; human cytomegalovirus
器官移植已在世界范围内广泛开展，不久的将来实现动物器官人源化后，猪可望成为最有潜力的供者。这样，器官来源问题得以解决[1]，并促使此技术走向另一个鼎盛时期。然而，不论是人类器官还是人源化动物器官，要找到主要组织相容性复合体(MHC)完全相同的供者的机率太低，必然会出现排异反应。为克服排异，临床上曾采用各种免疫抑制剂。但免疫抑制剂的使用，使机体免疫功能尤其是细胞免疫功能受到抑制，从而引发术后各种感染，其中主要是病毒感染。这已成为影响移植器官存活和受者性命的关键因素之一。据报道术后病毒感染以巨细胞病毒(HCMV)、疱疹病毒6型(HHV-6)感染居多[2～5]。本文对近5年来湖南省器官移植病人感染进行了追踪研究，初步探讨了器官移植病人HCMV和HHV-6的感染情况。
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1 对象与方法
1.1 对象 1992～1997年31例异体心、肺、肝、肾移植和自体骨髓移植病人。
1.2 标本 标本采集于术前一周、术后每周一次直至出院，出院后随访每月一次。无菌采集肝素抗凝外周血10ml，用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)用于分离HHV-6和HCMV，抽提DNA；无菌采集非抗凝全血5ml，分离血清用于检测抗HHV-6和抗-HCMV；留尿(晨尿)40ml，离心取沉渣用于分离HCMV，抽提DNA和原位杂交。
1.3 细胞 人胚肺细胞(human embryonic lung fibroblast cells, HEL)用于分离HCMV，增殖HCMV AD169制备抗原片；脐血单个核细胞(cord blood mononuclear cells, CBMC)，经PHA和rIL-2活化后用于分离HHV-6，增殖HHV-6 Z29和制备抗原片。
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1.4 PCR引物 HHV-6：上游引物5′TCTACAGCCCAGGACAATGGATTATATAT3′，下游引物5′TGAGATCATTCTCCCGTTCTTGAGGG3′。HCMV：上游引物5′TGCTCTTTTTTCTAGGCGCT3′，下游引物5′AATAAACCGTACCTACGTGACC3′。PCR试剂盒均由留美学者胡昌智提供。
1.5 病毒分离鉴定
1.5.1 HCMV的分离与鉴定 参照郭建平[6]等方法。每份标本(DMEM培养基白细胞悬液或经处理的尿沉渣)接种已成单层的HEL4个培养管，每管接种0.3ml，1?!000r*min-1，离心30min吸附，加DMEM维持液。隔日观察细胞病变(CPE)，每隔4d换一次维持液，观察2周无CPE者，盲传两代，仍无CPE出现者判为HCMV分离阴性，有CPE者判为阳性。收获细胞制备抗原片，用单克隆抗体进行鉴定。
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1.5.2 HHV-6分离与鉴定 参照Salahuddin[7]等方法进行。将新鲜分离的CBMC(1×106)置含小牛血清(15%)、PHA(15μg.ml-1)和rIL-2(5U.ml-1)的RPMI 1640培养基中；于5% CO2，37℃培养3天使CBMC被PHA和rIL-2活化。将分离的PBMC与活化的CBMC按1∶5比例混合，于5% CO2，37℃继续培养，逐日观察CPE。2周无CPE出现者，盲传2代，仍无CPE出现者判为HHV-6分离阴性，有CPE者判为阳性。收获细胞制备抗原片，用单克隆抗体进行鉴定。
1.6 抗HCMV和抗HHV-6 IgM的检测 按常规用间接免疫荧光法进行。
1.7 PCR检测HCMV-DNA和HHV-6 DNA 将PBMC，CBMC，HEL，收获的增殖HHV-6 Z29的CBMC和收获的增殖HCMV AD169的HEL细胞各约1×106个细胞，按常规方法用等体积苯酚等抽提DNA。PCR扩增和电泳分析时，分别检测HHV-6 DNA和HCMV-DNA。PCR扩增反应在0.5ml无菌管中进行，反应总体积为50μl，内含10×buffer 5μl，2.5mmol.L-1 dNTP 4μl，HCMV上下游引物各4μl(50pmole)，HHV-6上下游引物各3μl(50pmole)，Taq DNA多聚酶3U，标本DNA 8～10μl(≥1μg)，加灭菌蒸馏水至终容积50μl。扩增程序如下：94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸45s;35个循环，末次循环72℃延伸7min。以ΦX174HaeⅢ分子量标准，PCR产物经凝胶电泳后，紫外灯下观察结果。
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2 结果
2.1 不同时期HCMV分离与HCMV IgM的检测 检测31例器官移植病人不同时期的血、尿标本。HCMV分离阳性8例(8/31，25.8%)，4例死亡。HCMV分离阳性的8例病人中肾移植病人5例阳性(5/18，占肾移植病人的27.8%)，心、肝和肺移植病人各1例均阳性，骨髓移植病人HCMV分离均阴性(0/10)。在HCMV分离阳性的8例病人中，尿标本阳性7例，血标本阳性6例，尿和血标本均阳性6例。阳性者经原位杂交和单克隆抗体鉴定。31例器官移植者中除1例心脏移植病人类风湿因子阳性外，余为阴性。术前IgM均为阴性(0/31)，IgG均为阳性；术后IgM阳性者6例(6/31，19.4%)(图1)。
图1 不同时期血、尿标本中HCMV的分离与IgM的检测
Fig. 1 HCMV isolation and detection of anti-HCMV IgM in blood and urine at different periods
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2.2 不同时期HHV-6分离与IgM的检测 从31例器官移植病人不同时期的PBMC中分离HHV-6，病毒分离阳性10例(10/31，32.3%)，4例死亡。分离阳性者中肾移植病人3例(3/18，16.7%)，心脏移植病人1例(1/1)、肺移植病人1例(1/1)，骨髓移植病人5例(5/10，50%)。病毒分离阳性者经单克隆抗体鉴定。术前HHV-6 IgM阳性1例(1/31，3.2%)，IgG均为阳性；术后IgM阳性8例(8/31，25.8%)(图2)。
图2 不同时期的PBMC中HHV-6的分离与IgM的检测
Fig. 2 HHV-6 isolation in PBMC and detection of anti-HHV-6 IgM at different periods
2.3 PCR检测不同时期HCMV DNA和HHV-6 DNA 31例器官移植病人中HCMV DNA阳性14例(14/31，45.2%)，其中白细胞阳性13例，尿阳性9例，尿和血均阳性8例。阳性者在2%琼脂糖凝胶电泳后于171bp处见一条带。用这对引物于同样条件下扩增单纯疱疹病毒(1，2型HSV-1，HSV-2)、水痘带状疱疹病毒(VZV)、EB病毒(EBV)、HHV-6Z29及HEL细胞DNA，均未见阳性条带；扩增HCMV AD169株DNA则见明显阳性条带。故认为所用引物具有高度特异性。HHV-6 DNA阳性者19例(19/31，61.3%)，其中肾移植病人阳性8例(8/18，44.4%)，心脏移植病人1例(1/1)，肺移植1例(1/1)，骨髓移植9例(9/10，90%)。阳性者在2%琼脂糖凝胶电泳后于161bp处有一明显条带。用这对引物于同样条件下扩增HSV-1，HSV-2，VZV，EBV，HCMV及CBMC-DNA均未见阳性条带；扩增HHV-6 Z29株DNA则见明显的阳性条带。故所用引物具高度特异性(图3)。
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图3 不同时期血、尿中HCMV-DNA和HHV-6-DNA的检测率
Fig. 3 Detection of HCMV-DNA and HHV-6 DNA in blood and urine at different periods
3 讨论
器官移植病人术后HHV-6与HCMV感染较常见，且对器官移植成败至关重要。其感染的形式有两种：一种为原发感染，即器官移植病人在移植术前病毒感染指标为阴性，移植后首次发生的感染；另一种为复发感染，即器官移植病人术前病毒感染指标已为阳性，术后由于免疫抑制剂的使用致使潜伏病毒被激活而复发[8～10]。免疫抑制剂的使用，增加了HCMV和HHV-6感染的发生率和感染的严重程度，常导致肺炎、发热、肝炎、脑炎、胃肠出血、视网膜炎等，加重免疫排斥，导致移植失败甚至累及病人性命。Lewis和Cone等研究了器官移植病人HHV-6和HCMV感染，阳性率为27%～51%。感染大多发生于移植后第2～6周，移植后6个月内随时都可发生[3，4]。与无HCMV及HHV-6感染的病人相比，HCMV和/或HHV-6感染的移植病人死亡率增加[3，10，11]。
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根据本文HCMV和HHV-6的病毒分离及其相应的IgM检测结果，判断其活动性感染率分别为25.8%和32.3%，其中心、肺移植病人各1例为HCMV和HHV-6合并感染。不同时期HHV-6和HCMV感染结果，提示活动性感染开始于术后2周，3～4周达高峰，3月内随时均可发生。感染形式上，由于术前HCMV-DNA和HHV-6-DNA阳性率均较高，分别为35.5%和45.1%，术后阳性率分别增至45.1%和61.3%，并维持在较高水平(45%～61%)。同时IgG阳性率为100%。故推测感染主要系复发性质。免疫抑制剂的使用，使潜伏的HHV-6和HCMV被激活，活动性感染率增加，感染加重排异反应，排异反应又加重感染后果。有HCMV和/或HHV-6活动性感染者死亡率高；死者100%有HCMV和/或HHV-6感染。骨髓移植病人中HCMV活动性感染少见，而HHV-6的活动性感染率则高达50%。肾移植病人HCMV与HHV-6的感染率相近。可见在不同类型器官移植HCMV和HHV-6感染有差异。心肺大器官移植病人各1例均为HCMV和HHV-6合并感染。由于病例数少，其感染率尚难下结论。
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①湖南省中药局，卫生厅资助项目(批准号96035,95-5)
中国图书分类号 R392
参考文献
[1]Gretchen V. No moratorium on clinical trials. Science, 1998,279:648
[2]Editoral. Cytomegalovirus infection in allograft recipients. Lancet, 1989,1:303-304
[3]Lewis RM, Johnson PC, Golden A, et al. The adverse importance of cytomegalovirus infection on clinical outcome in cyclosporine prednise treated renal allograft recipients. Transplantation, 1988,45:353-359
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[4]Cone RW, Hackman RC, Huang MW, et al. Human herpesvirus 6 in lung tissue from patients with pneumonia after bone marrow transplantation. N Engl J Med, 1993,329:156-161
[5]Okuno T, Higashi K, Shiraki K, et al. Human herpesvirus 6 infection in renal transplantation. Transplantation, 1990,49:519-522
[6]郭建平，吴洁如.地塞米松、二甲亚砜及低速离心对人巨细胞病毒复制的影响.湖南医科大学学报，1989，14：25-28
[7]Salahuddin SZ, Ablashi DV, Markham PD, et al. Isolation of new virus, HBLV, in patients with lymphoproliferative disorder. Science, 1986,234:596-599
, 百拇医药
[8]Van Dorp WT, Vlieger A, Jiw NW, et al. The polymerase chain reaction, a sensitive and rapid technique for detection cytomegalovirus infection after transplantation. Transplantation, 1992,54:661-665
[9]Cuende JI, Johnson A, Sherman M, et al. High prevalence of HHV-6 DNA in peripheral blood mononuclear cells of healthy individuals detected by PCR. J Med Virol, 1994,43:115-118
[10]肖扬名，施凯，罗敏华，等.器官移植术后受者巨细胞病毒的PCR检测.湖南医科大学学报，1996，21：120-122
[11]罗敏华，施凯，肖扬名，等.从器官移植受者外周血分离出人类疱疹病毒6型.湖南医科大学学报，1996，21：117-119
收稿日期：1998-05-04, http://www.100md.com
单位：微生物学教研室 长沙 410078
关键词：器官移植；感染；巨细胞病毒；疱疹病毒6型
湖南医科大学学报990207 提 要 用病毒分离、PCR和血清学方法追踪研究31例器官移植病人HCMV和HHV-6感染情况及其对移植的影响。结果显示：HCMV和HHV-6分离率分别为35.5%和45.2%。术后DNA阳性率分别为25.8%和32.3%；术前相应的IgM阳性率分别为0%和3.2%，术后IgM阳性率分别为19.4%和25.8%；术前DNA阳性率分别为35.0%和45.2%。术后DNA阳性率分别高达45.2%和61.3%，并在3个月内维持高水平。早期死亡病例100%有HCMV和/或HHV-6感染。活动性HHV-6和HCMV感染率分别为32.3%和25.8%，多为复发性，术后2周出现，3～4周达高峰，3月内均可发生。提示术后HHV-6和/或HCMV感染是移植成败的关键之一。
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Follow-up study of human herpesvirus 6 and human cytomegalovirus
infection in organ transplantation recipients
Luo Minhua, Xiao Yangming, Dai Gan, et al
(Department of Microbiology and Immunology, Hunan Medical University, Changsha 410078)
Objective: To trace the study of the prevalence and adverse factors of human herpesvirus 6(HHV-6) and human cytomegalovirus(HCMV) infection in organ transplantation recipients. Method: Blood and urine specimens were detected by virus isolation, polymerase chain reaction(PCR), and indirect immunofluorescent assay. Result: HCMV and HHV-6 isolation rate were 25.8% and 32.3%, respectively. Anti-HCMV IgM and anti-HHV-6 IgM positive rates before operation were 0% and 3.2%, their positive rates after operation were 19.4% and 25.8%, respectively. HCMV-DNA and HHV-6-DNA positive rates before operation were 35.5% and 45.2%; their positive rates after operation were 45.2% and 61.3%, and kept the high positive rates for a long period. The patients who died within 3 months were all complicated by HCMV and/or HHV-6 productive infection. The productive infection rates of HCMV and HHV-6 were 25.8% and 32.2%, respectively. Conclusion: The majority of HCMV and HHV-6 infection are reactivation. Productive infection attacke at 2 weeks after operation, reaches the peak at 3～4 weeks after operation, and attacks at anytime within 3 months. HCMV and/or HHV-6 productive infection are fatal to recipients.
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Key words organ transplantation; infection; human herpesvirus 6; human cytomegalovirus
器官移植已在世界范围内广泛开展，不久的将来实现动物器官人源化后，猪可望成为最有潜力的供者。这样，器官来源问题得以解决[1]，并促使此技术走向另一个鼎盛时期。然而，不论是人类器官还是人源化动物器官，要找到主要组织相容性复合体(MHC)完全相同的供者的机率太低，必然会出现排异反应。为克服排异，临床上曾采用各种免疫抑制剂。但免疫抑制剂的使用，使机体免疫功能尤其是细胞免疫功能受到抑制，从而引发术后各种感染，其中主要是病毒感染。这已成为影响移植器官存活和受者性命的关键因素之一。据报道术后病毒感染以巨细胞病毒(HCMV)、疱疹病毒6型(HHV-6)感染居多[2～5]。本文对近5年来湖南省器官移植病人感染进行了追踪研究，初步探讨了器官移植病人HCMV和HHV-6的感染情况。
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1 对象与方法
1.1 对象 1992～1997年31例异体心、肺、肝、肾移植和自体骨髓移植病人。
1.2 标本 标本采集于术前一周、术后每周一次直至出院，出院后随访每月一次。无菌采集肝素抗凝外周血10ml，用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)用于分离HHV-6和HCMV，抽提DNA；无菌采集非抗凝全血5ml，分离血清用于检测抗HHV-6和抗-HCMV；留尿(晨尿)40ml，离心取沉渣用于分离HCMV，抽提DNA和原位杂交。
1.3 细胞 人胚肺细胞(human embryonic lung fibroblast cells, HEL)用于分离HCMV，增殖HCMV AD169制备抗原片；脐血单个核细胞(cord blood mononuclear cells, CBMC)，经PHA和rIL-2活化后用于分离HHV-6，增殖HHV-6 Z29和制备抗原片。
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1.4 PCR引物 HHV-6：上游引物5′TCTACAGCCCAGGACAATGGATTATATAT3′，下游引物5′TGAGATCATTCTCCCGTTCTTGAGGG3′。HCMV：上游引物5′TGCTCTTTTTTCTAGGCGCT3′，下游引物5′AATAAACCGTACCTACGTGACC3′。PCR试剂盒均由留美学者胡昌智提供。
1.5 病毒分离鉴定
1.5.1 HCMV的分离与鉴定 参照郭建平[6]等方法。每份标本(DMEM培养基白细胞悬液或经处理的尿沉渣)接种已成单层的HEL4个培养管，每管接种0.3ml，1?!000r*min-1，离心30min吸附，加DMEM维持液。隔日观察细胞病变(CPE)，每隔4d换一次维持液，观察2周无CPE者，盲传两代，仍无CPE出现者判为HCMV分离阴性，有CPE者判为阳性。收获细胞制备抗原片，用单克隆抗体进行鉴定。
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1.5.2 HHV-6分离与鉴定 参照Salahuddin[7]等方法进行。将新鲜分离的CBMC(1×106)置含小牛血清(15%)、PHA(15μg.ml-1)和rIL-2(5U.ml-1)的RPMI 1640培养基中；于5% CO2，37℃培养3天使CBMC被PHA和rIL-2活化。将分离的PBMC与活化的CBMC按1∶5比例混合，于5% CO2，37℃继续培养，逐日观察CPE。2周无CPE出现者，盲传2代，仍无CPE出现者判为HHV-6分离阴性，有CPE者判为阳性。收获细胞制备抗原片，用单克隆抗体进行鉴定。
1.6 抗HCMV和抗HHV-6 IgM的检测 按常规用间接免疫荧光法进行。
1.7 PCR检测HCMV-DNA和HHV-6 DNA 将PBMC，CBMC，HEL，收获的增殖HHV-6 Z29的CBMC和收获的增殖HCMV AD169的HEL细胞各约1×106个细胞，按常规方法用等体积苯酚等抽提DNA。PCR扩增和电泳分析时，分别检测HHV-6 DNA和HCMV-DNA。PCR扩增反应在0.5ml无菌管中进行，反应总体积为50μl，内含10×buffer 5μl，2.5mmol.L-1 dNTP 4μl，HCMV上下游引物各4μl(50pmole)，HHV-6上下游引物各3μl(50pmole)，Taq DNA多聚酶3U，标本DNA 8～10μl(≥1μg)，加灭菌蒸馏水至终容积50μl。扩增程序如下：94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸45s;35个循环，末次循环72℃延伸7min。以ΦX174HaeⅢ分子量标准，PCR产物经凝胶电泳后，紫外灯下观察结果。
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2 结果
2.1 不同时期HCMV分离与HCMV IgM的检测 检测31例器官移植病人不同时期的血、尿标本。HCMV分离阳性8例(8/31，25.8%)，4例死亡。HCMV分离阳性的8例病人中肾移植病人5例阳性(5/18，占肾移植病人的27.8%)，心、肝和肺移植病人各1例均阳性，骨髓移植病人HCMV分离均阴性(0/10)。在HCMV分离阳性的8例病人中，尿标本阳性7例，血标本阳性6例，尿和血标本均阳性6例。阳性者经原位杂交和单克隆抗体鉴定。31例器官移植者中除1例心脏移植病人类风湿因子阳性外，余为阴性。术前IgM均为阴性(0/31)，IgG均为阳性；术后IgM阳性者6例(6/31，19.4%)(图1)。
图1 不同时期血、尿标本中HCMV的分离与IgM的检测
Fig. 1 HCMV isolation and detection of anti-HCMV IgM in blood and urine at different periods
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2.2 不同时期HHV-6分离与IgM的检测 从31例器官移植病人不同时期的PBMC中分离HHV-6，病毒分离阳性10例(10/31，32.3%)，4例死亡。分离阳性者中肾移植病人3例(3/18，16.7%)，心脏移植病人1例(1/1)、肺移植病人1例(1/1)，骨髓移植病人5例(5/10，50%)。病毒分离阳性者经单克隆抗体鉴定。术前HHV-6 IgM阳性1例(1/31，3.2%)，IgG均为阳性；术后IgM阳性8例(8/31，25.8%)(图2)。
图2 不同时期的PBMC中HHV-6的分离与IgM的检测
Fig. 2 HHV-6 isolation in PBMC and detection of anti-HHV-6 IgM at different periods
2.3 PCR检测不同时期HCMV DNA和HHV-6 DNA 31例器官移植病人中HCMV DNA阳性14例(14/31，45.2%)，其中白细胞阳性13例，尿阳性9例，尿和血均阳性8例。阳性者在2%琼脂糖凝胶电泳后于171bp处见一条带。用这对引物于同样条件下扩增单纯疱疹病毒(1，2型HSV-1，HSV-2)、水痘带状疱疹病毒(VZV)、EB病毒(EBV)、HHV-6Z29及HEL细胞DNA，均未见阳性条带；扩增HCMV AD169株DNA则见明显阳性条带。故认为所用引物具有高度特异性。HHV-6 DNA阳性者19例(19/31，61.3%)，其中肾移植病人阳性8例(8/18，44.4%)，心脏移植病人1例(1/1)，肺移植1例(1/1)，骨髓移植9例(9/10，90%)。阳性者在2%琼脂糖凝胶电泳后于161bp处有一明显条带。用这对引物于同样条件下扩增HSV-1，HSV-2，VZV，EBV，HCMV及CBMC-DNA均未见阳性条带；扩增HHV-6 Z29株DNA则见明显的阳性条带。故所用引物具高度特异性(图3)。
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图3 不同时期血、尿中HCMV-DNA和HHV-6-DNA的检测率
Fig. 3 Detection of HCMV-DNA and HHV-6 DNA in blood and urine at different periods
3 讨论
器官移植病人术后HHV-6与HCMV感染较常见，且对器官移植成败至关重要。其感染的形式有两种：一种为原发感染，即器官移植病人在移植术前病毒感染指标为阴性，移植后首次发生的感染；另一种为复发感染，即器官移植病人术前病毒感染指标已为阳性，术后由于免疫抑制剂的使用致使潜伏病毒被激活而复发[8～10]。免疫抑制剂的使用，增加了HCMV和HHV-6感染的发生率和感染的严重程度，常导致肺炎、发热、肝炎、脑炎、胃肠出血、视网膜炎等，加重免疫排斥，导致移植失败甚至累及病人性命。Lewis和Cone等研究了器官移植病人HHV-6和HCMV感染，阳性率为27%～51%。感染大多发生于移植后第2～6周，移植后6个月内随时都可发生[3，4]。与无HCMV及HHV-6感染的病人相比，HCMV和/或HHV-6感染的移植病人死亡率增加[3，10，11]。
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根据本文HCMV和HHV-6的病毒分离及其相应的IgM检测结果，判断其活动性感染率分别为25.8%和32.3%，其中心、肺移植病人各1例为HCMV和HHV-6合并感染。不同时期HHV-6和HCMV感染结果，提示活动性感染开始于术后2周，3～4周达高峰，3月内随时均可发生。感染形式上，由于术前HCMV-DNA和HHV-6-DNA阳性率均较高，分别为35.5%和45.1%，术后阳性率分别增至45.1%和61.3%，并维持在较高水平(45%～61%)。同时IgG阳性率为100%。故推测感染主要系复发性质。免疫抑制剂的使用，使潜伏的HHV-6和HCMV被激活，活动性感染率增加，感染加重排异反应，排异反应又加重感染后果。有HCMV和/或HHV-6活动性感染者死亡率高；死者100%有HCMV和/或HHV-6感染。骨髓移植病人中HCMV活动性感染少见，而HHV-6的活动性感染率则高达50%。肾移植病人HCMV与HHV-6的感染率相近。可见在不同类型器官移植HCMV和HHV-6感染有差异。心肺大器官移植病人各1例均为HCMV和HHV-6合并感染。由于病例数少，其感染率尚难下结论。
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①湖南省中药局，卫生厅资助项目(批准号96035,95-5)
中国图书分类号 R392
参考文献
[1]Gretchen V. No moratorium on clinical trials. Science, 1998,279:648
[2]Editoral. Cytomegalovirus infection in allograft recipients. Lancet, 1989,1:303-304
[3]Lewis RM, Johnson PC, Golden A, et al. The adverse importance of cytomegalovirus infection on clinical outcome in cyclosporine prednise treated renal allograft recipients. Transplantation, 1988,45:353-359
, http://www.100md.com
[4]Cone RW, Hackman RC, Huang MW, et al. Human herpesvirus 6 in lung tissue from patients with pneumonia after bone marrow transplantation. N Engl J Med, 1993,329:156-161
[5]Okuno T, Higashi K, Shiraki K, et al. Human herpesvirus 6 infection in renal transplantation. Transplantation, 1990,49:519-522
[6]郭建平，吴洁如.地塞米松、二甲亚砜及低速离心对人巨细胞病毒复制的影响.湖南医科大学学报，1989，14：25-28
[7]Salahuddin SZ, Ablashi DV, Markham PD, et al. Isolation of new virus, HBLV, in patients with lymphoproliferative disorder. Science, 1986,234:596-599
, 百拇医药
[8]Van Dorp WT, Vlieger A, Jiw NW, et al. The polymerase chain reaction, a sensitive and rapid technique for detection cytomegalovirus infection after transplantation. Transplantation, 1992,54:661-665
[9]Cuende JI, Johnson A, Sherman M, et al. High prevalence of HHV-6 DNA in peripheral blood mononuclear cells of healthy individuals detected by PCR. J Med Virol, 1994,43:115-118
[10]肖扬名，施凯，罗敏华，等.器官移植术后受者巨细胞病毒的PCR检测.湖南医科大学学报，1996，21：120-122
[11]罗敏华，施凯，肖扬名，等.从器官移植受者外周血分离出人类疱疹病毒6型.湖南医科大学学报，1996，21：117-119
收稿日期：1998-05-04, http://www.100md.com