静脉与硅胶管小间隙桥接神经的实验研究
作者：王飞 张盛忠 路学一 林洪培
单位：王飞(首都医科大学附属同仁医院骨科 邮政编码100730)；路学一(首都医科大学附属同仁医院骨科 邮政编码100730)；林洪培(首都医科大学附属同仁医院骨科 邮政编码100730) 张盛忠(病理科)
关键词：周围神经；小间隙桥接；静脉/硅胶管
编者按 动物实验中 编者按 动物实验中，断裂神经间有3mm间隙，除使用非神经管桥接术外，也可采取保留神经外膜，再做神经外膜吻合，亦有利于神经的再衔接。这篇文章反映了同类实验的一种观点，供读者在实践中参考。
本刊编委会
摘 要：目的 探讨一种新的神经缝合方法，并比较静脉与硅胶管两种桥接物的优劣。方法 应用静脉、硅胶管作为再生室，对大白鼠股神经断裂进行小间隙(3mm)桥接的实验对比，5周后做显微解剖和组织病理学观测。结果 小间隙桥接有利于神经的选择性再生，而静脉组更明显优于硅胶管组。结论 应用静脉小间隙桥接断裂的周围神经符合神经再生的内在规律，为神经纤维的选择性再生提供了一个优良的内环境，有利于神经功能的恢复。
, 百拇医药
Experimental study on bridging the broken nerve with a small-gap
by vein and silica gel canal
Wang Fei
(The Department of Orthopedics, TongRen Hospital. Beijing 100073)
Zhang Shengzhong
(The Department of Orthopedics, TongRen Hospital. Beijing 100073)
Lu Xueyi
, 百拇医药
(The Department of Orthopedics, TongRen Hospital. Beijing 100073)
Abstract：Objective:To explore a new method of neurorrhaphy and compare the merits and dismerits of two bridging materials.Methods:Broken ends of femoral nerve of mouse were bridged by vein or silica gel canal with a 3mm gap, respectively. The microdissection and histopathological observation were made five weeks later. Results: Neurorrhaphy by a small gap bridge was comply with the principle of choice of neuroregeneration. The result of group of vein bridging would be of advantage superior to that of silica gel canal. Conclusion: Neurorrhaphy by vein bridging with a small gap complied with the characteristics of neuroregeneration, it provided an excellent inner-environment for the neurofibril regeneration and was beneficial to the recovery of the function of the nerve.
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Key words：Peripheral nerve Break bridging with a small gap Vein or silica gel canal▲
周围神经损伤的传统修复方法是应用神经外膜和神经束膜缝合，但由于周围神经多为混合神经，盲目的对接可导致感觉神经纤维与运动神经纤维的错接，以致临床效果欠佳。随着人们对周围神经再生趋向性的研究，设计在神经吻合端留有一定间隙，利用远端神经对近端神经的趋化与营养作用，保证断裂的神经束能良好对合，将是今后周围神经损伤修复的发展趋势。我们设计应用静脉与硅胶管小间隙桥接大鼠股神经的对比实验，旨在探讨两种不同非神经管状材料对神经再生的影响。
材料与方法
一、实验设计
选体重250～300g大白鼠10只，性别不限，分两组(实际上是一只鼠)，每只鼠随机取右腿或左腿的股神经为静脉桥接组，剩下的另一组为硅胶管桥接组。
, 百拇医药
二、实验方法
氯胺酮腹腔麻醉，去除大腿内侧毛，按无菌手术原则在放大10倍手术显微镜下自大腿近端分离并显露股神经，暴露15mm，每只鼠自股四头肌肌分支以上5mm处做双侧股神经切断，近侧神经断端切除3mm，用11-0显微缝线将两端缝合，留有3mm间隙。将预先取下的大鼠新鲜腔静脉及1.0mm内径硅胶管(长均为1cm)，分别桥接于两侧神经外，桥接后的静脉及硅胶管端分别用11-0显微缝线固定于神经外膜上。在距神经远、近断端5mm处及小间隙中央静脉与硅胶管外壁分别用碳素墨水标记，逐层缝合切口，放回笼中饲养。
三、观察方法
1.大体观察大鼠术后伸膝运动恢复的时间，并在放大10倍手术显微镜下进行显微解剖观察。
2.组织学检查：取下标本，10%中性福尔马林液固定，各组标本均在预先标记的神经近、远端5mm及小间隙中央做横切面，经梯度酒精、丙酮脱水，Epon 812包埋，AO超薄切片机切出1μm厚片，作HE及Gless镀银染色，光镜下进行组织学检查。
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3.神经纤维密度计数：光镜下每个横切面分为五个象限，即左上、左下、右上、右下、中，每个象限随机拍摄一张照片，在放大400倍的照片上人工计数神经纤维的数量，求出均数后除以照片所代表的实际组织面积即为神经纤维密度。
结果
一、大体及显微解剖观察
静脉组术后5周明显恢复自主伸膝运动，而硅胶管组仅恢复轻微伸膝运动。静脉组：静脉外壁与周围组织有轻度粘连；神经在静脉室中正常生长，再生神经除在吻合的小间隙部可见缝线外，不能辨认出神经吻合部位；静脉室中神经干与静脉粘连轻，桥接的静脉可完整去除；神经干在小间隙部直径与两端相似，无假性神经瘤形成。硅胶管组：硅管外壁均被一层厚而致密的结缔组织包绕；硅室中硅管与神经之间可见少量无色粘稠液体填充；再生神经通过小间隙部，神经干在小间隙部直径较两端明显细小，约为正常神经干的1/2；神经干无膨大，无假性神经瘤形成。
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二、组织学观察
光镜下桥接处结缔组织增生均明显减少，可见增生的雪旺氏细胞，神经纤维排列紊乱，神经束样结构不明显，远端5mm横切面，神经纤维均位于原神经束结构内，分布均匀。静脉组再生轴索数目多；硅胶管组再生轴索数目少，周围间质胶原化明显(图1、2、3)。
图1 近端5mm大鼠股神经正常结构(放大200倍)
图2 静脉组：远端5mm大鼠股神经横切面(放大200倍)再生轴索数目多，整个内部结构较成熟
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图3 硅胶管组：远端5mm大鼠股神经横切面
(放大200倍)再生轴索数目少，间质水肿，胶原化明显
三、神经纤维密度计数(近端5mm为7679±448个/mm2)结果见附表。
附表 神经纤维密度计数结果统计表(
±s)
n=10
静脉组
硅胶管组
t值
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P值
小间隙部
5305±581
3310±335
6.202
<0.001
远端5mm
2123±153
1679±109
3.361
<0.01
两组比较有显著性差异
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讨论
一、周围神经的断裂与修复，长期以来一直是很多学者研究的前沿课题。神经断裂后，手术只能恢复其连续性，但功能修复却依赖于神经纤维能否回到原来的支配形式。提高功能恢复，固然需要精细的显微外科技术，但技术提高毕竟有限，目前临床上常规应用的神经束膜和神经外膜吻合，实际上都是带有一定盲目性的强迫神经再生的修复方法。如何使再生神经更好地越过吻合口及如何避免神经吻合处形成瘢痕，这些一直是迫切需要解决的问题。近年来，国内外一些学者已从改进神经修复的显微外科技术转向了探索神经再生过程中生理、生化的改变，认为理想的神经修复应该最大限度地发挥神经营养性及趋向性的作用，建议在神经两断端间有意识地保留一定的间隙，使其充分发挥神经的营养性及趋向性，从而保证神经束的良好对合[1，2]。国内有学者通过实验也证实了小间隙桥接神经断裂优于神经的直接吻合[3，4]。
二、我们应用静脉及硅胶管作为再生室，对大鼠股神经断裂进行了小间隙(3mm)桥接的对比实验研究。术后5周经大体、显微解剖、组织病理学检测证明：静脉组明显优于硅胶管组。本实验观察到，静脉组大鼠伸膝运动恢复时间较硅胶管组短；硅室中再生神经干在小间隙部直径较两端明显细小，而静脉室中再生神经干直径与两端相似，组织学检查中发现再生神经密度静脉组较硅胶管组明显增高。
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Ochi等认为神经再生过程中，两端相互影响、相互作用，这种作用是一个复杂的过程，近端生长锥有多重感受器，能与环绕它周围表面的结构及化学因子发生反应[5]。同时周围神经断裂后，再生神经的数量、生长速度受再生环境中神经纤维活性因子的影响[6，7]。静脉壁的特点：管壁薄、具有通透性，这样有利于营养物质的渗入，且静脉壁与神经外膜结构相似，桥接后可形成再生神经外膜的成分。因此，我们认为静脉不仅仅只起一个机械性支架及保护再生神经纤维免遭瘢痕侵袭的作用，它还可为神经纤维的再生提供一个相对优良的内环境，有利于再生神经的生长。
三、桥接物的对比研究是提供神经最佳桥接物不可缺少的手段。本实验证明静脉作为桥接物，可为神经的损伤修复提供再生室，保证远端神经分泌的趋化物质扩散到神经近端，重建肢体的功能。而自体神经在无张力下缝接时，有意识地在外膜下断端保留3mm的间隙作为再生室，虽也可明显促进神经功能的恢复，但由于神经外膜簿弱，不易剥离，而神经束的切除又比较困难，因此术中操作不如静脉桥接简便易行。■
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参考文献：
[1]Dellon Al. Mackinnon SE. An alternative to the classical nerve graft for the management of the short nerve gap. Plast Reconstr Surg, 1988, 82:849.
[2]Mackinnon SE. Nerve regeneration through a pseudosynovial sheath in a primate model. Plast Reconstr Surg, 1985, 75:840.
[3]尹维田，张巨，王玉发，等.周围神经小间隙桥接-神经吻合方法实验研究.中华显微外科杂志，1991，3：183.
[4]张波，杨贵兰，邵振恒.大鼠周围神经损伤套管法和与缝合法的比较.中华实验外科杂志，1988，4：177.
, 百拇医药
[5]Ochi M, Ikuta Y, Miyamoto Y, et al. Experimental evidence of selective axonal regeneration in allogenic and isogenic Y-Chambers. Exp Neurol, 1992, 115:260.
[6]Rich KM, Alexander TD, Pryor JC, et al. Nerve growth factor enhances regeneration through silicone chambers. Exp Neurol, 1989, 105:162.
[7]Lundborg G, Longo ML, Varon S. Nerve regeneration model and trophiv factors in vivo. Brain Res, 1982, 232:157.
收稿日期：1997-11-26
修回日期：1998-06-25, 百拇医药
单位：王飞(首都医科大学附属同仁医院骨科 邮政编码100730)；路学一(首都医科大学附属同仁医院骨科 邮政编码100730)；林洪培(首都医科大学附属同仁医院骨科 邮政编码100730) 张盛忠(病理科)
关键词：周围神经；小间隙桥接；静脉/硅胶管
编者按 动物实验中 编者按 动物实验中，断裂神经间有3mm间隙，除使用非神经管桥接术外，也可采取保留神经外膜，再做神经外膜吻合，亦有利于神经的再衔接。这篇文章反映了同类实验的一种观点，供读者在实践中参考。
本刊编委会
摘 要：目的 探讨一种新的神经缝合方法，并比较静脉与硅胶管两种桥接物的优劣。方法 应用静脉、硅胶管作为再生室，对大白鼠股神经断裂进行小间隙(3mm)桥接的实验对比，5周后做显微解剖和组织病理学观测。结果 小间隙桥接有利于神经的选择性再生，而静脉组更明显优于硅胶管组。结论 应用静脉小间隙桥接断裂的周围神经符合神经再生的内在规律，为神经纤维的选择性再生提供了一个优良的内环境，有利于神经功能的恢复。
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Experimental study on bridging the broken nerve with a small-gap
by vein and silica gel canal
Wang Fei
(The Department of Orthopedics, TongRen Hospital. Beijing 100073)
Zhang Shengzhong
(The Department of Orthopedics, TongRen Hospital. Beijing 100073)
Lu Xueyi
, 百拇医药
(The Department of Orthopedics, TongRen Hospital. Beijing 100073)
Abstract：Objective:To explore a new method of neurorrhaphy and compare the merits and dismerits of two bridging materials.Methods:Broken ends of femoral nerve of mouse were bridged by vein or silica gel canal with a 3mm gap, respectively. The microdissection and histopathological observation were made five weeks later. Results: Neurorrhaphy by a small gap bridge was comply with the principle of choice of neuroregeneration. The result of group of vein bridging would be of advantage superior to that of silica gel canal. Conclusion: Neurorrhaphy by vein bridging with a small gap complied with the characteristics of neuroregeneration, it provided an excellent inner-environment for the neurofibril regeneration and was beneficial to the recovery of the function of the nerve.
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Key words：Peripheral nerve Break bridging with a small gap Vein or silica gel canal▲
周围神经损伤的传统修复方法是应用神经外膜和神经束膜缝合，但由于周围神经多为混合神经，盲目的对接可导致感觉神经纤维与运动神经纤维的错接，以致临床效果欠佳。随着人们对周围神经再生趋向性的研究，设计在神经吻合端留有一定间隙，利用远端神经对近端神经的趋化与营养作用，保证断裂的神经束能良好对合，将是今后周围神经损伤修复的发展趋势。我们设计应用静脉与硅胶管小间隙桥接大鼠股神经的对比实验，旨在探讨两种不同非神经管状材料对神经再生的影响。
材料与方法
一、实验设计
选体重250～300g大白鼠10只，性别不限，分两组(实际上是一只鼠)，每只鼠随机取右腿或左腿的股神经为静脉桥接组，剩下的另一组为硅胶管桥接组。
, 百拇医药
二、实验方法
氯胺酮腹腔麻醉，去除大腿内侧毛，按无菌手术原则在放大10倍手术显微镜下自大腿近端分离并显露股神经，暴露15mm，每只鼠自股四头肌肌分支以上5mm处做双侧股神经切断，近侧神经断端切除3mm，用11-0显微缝线将两端缝合，留有3mm间隙。将预先取下的大鼠新鲜腔静脉及1.0mm内径硅胶管(长均为1cm)，分别桥接于两侧神经外，桥接后的静脉及硅胶管端分别用11-0显微缝线固定于神经外膜上。在距神经远、近断端5mm处及小间隙中央静脉与硅胶管外壁分别用碳素墨水标记，逐层缝合切口，放回笼中饲养。
三、观察方法
1.大体观察大鼠术后伸膝运动恢复的时间，并在放大10倍手术显微镜下进行显微解剖观察。
2.组织学检查：取下标本，10%中性福尔马林液固定，各组标本均在预先标记的神经近、远端5mm及小间隙中央做横切面，经梯度酒精、丙酮脱水，Epon 812包埋，AO超薄切片机切出1μm厚片，作HE及Gless镀银染色，光镜下进行组织学检查。
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3.神经纤维密度计数：光镜下每个横切面分为五个象限，即左上、左下、右上、右下、中，每个象限随机拍摄一张照片，在放大400倍的照片上人工计数神经纤维的数量，求出均数后除以照片所代表的实际组织面积即为神经纤维密度。
结果
一、大体及显微解剖观察
静脉组术后5周明显恢复自主伸膝运动，而硅胶管组仅恢复轻微伸膝运动。静脉组：静脉外壁与周围组织有轻度粘连；神经在静脉室中正常生长，再生神经除在吻合的小间隙部可见缝线外，不能辨认出神经吻合部位；静脉室中神经干与静脉粘连轻，桥接的静脉可完整去除；神经干在小间隙部直径与两端相似，无假性神经瘤形成。硅胶管组：硅管外壁均被一层厚而致密的结缔组织包绕；硅室中硅管与神经之间可见少量无色粘稠液体填充；再生神经通过小间隙部，神经干在小间隙部直径较两端明显细小，约为正常神经干的1/2；神经干无膨大，无假性神经瘤形成。
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二、组织学观察
光镜下桥接处结缔组织增生均明显减少，可见增生的雪旺氏细胞，神经纤维排列紊乱，神经束样结构不明显，远端5mm横切面，神经纤维均位于原神经束结构内，分布均匀。静脉组再生轴索数目多；硅胶管组再生轴索数目少，周围间质胶原化明显(图1、2、3)。
图1 近端5mm大鼠股神经正常结构(放大200倍)
图2 静脉组：远端5mm大鼠股神经横切面(放大200倍)再生轴索数目多，整个内部结构较成熟
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图3 硅胶管组：远端5mm大鼠股神经横切面
(放大200倍)再生轴索数目少，间质水肿，胶原化明显
三、神经纤维密度计数(近端5mm为7679±448个/mm2)结果见附表。
附表 神经纤维密度计数结果统计表(
±s)n=10
静脉组
硅胶管组
t值
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P值
小间隙部
5305±581
3310±335
6.202
<0.001
远端5mm
2123±153
1679±109
3.361
<0.01
两组比较有显著性差异
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一、周围神经的断裂与修复，长期以来一直是很多学者研究的前沿课题。神经断裂后，手术只能恢复其连续性，但功能修复却依赖于神经纤维能否回到原来的支配形式。提高功能恢复，固然需要精细的显微外科技术，但技术提高毕竟有限，目前临床上常规应用的神经束膜和神经外膜吻合，实际上都是带有一定盲目性的强迫神经再生的修复方法。如何使再生神经更好地越过吻合口及如何避免神经吻合处形成瘢痕，这些一直是迫切需要解决的问题。近年来，国内外一些学者已从改进神经修复的显微外科技术转向了探索神经再生过程中生理、生化的改变，认为理想的神经修复应该最大限度地发挥神经营养性及趋向性的作用，建议在神经两断端间有意识地保留一定的间隙，使其充分发挥神经的营养性及趋向性，从而保证神经束的良好对合[1，2]。国内有学者通过实验也证实了小间隙桥接神经断裂优于神经的直接吻合[3，4]。
二、我们应用静脉及硅胶管作为再生室，对大鼠股神经断裂进行了小间隙(3mm)桥接的对比实验研究。术后5周经大体、显微解剖、组织病理学检测证明：静脉组明显优于硅胶管组。本实验观察到，静脉组大鼠伸膝运动恢复时间较硅胶管组短；硅室中再生神经干在小间隙部直径较两端明显细小，而静脉室中再生神经干直径与两端相似，组织学检查中发现再生神经密度静脉组较硅胶管组明显增高。
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Ochi等认为神经再生过程中，两端相互影响、相互作用，这种作用是一个复杂的过程，近端生长锥有多重感受器，能与环绕它周围表面的结构及化学因子发生反应[5]。同时周围神经断裂后，再生神经的数量、生长速度受再生环境中神经纤维活性因子的影响[6，7]。静脉壁的特点：管壁薄、具有通透性，这样有利于营养物质的渗入，且静脉壁与神经外膜结构相似，桥接后可形成再生神经外膜的成分。因此，我们认为静脉不仅仅只起一个机械性支架及保护再生神经纤维免遭瘢痕侵袭的作用，它还可为神经纤维的再生提供一个相对优良的内环境，有利于再生神经的生长。
三、桥接物的对比研究是提供神经最佳桥接物不可缺少的手段。本实验证明静脉作为桥接物，可为神经的损伤修复提供再生室，保证远端神经分泌的趋化物质扩散到神经近端，重建肢体的功能。而自体神经在无张力下缝接时，有意识地在外膜下断端保留3mm的间隙作为再生室，虽也可明显促进神经功能的恢复，但由于神经外膜簿弱，不易剥离，而神经束的切除又比较困难，因此术中操作不如静脉桥接简便易行。■
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参考文献：
[1]Dellon Al. Mackinnon SE. An alternative to the classical nerve graft for the management of the short nerve gap. Plast Reconstr Surg, 1988, 82:849.
[2]Mackinnon SE. Nerve regeneration through a pseudosynovial sheath in a primate model. Plast Reconstr Surg, 1985, 75:840.
[3]尹维田，张巨，王玉发，等.周围神经小间隙桥接-神经吻合方法实验研究.中华显微外科杂志，1991，3：183.
[4]张波，杨贵兰，邵振恒.大鼠周围神经损伤套管法和与缝合法的比较.中华实验外科杂志，1988，4：177.
, 百拇医药
[5]Ochi M, Ikuta Y, Miyamoto Y, et al. Experimental evidence of selective axonal regeneration in allogenic and isogenic Y-Chambers. Exp Neurol, 1992, 115:260.
[6]Rich KM, Alexander TD, Pryor JC, et al. Nerve growth factor enhances regeneration through silicone chambers. Exp Neurol, 1989, 105:162.
[7]Lundborg G, Longo ML, Varon S. Nerve regeneration model and trophiv factors in vivo. Brain Res, 1982, 232:157.
收稿日期：1997-11-26
修回日期：1998-06-25, 百拇医药