软骨提取液成分分析及降血脂和抗过氧化实验研究
作者：磨红玲 李茂
单位：磨红玲：广西医科大学病理生理学教研室 南宁 530021; 李茂：广西中医药研究所
关键词：酸性粘多糖；血脂；抗过氧化
广西医科大学990217
摘要 目的：为探讨动物软骨调节血脂和延缓衰老的作用。方法：将猪关节软骨碱降解及酶降解制得提取液，进行成分分析及动物实验。结果：猪软骨提取液中含有丰富的酸性粘多糖和氨基酸及人体必需微量元素，能显著降低大鼠血清TC和TG(P<0.01)和显著升高大鼠体内超氧化物歧化酶(SOD)活性并降低血清脂质过氧化物(LPO)水平(均P<0.01)。结论：猪软骨提取液有一定的保健作用。
中国图书资料分类法分类号 R151.3
CONTENT ANALYSIS AND RESEARCH OF THE CARTILAGE REFINED LIQUID ON ITS EFFECT IN ANTI-PEROXIDATION AND HYPERLIPEMIA REDUCTION
, 百拇医药
Mo Hongling，Li Mao
(Department of Pathophysiology of Guangxi Medical University,Nanning,530021)
Abstract Objective:To explore the action of animals' cartilage in regulating blood-fat and the delaying seni-um.Method:The refined liquid of pig cartilage was produced and its content was analysed.Result:The refined liquid of pig cartilage contains rich acid mucop-olysaccharide and aminal acid and essential trace elements that are benefitial to for human body,and can obviously reduce TC and TG and LPO in the serum of rats and induce the vitality of SOD in RBC of rats.Conclusion:The refined liquid of cartilage has some protective effect on human health.
, 百拇医药
Key words acid-mucopolysaccharide;blood-fat;anti-peroxidation
脊椎动物的软骨作为药用已有悠久历史。据《本草纲目》记载：动物软骨气味甘温，无毒，除湿热，壮腰骨，固齿耐老[1]。为了从现代医学角度探讨动物软骨的保健功能，我们对猪软骨提取液进行了成分分析及降血脂和抗过氧化实验研究现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料及制取
从本市四个农贸市场自购猪关节软骨共7.3 kg，洗净去附着物后，经碱处理、水解、酶解、过滤后备用。
1.2 实验动物及方法
Wistar老龄雄性大鼠80只，鼠龄17个月以上，体质量(260±5)g。正常饲养一周后，按体重随机分为正常对照组(Ⅰ组)，阳性对照组(Ⅱ组)，低剂量实验组(Ⅲ组)和高剂量实验组(Ⅳ组)。每组20只。Ⅰ组喂基础饲料，Ⅱ～Ⅳ组喂高脂饲料至形成高脂动物模型后，Ⅱ组继续喂高脂饲料，Ⅲ组和Ⅳ组喂实验饲料。实验阶段全程60 d。
, 百拇医药
高脂饲料配方：猪油15%，胆固醇1.5%，甲基硫氧嘧啶0.2%，基础饲料83.3%[2]。
实验饲料配方：低剂量组为高脂饲料85%，加软骨液原汁15%，高剂量组为高脂饲料70%加软骨液原汁30%。
1.3 观察指标
1.3.1 软骨液原汁用日立835-50型氨基酸自动分析仪测定氨基酸组分：751紫外分光光度计测定酸性粘多糖：日立Z-6000/7000型偏振塞曼原子吸收分光光度计测定部分元素。
1.3.2 测定方法：实验结束时处死动物，取血清参照文献[3]方法测定血清总胆固醇(TC)，血清甘油三脂(TG)；按文献[4]测定红细胞中超氧化物歧化酶(RBC-SOD)活性和血清脂质过氧化物(LPO)含量。
1.3.3 所得数据用微机进行单因素方差分析。
, 百拇医药
2 结果
2.1软骨经处理后，原汁中仍保留有丰富的酸性粘多糖，并含有一定量的多种氨基酸和人体必需元素(表1，表2)。
表1 软骨液酸性粘多糖和氨基酸含量(ρB/mg.L-1) 成分
含量
成分
含量
成分
含量
酸性粘多糖
27140.4
, 百拇医药
丙氨酸
106.0
酪氨酸
243.9
天门冬氨酸
23.0
胱氨酸
96.6
苯丙氨酸
240.4
苏氨酸
109.7
缬氨酸
, 百拇医药
164.0
赖氨酸
375.3
丝氨酸
52.3
蛋氨酸
105.4
组氨酸
42.9
谷氨酸
93.2
异亮氨酸
105.4
, http://www.100md.com
精氨酸
538.5
甘氨酸
70.6
亮氨酸
397.9
表2 软骨液中部分元素含量(wB/mg.kg-1) 元素
含量
元素
含量
P
, 百拇医药 111.1
Fe
6.13
Ca
99.66
Cr
0.06
Zn
50.78
Cu
0.83
Mg
64.18
, http://www.100md.com
Mn
0.01
2.2 从表3可见实验开始时，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组之间大鼠体内TC和TG水平无显著性差异(P均>0.05)，并且均高于Ⅰ组(P均<0.01)，实验性高血脂模型成功。实验结束时，Ⅲ、Ⅳ组大鼠TC和TG水平虽然稍高于Ⅰ组，但显著低于Ⅱ组(均P<0.01)，自身对比差异亦非常显著(P均<0.01)。
表3 各组大鼠血TC和TG变化(
±s,cB/nmol.L-1) 组别
n
TC
, http://www.100md.com TG
实验开始
实验结束
P
实验开始
实验结束
P
Ⅰ
20
2.1294±0.053
2.1347±0.045
>0.05
0.0971±0.003
, http://www.100md.com
0.0978±0.002
>0.05
Ⅱ
20
3.4169±0.061
3.5478±0.063
<0.01
1.0819±0.004
1.0889±0.005
<0.05
Ⅲ
20
, 百拇医药
3.4278±0.054
2.4103±0.060
<0.01
1.0786±0.003
0.3495±0.004
<0.01
Ⅳ
20
3.4109±0.059
2.4009±0.061
<0.01
1.0811±0.003
, 百拇医药
0.3489±0.004
<0.01
F检验
P<0.01
P<0.01
P<0.01
P<0.01
q检验
Ⅲ∶ⅣP>0.05
Ⅲ∶ⅣP>0.05
Ⅲ∶ⅣP>0.05
Ⅲ∶ⅣP>0.05
, 百拇医药
Ⅲ∶ⅡP>0.05
Ⅲ∶ⅡP<0.01
Ⅲ∶ⅡP>0.05
Ⅲ∶ⅡP<0.01
Ⅲ∶ⅠP<0.01
Ⅲ∶ⅠP<0.01
Ⅲ∶ⅠP<0.01
Ⅲ∶ⅠP<0.01
Ⅳ∶ⅠP>0.05
Ⅳ∶ⅠP<0.01
Ⅳ∶ⅠP>0.05
Ⅳ∶ⅠP<0.01
, 百拇医药
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
2.3 从表4可见，各组大鼠实验前后体内RBC-SOD和LPO测定，Ⅲ、Ⅳ组大鼠在实验结束时，血中RBC-SOD活性和LPO水平均与Ⅰ、Ⅱ组有显著差异，RBC-SOD活性明显增高，血清LPO水平明显降低(P均<0.01)。表4 各组大鼠RBC-SOD和LPO变化(
±s) 组别
, 百拇医药
n
RBC-SOD(U/G.H6)
LPO(cB/μmol.L-1)
实验开始
实验结束
P
实验开始
实验结束
P
Ⅰ
20
, 百拇医药
3007.21±42.83
3104.15±59.28
<0.05
2.9161±0.8001
2.8778±0.8310
>0.05
Ⅱ
20
3010.19±40.13
2507.91±47.35
<0.05
2.8103±0.8016
, 百拇医药
4.0019±0.8063
<0.05
Ⅲ
20
3011.37±49.08
4882.74±54.28
<0.05
2.8150±0.8121
2.9709±0.8014
>0.05
Ⅳ
20
, 百拇医药
3009.141±45.13
4893.61±50.19
<0.05
2.8171±0.8021
3.0011±0.8021
>0.05
F检验
P>0.05 P<0.01
P>0.05 P<0.01
q检验
Ⅳ∶ⅢP>0.05
, 百拇医药 Ⅳ∶ⅢP>0.05
Ⅳ∶ⅡP<0.01
Ⅳ∶ⅡP<0.01
Ⅳ∶ⅠP<0.01
Ⅳ∶ⅠP>0.05
Ⅲ∶ⅡP<0.01
Ⅲ∶ⅡP<0.01
Ⅲ∶ⅠP<0.01
Ⅲ∶ⅠP>0.05
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
3 讨论
, 百拇医药
对软骨液的成分分析表明，除含有多种氨基酸外，并含有丰富酸性粘多糖和人体必需矿物质。说明动物软骨经过这样的工艺处理后，仍能有效的保持其中的营养物质，并经动物实验证实，可以有效的降低老龄高血脂大鼠血中TC和TG水平，提示动物软骨不仅是一种营养食品，还可以作为一种调节血脂的保健食品加以开发。
软骨液降血脂的机理，与其含有丰富的酸性粘多糖有关。Ehilich最早于1973年发现酸性粘多糖具有降胆固醇作用，迄今为止的研究已证实，酸性粘多糖可提高毛细血管内脂蛋白脂酶的活性，并促进该酶的释放，从而起到降血脂作用[5，6]。
机体衰老过程与体内SOD酶活性下降和自由基反应过程增强有关[7]。本次实验表明，软骨液能显著提高老龄大鼠体内SOD活性并显著降低LPO水平，提示软骨液可能具有一定的延缓衰老作用。其机理可能与其含有的Zn、Cu等微量元素参与组成体内抗氧化酶系统，增强SOD抗自由基作用有关[8]。
, 百拇医药
参考文献
1 李时珍.本草纲目(下册).北京：人民卫生出版社，1982.2 168
2 于守洋.中国营养保健食品指南.哈尔滨：黑龙江科学技术出版社，1996.222
3 金宗濂.功能食品评价原理及方法.北京：北京大学出版社，1995.86，107
4 许士凯.抗衰老药物学.北京：中国医药科学技术出版社，1994.149
5 张新江，郑德舰.陶氏太阳海星酸性粘多糖药物研究.海洋药物，1983，3(1)：23
6 赵本树，杜晓东，吕金梁.鲨鱼软骨酸性粘多糖对小鼠降脂作用.中国药理学通报，1995，11(3)：259
7 王岛雄一郎.老化与过氧化脂质.国外医学老年学分册，1983，4(3)：123
8 潘 王 番，李思汉.锌铜与动脉粥样硬化.微量元素与健康，1995，12(3)：58
收稿日期：1998-08-10, http://www.100md.com
单位：磨红玲：广西医科大学病理生理学教研室 南宁 530021; 李茂：广西中医药研究所
关键词：酸性粘多糖；血脂；抗过氧化
广西医科大学990217
摘要 目的：为探讨动物软骨调节血脂和延缓衰老的作用。方法：将猪关节软骨碱降解及酶降解制得提取液，进行成分分析及动物实验。结果：猪软骨提取液中含有丰富的酸性粘多糖和氨基酸及人体必需微量元素，能显著降低大鼠血清TC和TG(P<0.01)和显著升高大鼠体内超氧化物歧化酶(SOD)活性并降低血清脂质过氧化物(LPO)水平(均P<0.01)。结论：猪软骨提取液有一定的保健作用。
中国图书资料分类法分类号 R151.3
CONTENT ANALYSIS AND RESEARCH OF THE CARTILAGE REFINED LIQUID ON ITS EFFECT IN ANTI-PEROXIDATION AND HYPERLIPEMIA REDUCTION
, 百拇医药
Mo Hongling，Li Mao
(Department of Pathophysiology of Guangxi Medical University,Nanning,530021)
Abstract Objective:To explore the action of animals' cartilage in regulating blood-fat and the delaying seni-um.Method:The refined liquid of pig cartilage was produced and its content was analysed.Result:The refined liquid of pig cartilage contains rich acid mucop-olysaccharide and aminal acid and essential trace elements that are benefitial to for human body,and can obviously reduce TC and TG and LPO in the serum of rats and induce the vitality of SOD in RBC of rats.Conclusion:The refined liquid of cartilage has some protective effect on human health.
, 百拇医药
Key words acid-mucopolysaccharide;blood-fat;anti-peroxidation
脊椎动物的软骨作为药用已有悠久历史。据《本草纲目》记载：动物软骨气味甘温，无毒，除湿热，壮腰骨，固齿耐老[1]。为了从现代医学角度探讨动物软骨的保健功能，我们对猪软骨提取液进行了成分分析及降血脂和抗过氧化实验研究现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料及制取
从本市四个农贸市场自购猪关节软骨共7.3 kg，洗净去附着物后，经碱处理、水解、酶解、过滤后备用。
1.2 实验动物及方法
Wistar老龄雄性大鼠80只，鼠龄17个月以上，体质量(260±5)g。正常饲养一周后，按体重随机分为正常对照组(Ⅰ组)，阳性对照组(Ⅱ组)，低剂量实验组(Ⅲ组)和高剂量实验组(Ⅳ组)。每组20只。Ⅰ组喂基础饲料，Ⅱ～Ⅳ组喂高脂饲料至形成高脂动物模型后，Ⅱ组继续喂高脂饲料，Ⅲ组和Ⅳ组喂实验饲料。实验阶段全程60 d。
, 百拇医药
高脂饲料配方：猪油15%，胆固醇1.5%，甲基硫氧嘧啶0.2%，基础饲料83.3%[2]。
实验饲料配方：低剂量组为高脂饲料85%，加软骨液原汁15%，高剂量组为高脂饲料70%加软骨液原汁30%。
1.3 观察指标
1.3.1 软骨液原汁用日立835-50型氨基酸自动分析仪测定氨基酸组分：751紫外分光光度计测定酸性粘多糖：日立Z-6000/7000型偏振塞曼原子吸收分光光度计测定部分元素。
1.3.2 测定方法：实验结束时处死动物，取血清参照文献[3]方法测定血清总胆固醇(TC)，血清甘油三脂(TG)；按文献[4]测定红细胞中超氧化物歧化酶(RBC-SOD)活性和血清脂质过氧化物(LPO)含量。
1.3.3 所得数据用微机进行单因素方差分析。
, 百拇医药
2 结果
2.1软骨经处理后，原汁中仍保留有丰富的酸性粘多糖，并含有一定量的多种氨基酸和人体必需元素(表1，表2)。
表1 软骨液酸性粘多糖和氨基酸含量(ρB/mg.L-1) 成分
含量
成分
含量
成分
含量
酸性粘多糖
27140.4
, 百拇医药
丙氨酸
106.0
酪氨酸
243.9
天门冬氨酸
23.0
胱氨酸
96.6
苯丙氨酸
240.4
苏氨酸
109.7
缬氨酸
, 百拇医药
164.0
赖氨酸
375.3
丝氨酸
52.3
蛋氨酸
105.4
组氨酸
42.9
谷氨酸
93.2
异亮氨酸
105.4
, http://www.100md.com
精氨酸
538.5
甘氨酸
70.6
亮氨酸
397.9
表2 软骨液中部分元素含量(wB/mg.kg-1) 元素
含量
元素
含量
P
, 百拇医药 111.1
Fe
6.13
Ca
99.66
Cr
0.06
Zn
50.78
Cu
0.83
Mg
64.18
, http://www.100md.com
Mn
0.01
2.2 从表3可见实验开始时，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组之间大鼠体内TC和TG水平无显著性差异(P均>0.05)，并且均高于Ⅰ组(P均<0.01)，实验性高血脂模型成功。实验结束时，Ⅲ、Ⅳ组大鼠TC和TG水平虽然稍高于Ⅰ组，但显著低于Ⅱ组(均P<0.01)，自身对比差异亦非常显著(P均<0.01)。
表3 各组大鼠血TC和TG变化(
±s,cB/nmol.L-1) 组别n
TC
, http://www.100md.com TG
实验开始
实验结束
P
实验开始
实验结束
P
Ⅰ
20
2.1294±0.053
2.1347±0.045
>0.05
0.0971±0.003
, http://www.100md.com
0.0978±0.002
>0.05
Ⅱ
20
3.4169±0.061
3.5478±0.063
<0.01
1.0819±0.004
1.0889±0.005
<0.05
Ⅲ
20
, 百拇医药
3.4278±0.054
2.4103±0.060
<0.01
1.0786±0.003
0.3495±0.004
<0.01
Ⅳ
20
3.4109±0.059
2.4009±0.061
<0.01
1.0811±0.003
, 百拇医药
0.3489±0.004
<0.01
F检验
P<0.01
P<0.01
P<0.01
P<0.01
q检验
Ⅲ∶ⅣP>0.05
Ⅲ∶ⅣP>0.05
Ⅲ∶ⅣP>0.05
Ⅲ∶ⅣP>0.05
, 百拇医药
Ⅲ∶ⅡP>0.05
Ⅲ∶ⅡP<0.01
Ⅲ∶ⅡP>0.05
Ⅲ∶ⅡP<0.01
Ⅲ∶ⅠP<0.01
Ⅲ∶ⅠP<0.01
Ⅲ∶ⅠP<0.01
Ⅲ∶ⅠP<0.01
Ⅳ∶ⅠP>0.05
Ⅳ∶ⅠP<0.01
Ⅳ∶ⅠP>0.05
Ⅳ∶ⅠP<0.01
, 百拇医药
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
2.3 从表4可见，各组大鼠实验前后体内RBC-SOD和LPO测定，Ⅲ、Ⅳ组大鼠在实验结束时，血中RBC-SOD活性和LPO水平均与Ⅰ、Ⅱ组有显著差异，RBC-SOD活性明显增高，血清LPO水平明显降低(P均<0.01)。表4 各组大鼠RBC-SOD和LPO变化(
±s) 组别, 百拇医药
n
RBC-SOD(U/G.H6)
LPO(cB/μmol.L-1)
实验开始
实验结束
P
实验开始
实验结束
P
Ⅰ
20
, 百拇医药
3007.21±42.83
3104.15±59.28
<0.05
2.9161±0.8001
2.8778±0.8310
>0.05
Ⅱ
20
3010.19±40.13
2507.91±47.35
<0.05
2.8103±0.8016
, 百拇医药
4.0019±0.8063
<0.05
Ⅲ
20
3011.37±49.08
4882.74±54.28
<0.05
2.8150±0.8121
2.9709±0.8014
>0.05
Ⅳ
20
, 百拇医药
3009.141±45.13
4893.61±50.19
<0.05
2.8171±0.8021
3.0011±0.8021
>0.05
F检验
P>0.05 P<0.01
P>0.05 P<0.01
q检验
Ⅳ∶ⅢP>0.05
, 百拇医药 Ⅳ∶ⅢP>0.05
Ⅳ∶ⅡP<0.01
Ⅳ∶ⅡP<0.01
Ⅳ∶ⅠP<0.01
Ⅳ∶ⅠP>0.05
Ⅲ∶ⅡP<0.01
Ⅲ∶ⅡP<0.01
Ⅲ∶ⅠP<0.01
Ⅲ∶ⅠP>0.05
Ⅱ∶ⅠP<0.01
Ⅱ∶ⅠP<0.01
3 讨论
, 百拇医药
对软骨液的成分分析表明，除含有多种氨基酸外，并含有丰富酸性粘多糖和人体必需矿物质。说明动物软骨经过这样的工艺处理后，仍能有效的保持其中的营养物质，并经动物实验证实，可以有效的降低老龄高血脂大鼠血中TC和TG水平，提示动物软骨不仅是一种营养食品，还可以作为一种调节血脂的保健食品加以开发。
软骨液降血脂的机理，与其含有丰富的酸性粘多糖有关。Ehilich最早于1973年发现酸性粘多糖具有降胆固醇作用，迄今为止的研究已证实，酸性粘多糖可提高毛细血管内脂蛋白脂酶的活性，并促进该酶的释放，从而起到降血脂作用[5，6]。
机体衰老过程与体内SOD酶活性下降和自由基反应过程增强有关[7]。本次实验表明，软骨液能显著提高老龄大鼠体内SOD活性并显著降低LPO水平，提示软骨液可能具有一定的延缓衰老作用。其机理可能与其含有的Zn、Cu等微量元素参与组成体内抗氧化酶系统，增强SOD抗自由基作用有关[8]。
, 百拇医药
参考文献
1 李时珍.本草纲目(下册).北京：人民卫生出版社，1982.2 168
2 于守洋.中国营养保健食品指南.哈尔滨：黑龙江科学技术出版社，1996.222
3 金宗濂.功能食品评价原理及方法.北京：北京大学出版社，1995.86，107
4 许士凯.抗衰老药物学.北京：中国医药科学技术出版社，1994.149
5 张新江，郑德舰.陶氏太阳海星酸性粘多糖药物研究.海洋药物，1983，3(1)：23
6 赵本树，杜晓东，吕金梁.鲨鱼软骨酸性粘多糖对小鼠降脂作用.中国药理学通报，1995，11(3)：259
7 王岛雄一郎.老化与过氧化脂质.国外医学老年学分册，1983，4(3)：123
8 潘 王 番，李思汉.锌铜与动脉粥样硬化.微量元素与健康，1995，12(3)：58
收稿日期：1998-08-10, http://www.100md.com