奥丹色酮对蛙心室不应期的影响
作者：林春 张小军 贾秉钧 陈崇宏
单位：林春 张小军 贾秉钧 (福建医科大学生理学教研室 福州 350004)；陈崇宏 (福建医科大学药理学教研室 福州 350004)
关键词：奥丹色酮；心室；不应期；牛蛙
福建医科大学学报990214
目的 研究奥丹色酮对蛙心室有效不应期及相对不应期的影响。方法 牛蛙在体蛙心灌流。结果 低于10-3μmol/L浓度的奥丹色酮对蛙心室有效不应期及相对不应期均无明显影响(P>0.05)。起始有效浓度为10-3μmol/L，在10-3～10μmol/L范围内，对有效不应期无明显影响，但显著延长相对不应期(P<0.01)，且呈剂量依赖性及时间依从性关系。结论 奥丹色酮具有延长蛙心室相对不应期的作用。
, 百拇医药
Effect of Ondansetron on Ventricular Refractory Period in Frog Heart
Lin Chun Zhang Xiaojun Jia Bingjun,et al
(Department of Physiology,Fujian Medical University,Fuzhou,350004)
Objective Effects of ondansetron on ventricular effective and relative refractory period in the bullfrog heart were observed.Methods Using the ventricle perfusion of bullfrog with Ringer's and ondansetron solution in vivo.Results Ondansetron below 10-3μmol/L contration,ondansetron didn't cause significant prolongation effective refractory period(ERP),but prolonged significantly related refractory period(RRP)(P<0.01),which depended on concentration and perfusion time of ondansetron.Conclusion Ondansetron might have effect of prolongation ventricular RRP in the bullfrog heart.
, 百拇医药
Key words ondansetron;ventricle;refractory period;bullfrog
奥丹色酮(ondansetron)是高选择性5-HT3受体拮抗剂，具有强止吐作用。Aapro应用于防止化疗时所引起的恶心和呕吐[1]；Costall的临床前研究认为奥丹色酮可用于抑制焦虑与精神病的发作[2]。奥丹色酮可延长心肌动作电位时程(APD)[3,4]，Scholtysik应用另一化学结构不同于奥丹色酮的5-HT3受体拮抗剂(ICS-205-930)证实其具有延长Q-T间期及抗心律失常的作用[5]。但对心肌不应期的影响未见报道。本工作系先期在冷血动物心室观察奥丹色酮对其不应期的影响。
1 材料与方法
1.1 动物 牛蛙(市售)30只，180±20g。破坏中枢神经，背位固定于蛙手术板。除向心的后腔静脉及离心的右主动脉以外，结扎所有进出心脏的动静脉。在后腔静脉移行于静脉窦处向心插管并结扎，用任氏液灌流静脉窦、心房和心室，左主动脉结扎插管引流计量。
, http://www.100md.com
1.2 蛙心灌流 任氏液与奥丹色酮溶液分别置于内径相等的50ml注射器外套筒，套筒下端经调节夹由三通开关连接，再接静脉窦插管。二灌流套筒的恒压微玻口与蛙心平面距离相等(30～35cm),调节任氏液与奥丹色酮溶液的流量使之一致，在灌流全过程中心率与蛙心外形及灌流量保持稳定。
1.3 不应期的检测 刺激电极阴极置于房室交界沟处，阳极置于心尖，心尖夹垂直连接于10g张力换能器(GH-2A)弹簧应变片。换能器输出分二路，一路接生理记录仪(LSM-2A)直流前放，描记心动曲线，另一路经电压放大调节器接数字显示刺激器(DSA-Ⅱ)的触发线路，使心肌收缩达最高点时的电流触发刺激器(S1)，由输出端输出一个波宽1.0ms、强度相当于心肌刺激阈1.0倍的方波，作为检测刺激(S2)，调节数字显示延时线路，控制S1—S2间期(ms,S1与S2均显示于SBR-1示波器进行校对)，当S2引起心室(正常心动周期曲线外的)最小期外收缩时的S1—S2，加心室收缩起点至收缩最高点的时程为心室有效不应期(ERP)。继续延长S1—S2，当S2引起的心室期外收缩幅度相当于正常心动曲线幅度时的全时程减去ERP为相对不应期(RRP)。
, http://www.100md.com
1.4 药物 双蒸水配制蛙心灌流液(NaCl6.76,KCl0.09,CaCl20.117,NaHCO30.225g/L)。奥丹色酮来源于药理学教研室陈崇宏教授(Glaxo Group Research Ltd. Greenford Middlesex UK.,受赠于浙江省医学科学研究所)，用上述蛙心灌流液配制。
1.5 资料统计 实验数据以
±s表示，组间比较用t检验，P<0.05为显著性标准。
2 结 果
2.1 蛙心室不应期对照值 15只动物在任氏液灌流5min条件下，有效不应期609±98ms，相对不应期490±67ms。
2.2 不同浓度奥丹色酮溶液对心室不应期的影响 15只动物，奥丹色酮溶液取0.001，0.01，0.1，1.0，10μmol/L五种浓度，依次灌流5min后，检测有效不应期及相对不应期的变化，观察其与奥丹色酮浓度的关系(表1,图1)。
, http://www.100md.com
表1 不同浓度奥丹色酮对蛙心室不应期的影响(n=15) 奥丹色酮(μmol/L)
ERP(ms)
RRP(ms)
用药前
609±38
490±67
0.001
601±16
565±81*
0.01
598±38
, 百拇医药 650±137**
0.1
613±36
734±106**
1.0
618±53
893±158**
10
620±28
903±147**
ERP：有效不应期；RRP：相对不应期.与用药前比较,*:P<0.05 ,**:P<0.01(下表同)
, 百拇医药
图1 不同浓度奥丹色酮对蛙心室不应期的影响(%)
○—○ 相对不应期 ●—● 有效不应期
n=15.*:P<0.05,**:P<0.01(下图同)
(1)5种浓度奥丹色酮溶液对蛙心有效不应期不表现任何明显影响
(P>0.05);(2)从0.001μmol/L起始至1.0μmol/L范围内相对不应期的延长与剂量呈明显的直线正相关，超过1.0μmol/L渐表现趋于饱和状态。
2.3 奥丹色酮灌流后不同时间点对不应期的影响 15只动物，用1.0μmol/L浓度的奥丹色酮溶液灌流蛙心，观察灌流后的2,4,8,16,32min五个时间点，检测不应期的变化(表2，图2)。在所取时间点对有效不应期均无明显影响(P>0.05)，奥丹色酮对相对不应期的影响表现明显的时间依从关系。
, http://www.100md.com
表2 奥丹色酮灌流(1μmol/L)后不同时间点对不应期的影响(n=15) 用药前
560±41
420±38
2
590±18
450±42*
4
598±23
540±21**
8
585±31
680±17**
, 百拇医药
16
583±27
800±32**
图2 奥丹色酮(1μmol/L)灌流不同时间对蛙心室不应期的影响
3 讨 论
实验结果可以看出，奥丹色酮对蛙心室肌兴奋性的有效不应期没有明显影响，却显著延长相对不应期，并呈明显的剂量依赖性与时间依从性关系，从而改变了有效不应期与相对不应期的比例。5-HT3受体广泛分布于中枢神经与外周神经系统，调节Na+,K+离子流，对K+更具选择性[6]，影响神经系统去极化及递质释放。5-HT3受体亦存在哺乳动物心肌细胞，影响其离子通透性，Lorenzi证实奥丹色酮低浓度(<1.7±1.0μmol/L)时，阻断哺乳动物离体心肌细胞的延迟性整流电流(Ik),延长动作电位时程，但并不影响静息电位水平及动作电位幅值[3]，主要影响复极时程，Williams观察到奥丹色酮可延长麻醉家兔心电图的Q-T间期[7]。膜电位复极化时程的后移，膜电位状况的变化将导致检测刺激S2时表现不应期相应延长的现象。至于奥丹色酮为何只影响蛙心室相对不应期而不明显影响其绝对不应期，本实验难以观察，尚在实验中。
, 百拇医药
本实验分别以正常任氏液或1.0μmol/L奥丹色酮不间断灌流35min，蛙心率均无明显变化(45±5min-1,n=15,P>0.05)。但随奥丹色酮灌流时间的延长，相对不应期的变化愈益明显，灌流时间未超过16min时，不应期的变化与灌流时间呈直线正相关，16～32min反应渐趋饱和状况，所以奥丹色酮 对蛙心室相对不应期的影响，并非由于心率与灌流时间所致。
奥丹色酮明显改变蛙心室相对不应期，从而改变有效不应期与相对不应期比例的特点是否也表现在哺乳动物心室肌，尚有待进一步观察，但这一特点无疑对心率失常的调节具有重要的药理学意义，文献已有初步报道[8]。
参考文献
1 Aapro MS.5-HT3 receptor antagonists:an overview of their present status and future potential in cancer therapy-induced emesis.Drug，1991;42:551
, 百拇医药
2 Costall B,Naytor RJ,Tylers MB.The psychopharmacology of 5-HT3 receptor.Pharmacol Ther,1990;47:181
3 Lorenzi de FG,Bridal TR,Spinelli W. Bloke of the delayed rectifier current(IK) by the 5-HT3 antagonists ondansetron and granisetron in feline ventricular myocytes.J Pharmaca,1994;113:527
4 Scholtysik G.Evidence for inhibition by ICS-205-930 and stimulation by BRL34915 of K+ conductance in cardiac muscle.Naunyn Schmied Arch Pharmacol,1987;335:692
, http://www.100md.com
5 Scholtysik G,Imoto Y,Yatani A,et al.5-hydroxytryptamine antagonist ICS-205-930 bloke cardiac potassium,sodium and calcium currents.J Pharmacol Exp Ther,1988;245:773
6 Malone HM,Peters JA,Lambert JJ.Physiological and phmarcological properties of 5-HT3 receptors - a patch clamp study.Neuropeptides,1991;19(Suppl):25
7 Williams PD,Cohen ML,Turk JA.Electrocardiographic effects of granisetron and ondansetron,two 5-HT3 receptor antagonists in anesthetized dogs.Drug Der Res,1991;24:277
8 Hof RP,Hof A,Novosel D,et al.Antiarrhythmic hemodynamic effects of tropisetron on anesthetized rabbits.J Cardiovasc Pharmacol,1991;22:499
(收稿:1999-01-27 修回:1999-04-13), 百拇医药
单位：林春 张小军 贾秉钧 (福建医科大学生理学教研室 福州 350004)；陈崇宏 (福建医科大学药理学教研室 福州 350004)
关键词：奥丹色酮；心室；不应期；牛蛙
福建医科大学学报990214
目的 研究奥丹色酮对蛙心室有效不应期及相对不应期的影响。方法 牛蛙在体蛙心灌流。结果 低于10-3μmol/L浓度的奥丹色酮对蛙心室有效不应期及相对不应期均无明显影响(P>0.05)。起始有效浓度为10-3μmol/L，在10-3～10μmol/L范围内，对有效不应期无明显影响，但显著延长相对不应期(P<0.01)，且呈剂量依赖性及时间依从性关系。结论 奥丹色酮具有延长蛙心室相对不应期的作用。
, 百拇医药
Effect of Ondansetron on Ventricular Refractory Period in Frog Heart
Lin Chun Zhang Xiaojun Jia Bingjun,et al
(Department of Physiology,Fujian Medical University,Fuzhou,350004)
Objective Effects of ondansetron on ventricular effective and relative refractory period in the bullfrog heart were observed.Methods Using the ventricle perfusion of bullfrog with Ringer's and ondansetron solution in vivo.Results Ondansetron below 10-3μmol/L contration,ondansetron didn't cause significant prolongation effective refractory period(ERP),but prolonged significantly related refractory period(RRP)(P<0.01),which depended on concentration and perfusion time of ondansetron.Conclusion Ondansetron might have effect of prolongation ventricular RRP in the bullfrog heart.
, 百拇医药
Key words ondansetron;ventricle;refractory period;bullfrog
奥丹色酮(ondansetron)是高选择性5-HT3受体拮抗剂，具有强止吐作用。Aapro应用于防止化疗时所引起的恶心和呕吐[1]；Costall的临床前研究认为奥丹色酮可用于抑制焦虑与精神病的发作[2]。奥丹色酮可延长心肌动作电位时程(APD)[3,4]，Scholtysik应用另一化学结构不同于奥丹色酮的5-HT3受体拮抗剂(ICS-205-930)证实其具有延长Q-T间期及抗心律失常的作用[5]。但对心肌不应期的影响未见报道。本工作系先期在冷血动物心室观察奥丹色酮对其不应期的影响。
1 材料与方法
1.1 动物 牛蛙(市售)30只，180±20g。破坏中枢神经，背位固定于蛙手术板。除向心的后腔静脉及离心的右主动脉以外，结扎所有进出心脏的动静脉。在后腔静脉移行于静脉窦处向心插管并结扎，用任氏液灌流静脉窦、心房和心室，左主动脉结扎插管引流计量。
, http://www.100md.com
1.2 蛙心灌流 任氏液与奥丹色酮溶液分别置于内径相等的50ml注射器外套筒，套筒下端经调节夹由三通开关连接，再接静脉窦插管。二灌流套筒的恒压微玻口与蛙心平面距离相等(30～35cm),调节任氏液与奥丹色酮溶液的流量使之一致，在灌流全过程中心率与蛙心外形及灌流量保持稳定。
1.3 不应期的检测 刺激电极阴极置于房室交界沟处，阳极置于心尖，心尖夹垂直连接于10g张力换能器(GH-2A)弹簧应变片。换能器输出分二路，一路接生理记录仪(LSM-2A)直流前放，描记心动曲线，另一路经电压放大调节器接数字显示刺激器(DSA-Ⅱ)的触发线路，使心肌收缩达最高点时的电流触发刺激器(S1)，由输出端输出一个波宽1.0ms、强度相当于心肌刺激阈1.0倍的方波，作为检测刺激(S2)，调节数字显示延时线路，控制S1—S2间期(ms,S1与S2均显示于SBR-1示波器进行校对)，当S2引起心室(正常心动周期曲线外的)最小期外收缩时的S1—S2，加心室收缩起点至收缩最高点的时程为心室有效不应期(ERP)。继续延长S1—S2，当S2引起的心室期外收缩幅度相当于正常心动曲线幅度时的全时程减去ERP为相对不应期(RRP)。
, http://www.100md.com
1.4 药物 双蒸水配制蛙心灌流液(NaCl6.76,KCl0.09,CaCl20.117,NaHCO30.225g/L)。奥丹色酮来源于药理学教研室陈崇宏教授(Glaxo Group Research Ltd. Greenford Middlesex UK.,受赠于浙江省医学科学研究所)，用上述蛙心灌流液配制。
1.5 资料统计 实验数据以
±s表示，组间比较用t检验，P<0.05为显著性标准。2 结 果
2.1 蛙心室不应期对照值 15只动物在任氏液灌流5min条件下，有效不应期609±98ms，相对不应期490±67ms。
2.2 不同浓度奥丹色酮溶液对心室不应期的影响 15只动物，奥丹色酮溶液取0.001，0.01，0.1，1.0，10μmol/L五种浓度，依次灌流5min后，检测有效不应期及相对不应期的变化，观察其与奥丹色酮浓度的关系(表1,图1)。
, http://www.100md.com
表1 不同浓度奥丹色酮对蛙心室不应期的影响(n=15) 奥丹色酮(μmol/L)
ERP(ms)
RRP(ms)
用药前
609±38
490±67
0.001
601±16
565±81*
0.01
598±38
, 百拇医药 650±137**
0.1
613±36
734±106**
1.0
618±53
893±158**
10
620±28
903±147**
ERP：有效不应期；RRP：相对不应期.与用药前比较,*:P<0.05 ,**:P<0.01(下表同)
, 百拇医药
图1 不同浓度奥丹色酮对蛙心室不应期的影响(%)
○—○ 相对不应期 ●—● 有效不应期
n=15.*:P<0.05,**:P<0.01(下图同)
(1)5种浓度奥丹色酮溶液对蛙心有效不应期不表现任何明显影响
(P>0.05);(2)从0.001μmol/L起始至1.0μmol/L范围内相对不应期的延长与剂量呈明显的直线正相关，超过1.0μmol/L渐表现趋于饱和状态。
2.3 奥丹色酮灌流后不同时间点对不应期的影响 15只动物，用1.0μmol/L浓度的奥丹色酮溶液灌流蛙心，观察灌流后的2,4,8,16,32min五个时间点，检测不应期的变化(表2，图2)。在所取时间点对有效不应期均无明显影响(P>0.05)，奥丹色酮对相对不应期的影响表现明显的时间依从关系。
, http://www.100md.com
表2 奥丹色酮灌流(1μmol/L)后不同时间点对不应期的影响(n=15) 用药前
560±41
420±38
2
590±18
450±42*
4
598±23
540±21**
8
585±31
680±17**
, 百拇医药
16
583±27
800±32**
图2 奥丹色酮(1μmol/L)灌流不同时间对蛙心室不应期的影响
3 讨 论
实验结果可以看出，奥丹色酮对蛙心室肌兴奋性的有效不应期没有明显影响，却显著延长相对不应期，并呈明显的剂量依赖性与时间依从性关系，从而改变了有效不应期与相对不应期的比例。5-HT3受体广泛分布于中枢神经与外周神经系统，调节Na+,K+离子流，对K+更具选择性[6]，影响神经系统去极化及递质释放。5-HT3受体亦存在哺乳动物心肌细胞，影响其离子通透性，Lorenzi证实奥丹色酮低浓度(<1.7±1.0μmol/L)时，阻断哺乳动物离体心肌细胞的延迟性整流电流(Ik),延长动作电位时程，但并不影响静息电位水平及动作电位幅值[3]，主要影响复极时程，Williams观察到奥丹色酮可延长麻醉家兔心电图的Q-T间期[7]。膜电位复极化时程的后移，膜电位状况的变化将导致检测刺激S2时表现不应期相应延长的现象。至于奥丹色酮为何只影响蛙心室相对不应期而不明显影响其绝对不应期，本实验难以观察，尚在实验中。
, 百拇医药
本实验分别以正常任氏液或1.0μmol/L奥丹色酮不间断灌流35min，蛙心率均无明显变化(45±5min-1,n=15,P>0.05)。但随奥丹色酮灌流时间的延长，相对不应期的变化愈益明显，灌流时间未超过16min时，不应期的变化与灌流时间呈直线正相关，16～32min反应渐趋饱和状况，所以奥丹色酮 对蛙心室相对不应期的影响，并非由于心率与灌流时间所致。
奥丹色酮明显改变蛙心室相对不应期，从而改变有效不应期与相对不应期比例的特点是否也表现在哺乳动物心室肌，尚有待进一步观察，但这一特点无疑对心率失常的调节具有重要的药理学意义，文献已有初步报道[8]。
参考文献
1 Aapro MS.5-HT3 receptor antagonists:an overview of their present status and future potential in cancer therapy-induced emesis.Drug，1991;42:551
, 百拇医药
2 Costall B,Naytor RJ,Tylers MB.The psychopharmacology of 5-HT3 receptor.Pharmacol Ther,1990;47:181
3 Lorenzi de FG,Bridal TR,Spinelli W. Bloke of the delayed rectifier current(IK) by the 5-HT3 antagonists ondansetron and granisetron in feline ventricular myocytes.J Pharmaca,1994;113:527
4 Scholtysik G.Evidence for inhibition by ICS-205-930 and stimulation by BRL34915 of K+ conductance in cardiac muscle.Naunyn Schmied Arch Pharmacol,1987;335:692
, http://www.100md.com
5 Scholtysik G,Imoto Y,Yatani A,et al.5-hydroxytryptamine antagonist ICS-205-930 bloke cardiac potassium,sodium and calcium currents.J Pharmacol Exp Ther,1988;245:773
6 Malone HM,Peters JA,Lambert JJ.Physiological and phmarcological properties of 5-HT3 receptors - a patch clamp study.Neuropeptides,1991;19(Suppl):25
7 Williams PD,Cohen ML,Turk JA.Electrocardiographic effects of granisetron and ondansetron,two 5-HT3 receptor antagonists in anesthetized dogs.Drug Der Res,1991;24:277
8 Hof RP,Hof A,Novosel D,et al.Antiarrhythmic hemodynamic effects of tropisetron on anesthetized rabbits.J Cardiovasc Pharmacol,1991;22:499
(收稿:1999-01-27 修回:1999-04-13), 百拇医药