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编号:10224553
大肠肿瘤bcl-2和C-MYC基因的表达及其意义
http://www.100md.com 《齐鲁医学杂志》 1999年第2期
     作者:孙方利 赵幼安 张维东 高雪芹

    单位:孙方利 青岛市第二人民医院消化内科(青岛 266033);赵幼安 山东医科大学附属医院消化内科;张维东 高雪芹 山东省医学科学院基础医学研究所病理科

    关键词:肠肿瘤;基因,MYC;基因,bcl-2;基因表达调控

    齐鲁医学杂志/990201 【摘要】 ①目的 探讨大肠癌和大肠腺瘤中细胞凋亡相关基因bcl-2和C-MYC的表达及临床意义。②方法应用免疫组织化学方法对42例大肠癌,38例大肠腺瘤和15例正常大肠黏膜中bcl-2,C-MYC的表达率及表达强度进行观察和比较。③结果 大肠癌和大肠腺瘤bcl-2和C-MYC基因阳性表达率均显著高于正常大肠黏膜(χ2=4.20~20.66,P<0.05),大肠癌bcl-2和C-MYC基因阳性表达率显著高于大肠腺瘤(χ2=9.40,8.75,P<0.05);大肠癌bcl-2和C-MYC的表达强度均显著高于大肠腺瘤或正常大肠黏膜(χ2=4.98~16.84,P<0.05)。bcl-2和C-MYC基因在大肠癌中的表达率与病人的性别、年龄、组织类型、浸润深度、淋巴结转移及Dukes分期均无明显关系(χ2=0~1.56,P>0.05)。④结论 bcl-2和C-MYC基因过度表达可能与大肠肿瘤的发生有关,而对大肠癌病人的预后没有明显生物学意义。
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    中国图书馆分类法分类号 R735.3+4

    EXPRESSION AND SIGNIFICANCE OF BCL-2 AND C-MYC GENES IN COLORECTAL TUMORS

    Sun Fangli, Zhao Youan, Zhang Weidong, et al

    Department of Gastroenterology, The Second People's Hospital of Qingdao, Qingdao 266033

    【ABSTRACT】 Objective To investigate the expression of bcl-2 and C-MYC genes in colorectal carcinoma and adenoma and their clinical significance. Methods The positive rate and the intensity of expression of bcl-2 and C-MYC in 42 colorectal carcinoma, 38 colorectal adenoma and 15 normal colorectal mucosa were observed and compared with immunohistochemical method.Results The positive rate of bcl-2 and C-MYC gene expression in colorectal carcinoma and adenoma were significantly higher than that in normal colorectal mucosa (χ2=4.20-20.66, P<0.05). The positive rate of bcl-2 and C-MYC gene expression in colorectal carcinoma was also significantly higher than that in colorectal adenoma (χ2 =9.40,8.75, P<0.05). The intensity of bcl-2 and C-MYC gene expression in colorectal carcinoma was significantly higher than that in colorectal adenoma or normal mucosa (χ2 = 4.98-16.84,P<0.05). In colorectal carcinoma, the rate of bcl-2 and C-MYC gene expression had no correlation with the age and sex of patients, tumor histologic grade, lymph node metastasis, the depth of invasion and Dukes' stages of tumors (χ2=0-1.56,P>0.05). Conclusion The results indicate that over expression of bcl-2 and C-MYC gene may be related to the occurrance of colorectal tumor, but has no particular biological significance in prognosis of colorectal carcinoma.
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    【KEY WORDS】 intestinal neoplasm; genes, MYC; genes, bcl-2; gene expression regulation

    研究表明,肿瘤的发生、发展不仅与肿瘤细胞的增殖有关,而且与其凋亡也密切相关。bcl-2和C-MYC为重要的细胞凋亡调控基因,恶性肿瘤中经常有这两种基因产物同时活动。我们应用免疫组织化学方法对大肠肿瘤中此两种基因表达情况进行联合检测和比较,以期了解它们在大肠肿瘤发病中的作用及其临床意义。

    1 材料和方法

    1.1 标本来源

    标本来源于1995~1997年山东医科大学附属医院手术切除或经结肠镜电切的大肠肿瘤组织,并经病理证实。其中大肠癌病人42例(男25例,女17例;年龄27~84岁,平均56岁),高、中、低分化及黏液腺癌分别为14,14,9和5例,术前均未接受任何抗癌治疗;大肠腺瘤38例(男26例,女12例;年龄16~80岁,平均48岁),其中管状腺瘤20例,绒毛状腺瘤15例,管状绒毛状腺瘤3例;正常大肠黏膜组织15例(男11例,女4例;年龄32~76岁,平均43岁)。所有标本均经体积分数为0.10的福尔马林固定后,脱水,常规石蜡包埋,连续4μm切片。
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    1.2 染色方法

    采用免疫组织化学SABC法。小鼠抗人bcl-2,C-MYC单克隆抗体分别为CAL-BIOCHEM公司和CASTRA公司产品。HIGH-SABC试剂盒购自武汉博士德公司。染色步骤按说明书方法进行。bcl-2,C-MYC一抗均采用即用型,阳性对照采用阳性对照片(购于武汉博士德公司),阴性对照以PBS代替一抗。

    1.3 阳性标准及表达强度

    bcl-2及C-MYC蛋白表达以细胞出现清晰的棕黄色沉淀为阳性。其表达强度根据阳性细胞数的多少分为4级:(-)无阳性细胞或阳性细胞数<5%;(+)阳性细胞数为5%~25%;()阳性细胞数为26%~50%;()阳性细胞数>50%.
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    1.4 统计学方法

    两样本率的比较采用χ2检验或确切概率法。

    2 结果

    2.1 不同组织bcl-2及C-MCY基因的表达

    大肠癌组bcl-2基因阳性表达率为88.10%,大肠腺瘤组为57.89%,正常大肠黏膜组为26.67%,三组间比较差异均有显著性(χ2=9.40,20.66,4.20,P<0.01,0.05),而且大肠癌组表达强度为()者显著高于其他两组(χ2=16.84,11.88,P<0.01)。大肠癌组C-MYC基因阳性表达率为83.33%,大肠腺瘤组为52.63%,正常大肠黏膜组为20.00%,三组间比较差异均有显著性(χ2=8.75,19.95,4.66,P<0.01,0.05),而且大肠癌组表达强度为()者也显著高于其他两组(χ2=4.98,7.94,P<0.05)。见表1.
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    表1 三组病人bcl-2及C-MYC基因表达率及表达强度比较(例) 组别

    n

    bcl-2基因表达强度

    表达率

    (%)

    C-MCY基因表达强度

    表达率

    (%)

    -

    +
, 百拇医药
    -

    +

    正常大肠组

    15

    11

    3

    1

    0

    26.67

    12

    3
, 百拇医药
    0

    0

    20.00

    大肠癌组

    42

    5

    5

    11

    21*

    88.10**

    7

    5

    14
, 百拇医药
    16**

    83.33**

    大肠腺瘤组

    38

    16

    11

    8

    3

    57.89

    18

    5

    9

    6
, 百拇医药
    52.63

    与正常大肠组及大肠腺瘤组比较,*χ2=4.98,7.94,P均<0.05;**χ2=8.75~20.66,P<0.01;与正常大肠组比较,χ2=4.20,4.66,P<0.05

    2.2 bcl-2和C-MYC基因表达与大肠癌临床病理特征的关系

    bcl-2和C-MYC基因阳性表达率与大肠癌病人年龄、性别、淋巴结转移、组织类型、浸润深度、Dukes分期等均无明显的关系(χ2=0~1.56,P>0.05)。见表2.

    表2 bcl-2和C-MYC基因表达与大肠癌临床病理特征的关系
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    病理特征

    n

    bcl-2

    C-MYC

    阳性率(%)

    χ2

    P

    阳性率(%)

    χ2

    P

    组织类型

    高分化

    14
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    85.71

    85.71

    低分化

    9

    88.89

    0.67

    77.78

    0.52

    黏液腺癌

    5

    80.00

    0.62

    80.00
, 百拇医药
    0.62

    淋巴结

    转 移

    15

    86.67

    0.05

    >0.05

    80.00

    0.08

    >0.05

    未转移

    27

    88.89
, 百拇医药
    85.19

    浆膜

    浸 润

    36

    88.89

    0.15

    >0.05

    83.33

    0

    >0.05

    未浸润

    6

    83.33
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    83.33

    Dukes 分期

    A,B

    24

    87.50

    0.02

    >0.05

    87.50

    1.56

    >0.05

    C,D

    18

    88.89
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    72.22

    年龄

    <56岁

    19

    89.47

    0.06

    >0.05

    84.21

    0.02

    >0.05

    >56岁

    23

    86.96
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    82.61

    性别

    男

    25

    88.00

    0.000 5

    >0.05

    84.00

    0.02

    >0.05

    女

    17

    88.24
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    82.35

    3 讨论

    肿瘤的形成不单是细胞过度增殖的结果,而且与细胞凋亡异常有关。细胞凋亡是由多个基因调控的多种信号传递系统参与的主动耗能过程〔1,2〕。此过程有许多基因参与,包括bcl-2,C-MYC基因等。bcl-2基因是目前已知的一种抑制细胞凋亡基因,与肿瘤的发生有关〔3,4〕。bcl-2在肿瘤的形成中抑制细胞凋亡的机制尚未完全清楚。C-MYC基因作为一种转录因子,具有抑制和促进细胞凋亡的作用〔5〕。研究表明,C-MYC表达失调时,决定细胞发生增殖还是凋亡的关键并非C-MYC本身,它与其他基因协同作用方能发挥调节细胞凋亡的作用,若C-MYC表达增强,同时有bcl-2基因的高表达,则后者能阻断C-MYC的促细胞凋亡过程。

    本文结果显示,大肠肿瘤中bcl-2和C-MYC基因的表达均较正常大肠黏膜增强,而大肠癌又高于大肠腺瘤,说明bcl-2,C-MYC基因的异常表达和细胞凋亡的调控异常在大肠癌的发生中具有重要作用。Mosnier等〔6〕报道与大肠癌发生发展密切相关的P53基因在大肠腺瘤中表达很低(1/28),大肠癌形成过程中bcl-2基因异常表达较P53为早,说明bcl-2,C-MYC异常表达及其所导致的细胞凋亡调控异常与大肠癌的发生有关,故对大肠肿瘤早期进行bcl-2和C-MYC基因检测具有重要意义。而本文结果亦显示,bcl-2和C-MYC基因表达与大肠癌组织类型、淋巴结转移、浸润深度、临床分期等临床病理特征无关,提示二者在大肠癌中、晚期作用不明显,作为判断大肠癌预后的参考指标无明显意义。
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    参考文献

    1 Steller H. Mechanisms and genes of cellular suicide. Science,1995,267:1 445

    2 Schwartz LM, Osborne BA. Programmed cell death, apoptosis and killer genes. Immunol Today,1993,14(12):582

    3 Vaux DL, Cory S, Adams JM. Bcl-2 gene promotes haemopoietic cell survival and cooperates with C-MYC to immortalize pre-B cells. Nature,1998,335:440

    4 宝福凯. bcl-2基因家族对apoptosis的调节.生理科学进展, 1997,27(1):62
, 百拇医药
    5 Packham G, Cleveland JL. C-MYC and apoptosis. BBA, 1995,1242:11

    6 Mosnier JF, Perret AG, Vindimian M, et al. An immunohistochemical study of the simultaneous expression of bcl-2 and P53 oncoproteins in epithelial tumors of the colon and rectum.Arch Pathol Lab Med, 1996,120:654

    (1999-03-20收稿 1999-05-29修回), http://www.100md.com