抗坏血酸氧化酶在TRINDER反应中抗VC干扰应用评价
作者：黄亨健 徐克和 杨伟男 潘万德 李萍
单位：华西医科大学附属第一医院检验科(成都 610041)
关键词：
华西医学WEST CHINA MEDICAL JOURNAL1999年 第14卷 第2期 Vol [中图分类号]R446.1 [文献标识码]D
[文章编号]1002-0179(1999)02-0236-02
临床生化许多检测项目都应用了Trinder反应，如葡萄糖(GLU)、甘油三脂(TG)、胆固醇(CHOL)、尿酸(UA)。其原理为被测物质通过酶作用产生的过氧化氢(H2O2)在4—氨基替比林(4-AAP)、过氧化物酶(POD)的存在下，可生成红色醌亚胺化合物。该反应过程受到数十种药物干扰〔1〕。其中影响最大的药物为抗坏血酸(维生素C)，它能还原反应过程中所产生H2O2。使其生成的红色醌亚胺化合物减少。结果呈负干扰。近年来，应用抗坏血酸氧化酶使样本中的Vc干扰得以完全排除。本文对含有抗坏血酸氧化酶与不含抗坏血酸氧化酶的甘油三脂(TG)、胆固醇(CHOL)、尿酸(UA)试剂分别测定加入系列浓度Vc的样本，并进行了比较分析。
, http://www.100md.com
1 临床方与法
1.1 仪器与试剂 日立7170A全自动生化仪。上海东菱公司：甘油三脂(TG)、胆固醇(CHOL)、尿酸(UA)液体双试剂(R1试剂中含有1000U/L抗坏血酸氧化酶)批号951028。长征公司：甘油三脂(TG)、胆固醇(CHOL)、尿酸(UA)单一试剂(未含抗坏血酸氧化酶)。批号950889。成都试剂厂：抗坏血酸(分析纯)。
1.2 方法 液体双试剂和单一试剂的TG、CHOL、UA的分析参数按试剂说明书设定。先测定血清中TG、CHOL、UA含量。再加入不同浓度的Vc量。测定TG、CHOL。加入Vc量浓度为0.045～1.82mmol/L。测定UA加入Vc量浓度为0.01～0.23mmol/L。
2 结果
TG、CHOL、UA液体双试剂进行抗Vc的干扰实验及TG、CHOL、UA单一试剂进行Vc的干扰实验。结果见表1，表2，表3。
, 百拇医药
表1.抗坏血酸对液体双试剂及单一试剂TG的影响 加入抗坏血酸量
mmol/L
全液体双试剂
单一试剂
理论值
实测值
变化率%
理论值
实测值
变化率%
0.045
2.07
, http://www.100md.com
2.09
0.96
2.01
2.01
+0.50
0.08
2.01
2.03
+0.66
1.98
1.90
-4.00
0.15
, 百拇医药
1.87
1.84
-1.60
1.78
1.61
-9.55
0.18
1.79
1.79
0.00
1.77
1.56
-11.8
, 百拇医药
0.43
1.99
2.00
+0.50
1.92
1.66
-13.5
0.79
1.92
1.94
+1.04
1.88
1.18
, http://www.100md.com
-37.2
1.48
1.75
1.80
+2.85
1.69
0.32
-80.7
1.82
1.68
1.70
-1.20
1.60
, 百拇医药
0.18
-88.7
表2.抗坏血酸对液体双试剂及单一试剂CHOL的影响 加入抗坏血酸量
mmol/L
全液体双试剂
单一试剂
理论值
实测值
变化率%
理论值
实测值
变化率%
, http://www.100md.com
0.08
4.78
4.82
+0.84
4.63
4.64
+0.21
0.11
4.52
4.60
+1.77
4.50
4.39
, 百拇医药
-2.40
0.15
4.53
4.55
+0.44
4.37
4.13
-5.49
0.18
4.17
4.13
-0.96
4.12
, 百拇医药
3.91
-5.20
0.43
2.83
2.86
+1.40
2.73
2.49
-8.80
0.79
2.68
2.70
-0.81
, 百拇医药
2.63
1.94
-26.2
1.47
2.47
2.45
+0.81
2.40
1.00
-58.3
1.82
2.36
2.37
, http://www.100md.com
+0.42
2.27
0.72
-68.3
表3.抗坏血酸对液体双试剂及单一试剂UA的影响 加入抗坏血酸量
mmol/L
全液体双试剂
单一试剂
理论值
实测值
变化率%
理论值
, 百拇医药
实测值
变化率%
0.01
364
364
0.00
366
363
-0.83
0.02
366
364
-0.50
, 百拇医药
363
347
-4.40
0.045
353
350
-0.80
338
292
-13.6
0.12
327
327
, 百拇医药
0.00
318
215
-32.4
0.15
314
311
-0.90
305
173
-43.2
0.23
329
, 百拇医药
335
+2.90
344
94
-72.6
3 讨论
液体双试剂中R1含有1000U/L抗坏血酸氧化酶，该酶能在3～5分钟完全破坏Vc。然后加入R2试剂启动反应，彻底地克服了样本中Vc的干扰。表1、2、3结果显示：液体双试剂中的TG、CHOL在Vc浓度从0.045mmol/L递增至1.82mmol/L，UA在Vc浓度从0.01mmol/L递增至0.23mmol/L时，各项指标的实测值与理论值差别甚小。而未含有抗坏血酸氧化酶的TG、CHOL、UA在Vc浓度为0.18mmol/L(正常人机体内Vc最高含量0.20mmol/L)，便可导致TG测定值结果偏低11.8%，CHOL测定结果偏低5.2%，UA测定结果偏低高达50%以上。当Vc浓度为1.82mmol/L可产生TG，CHOL测定结果下降88.7%，68.3%。而UA在Vc浓度为0.23mmol/L时可抑制反应达72.6%，与文献〔2，3〕报导一致。以上结果表明，抗坏血酸氧化酶能有效地解决体内Vc对Trinder反应的干扰。从而能真正反映机体内物质浓度的真实含量。提高了实验结果的准确性。
, 百拇医药
正常人血清Vc浓度最高为0.20mmol/L。并随着尿液排出体外。近年来，随着人们对保健意识的增强。口服Vc的人群有增无减。将会导致TG、CHOL、UA测定结果偏低。特别是肾脏功能有损害的患者，对Vc的排出有障碍，故Vc可在体内富积，应给予重视。因此在实验诊断中，应当选择含有抗坏血酸氧化酶的试剂或者在检查前停止服用某些药物。从而真正反映体内物质实际含量。
4 参考文献
1 顾光煜，等，主编：临床化学自动分析仪应用指南。海洋出版社1993年。
2 Dobson HM，Muir MM，Hume R.The effect of ascorbic acid on the seasonal variations in serum cholesterol level.Scott Mer J 1984；29∶176.
3 Schultz KL，Badrick TC，Gaffency PT.High oral doses of sodium ascorbate cause significant cganges in five common clinical biochemical assay.Clin Biochem Rev 1993；14∶365.
(收稿日期：1999-03-28), 百拇医药
单位：华西医科大学附属第一医院检验科(成都 610041)
关键词：
华西医学WEST CHINA MEDICAL JOURNAL1999年 第14卷 第2期 Vol [中图分类号]R446.1 [文献标识码]D
[文章编号]1002-0179(1999)02-0236-02
临床生化许多检测项目都应用了Trinder反应，如葡萄糖(GLU)、甘油三脂(TG)、胆固醇(CHOL)、尿酸(UA)。其原理为被测物质通过酶作用产生的过氧化氢(H2O2)在4—氨基替比林(4-AAP)、过氧化物酶(POD)的存在下，可生成红色醌亚胺化合物。该反应过程受到数十种药物干扰〔1〕。其中影响最大的药物为抗坏血酸(维生素C)，它能还原反应过程中所产生H2O2。使其生成的红色醌亚胺化合物减少。结果呈负干扰。近年来，应用抗坏血酸氧化酶使样本中的Vc干扰得以完全排除。本文对含有抗坏血酸氧化酶与不含抗坏血酸氧化酶的甘油三脂(TG)、胆固醇(CHOL)、尿酸(UA)试剂分别测定加入系列浓度Vc的样本，并进行了比较分析。
, http://www.100md.com
1 临床方与法
1.1 仪器与试剂 日立7170A全自动生化仪。上海东菱公司：甘油三脂(TG)、胆固醇(CHOL)、尿酸(UA)液体双试剂(R1试剂中含有1000U/L抗坏血酸氧化酶)批号951028。长征公司：甘油三脂(TG)、胆固醇(CHOL)、尿酸(UA)单一试剂(未含抗坏血酸氧化酶)。批号950889。成都试剂厂：抗坏血酸(分析纯)。
1.2 方法 液体双试剂和单一试剂的TG、CHOL、UA的分析参数按试剂说明书设定。先测定血清中TG、CHOL、UA含量。再加入不同浓度的Vc量。测定TG、CHOL。加入Vc量浓度为0.045～1.82mmol/L。测定UA加入Vc量浓度为0.01～0.23mmol/L。
2 结果
TG、CHOL、UA液体双试剂进行抗Vc的干扰实验及TG、CHOL、UA单一试剂进行Vc的干扰实验。结果见表1，表2，表3。
, 百拇医药
表1.抗坏血酸对液体双试剂及单一试剂TG的影响 加入抗坏血酸量
mmol/L
全液体双试剂
单一试剂
理论值
实测值
变化率%
理论值
实测值
变化率%
0.045
2.07
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2.09
0.96
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0.08
2.01
2.03
+0.66
1.98
1.90
-4.00
0.15
, 百拇医药
1.87
1.84
-1.60
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-9.55
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0.18
-88.7
表2.抗坏血酸对液体双试剂及单一试剂CHOL的影响 加入抗坏血酸量
mmol/L
全液体双试剂
单一试剂
理论值
实测值
变化率%
理论值
实测值
变化率%
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表3.抗坏血酸对液体双试剂及单一试剂UA的影响 加入抗坏血酸量
mmol/L
全液体双试剂
单一试剂
理论值
实测值
变化率%
理论值
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实测值
变化率%
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3 讨论
液体双试剂中R1含有1000U/L抗坏血酸氧化酶，该酶能在3～5分钟完全破坏Vc。然后加入R2试剂启动反应，彻底地克服了样本中Vc的干扰。表1、2、3结果显示：液体双试剂中的TG、CHOL在Vc浓度从0.045mmol/L递增至1.82mmol/L，UA在Vc浓度从0.01mmol/L递增至0.23mmol/L时，各项指标的实测值与理论值差别甚小。而未含有抗坏血酸氧化酶的TG、CHOL、UA在Vc浓度为0.18mmol/L(正常人机体内Vc最高含量0.20mmol/L)，便可导致TG测定值结果偏低11.8%，CHOL测定结果偏低5.2%，UA测定结果偏低高达50%以上。当Vc浓度为1.82mmol/L可产生TG，CHOL测定结果下降88.7%，68.3%。而UA在Vc浓度为0.23mmol/L时可抑制反应达72.6%，与文献〔2，3〕报导一致。以上结果表明，抗坏血酸氧化酶能有效地解决体内Vc对Trinder反应的干扰。从而能真正反映机体内物质浓度的真实含量。提高了实验结果的准确性。
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正常人血清Vc浓度最高为0.20mmol/L。并随着尿液排出体外。近年来，随着人们对保健意识的增强。口服Vc的人群有增无减。将会导致TG、CHOL、UA测定结果偏低。特别是肾脏功能有损害的患者，对Vc的排出有障碍，故Vc可在体内富积，应给予重视。因此在实验诊断中，应当选择含有抗坏血酸氧化酶的试剂或者在检查前停止服用某些药物。从而真正反映体内物质实际含量。
4 参考文献
1 顾光煜，等，主编：临床化学自动分析仪应用指南。海洋出版社1993年。
2 Dobson HM，Muir MM，Hume R.The effect of ascorbic acid on the seasonal variations in serum cholesterol level.Scott Mer J 1984；29∶176.
3 Schultz KL，Badrick TC，Gaffency PT.High oral doses of sodium ascorbate cause significant cganges in five common clinical biochemical assay.Clin Biochem Rev 1993；14∶365.
(收稿日期：1999-03-28), 百拇医药