卵巢癌组织中AgNOR的意义
作者：冯忻 陈惠祯
单位：冯忻 广州市肿瘤医院妇瘤科(广州，510095)；陈惠祯 湖北医科大学附二院肿瘤科
关键词：卵巢肿瘤；嗜银核仁组成区/病理学
中图号
中图号：R737.31 文献标识码：A
文章编号：1000-467X(1999)02-0222-02
准确的判断卵巢癌恶性程度和病人的预后，有助于治疗方案的合理制定，对提高疗效和延长生存时间有重要意义。本文通过AgNOR含量的测定，探讨其与卵巢癌预后的关系。
1 材料与方法
1.1 标本与仪器
, 百拇医药
标本取自1988年至1992年在湖北医科大学附二院手术并存档的石蜡标本，包括上皮性卵巢癌60例，上皮性卵巢良性肿瘤20例，正常卵巢20例。其中，上皮性卵巢癌根据WHO制定标准分为：浆液性囊腺癌27例，粘液性囊腺癌17例，宫内膜样癌6例，未分化细胞癌3例，恶性勃纳勒氏瘤4例，透明细胞癌3例。所有病人均随访3～7年。
TJTY-400型真彩色细胞图像处理系统，由同济太阳科技公司提供。
1.2 染色及判断方法
AgNOR染色是一种避光嗜银染色，以胞浆呈淡黄色，AgNOR颗粒棕褐色为佳(图1)。用图象分析仪测出每个细胞AgNOR颗粒计数、面积，每例均随机检测2～5个视野150个细胞。结果判断采用中国抗癌协会主持召开的“全国核仁组成区学术讨论会”制定的标准方案，即计数每个细胞可辨别的颗粒，直径大于2.5μm(含2.5μm)的团块或颗粒按5个颗粒计算，最后按单位细胞内的AgNOR数计算。
, 百拇医药
图1 卵巢癌组织中嗜银染色的AgNOR颗粒，核内AgNOR颗粒形态不规则大小不一，数目增多(100×)
2 结果
2.1 卵巢良、恶性肿瘤和正常组织的AgNOR颗粒检测结果
卵巢癌组织中AgNOR颗粒数目、面积多于或大于卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织，三者间有显著差异(P<0.001)，见表1。
表1 正常卵巢、卵巢良恶性肿瘤与AgNOR颗粒数、面积的关系
组别
例
数
AgNOR(
±s)
, http://www.100md.com
计数(个)
面积(μm2)
正常卵巢
20
1.2001±0.21
2289.476±0.34
上皮性卵巢良性肿瘤
20
1.3754±0.48
4022.354±0.78
上皮性卵巢癌
60
, http://www.100md.com
4.8930±0.96
6324.443±0.98
F=508.2865 P<0.01；F=166336742.6 P<0.01
2.2 上皮性卵巢癌组织中的各亚型与AgNOR含量的关系
AgNOR含量不能特异性地鉴别上皮性卵巢癌组织各亚型(见表2)。
表2 上皮性卵巢癌组织中各亚型与AgNOR含量的关系
组织类型
例
数
AgNOR(±s)
, 百拇医药
计数(个)
面积(μm2)
浆液性囊腺癌
27
4.6890±0.88
6534.202±0.86
粘液性囊腺癌
17
4.9763±0.99
6548.302±0.98
宫内膜样癌
6
, http://www.100md.com
4.6930±0.79
6423.407±0.78
未分化细胞癌
3
4.8454±0.98
6278.503±0.88
恶性勃纳勒氏瘤
4
4.7954±0.82
6189.429±0.96
透明细胞癌
3
, http://www.100md.com
4.8678±0.84
6278.486±0.76
P>0.05 P>0.05
2.3 AgNOR颗粒数与卵巢癌生存时间的关系
卵巢癌组织中AgNOR颗粒数目多少与卵巢癌术后生存时间相关(见表3)
表3 AgNOR颗粒数与卵巢癌生存时间的关系
AgNOR计数(个)
例
数
生存时间(年)
<3
, http://www.100md.com
3～5
≥5
≥4
43
18
19
6
<4
17
0
2
15
χ2=29.9824 P<0.01 r=0.5772
, 百拇医药
3 讨论
核仁组成区(NOR)是DNA的一个片断，能反映rDNA的转录活动和细胞增殖活性〔1〕。有资料报道〔2～5〕，胃癌和乳腺癌组织中AgNOR计数〔6〕、面积有助于判断肿瘤的分化程度、组织类型和预后，对鉴别良恶性肿瘤有较大的意义。
Miller对25例子宫浆液性乳头状腺癌的患者进行AgNOR含量测定，发现含量高、面积大、核大者，危险性高，预后差。尽管多种肿瘤的AgNOR检测均有其一定的临床意义，但在卵巢癌组织中进行AgNOR的检测目前国内仅北京一篇报道。本组AgNOR分析结果显示，卵巢癌组织中AgNOR计数明显高于卵巢良性肿瘤组和正常卵巢组，差异显著(P<0.01)。且由于恶性病变时细胞异常增殖的多样化形式而表现为卵巢癌组的AgNOR颗粒大小不一，形态不规则，及分布紊乱的不均匀改变。AgNOR核面积更能真实地反映核内染色质增殖的活跃程度。本研究发现从正常卵巢组到卵巢良性肿瘤组，到卵巢癌组的AgNOR核面积逐渐增大，且差异显著(P<0.01)。这是因为其细胞增殖程度不断增加，核内染色质相对含量愈多，复制能力愈强。上皮性卵巢癌的各亚型与AgNOR的关系无显著差异(见表2)，说明AgNOR的定量分析仅能帮助区别良恶性肿瘤，而不能特异性的鉴别卵巢上皮癌的临床亚型。
, http://www.100md.com
研究中还发现AgNOR的计数，面积与生存时间明显相关(r=0.5772)。这与AgNOR能有效地反映细胞增殖状态密切相关。计算机图像分析能客观准确地反映信息，避免了光镜下AgNOR计数的主观因素。该方法简便，重复性好，有益于临床推广，在鉴别良恶性肿瘤预后方面有实际的意义。
参考文献
1 Chiusa L, Galliano D, Formiconi A, et al. High and low risk prostate carcinoma determined by histologic grade and proliferative activity〔J〕. Cancer, 1997， 79：1956.
2 Kakeji Y, Maehara Y, Orita H, et al. Argyrophilic nuclealar organizer region in endoscopically obtained biopsy tissue: a useful predictor of nodal metastasis and prognosis in carcinoma of the stomach〔J〕. J Am Coll Surg, 1996， 182：482.
, 百拇医药
3 Kakeji Y, Maehara Y, Morita M, et al. Correlation between sialy Tn antigen and lymphatic metastasis in patients with Borrmann type Ⅳ gastric carcinoma〔J〕. Br J Cancer, 1995， 71：191.
4 Bellotti M, Elsner B, Kahn A, et al. Morphometric determination of AgNORs in breast carcinoma〔J〕. Correlation with flow cytometry and proliferating cell nuclear antigen, Anal Quant Cytol Histol, 1997， 19：139.
5 Simha M, Menon M, Doctor V. Prognostic value of argyrophylic nucleolar organiser regions (AgNORs) in breast lesions〔J〕. Indian J Cancer, 1996， 33：76.
6 Miller B, Umpierre S, Torno C, et al. Histologic Characterization of uterine papillary serous adrenocarcinoma〔J〕. Gyneed Oncol, 1995， 56：425.
收稿日期：1997-09-21；修回日期：1998-01-06, 百拇医药
单位：冯忻 广州市肿瘤医院妇瘤科(广州，510095)；陈惠祯 湖北医科大学附二院肿瘤科
关键词：卵巢肿瘤；嗜银核仁组成区/病理学
中图号
中图号：R737.31 文献标识码：A
文章编号：1000-467X(1999)02-0222-02
准确的判断卵巢癌恶性程度和病人的预后，有助于治疗方案的合理制定，对提高疗效和延长生存时间有重要意义。本文通过AgNOR含量的测定，探讨其与卵巢癌预后的关系。
1 材料与方法
1.1 标本与仪器
, 百拇医药
标本取自1988年至1992年在湖北医科大学附二院手术并存档的石蜡标本，包括上皮性卵巢癌60例，上皮性卵巢良性肿瘤20例，正常卵巢20例。其中，上皮性卵巢癌根据WHO制定标准分为：浆液性囊腺癌27例，粘液性囊腺癌17例，宫内膜样癌6例，未分化细胞癌3例，恶性勃纳勒氏瘤4例，透明细胞癌3例。所有病人均随访3～7年。
TJTY-400型真彩色细胞图像处理系统，由同济太阳科技公司提供。
1.2 染色及判断方法
AgNOR染色是一种避光嗜银染色，以胞浆呈淡黄色，AgNOR颗粒棕褐色为佳(图1)。用图象分析仪测出每个细胞AgNOR颗粒计数、面积，每例均随机检测2～5个视野150个细胞。结果判断采用中国抗癌协会主持召开的“全国核仁组成区学术讨论会”制定的标准方案，即计数每个细胞可辨别的颗粒，直径大于2.5μm(含2.5μm)的团块或颗粒按5个颗粒计算，最后按单位细胞内的AgNOR数计算。
, 百拇医药
图1 卵巢癌组织中嗜银染色的AgNOR颗粒，核内AgNOR颗粒形态不规则大小不一，数目增多(100×)
2 结果
2.1 卵巢良、恶性肿瘤和正常组织的AgNOR颗粒检测结果
卵巢癌组织中AgNOR颗粒数目、面积多于或大于卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织，三者间有显著差异(P<0.001)，见表1。
表1 正常卵巢、卵巢良恶性肿瘤与AgNOR颗粒数、面积的关系
组别
例
数
AgNOR(
±s), http://www.100md.com
计数(个)
面积(μm2)
正常卵巢
20
1.2001±0.21
2289.476±0.34
上皮性卵巢良性肿瘤
20
1.3754±0.48
4022.354±0.78
上皮性卵巢癌
60
, http://www.100md.com
4.8930±0.96
6324.443±0.98
F=508.2865 P<0.01；F=166336742.6 P<0.01
2.2 上皮性卵巢癌组织中的各亚型与AgNOR含量的关系
AgNOR含量不能特异性地鉴别上皮性卵巢癌组织各亚型(见表2)。
表2 上皮性卵巢癌组织中各亚型与AgNOR含量的关系
组织类型
例
数
AgNOR(
±s), 百拇医药
计数(个)
面积(μm2)
浆液性囊腺癌
27
4.6890±0.88
6534.202±0.86
粘液性囊腺癌
17
4.9763±0.99
6548.302±0.98
宫内膜样癌
6
, http://www.100md.com
4.6930±0.79
6423.407±0.78
未分化细胞癌
3
4.8454±0.98
6278.503±0.88
恶性勃纳勒氏瘤
4
4.7954±0.82
6189.429±0.96
透明细胞癌
3
, http://www.100md.com
4.8678±0.84
6278.486±0.76
P>0.05 P>0.05
2.3 AgNOR颗粒数与卵巢癌生存时间的关系
卵巢癌组织中AgNOR颗粒数目多少与卵巢癌术后生存时间相关(见表3)
表3 AgNOR颗粒数与卵巢癌生存时间的关系
AgNOR计数(个)
例
数
生存时间(年)
<3
, http://www.100md.com
3～5
≥5
≥4
43
18
19
6
<4
17
0
2
15
χ2=29.9824 P<0.01 r=0.5772
, 百拇医药
3 讨论
核仁组成区(NOR)是DNA的一个片断，能反映rDNA的转录活动和细胞增殖活性〔1〕。有资料报道〔2～5〕，胃癌和乳腺癌组织中AgNOR计数〔6〕、面积有助于判断肿瘤的分化程度、组织类型和预后，对鉴别良恶性肿瘤有较大的意义。
Miller对25例子宫浆液性乳头状腺癌的患者进行AgNOR含量测定，发现含量高、面积大、核大者，危险性高，预后差。尽管多种肿瘤的AgNOR检测均有其一定的临床意义，但在卵巢癌组织中进行AgNOR的检测目前国内仅北京一篇报道。本组AgNOR分析结果显示，卵巢癌组织中AgNOR计数明显高于卵巢良性肿瘤组和正常卵巢组，差异显著(P<0.01)。且由于恶性病变时细胞异常增殖的多样化形式而表现为卵巢癌组的AgNOR颗粒大小不一，形态不规则，及分布紊乱的不均匀改变。AgNOR核面积更能真实地反映核内染色质增殖的活跃程度。本研究发现从正常卵巢组到卵巢良性肿瘤组，到卵巢癌组的AgNOR核面积逐渐增大，且差异显著(P<0.01)。这是因为其细胞增殖程度不断增加，核内染色质相对含量愈多，复制能力愈强。上皮性卵巢癌的各亚型与AgNOR的关系无显著差异(见表2)，说明AgNOR的定量分析仅能帮助区别良恶性肿瘤，而不能特异性的鉴别卵巢上皮癌的临床亚型。
, http://www.100md.com
研究中还发现AgNOR的计数，面积与生存时间明显相关(r=0.5772)。这与AgNOR能有效地反映细胞增殖状态密切相关。计算机图像分析能客观准确地反映信息，避免了光镜下AgNOR计数的主观因素。该方法简便，重复性好，有益于临床推广，在鉴别良恶性肿瘤预后方面有实际的意义。
参考文献
1 Chiusa L, Galliano D, Formiconi A, et al. High and low risk prostate carcinoma determined by histologic grade and proliferative activity〔J〕. Cancer, 1997， 79：1956.
2 Kakeji Y, Maehara Y, Orita H, et al. Argyrophilic nuclealar organizer region in endoscopically obtained biopsy tissue: a useful predictor of nodal metastasis and prognosis in carcinoma of the stomach〔J〕. J Am Coll Surg, 1996， 182：482.
, 百拇医药
3 Kakeji Y, Maehara Y, Morita M, et al. Correlation between sialy Tn antigen and lymphatic metastasis in patients with Borrmann type Ⅳ gastric carcinoma〔J〕. Br J Cancer, 1995， 71：191.
4 Bellotti M, Elsner B, Kahn A, et al. Morphometric determination of AgNORs in breast carcinoma〔J〕. Correlation with flow cytometry and proliferating cell nuclear antigen, Anal Quant Cytol Histol, 1997， 19：139.
5 Simha M, Menon M, Doctor V. Prognostic value of argyrophylic nucleolar organiser regions (AgNORs) in breast lesions〔J〕. Indian J Cancer, 1996， 33：76.
6 Miller B, Umpierre S, Torno C, et al. Histologic Characterization of uterine papillary serous adrenocarcinoma〔J〕. Gyneed Oncol, 1995， 56：425.
收稿日期：1997-09-21；修回日期：1998-01-06, 百拇医药