益气增液口服液质量标准研究
作者：周淑芳 李秀亮 余凌英 严冬
单位：成都中医药大学，四川 成都 610075
关键词：益气增液口服液；质量标准；中药制剂
成都中医药大学学报990226 摘 要： 为控制益气增液口服液产品的质量，采用薄层色谱法对方中的红参、广藿香、乌梅进行了定性鉴别，并采用双波长薄层扫描法测定人参皂甙Rb1的含量。结果建立的方法灵敏、准确，具有重现性好的优点。可作为本制剂的质量标准。
中图分类号： R943 文献标识码：B 文章编号：1004-0668(1999)02-0051-02
益气增液口服液由红参、广藿香、乌梅等中药组成，具有益气止泻，纠正脱水等功能，临床用于治疗小儿泄泻伴有失水之症效果明显。为了控制本产品质量，我们对方中的红参、广藿香、乌梅建立薄层色谱定性分析，并采用双波长薄层扫描法测定人参皂甙Rb1的含量。现将结果报告如下。
, http://www.100md.com
1 实验材料
CS-9000双波长薄层扫描仪(日本岛津公司出品)，939全自动薄层制板器(重庆市南岸贝尔德仪器技术厂出品)，定量毛细管(美国Drummond厂出品)，硅胶G(青岛海洋化工厂出品)。
对照品：人参皂甙Rb1、Rg1，广藿香油，百秋李醇，均购自中国药品生物制品检定所。
药材红参、广藿香、乌梅等均购自四川省中药材公司；益气增液口服液，由本校药剂教研室提供。
所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 定性鉴别
2.1.1红参薄层鉴别 取本品10mL，用水饱和正丁醇萃取3次，每次15mL，合并正丁醇萃取液，先用氨试液洗涤2次，每次10mL[1]，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次5mL，正丁醇液挥干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂甙Rg1对照品，用甲醇溶解，制成每mL含1mg的溶液作为对照品溶液。同法制成阴性对照品溶液。取吸上述3种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(22∶18∶17)下层溶液为展开剂[2]，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，110℃烘至显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的紫红色斑点。结果见图1。
, 百拇医药
图1红参薄层色谱图
1人参皂甙Rg1 2阳性药材
3、4、5样品 6阴性对照品
2.1.2广藿香薄层鉴别 取本品10mL，加石油醚萃取2次，每次15mL合并石油醚萃取液，挥干，残渣加无水乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取广藿香油、百秋李醇适量，分别加无水乙醇溶解制成溶液，制成对照品溶液。同法制成阴性对照品溶液。吸取上述4种溶液各6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-氯仿(10∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%硫酸香草醛溶液，110℃烘至显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同的紫红色斑点。结果见图2。
图2 广藿香薄层色谱
, http://www.100md.com
1百秋李醇 2广藿香油
3、4、5样品 6阴性对照品
2.1.3乌梅薄层鉴别 取本品20mL，蒸干，残渣加60%乙醇(pH1～2)50mL，冷浸过夜，滤过，滤液挥去乙醇并浓缩至约10mL，加0.1N氢氧化纳调至pH9～10mL，然后加浓盐酸调至pH1～2，并用乙醚萃取3次，每次10mL，合并乙醇萃取液，用无Na2SO4脱水，挥干乙醚，残渣加1mL无水乙醇溶解，作为供试品溶液[3]。另取药材2.0g，参照供试品溶液制备方法制得阳性药材溶液。再同法制得阴性对照品。取吸上述3种溶液各8μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(20∶15)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视[4]。供试品色谱中，在与阳性药材相应位置上具有相同颜色的蓝色荧光斑点。结果见图3。
, 百拇医药
图3 乌梅薄层色谱图
1阳性药材 2、3、4样品
5阴性对照品
2.2 含量测定
2.2.1对照品溶液的制备 精密称取人参皂甙Rb1对照品5mg，置城5mL量瓶中，加甲醇使溶解，并定容至刻度。
2.2.2供试品溶液的制备 取本品10mL，用水饱和正丁醇萃取4次，每次20mL，合并正丁醇萃取液。先用氨试液洗涤3次，每次5mL，弃去氨液层，再用正丁醇饱和水洗涤3次，每次5mL，取正丁醇液挥干，残渣加甲醇使溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2.2.3阴性对照品溶液的制备 取除红参以外的另几味药，参照供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。
, http://www.100md.com
2.2.4层析条件及色谱条件[5] 硅胶G薄层板，原度为0.5mm，105℃活化30min，冷却后备用。展开剂：氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)10℃以下放置的下层溶液。显色剂：5%硫酸乙醇溶液。显色后于105℃烘5～7min。
2.2.5扫描条件 双波长反射锯齿扫描，λs=525nm,λR=680nm,SX=3。
2.2.6线性关系考察 精密取吸对照品溶液1、2、3、4、5μL分别点于同一硅胶G薄层板上，依法展开，显色，扫描测定斑点面积积分值求得回归方程A=5218.1C+3089，γ=0.9951，线性范围：1～5μg。
2.2.7精密度试验 精密取药材对照品溶液2μL(n=5)分别点于同一硅胶G薄层板上，依法展开，测定，结果：RSD=1.89%，表明同板精密度较好，异板精密度较差。
, http://www.100md.com
2.2.8稳定性试验 精密吸取对照品溶液2μL，依法展开，测定，每隔30min扫描1次。结薄层显色后26)果：人参皂甙Rb1峰面积变化不大，RSD=2.29%，表明人参皂甙Rb1薄层显色后2.0h内基本稳定。
2.2.9加样回收 精密称定一定量的人参皂甙Rb1对照品，加入已知含量样品中，按样品处理方法处理并测定。结果见表1。
表1 加样回收测定结果 序号
样品中Rb1
含量(mg)
加入Rb1
量(mg)
, 百拇医药
测得值
(mg)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
1
0.9945
0.2496
1.2237
98.36
2
0.9945
, 百拇医药
0.2496
1.2098
97.24
3
0.9945
0.5616
1.5962
102.58
98.82
4
0.9945
0.8736
1.8582
, 百拇医药
99.47
5
0.9945
0.8736
1.8014
96.43
2.2.10样品测定 精密吸取供试品溶液8μL，对照品溶液2μL、4μL分别点于同一硅胶G薄层板上，依法展开，测定。结果见表2。表2 样品含量测定 批号
样品含量(mg/mL)
平均含量(mg/mL)RSD(%)
980614
0.08496
, 百拇医药
0.08651
0.08378
0.08542
2.23
980620
0.1105
0.1098
0.1132
0.1112
1.62
980629
0.08941
, 百拇医药 0.09223
0.09476
0.09213
0.9
3 讨论
在红参的鉴别和含量测定中，未用水洗，背景干扰较大，后来采用正丁醇饱和水少量多次洗涤，明显减少背景干扰，有利于红参的鉴别和含量的测定。
乌梅的鉴别，采用酸碱处理，除去水溶性和脂溶性杂质，紫外灯下检视，背景干扰小，利于观察。
在含量测定中只测了人参皂甙Rb1的含量，这并不能完全说明整个制剂中人参皂甙的含量，今后有必要建立多个人参皂甙成分含量的检测方法，真正控制制剂质量。
, 百拇医药 基金项目：四川省中医管理局科研基金资助
作者简介：周淑芳，女，1944年5月生；副教授，硕士生导师；中药药剂学专业；研究方向：中药新制剂研究与开发。
参考文献
1 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典.广州：广东科学技术出版社-化学工业出版社，1995.4.
2 刘训红.中药材薄层色谱鉴别.天津：天津科学技术出版社，1992.121.
3 康廷国.中成药薄层色谱鉴别.北京：人民卫生出版社，1995.130.
4 康廷国.中成药薄层色谱鉴别.北京：人民卫生出版社，1995.388.
5 王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.北京：中国医药科技出版社，1994.328.
(收稿日期：1999-02-26), http://www.100md.com
单位：成都中医药大学，四川 成都 610075
关键词：益气增液口服液；质量标准；中药制剂
成都中医药大学学报990226 摘 要： 为控制益气增液口服液产品的质量，采用薄层色谱法对方中的红参、广藿香、乌梅进行了定性鉴别，并采用双波长薄层扫描法测定人参皂甙Rb1的含量。结果建立的方法灵敏、准确，具有重现性好的优点。可作为本制剂的质量标准。
中图分类号： R943 文献标识码：B 文章编号：1004-0668(1999)02-0051-02
益气增液口服液由红参、广藿香、乌梅等中药组成，具有益气止泻，纠正脱水等功能，临床用于治疗小儿泄泻伴有失水之症效果明显。为了控制本产品质量，我们对方中的红参、广藿香、乌梅建立薄层色谱定性分析，并采用双波长薄层扫描法测定人参皂甙Rb1的含量。现将结果报告如下。
, http://www.100md.com
1 实验材料
CS-9000双波长薄层扫描仪(日本岛津公司出品)，939全自动薄层制板器(重庆市南岸贝尔德仪器技术厂出品)，定量毛细管(美国Drummond厂出品)，硅胶G(青岛海洋化工厂出品)。
对照品：人参皂甙Rb1、Rg1，广藿香油，百秋李醇，均购自中国药品生物制品检定所。
药材红参、广藿香、乌梅等均购自四川省中药材公司；益气增液口服液，由本校药剂教研室提供。
所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 定性鉴别
2.1.1红参薄层鉴别 取本品10mL，用水饱和正丁醇萃取3次，每次15mL，合并正丁醇萃取液，先用氨试液洗涤2次，每次10mL[1]，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次5mL，正丁醇液挥干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂甙Rg1对照品，用甲醇溶解，制成每mL含1mg的溶液作为对照品溶液。同法制成阴性对照品溶液。取吸上述3种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(22∶18∶17)下层溶液为展开剂[2]，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，110℃烘至显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的紫红色斑点。结果见图1。
, 百拇医药
图1红参薄层色谱图
1人参皂甙Rg1 2阳性药材
3、4、5样品 6阴性对照品
2.1.2广藿香薄层鉴别 取本品10mL，加石油醚萃取2次，每次15mL合并石油醚萃取液，挥干，残渣加无水乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取广藿香油、百秋李醇适量，分别加无水乙醇溶解制成溶液，制成对照品溶液。同法制成阴性对照品溶液。吸取上述4种溶液各6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-氯仿(10∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%硫酸香草醛溶液，110℃烘至显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同的紫红色斑点。结果见图2。
图2 广藿香薄层色谱
, http://www.100md.com
1百秋李醇 2广藿香油
3、4、5样品 6阴性对照品
2.1.3乌梅薄层鉴别 取本品20mL，蒸干，残渣加60%乙醇(pH1～2)50mL，冷浸过夜，滤过，滤液挥去乙醇并浓缩至约10mL，加0.1N氢氧化纳调至pH9～10mL，然后加浓盐酸调至pH1～2，并用乙醚萃取3次，每次10mL，合并乙醇萃取液，用无Na2SO4脱水，挥干乙醚，残渣加1mL无水乙醇溶解，作为供试品溶液[3]。另取药材2.0g，参照供试品溶液制备方法制得阳性药材溶液。再同法制得阴性对照品。取吸上述3种溶液各8μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(20∶15)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视[4]。供试品色谱中，在与阳性药材相应位置上具有相同颜色的蓝色荧光斑点。结果见图3。
, 百拇医药
图3 乌梅薄层色谱图
1阳性药材 2、3、4样品
5阴性对照品
2.2 含量测定
2.2.1对照品溶液的制备 精密称取人参皂甙Rb1对照品5mg，置城5mL量瓶中，加甲醇使溶解，并定容至刻度。
2.2.2供试品溶液的制备 取本品10mL，用水饱和正丁醇萃取4次，每次20mL，合并正丁醇萃取液。先用氨试液洗涤3次，每次5mL，弃去氨液层，再用正丁醇饱和水洗涤3次，每次5mL，取正丁醇液挥干，残渣加甲醇使溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2.2.3阴性对照品溶液的制备 取除红参以外的另几味药，参照供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。
, http://www.100md.com
2.2.4层析条件及色谱条件[5] 硅胶G薄层板，原度为0.5mm，105℃活化30min，冷却后备用。展开剂：氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)10℃以下放置的下层溶液。显色剂：5%硫酸乙醇溶液。显色后于105℃烘5～7min。
2.2.5扫描条件 双波长反射锯齿扫描，λs=525nm,λR=680nm,SX=3。
2.2.6线性关系考察 精密取吸对照品溶液1、2、3、4、5μL分别点于同一硅胶G薄层板上，依法展开，显色，扫描测定斑点面积积分值求得回归方程A=5218.1C+3089，γ=0.9951，线性范围：1～5μg。
2.2.7精密度试验 精密取药材对照品溶液2μL(n=5)分别点于同一硅胶G薄层板上，依法展开，测定，结果：RSD=1.89%，表明同板精密度较好，异板精密度较差。
, http://www.100md.com
2.2.8稳定性试验 精密吸取对照品溶液2μL，依法展开，测定，每隔30min扫描1次。结薄层显色后26)果：人参皂甙Rb1峰面积变化不大，RSD=2.29%，表明人参皂甙Rb1薄层显色后2.0h内基本稳定。
2.2.9加样回收 精密称定一定量的人参皂甙Rb1对照品，加入已知含量样品中，按样品处理方法处理并测定。结果见表1。
表1 加样回收测定结果 序号
样品中Rb1
含量(mg)
加入Rb1
量(mg)
, 百拇医药
测得值
(mg)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
1
0.9945
0.2496
1.2237
98.36
2
0.9945
, 百拇医药
0.2496
1.2098
97.24
3
0.9945
0.5616
1.5962
102.58
98.82
4
0.9945
0.8736
1.8582
, 百拇医药
99.47
5
0.9945
0.8736
1.8014
96.43
2.2.10样品测定 精密吸取供试品溶液8μL，对照品溶液2μL、4μL分别点于同一硅胶G薄层板上，依法展开，测定。结果见表2。表2 样品含量测定 批号
样品含量(mg/mL)
平均含量(mg/mL)RSD(%)
980614
0.08496
, 百拇医药
0.08651
0.08378
0.08542
2.23
980620
0.1105
0.1098
0.1132
0.1112
1.62
980629
0.08941
, 百拇医药 0.09223
0.09476
0.09213
0.9
3 讨论
在红参的鉴别和含量测定中，未用水洗，背景干扰较大，后来采用正丁醇饱和水少量多次洗涤，明显减少背景干扰，有利于红参的鉴别和含量的测定。
乌梅的鉴别，采用酸碱处理，除去水溶性和脂溶性杂质，紫外灯下检视，背景干扰小，利于观察。
在含量测定中只测了人参皂甙Rb1的含量，这并不能完全说明整个制剂中人参皂甙的含量，今后有必要建立多个人参皂甙成分含量的检测方法，真正控制制剂质量。
, 百拇医药 基金项目：四川省中医管理局科研基金资助
作者简介：周淑芳，女，1944年5月生；副教授，硕士生导师；中药药剂学专业；研究方向：中药新制剂研究与开发。
参考文献
1 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典.广州：广东科学技术出版社-化学工业出版社，1995.4.
2 刘训红.中药材薄层色谱鉴别.天津：天津科学技术出版社，1992.121.
3 康廷国.中成药薄层色谱鉴别.北京：人民卫生出版社，1995.130.
4 康廷国.中成药薄层色谱鉴别.北京：人民卫生出版社，1995.388.
5 王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.北京：中国医药科技出版社，1994.328.
(收稿日期：1999-02-26), http://www.100md.com