皮下埋植吡喹酮缓释剂控制家犬细粒棘球绦虫感染的实验研究*
作者：焦 伟 柴君杰 吴树春 伊斯拉音.乌斯曼 王鸣杰 尤纪青 付 承 瞿 群 张文林
单位：焦 伟 柴君杰 吴树春 伊斯拉音.乌斯曼 付 承 瞿 群 张文林 新疆地方病防治研究所，卫生部包虫病防治培训基地(乌鲁木齐，830002)；王鸣杰 尤纪青 中国预防医学科学院寄生虫病研究所
关键词：吡喹酮；缓释剂；细粒棘球绦虫
中国人兽共患病杂志990316 摘 要 家犬皮下埋植吡喹酮缓释剂的剂量与驱虫效果相关。用50mg/kg剂量在埋植后4个月以细粒棘粒蚴原头节进行攻击可保护家犬不受感染。3只家犬埋植剂量为36.36、44.44和66.66mg/kg吡喹酮，3个月药物释放率各为76.7%、65.8%和56.1%。血液吡喹酮浓度在埋植后10天至3个月维持在0.8974～3.6849μg/ml之间。50mg/kg吡喹酮剂量对植药犬的肝肾功能无明显影响。
, http://www.100md.com
EXPERIMENTAL INVESTIGATION ON THE CONTROL OF ECHINOCOCCUS
GRANULOSUS INFECTION IN DOGS BY SUBCUTANEOUSLY PLANTATION
WITH A SLOW RELEASED PREPARATION OF PRAZIQUANTEL
Jiao Wei Chai Junjie Wu Shuchun Israyil.Osman
Wang Minjie You Jiqing Fu Chen Qu Qun Zhang Wenlin
(Xingjiang Institute for Endemic Diseases Control and Research,Urumqi,830002)
, 百拇医药
ABSTRACT The dehelminthic efficacy of the slow released preparation subcutaneously planted in dogs correlated with doses of praziquantel.With the dose of 50mg/kg of praziquantel may prevent the dogs from challenging infection with protoscolices of E.granulosus.Three dogs planted with 36.36mg/kg,44.44mg/kg and 66.66mg/kg of praziquantel the drug release rate were 76.7%,65.8% and 56.1% respectively in 3 months and the concentration of praziquatel in serum of these dogs were sustained within 0.8974～3.6849 μg/ml.By examination the functions of the liver and kidney have not resulted any abnormalities in the dogs of drug plantd.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Praziquatel Slow released preparation Echinococcus granulosus
我们在前文中报道了一种埋植于大鼠和家犬皮下的吡喹酮药棒具有缓释作用。同时初步证实了在家犬体内能够预防细粒棘粒绦虫原头节的感染〔1〕。本文为对这种缓释药棒在家犬体内实验研究结果。
1 材料与方法
1.1 吡喹酮药棒及埋植方法 制法同〔1〕。每支含上海第六制药厂产吡喹酮100mg。在家犬颈部背侧剪毛，局部用碘酒、酒精消毒。用尖头手术刀将皮肤扎一小孔，插入植药器，向颈部两侧植入药棒，缝合切口，1周后拆线。
1.2 实验用犬 从乌鲁木齐及附近农村中收购的当地常见品种家犬。部份由本实验室自行繁殖。用于实验的家犬体重在3～25kg之间。每只犬在用于实验前，用细粒棘球蚴原头节进行实验感染，20天后用槟榔碱驱虫法证实。对感染有抗性的犬予以废弃。感染良好的犬灌服吡喹酮彻底驱虫。观察2个月后用于实验。
, 百拇医药
1.3 吡喹酮的定量测定方法 用高效液相色谱法测定药棒内残留吡喹酮及血药浓度〔2〕。
1.4 家犬实验感染 从屠宰场收集患肝包虫病的绵羊肝，带回实验室收集囊液和原头节，原头节计数后，用囊液制成悬液，用不装针头的兽用注射器注至家犬舌根，使其吞下。每只犬用原头节1×105，间隔1天，重复1次。感染后30～35天用槟榔碱给犬导泻驱虫。收集粪便，在黑底瓷盘中收取细粒棘球绦虫成虫并计数。
1.5 家犬肝肾功能检查 家犬在埋植药棒前后不同时间，采血做肝肾功能试验，包括谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清蛋白、总胆红素和肌酐，分别采用上海长征和北化试剂。
1.6 家犬槟榔碱驱虫实验 按文献〔1〕进行。
2 结果
, http://www.100md.com
2.1 埋植剂量与驱虫效果 选不同体重的家犬，每只埋植药棒5支含吡喹酮总量为500mg。两组实验犬分批于攻击感染前6个月和4个月埋药，然后和对照组同时进行攻击感染。表1结果显示在植药后4个月，植入不同剂量吡喹酮的犬对细粒棘球蚴原头节的感染有一定的预防作用。在6个月时预防作用明显减弱。用药剂量和驱虫效果之间显示正比关系。剂量在50mg/kg以上时驱虫作用明显。
表1 家犬皮下埋植不同剂量PZQ缓释剂的驱虫效果
Table 1 Dehelminthic effect with different doses of PZQ slow release preparation planted subcutaneously in dogs challenged with protoscolices of E.granulosus 犬号
No.of
, http://www.100md.com
dog
体重
(kg)
Body
weight
植入PZQ剂量
doses of PZQ planted
攻击感染时间
(植药后的月数)
time of challenge
infection(months
after planting)
, http://www.100md.com
驱虫结果
(驱出成虫数)
result of arecoling
purging(No.of
adult worm)
mg/犬
mg/kg
植药犬dog of drug planted
1
18
500
27.77
, http://www.100md.com
4
710
2
16
500
31.25
4
-
3
15
500
33.33
4
8
, 百拇医药
4
9
500
55.55
4
7
5
22
500
22.72
6
7000
6
19
, 百拇医药
500
26.31
6
470
7
14
500
35.71
6
450
8
5
500
, 百拇医药 100.00
6
3
对照犬dog of cotrol
1
2500
2
3000
3
15000
4
3500
5
, 百拇医药
17000
6
5000
2.2 缓释药棒对家犬肝肾功能的影响 4只家犬按吡喹酮50mg/kg的剂量植入药棒，在植药前、植药后1、3个月检查肝肾功能的结果见表2。未出现异常。
表2 家犬皮下埋植PZQ缓释剂(50mg/kg)后肝功能检测结果
Table 2 Determination of function of liver and kidney in dogs planted with PZQ(500mg/kg) 检测时间
Time
犬号
, 百拇医药 No.of dog
血清总蛋白
(g/dl)
Total Protein
白蛋白
(g/dl)
albumin
球蛋白
(g/dl)
globulin
ALT
(Iu/L)
, 百拇医药 AST
(Iu/L)
肌酐
(μmol/L)
Creatinine
总胆红素
(μmol/L)
total billirubin
植药前
Before plantation
1
4.8
, http://www.100md.com
2.9
1.9
13
20
79
2.9
2
5.8
3.3
2.5
29
7
66
6.0
, http://www.100md.com
3
-
2.7
-
17
-
73
5.0
4
5.1
2.3
2.8
32
37
, 百拇医药
60
4.3
植药后1个月
1 month after plantation
1
4.8
3.0
2.8
20
42
80
5.9
2
, 百拇医药
4.9
2.8
2.1
17
40
46
5.9
3
5.5
3.4
2.1
26
42
, 百拇医药 63
3.9
4
6.1
2.7
2.3
31
35
70
5.9
植药后3个月
3 month after plantation
1
, 百拇医药
5.1
2.9
2.2
20
20
122
13
2
4.7
2.3
2.4
8
17
80
, 百拇医药
4.7
3
5.8
3.7
2.1
34
40
143
18
4
5.1
2.3
2.8
, 百拇医药 20
20
122
13
2.3 吡喹酮的释放速率和血药浓度 选取3只幼犬，按每只200mg吡喹酮植入药棒。于植药后不同时间测定血药浓度，并于3个月时取出药棒测定残留的吡喹酮量。结果见表3。3个月内，根据植入药量和残留量计算吡喹酮的释放速度各为76.7%、65.8%和56.1%。体重高，释放率也高。以此粗略估计理论缓释时间为4～5个月。在3个月内血药浓度比较稳定。这3只犬在植药后2个月时曾用细粒棘球蚴原头节进行攻击均未感染。表明血药浓度维持在这个水平，可以预防感染。表3 家犬埋植PZQ缓释剂后药物释放状况及血药浓度测定
Table 3 Drug release and concentration of PZQ in serum of dogs after plantation of slow release praparation 犬号
, 百拇医药
No.of dog
体重(kg)
Body weight
植入PZQ剂量
doses of PZQ
3个月后残留
药量mg/犬
residual amount of PZQ
at the end of 3 months
3个月内释放药量
amount of PZQ releosed
, 百拇医药
within 3 months
血药浓度测定结果(ug/ml)
concentration of PZQ in serum
mg/犬
mg/kg
mg/犬
mg/kg/d
10天
10 days
1个月
1 months
2个月
, 百拇医药
2 months
3个月
3 months
1
5.5
200
36.36
46.68
153.32
0.30
1.9329
2.2965
2.2908
, 百拇医药
2.0259
2
4.5
200
44.44
68.32
131.68
0.32
2.4687
3.6849
1.5233
3.6247
3
, 百拇医药
3.0
200
66.66
87.88
112.12
0.41
1.098
1.7709
1.3257
0.8974
2.4 缓释药棒驱虫效果的进一步实验结果 选择体重已经基本稳定的成年犬，以50mg/kg吡喹酮的剂量植入药棒。在植药后4个月时进行攻击感染的结果见表4。说明在此剂量条件下，植入后4个月可保持显著的驱虫效果。表4 家犬植入PZQ缓释剂(50mg/kg)4个月的驱虫试验结果
, 百拇医药
Table 4 Dehelminthic effect of slow release preparaton of PZQ(50mg/kg)after 4 months planted in dogs 犬号
No.of
dog
体重(kg)
Body
weight
植入PZQ剂量
Doses of PZQ planted
攻击实验结果
(驱出E.g成虫数)
, http://www.100md.com
Results of challege infection with
protogcolices(No.of adult worm
of E.granulosus)
mg/犬
mg/kg
植药犬 dog of drug planted
1
25
1300
52
-
, http://www.100md.com
2
20
1000
50
-
3
21
1100
52.3
-
4
18
900
50
, 百拇医药
-
5
13.5
800
59.2
-
6
11
600
54.2
19
7
17.5
900
, http://www.100md.com
51.2
-
对照犬 dog of control
1
-
-
11600
2
-
-
13114
3
-
, http://www.100md.com
-
9600
3 结论
系统的实验观察，证实吡喹酮缓释药棒埋植在家犬体内具安全性。以50mg/kg吡喹酮的植入量在4个月内可以控制大剂量原头节的攻击感染。表明这一剂型可用于预防家犬细粒棘球绦虫的感染。进一步提高吡喹酮剂量和延长释放速率就可以用于控制家犬细粒棘粒绦虫的感染。
*国家“九五”科技攻关项目(96-906-04-09)
4 参考文献
1.焦 伟，等.大鼠及犬皮下埋植吡喹酮控释棒的药物释放及预防细粒棘球蚴原头节感染的初步观察.地方病通报，1998，13(3)：40.
2.Xiao SH et al.Quantitative determination of praziquantel in serum by high-performance liquid chromatography.J Chromatogr,1983,275.
收稿日期：1998年7月3日 修回日期：1999年1月5日, http://www.100md.com
单位：焦 伟 柴君杰 吴树春 伊斯拉音.乌斯曼 付 承 瞿 群 张文林 新疆地方病防治研究所，卫生部包虫病防治培训基地(乌鲁木齐，830002)；王鸣杰 尤纪青 中国预防医学科学院寄生虫病研究所
关键词：吡喹酮；缓释剂；细粒棘球绦虫
中国人兽共患病杂志990316 摘 要 家犬皮下埋植吡喹酮缓释剂的剂量与驱虫效果相关。用50mg/kg剂量在埋植后4个月以细粒棘粒蚴原头节进行攻击可保护家犬不受感染。3只家犬埋植剂量为36.36、44.44和66.66mg/kg吡喹酮，3个月药物释放率各为76.7%、65.8%和56.1%。血液吡喹酮浓度在埋植后10天至3个月维持在0.8974～3.6849μg/ml之间。50mg/kg吡喹酮剂量对植药犬的肝肾功能无明显影响。
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EXPERIMENTAL INVESTIGATION ON THE CONTROL OF ECHINOCOCCUS
GRANULOSUS INFECTION IN DOGS BY SUBCUTANEOUSLY PLANTATION
WITH A SLOW RELEASED PREPARATION OF PRAZIQUANTEL
Jiao Wei Chai Junjie Wu Shuchun Israyil.Osman
Wang Minjie You Jiqing Fu Chen Qu Qun Zhang Wenlin
(Xingjiang Institute for Endemic Diseases Control and Research,Urumqi,830002)
, 百拇医药
ABSTRACT The dehelminthic efficacy of the slow released preparation subcutaneously planted in dogs correlated with doses of praziquantel.With the dose of 50mg/kg of praziquantel may prevent the dogs from challenging infection with protoscolices of E.granulosus.Three dogs planted with 36.36mg/kg,44.44mg/kg and 66.66mg/kg of praziquantel the drug release rate were 76.7%,65.8% and 56.1% respectively in 3 months and the concentration of praziquatel in serum of these dogs were sustained within 0.8974～3.6849 μg/ml.By examination the functions of the liver and kidney have not resulted any abnormalities in the dogs of drug plantd.
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KEY WORDS Praziquatel Slow released preparation Echinococcus granulosus
我们在前文中报道了一种埋植于大鼠和家犬皮下的吡喹酮药棒具有缓释作用。同时初步证实了在家犬体内能够预防细粒棘粒绦虫原头节的感染〔1〕。本文为对这种缓释药棒在家犬体内实验研究结果。
1 材料与方法
1.1 吡喹酮药棒及埋植方法 制法同〔1〕。每支含上海第六制药厂产吡喹酮100mg。在家犬颈部背侧剪毛，局部用碘酒、酒精消毒。用尖头手术刀将皮肤扎一小孔，插入植药器，向颈部两侧植入药棒，缝合切口，1周后拆线。
1.2 实验用犬 从乌鲁木齐及附近农村中收购的当地常见品种家犬。部份由本实验室自行繁殖。用于实验的家犬体重在3～25kg之间。每只犬在用于实验前，用细粒棘球蚴原头节进行实验感染，20天后用槟榔碱驱虫法证实。对感染有抗性的犬予以废弃。感染良好的犬灌服吡喹酮彻底驱虫。观察2个月后用于实验。
, 百拇医药
1.3 吡喹酮的定量测定方法 用高效液相色谱法测定药棒内残留吡喹酮及血药浓度〔2〕。
1.4 家犬实验感染 从屠宰场收集患肝包虫病的绵羊肝，带回实验室收集囊液和原头节，原头节计数后，用囊液制成悬液，用不装针头的兽用注射器注至家犬舌根，使其吞下。每只犬用原头节1×105，间隔1天，重复1次。感染后30～35天用槟榔碱给犬导泻驱虫。收集粪便，在黑底瓷盘中收取细粒棘球绦虫成虫并计数。
1.5 家犬肝肾功能检查 家犬在埋植药棒前后不同时间，采血做肝肾功能试验，包括谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清蛋白、总胆红素和肌酐，分别采用上海长征和北化试剂。
1.6 家犬槟榔碱驱虫实验 按文献〔1〕进行。
2 结果
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2.1 埋植剂量与驱虫效果 选不同体重的家犬，每只埋植药棒5支含吡喹酮总量为500mg。两组实验犬分批于攻击感染前6个月和4个月埋药，然后和对照组同时进行攻击感染。表1结果显示在植药后4个月，植入不同剂量吡喹酮的犬对细粒棘球蚴原头节的感染有一定的预防作用。在6个月时预防作用明显减弱。用药剂量和驱虫效果之间显示正比关系。剂量在50mg/kg以上时驱虫作用明显。
表1 家犬皮下埋植不同剂量PZQ缓释剂的驱虫效果
Table 1 Dehelminthic effect with different doses of PZQ slow release preparation planted subcutaneously in dogs challenged with protoscolices of E.granulosus 犬号
No.of
, http://www.100md.com
dog
体重
(kg)
Body
weight
植入PZQ剂量
doses of PZQ planted
攻击感染时间
(植药后的月数)
time of challenge
infection(months
after planting)
, http://www.100md.com
驱虫结果
(驱出成虫数)
result of arecoling
purging(No.of
adult worm)
mg/犬
mg/kg
植药犬dog of drug planted
1
18
500
27.77
, http://www.100md.com
4
710
2
16
500
31.25
4
-
3
15
500
33.33
4
8
, 百拇医药
4
9
500
55.55
4
7
5
22
500
22.72
6
7000
6
19
, 百拇医药
500
26.31
6
470
7
14
500
35.71
6
450
8
5
500
, 百拇医药 100.00
6
3
对照犬dog of cotrol
1
2500
2
3000
3
15000
4
3500
5
, 百拇医药
17000
6
5000
2.2 缓释药棒对家犬肝肾功能的影响 4只家犬按吡喹酮50mg/kg的剂量植入药棒，在植药前、植药后1、3个月检查肝肾功能的结果见表2。未出现异常。
表2 家犬皮下埋植PZQ缓释剂(50mg/kg)后肝功能检测结果
Table 2 Determination of function of liver and kidney in dogs planted with PZQ(500mg/kg) 检测时间
Time
犬号
, 百拇医药 No.of dog
血清总蛋白
(g/dl)
Total Protein
白蛋白
(g/dl)
albumin
球蛋白
(g/dl)
globulin
ALT
(Iu/L)
, 百拇医药 AST
(Iu/L)
肌酐
(μmol/L)
Creatinine
总胆红素
(μmol/L)
total billirubin
植药前
Before plantation
1
4.8
, http://www.100md.com
2.9
1.9
13
20
79
2.9
2
5.8
3.3
2.5
29
7
66
6.0
, http://www.100md.com
3
-
2.7
-
17
-
73
5.0
4
5.1
2.3
2.8
32
37
, 百拇医药
60
4.3
植药后1个月
1 month after plantation
1
4.8
3.0
2.8
20
42
80
5.9
2
, 百拇医药
4.9
2.8
2.1
17
40
46
5.9
3
5.5
3.4
2.1
26
42
, 百拇医药 63
3.9
4
6.1
2.7
2.3
31
35
70
5.9
植药后3个月
3 month after plantation
1
, 百拇医药
5.1
2.9
2.2
20
20
122
13
2
4.7
2.3
2.4
8
17
80
, 百拇医药
4.7
3
5.8
3.7
2.1
34
40
143
18
4
5.1
2.3
2.8
, 百拇医药 20
20
122
13
2.3 吡喹酮的释放速率和血药浓度 选取3只幼犬，按每只200mg吡喹酮植入药棒。于植药后不同时间测定血药浓度，并于3个月时取出药棒测定残留的吡喹酮量。结果见表3。3个月内，根据植入药量和残留量计算吡喹酮的释放速度各为76.7%、65.8%和56.1%。体重高，释放率也高。以此粗略估计理论缓释时间为4～5个月。在3个月内血药浓度比较稳定。这3只犬在植药后2个月时曾用细粒棘球蚴原头节进行攻击均未感染。表明血药浓度维持在这个水平，可以预防感染。表3 家犬埋植PZQ缓释剂后药物释放状况及血药浓度测定
Table 3 Drug release and concentration of PZQ in serum of dogs after plantation of slow release praparation 犬号
, 百拇医药
No.of dog
体重(kg)
Body weight
植入PZQ剂量
doses of PZQ
3个月后残留
药量mg/犬
residual amount of PZQ
at the end of 3 months
3个月内释放药量
amount of PZQ releosed
, 百拇医药
within 3 months
血药浓度测定结果(ug/ml)
concentration of PZQ in serum
mg/犬
mg/kg
mg/犬
mg/kg/d
10天
10 days
1个月
1 months
2个月
, 百拇医药
2 months
3个月
3 months
1
5.5
200
36.36
46.68
153.32
0.30
1.9329
2.2965
2.2908
, 百拇医药
2.0259
2
4.5
200
44.44
68.32
131.68
0.32
2.4687
3.6849
1.5233
3.6247
3
, 百拇医药
3.0
200
66.66
87.88
112.12
0.41
1.098
1.7709
1.3257
0.8974
2.4 缓释药棒驱虫效果的进一步实验结果 选择体重已经基本稳定的成年犬，以50mg/kg吡喹酮的剂量植入药棒。在植药后4个月时进行攻击感染的结果见表4。说明在此剂量条件下，植入后4个月可保持显著的驱虫效果。表4 家犬植入PZQ缓释剂(50mg/kg)4个月的驱虫试验结果
, 百拇医药
Table 4 Dehelminthic effect of slow release preparaton of PZQ(50mg/kg)after 4 months planted in dogs 犬号
No.of
dog
体重(kg)
Body
weight
植入PZQ剂量
Doses of PZQ planted
攻击实验结果
(驱出E.g成虫数)
, http://www.100md.com
Results of challege infection with
protogcolices(No.of adult worm
of E.granulosus)
mg/犬
mg/kg
植药犬 dog of drug planted
1
25
1300
52
-
, http://www.100md.com
2
20
1000
50
-
3
21
1100
52.3
-
4
18
900
50
, 百拇医药
-
5
13.5
800
59.2
-
6
11
600
54.2
19
7
17.5
900
, http://www.100md.com
51.2
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对照犬 dog of control
1
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11600
2
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13114
3
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9600
3 结论
系统的实验观察，证实吡喹酮缓释药棒埋植在家犬体内具安全性。以50mg/kg吡喹酮的植入量在4个月内可以控制大剂量原头节的攻击感染。表明这一剂型可用于预防家犬细粒棘球绦虫的感染。进一步提高吡喹酮剂量和延长释放速率就可以用于控制家犬细粒棘粒绦虫的感染。
*国家“九五”科技攻关项目(96-906-04-09)
4 参考文献
1.焦 伟，等.大鼠及犬皮下埋植吡喹酮控释棒的药物释放及预防细粒棘球蚴原头节感染的初步观察.地方病通报，1998，13(3)：40.
2.Xiao SH et al.Quantitative determination of praziquantel in serum by high-performance liquid chromatography.J Chromatogr,1983,275.
收稿日期：1998年7月3日 修回日期：1999年1月5日, http://www.100md.com