舌鳞癌患者治疗前后血中LPO、SOD水平的变化及意义
作者：姚金光 蒙敏 梁自民 欧子民
单位：右江民族医学院附院口腔科；广西医科大学口腔医院
关键词：
广西医学GUANGXI MEDICAL YIXUE1999年 第21卷 第3期 Vol 研究表明，氧自由基介导的脂质过氧化及抗氧化与肿瘤发生发展密切联系，一些化学致癌物质必须通过体内代谢活化为氧自由基才能获致癌能力(1)。舌癌与氧自由基之间关系如何，国内外目前尚未见系统报道。已有的相关实验多局限于肿瘤细胞与其相应的正常组织细胞间活性或含量横断面观察，使资料的可比性差。本研究通过舌癌患者手术、化疗前后血浆脂质过氧化物(Lipid peroxide, LPO)、红细胞超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的动态观察，旨在探讨舌癌与氧自由基的关系及化疗、手术治疗对氧自由基的影响及疗效的临床意义。
, 百拇医药
1 对象与方法
1.1对象：(1)28例舌癌住院患者均经病理证实为鳞状细胞癌，其中男性16例，女性12例，年龄37～72岁。22例舌癌患者先行颞浅动脉插管灌注化疗(5-氟脲嘧啶、顺铂)后再行根治术；6例患者未经化疗 ，直接行病灶切除加舌骨上清扫或颈淋巴清扫术。(2)手术对照组：8例均为行牙槽或颌骨正畸手术患者，无其他系统疾病。其中男5例，女3例，年龄19～37岁。(3)正常对照组：31例同时期健康献血员，男20例，女11例，年龄23～54岁。
1.2 方法：(1)空腹抽取术前1天、术后1周、化疗前、化疗后1周静脉血进行血浆LPO含量(2)(硫代巴比妥酸法)、红细胞SOD活性(3)(黄嘌呤氧化法)测定。(2)数理统计方法：所有数据用+s来表示，用方差分析、t检验(t′)进行统计分析，各组处理采用美国SPSS统计软件在微机上完成。
2 结果
, 百拇医药
2.128例舌癌患者治疗前不同年龄血浆LPO随年龄增大呈上升趋势(P>0.05)，红细胞SOD随年龄增大呈下降趋势，且年龄大于60岁与小于49岁比较有显著性差异(P<0.05)(如表1)：
表1 舌癌患者治疗前不同年龄各参数比较(
+s) 年龄组(岁)
例数
LPO(μmol/L)
SOD(Nu/mgHb)
<49
11
8.68±2.74
61.03±16.58
, 百拇医药
49～59
11
10.65±4.22
48.89±21.67
>60
6
11.06±4.18
43.20±17.78*
合计
28
10.38±3.90
51.23±19.81
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与49岁以下组比较：*P<0.05
2.2 舌癌患者治疗前与正常组相比，血浆LPO显著增高(P<0.001)，而红细胞SOD显著降低(P<0.001)如表2。表2 舌癌治疗前LPO、SOD比较(+s) 组别
例数
LPO(μmol/L)
SOD(Nu/mgHb)
正常组
31
4.22±0.84
103.69±17.35
, 百拇医药
舌癌组
28
10.38±3.90*
51.23±19.81*
与正常组比较：*P<0.001
2.3 6例舌癌患者单纯手术(术前未化疗)后LPO显著低于术前(P<0.05)而SOD明显高于术前(P<0.05)，但仍未升高到正常水平(P<0.05)，如表3。表3 舌癌单纯手术各参数比较(+s) 组别
例数
LPO(μmol/L)
, 百拇医药
SOD(Nu/mgHb)
对照组术前
8
4.50±1.17
99.23±17.35
舌癌组术前
6
10.87±4.14*
55.42±13.24△
对照组术后
8
4.68±1.23
, 百拇医药
100.49±16.37
舌癌组术后
6
6.98±2.14※★
76.90±11.71※★
与对照组术前比较*P<0.05，△P<0.001；与对照组术后比国产※P<0.05；与舌癌组术前比较★P<0.05
2.4 22例舌癌患者化疗后LPO、SOD变化，如表4：表4 舌癌化疗后各参数比较(+s) 组别
例数
, 百拇医药
LPO(μmol/L)
SOD(Nu/mgHb)
正常组
31
4.22±0.84
103.69±17.35
化疗前(2)
22
10.25±3.94
50.09±21.37
化疗后(3)
22
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11.38±2.87*▲
69.00±10.89*▲
与正常组比较*P<0.001 与化疗前比较▲P>0.05
2.5 22例舌癌单纯手术、化疗+手术治疗后LPO、SOD变化，如表5：表5 22例单纯手术、化疗+手术治疗后各参数比较(+s) 组别
例数
LPO(μmol/L)
SOD(Nu/mgHb)
正常组
, http://www.100md.com
31
4.22±0.84
103.69±17.35
单纯手术
6
6.98±2.14★
76.90±11.71★
化疗+手术
22
4.47±1.45▲
93.97±15.04★▲
, 百拇医药
与正常组比较：★P<0.05；与单纯手术组比较：▲P<0.053 讨论
在生理状况下，机体内氧自由基不断产生和清除，使之处于动态平衡。但是，在某些病理情况下，不论何种原因，凡是氧自由基的产生增加或机体清除氧自由基能力的减弱，就会造成氧自由基对机体的损害。氧自由基理想的检测方法是直接法，但仪器价格昂贵。间接法虽其特异性、准确性不如直接法，但方法简便，成本低，尤其是SOD和LPO两项指标目前已被广为采用。LPO是氧自由基与不饱和脂肪酸起作用引起脂质过氧化的产物，其含量的高低间接反应了机体细胞受氧自由基攻击的严重程度和损伤程度。SOD是机体内主要清除氧自由基的抗氧化酶，其活性的高低反应机体清除氧自由基的能力。研究认为，癌肿的发生与氧自由基密切相关(4)。其机理是氧自由基通过脂质过氧化反应损伤而致癌。国外报道恶性肿瘤患者血中LPO含量高于正常人(5)。本研究测定舌癌患者血浆中LPO含量，结果与文献报道相符，说明舌癌患者体内脂质过氧化损伤增强。Takada(5)将Vv-2癌细胞种植在家兔上颌窦内，诱发家兔上颌窦Vx-2癌，在癌组织及血中SOD活性明显降低，并认为SOD活性降低是肿瘤细胞的特征之一。本研究资料的结果也说明了这一点。关于SOD活性降低的原因目前仍无定论，可能是综合因素所致：合成不足；癌肿抑制或耗竭；降解增加等。我们还注意到，随着年龄的增加血浆LPO含量有逐渐升高的趋势，因此推测老年人由于接触致癌物质时间较长，病 体内致癌物质大量积累而诱发体内氧自由基增多，同时这些老年人红细胞SOD活性降低，使机体清除氧自由基损伤减弱，这样过多的氧自由基则损伤DNA等生物大分子，诱发其变为癌基团，最终发生舌癌。这一推测亦可以解释老年易发癌变的原因。
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恶性肿瘤手术切除后，患者体内氧自由水平是否会改变?我们没见到这方面系统的研究。本研究结果表明(表3、表5)术后肿瘤负荷减少后，体内氧自由基含量降低，而单纯手术切除并不能完全清除患者体内癌细胞，选择化疗+手术综合治疗方案优于单纯手术切除。但鉴于癌肿术后血浆LPO高于正常水平，SOD活性仍部分受到抑制，这或许是舌癌患者治疗后复发的可能原因之一，同时亦提示化疗+手术治疗后有必要进行放疗。对舌癌患者术前后进行SOD活性和LPO含量的测定，有助于了解机体内氧自由基的水平及其脂质过氧化作用的损害程度，并为自由基清除剂或抗氧化剂的临床应用提供理论依据。
目前的资料证实，利用癌细胞与正常细胞中的SOD活性的差别，通过对细胞毒性作用来 杀伤癌细胞是化疗药物的重要机理之一(6)。由于癌细胞中SOD活性低，所以化疗药物作用于细胞后癌细胞中氧自由基含量较正常细胞高，使癌细胞对化疗药物更敏感，有利于药物对癌细胞的选择性杀伤。本实验观察到，舌癌患者化疗后血浆LPO比化疗前略高，但未见明显差异，可能原因有(1)一方面该化疗药物可引发自由基和脂质过氧化的形成及氧化过程(7)，相继引起细胞膜和DNA的损害，使化疗后LPO增高，另一方面由于化疗后癌肿消失或缩小，使体内LPO含量降低，两方面综合结果使化疗前后LPO含量未见明显差异。(2)观察病例尚少，未看出明显差异。我们还观察到，虽化疗后肿瘤缩小或消退，但红细胞SOD却未能升到正常水平，可能是由于脂质过氧化增强而消耗了部分抗氧化酶或体内癌细胞未能完全被清除的结果，表明化疗后再进行手术根治和放疗是必要的。
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参考文献
[1]Shamberger RJ. Increase of peroxitation in carcinogenesis. J Natl Cancer Inst 1972;48(5):1491
[2]向荣，王鼎年.过氧化脂质硫代巴比妥酸分光光度的改进.生物化学与生物物理学进展 1990；17(3)：241
[3]Oyanagui Y. Reevaluation of assay methods and establishment of kit for superoxide dismutase activity. Anal Biochem 1984;142:290
[4]Bullkey GB. The role of oxygen free radicals in human disease processes. Surgery 1983;94:407
, http://www.100md.com
[5]Takada Y, Noguchi T, Okabe T, et al. Superoxide dismutase in verious tissues form rabbits bearing the Vx-2carcinoma in the maxillary sinus. Cancer Res 1982;42:4233
[6]Oberley LW, Buettner GR. Role of superoxide dismutase in cancer. Cancer Res 1979;39:1141
[7]许显福，孙恪遵，皇甫梅生，等.肺癌插管化疗对SOD及LPO影响的观察.浙江医学 1992；14(1)：16, http://www.100md.com
单位：右江民族医学院附院口腔科；广西医科大学口腔医院
关键词：
广西医学GUANGXI MEDICAL YIXUE1999年 第21卷 第3期 Vol 研究表明，氧自由基介导的脂质过氧化及抗氧化与肿瘤发生发展密切联系，一些化学致癌物质必须通过体内代谢活化为氧自由基才能获致癌能力(1)。舌癌与氧自由基之间关系如何，国内外目前尚未见系统报道。已有的相关实验多局限于肿瘤细胞与其相应的正常组织细胞间活性或含量横断面观察，使资料的可比性差。本研究通过舌癌患者手术、化疗前后血浆脂质过氧化物(Lipid peroxide, LPO)、红细胞超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的动态观察，旨在探讨舌癌与氧自由基的关系及化疗、手术治疗对氧自由基的影响及疗效的临床意义。
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1 对象与方法
1.1对象：(1)28例舌癌住院患者均经病理证实为鳞状细胞癌，其中男性16例，女性12例，年龄37～72岁。22例舌癌患者先行颞浅动脉插管灌注化疗(5-氟脲嘧啶、顺铂)后再行根治术；6例患者未经化疗 ，直接行病灶切除加舌骨上清扫或颈淋巴清扫术。(2)手术对照组：8例均为行牙槽或颌骨正畸手术患者，无其他系统疾病。其中男5例，女3例，年龄19～37岁。(3)正常对照组：31例同时期健康献血员，男20例，女11例，年龄23～54岁。
1.2 方法：(1)空腹抽取术前1天、术后1周、化疗前、化疗后1周静脉血进行血浆LPO含量(2)(硫代巴比妥酸法)、红细胞SOD活性(3)(黄嘌呤氧化法)测定。(2)数理统计方法：所有数据用+s来表示，用方差分析、t检验(t′)进行统计分析，各组处理采用美国SPSS统计软件在微机上完成。
2 结果
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2.128例舌癌患者治疗前不同年龄血浆LPO随年龄增大呈上升趋势(P>0.05)，红细胞SOD随年龄增大呈下降趋势，且年龄大于60岁与小于49岁比较有显著性差异(P<0.05)(如表1)：
表1 舌癌患者治疗前不同年龄各参数比较(
+s) 年龄组(岁)例数
LPO(μmol/L)
SOD(Nu/mgHb)
<49
11
8.68±2.74
61.03±16.58
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49～59
11
10.65±4.22
48.89±21.67
>60
6
11.06±4.18
43.20±17.78*
合计
28
10.38±3.90
51.23±19.81
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与49岁以下组比较：*P<0.05
2.2 舌癌患者治疗前与正常组相比，血浆LPO显著增高(P<0.001)，而红细胞SOD显著降低(P<0.001)如表2。表2 舌癌治疗前LPO、SOD比较(
+s) 组别例数
LPO(μmol/L)
SOD(Nu/mgHb)
正常组
31
4.22±0.84
103.69±17.35
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舌癌组
28
10.38±3.90*
51.23±19.81*
与正常组比较：*P<0.001
2.3 6例舌癌患者单纯手术(术前未化疗)后LPO显著低于术前(P<0.05)而SOD明显高于术前(P<0.05)，但仍未升高到正常水平(P<0.05)，如表3。表3 舌癌单纯手术各参数比较(
+s) 组别例数
LPO(μmol/L)
, 百拇医药
SOD(Nu/mgHb)
对照组术前
8
4.50±1.17
99.23±17.35
舌癌组术前
6
10.87±4.14*
55.42±13.24△
对照组术后
8
4.68±1.23
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100.49±16.37
舌癌组术后
6
6.98±2.14※★
76.90±11.71※★
与对照组术前比较*P<0.05，△P<0.001；与对照组术后比国产※P<0.05；与舌癌组术前比较★P<0.05
2.4 22例舌癌患者化疗后LPO、SOD变化，如表4：表4 舌癌化疗后各参数比较(
+s) 组别例数
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LPO(μmol/L)
SOD(Nu/mgHb)
正常组
31
4.22±0.84
103.69±17.35
化疗前(2)
22
10.25±3.94
50.09±21.37
化疗后(3)
22
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11.38±2.87*▲
69.00±10.89*▲
与正常组比较*P<0.001 与化疗前比较▲P>0.05
2.5 22例舌癌单纯手术、化疗+手术治疗后LPO、SOD变化，如表5：表5 22例单纯手术、化疗+手术治疗后各参数比较(
+s) 组别例数
LPO(μmol/L)
SOD(Nu/mgHb)
正常组
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31
4.22±0.84
103.69±17.35
单纯手术
6
6.98±2.14★
76.90±11.71★
化疗+手术
22
4.47±1.45▲
93.97±15.04★▲
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与正常组比较：★P<0.05；与单纯手术组比较：▲P<0.053 讨论
在生理状况下，机体内氧自由基不断产生和清除，使之处于动态平衡。但是，在某些病理情况下，不论何种原因，凡是氧自由基的产生增加或机体清除氧自由基能力的减弱，就会造成氧自由基对机体的损害。氧自由基理想的检测方法是直接法，但仪器价格昂贵。间接法虽其特异性、准确性不如直接法，但方法简便，成本低，尤其是SOD和LPO两项指标目前已被广为采用。LPO是氧自由基与不饱和脂肪酸起作用引起脂质过氧化的产物，其含量的高低间接反应了机体细胞受氧自由基攻击的严重程度和损伤程度。SOD是机体内主要清除氧自由基的抗氧化酶，其活性的高低反应机体清除氧自由基的能力。研究认为，癌肿的发生与氧自由基密切相关(4)。其机理是氧自由基通过脂质过氧化反应损伤而致癌。国外报道恶性肿瘤患者血中LPO含量高于正常人(5)。本研究测定舌癌患者血浆中LPO含量，结果与文献报道相符，说明舌癌患者体内脂质过氧化损伤增强。Takada(5)将Vv-2癌细胞种植在家兔上颌窦内，诱发家兔上颌窦Vx-2癌，在癌组织及血中SOD活性明显降低，并认为SOD活性降低是肿瘤细胞的特征之一。本研究资料的结果也说明了这一点。关于SOD活性降低的原因目前仍无定论，可能是综合因素所致：合成不足；癌肿抑制或耗竭；降解增加等。我们还注意到，随着年龄的增加血浆LPO含量有逐渐升高的趋势，因此推测老年人由于接触致癌物质时间较长，病 体内致癌物质大量积累而诱发体内氧自由基增多，同时这些老年人红细胞SOD活性降低，使机体清除氧自由基损伤减弱，这样过多的氧自由基则损伤DNA等生物大分子，诱发其变为癌基团，最终发生舌癌。这一推测亦可以解释老年易发癌变的原因。
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恶性肿瘤手术切除后，患者体内氧自由水平是否会改变?我们没见到这方面系统的研究。本研究结果表明(表3、表5)术后肿瘤负荷减少后，体内氧自由基含量降低，而单纯手术切除并不能完全清除患者体内癌细胞，选择化疗+手术综合治疗方案优于单纯手术切除。但鉴于癌肿术后血浆LPO高于正常水平，SOD活性仍部分受到抑制，这或许是舌癌患者治疗后复发的可能原因之一，同时亦提示化疗+手术治疗后有必要进行放疗。对舌癌患者术前后进行SOD活性和LPO含量的测定，有助于了解机体内氧自由基的水平及其脂质过氧化作用的损害程度，并为自由基清除剂或抗氧化剂的临床应用提供理论依据。
目前的资料证实，利用癌细胞与正常细胞中的SOD活性的差别，通过对细胞毒性作用来 杀伤癌细胞是化疗药物的重要机理之一(6)。由于癌细胞中SOD活性低，所以化疗药物作用于细胞后癌细胞中氧自由基含量较正常细胞高，使癌细胞对化疗药物更敏感，有利于药物对癌细胞的选择性杀伤。本实验观察到，舌癌患者化疗后血浆LPO比化疗前略高，但未见明显差异，可能原因有(1)一方面该化疗药物可引发自由基和脂质过氧化的形成及氧化过程(7)，相继引起细胞膜和DNA的损害，使化疗后LPO增高，另一方面由于化疗后癌肿消失或缩小，使体内LPO含量降低，两方面综合结果使化疗前后LPO含量未见明显差异。(2)观察病例尚少，未看出明显差异。我们还观察到，虽化疗后肿瘤缩小或消退，但红细胞SOD却未能升到正常水平，可能是由于脂质过氧化增强而消耗了部分抗氧化酶或体内癌细胞未能完全被清除的结果，表明化疗后再进行手术根治和放疗是必要的。
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参考文献
[1]Shamberger RJ. Increase of peroxitation in carcinogenesis. J Natl Cancer Inst 1972;48(5):1491
[2]向荣，王鼎年.过氧化脂质硫代巴比妥酸分光光度的改进.生物化学与生物物理学进展 1990；17(3)：241
[3]Oyanagui Y. Reevaluation of assay methods and establishment of kit for superoxide dismutase activity. Anal Biochem 1984;142:290
[4]Bullkey GB. The role of oxygen free radicals in human disease processes. Surgery 1983;94:407
, http://www.100md.com
[5]Takada Y, Noguchi T, Okabe T, et al. Superoxide dismutase in verious tissues form rabbits bearing the Vx-2carcinoma in the maxillary sinus. Cancer Res 1982;42:4233
[6]Oberley LW, Buettner GR. Role of superoxide dismutase in cancer. Cancer Res 1979;39:1141
[7]许显福，孙恪遵，皇甫梅生，等.肺癌插管化疗对SOD及LPO影响的观察.浙江医学 1992；14(1)：16, http://www.100md.com