开心散对老龄大鼠血液流变性的影响1
作者：卞慧敏 龚婕宁 俞晶华 陆跃鸣
单位：南京中医药大学基础医学院，南京 210029
关键词：开心散；老年鼠；血液流变学；血凝学
中国老年学杂志/990324 摘 要 目的 研究开心散对老年大鼠血液流变性的影响。方法 选择21月龄大鼠为衰老模型，6月龄大鼠为青年对照组，用复方开心散进行治疗，检测全血粘度、血浆粘度、血小板聚集和KPTT、PT、纤维蛋白原。结果 21月龄大鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数均明显高于6月龄组，红细胞变形能力则较6月龄组明显降低，KPTT明显缩短(P<0.05或0.01)。开心散则能够降低21月龄大鼠全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度和红细胞聚集指数，提高红细胞变形能力，抑制体外血小板聚集，延长KPTT时间，作用优于开心散原方和脑复康组。结论 复方开心散具有降低血液粘稠度、改善微循环的作用，有利于减少或延缓老年性疾病的发生和发展。
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血管性痴呆是脑血管损伤引起的痴呆的总称，有人统计约20%～40%的脑血管病患者伴有程度不同的智能障碍。而红细胞的压积大于40%时，血液粘度增加，血液流速减慢，导致脑灌注降低，从而加速痴呆的形成过程。因此降低血液的粘稠度，改善脑血流量，将有助于延缓痴呆的发展。我们先前的实验表明开心散能够提高老龄大鼠近记忆力、延缓衰老，并通过调节大脑单胺类神经递质和SOD、LPO水平来达到这一目的〔1〕。为了进一步探讨开心散的益智健脑作用，现观察其对老龄大鼠血液流变性的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物 选用健康SD大鼠，21月龄，体重500～620g，6月龄，体重220～280g，全部雄性，由江苏省实验动物中心提供；青紫兰家兔，体重2～2.5g，雌雄不拘，由本院实验动物中心提供。
1.2 药物 开心散由人参10g，远志10g，菖蒲10g，茯苓20g组成，经水提醇提、浓缩、低温减压干燥等，最后制成粉剂，每克药粉约含生药9.38g。开心散原方由上四味药直接烘干研碎，过80目筛而成，临用时配成适当的浓度。每日灌胃1次，小剂量0.10g/kg，大剂量0.30g/kg、脑复康0.32g/kg，开心散原方0.54g/kg，连续灌胃1个月。
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1.3 检测指标
1.3.1 对大鼠血液粘度的影响 大鼠在戊巴比妥钠麻醉下，从颈动脉插管放血，以枸橼酸钠(3.8%)1∶9抗凝，用NXE-1型锥板式粘度计(成都仪器厂)测定全血粘度、血浆粘度，按温氏管法测定血沉、血球压积。
1.3.2 红细胞变形能力测定 用DXC-400核孔滤膜红细胞变形能力测定仪(上海医科大学仪器厂)测定红细胞变形能力。
1.3.3 对家兔体外血小板聚集率的影响 青紫兰家兔用普鲁卡因局部麻醉，颈动脉插管放血，3.8%的枸橼酸钠1∶9抗凝，以800r/min离心10min，取富血小板血浆；剩余部分以3000r/min离心，取贫血小板血浆，聚集诱导剂用ADP(浓度40nmol/L)，按文献方法〔2〕用KD-200血小板聚集仪(镇江科达仪器厂)测定血小板聚集率。
1.3.4 血凝学指标 纤维蛋白原含量测定按文献〔3〕的方法略加改进，凝血酶元时间(PT)、白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)的测定按上海医科大学华山医院检验科提供的试剂和方法进行。
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本文实验数据均采用F检验和SNK法进行两两比较。
2 结 果
2.1 开心散对老龄大鼠血液流变性的影响 21月龄大鼠全血粘度和血浆粘度均明显高于6月龄组，校正后的还原全血粘度也有明显增加，各给药组均能降低21月龄大鼠的全血粘度和血浆粘度，使之接近6月龄大鼠的水平，其中开心散两个剂量组还能降低全血还原粘度，且作用优于开心散原方与脑复康组，与21月龄组比较差异均有高度显著性(见表1)。
2.2 开心散对老龄大鼠血细胞比容、血沉、红细胞聚集指数和变形能力的影响 21月龄大鼠与6月龄大鼠比较红细胞压积、血沉无明显改变，而红细胞聚集指数则明显增高、血细胞变形能力显著下降，开心散原方和脑复康组有降低血细胞比容的作用，与21月龄大鼠比较差异有高度显著性。开心散各组均能降低红细胞聚集指数，其作用均优于脑复康组。红细胞滤过指数反应了红细胞的变形能力，滤过指数越低，则变形能力越强。各给药组均能够提高红细胞的变形能力，与21月龄大鼠比较差异有高度显著性，其中又以开心散大剂量组为最好(见表2)。
, 百拇医药
2.3 开心散对家兔体外血小板聚集率的影响 实验结果表明不同浓度的开心散均能够明显抑制ADP诱导的体外血小板聚集，并且有明显的量效关系Y=45.87-12.1X，r=-0.967(见表3)。
表1 开心散对老龄大鼠全血和血浆粘度的影响(
±s) 组别
剂量
(g/kg)
n
全血粘度(mpa.s)
全血还原粘度
血浆粘度(mpa.s)
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(153S-1)
ηH(230S-1
ηL(5.73S-1)
6月龄
等容积
9
5.432±0.424
31.008±4.4872)
11.278±0.6971)
2.288±0.3052)
, http://www.100md.com
21月龄
等容积
10
5.727±0.160
41.646±5.339
12.120±0.962
2.822±0.337
开心散原方
0.54
10
5.228±0.3912)
29.743±7.4552)3)
, http://www.100md.com
11.786±0.741
2.246±0.2292)
开心散
0.10
10
5.319±0.5021)
31.182±4.1492)
10.902±0.9641)
2.519±0.2542)
0.30
, 百拇医药
10
5.177±0.4752)
31.619±3.1062)3)
10.708±1.2671)
2.172±0.3332)
脑复康
0.32
10
5.192±0.5162)
36.412±4.2171)
, http://www.100md.com
11.519±0.684
2.388±0.2441)
与模型组比较：1)P<0.05，2)P<0.01；与脑复康组比较：3)P<0.05，4P<0.01；下同表2 开心散对老龄大鼠血细胞比容、血沉、红细胞聚集指数和变形能力的影响(±s) 组别
剂量
(g/kg)
n
红细胞压积
(%)
血沉
, 百拇医药
(mm/h)
红细胞聚集指数
红细胞变形能力
滤过指数
6月龄
等容积
9
39.33±3.24
0.72±0.79
5.69±0.512)4)
0.139±0.0262)5)
21月龄
, 百拇医药
等容积
10
39.15±3.87
0.40±0.52
7.34±0.97
0.194±0.043
开心散原方
0.54
10
35.89±2.751)
0.69±0.47
5.651.222)4)
, 百拇医药
0.170±0.024
开心散
0.10
10
39.65±3.47
0.74±0.74
5.90±0.912)3)
0.152±0.0321)
0.30
10
39.20±3.85
1.35±0.881)
, 百拇医药
6.12±0.432)3)
0.112±0.0372)6)7)
脑复康
0.32
10
36.40±4.031)
1.50±0.942)
7.04±0.85
0.154±0.0431)
与开心散原方组比较：5)P<0.05，6)P<0.01；与开心散小剂量组比较：7)P<0.05；红细胞聚集指数=ηL/ηH，ηL：低切变率下的粘度，ηH：高切变率下的粘度表3 开心散对ADP诱导的家兔体外血小板聚集率的影响(±s) 组别
, 百拇医药
终浓度
(mg/ml)
n
1min聚集率
(%)
最大聚集率
(%)
抑制率
(%)
IC50
生理盐水
等容积
7
, 百拇医药
45.61±4.25
49.74±2.72
开心散
0.463
4
39.79±4.292)
41.88±4.462)
15.80
0.926
4
27.57±3.752)
, http://www.100md.com
32.21±3.843)
35.24
1.756
1.852
4
10.29±0.192)
16.48±1.992)
66.87
3.704
4
3.99±1.502)
, 百拇医药
4.94±2.352)
90.07
2.4 开心散对老龄大鼠KPTT、PT和血浆纤维蛋白原的影响 21月龄大鼠KPTT时间(32.00±5.12)比6月龄大鼠(42.22±6.55)，明显缩短(P<0.05)，PT和血浆纤维蛋白原则无明显差异。开心散原方(45.22±6.85)、开心散小剂量(44.90±9.30)、大剂量(41.80±6.61)和脑复康(50.50±10.49)均能延长KPTT时间，与21月龄大鼠比较差异均有高度显著性(P<0.01)。
3 讨 论
血液粘度是衡量血液流动性的一项综合指标，在血液循环中又是血液阻力的重要决定因素之一。血液粘度增高，可以使血流阻力增加，营养血流减少，氧气和营养物质不能及时运送到机体各脏器组织，正常的能量代谢将发生障碍，各脏器组织则难以完成其生理功能。血液粘度的增高又会引起血流变慢，血流变慢又将促使血栓的发生，血小板聚集的增加，也将促使血栓形成。实验结果表明21月龄雄性大鼠全血粘度和血浆粘度明显升高。各给药组均能降低21月龄大鼠全血粘度和血浆粘度，使之接近6月龄大鼠水平。
, 百拇医药
正常人血液的血细胞比容约为45%，其中红细胞约占细胞总体积的95%，因此血细胞比容是影响血液粘度的最重要因素。实验发现21月龄大鼠血细胞比容与6月龄组无明显差别，而开心散原方和脑康复组血细胞比容则明显下降，推测其降低血液粘度的作用可能与此有关。如果排除这一因素，通过还原全血粘度可以看出，开心散大、小剂量组均可降低21月龄大鼠全血还原粘度，而开心散原方和脑复康组则作用不明显。
红细胞变形能力和红细胞聚集都是影响血液粘度的主要因素。红细胞变形能力降低和聚集增加均可导致全血粘度的升高。实验结果提示21月龄大鼠红细胞变形能力明显降低，而红细胞聚集指数却明显增加，因此其全血粘度的增高可能与之有关。而开心散两个剂量组均能提高红细胞变形能力，降低红细胞聚集指数，这可能是其降低全血粘度的途径之一。
血小板是一种多功能细胞，具有粘附、聚集和释放功能，并且具有较强的促凝活性，在血栓形成与止血过程中起着重要作用。有资料报道，老年人血小板粘附和聚集功能比中青年明显增加〔4，5〕；老年大鼠血小板聚集率也明显高于青年组〔6〕。因此降低血小板的聚集率，将有助于预防血栓的形成，改善血液的凝聚状态。开心散能够明显抑制体外血小板聚集率，且作用强度随剂量的增加(在一定的范围内)而增强。
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总之，开心散能够改善全血粘度和血浆粘度，提高红细胞变形能力，降低红细胞聚集指数，延长KPTT，抑制血小板聚集率，这些作用都将有助于降低血液粘稠度，改善微循环，维持组织的正常代谢，减少或延缓老年性疾病的发生和发展。
1 江苏省教育委员会自然科学基金项目(94062)
作者简介：卞慧敏，女，40岁，副研究员，硕士，从事中医基础理论和中药药理研究
4 参考文献
1 黄玉芳，卞慧敏，郭海英 et al.开心散对老年大鼠记忆力和单胺类神经递质的影响.中华老年医学杂志，1998；17：154
2 陈 奇主编.中药药理研究方法.第1版.北京：人民卫生出版社，1993：564
3 邓家栋主编.血液病实验诊断.第1版.天津：天津科学技术出版社，1985：258
4 申玉璋，陈兆乐，刘作芳 et al.老年人血小板功能变化的研究.中华老年医学杂志，1990；9(3)：168
5 徐 洁，孟家眉.健康人血液流变学、血小板聚集功能、凝血因子Ⅷ相关抗原测定分析.中华老年医学杂志，1988；7(1)：30
6 李建生，姚培发，林水淼 et al.老年大鼠血小板与动脉组织花生四烯酸代谢的变化.中华老年医学杂志，1994；13(5)：259
〔1998-05-15收稿 1998-10-10修回〕, 百拇医药
单位：南京中医药大学基础医学院，南京 210029
关键词：开心散；老年鼠；血液流变学；血凝学
中国老年学杂志/990324 摘 要 目的 研究开心散对老年大鼠血液流变性的影响。方法 选择21月龄大鼠为衰老模型，6月龄大鼠为青年对照组，用复方开心散进行治疗，检测全血粘度、血浆粘度、血小板聚集和KPTT、PT、纤维蛋白原。结果 21月龄大鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数均明显高于6月龄组，红细胞变形能力则较6月龄组明显降低，KPTT明显缩短(P<0.05或0.01)。开心散则能够降低21月龄大鼠全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度和红细胞聚集指数，提高红细胞变形能力，抑制体外血小板聚集，延长KPTT时间，作用优于开心散原方和脑复康组。结论 复方开心散具有降低血液粘稠度、改善微循环的作用，有利于减少或延缓老年性疾病的发生和发展。
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血管性痴呆是脑血管损伤引起的痴呆的总称，有人统计约20%～40%的脑血管病患者伴有程度不同的智能障碍。而红细胞的压积大于40%时，血液粘度增加，血液流速减慢，导致脑灌注降低，从而加速痴呆的形成过程。因此降低血液的粘稠度，改善脑血流量，将有助于延缓痴呆的发展。我们先前的实验表明开心散能够提高老龄大鼠近记忆力、延缓衰老，并通过调节大脑单胺类神经递质和SOD、LPO水平来达到这一目的〔1〕。为了进一步探讨开心散的益智健脑作用，现观察其对老龄大鼠血液流变性的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物 选用健康SD大鼠，21月龄，体重500～620g，6月龄，体重220～280g，全部雄性，由江苏省实验动物中心提供；青紫兰家兔，体重2～2.5g，雌雄不拘，由本院实验动物中心提供。
1.2 药物 开心散由人参10g，远志10g，菖蒲10g，茯苓20g组成，经水提醇提、浓缩、低温减压干燥等，最后制成粉剂，每克药粉约含生药9.38g。开心散原方由上四味药直接烘干研碎，过80目筛而成，临用时配成适当的浓度。每日灌胃1次，小剂量0.10g/kg，大剂量0.30g/kg、脑复康0.32g/kg，开心散原方0.54g/kg，连续灌胃1个月。
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1.3 检测指标
1.3.1 对大鼠血液粘度的影响 大鼠在戊巴比妥钠麻醉下，从颈动脉插管放血，以枸橼酸钠(3.8%)1∶9抗凝，用NXE-1型锥板式粘度计(成都仪器厂)测定全血粘度、血浆粘度，按温氏管法测定血沉、血球压积。
1.3.2 红细胞变形能力测定 用DXC-400核孔滤膜红细胞变形能力测定仪(上海医科大学仪器厂)测定红细胞变形能力。
1.3.3 对家兔体外血小板聚集率的影响 青紫兰家兔用普鲁卡因局部麻醉，颈动脉插管放血，3.8%的枸橼酸钠1∶9抗凝，以800r/min离心10min，取富血小板血浆；剩余部分以3000r/min离心，取贫血小板血浆，聚集诱导剂用ADP(浓度40nmol/L)，按文献方法〔2〕用KD-200血小板聚集仪(镇江科达仪器厂)测定血小板聚集率。
1.3.4 血凝学指标 纤维蛋白原含量测定按文献〔3〕的方法略加改进，凝血酶元时间(PT)、白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)的测定按上海医科大学华山医院检验科提供的试剂和方法进行。
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本文实验数据均采用F检验和SNK法进行两两比较。
2 结 果
2.1 开心散对老龄大鼠血液流变性的影响 21月龄大鼠全血粘度和血浆粘度均明显高于6月龄组，校正后的还原全血粘度也有明显增加，各给药组均能降低21月龄大鼠的全血粘度和血浆粘度，使之接近6月龄大鼠的水平，其中开心散两个剂量组还能降低全血还原粘度，且作用优于开心散原方与脑复康组，与21月龄组比较差异均有高度显著性(见表1)。
2.2 开心散对老龄大鼠血细胞比容、血沉、红细胞聚集指数和变形能力的影响 21月龄大鼠与6月龄大鼠比较红细胞压积、血沉无明显改变，而红细胞聚集指数则明显增高、血细胞变形能力显著下降，开心散原方和脑复康组有降低血细胞比容的作用，与21月龄大鼠比较差异有高度显著性。开心散各组均能降低红细胞聚集指数，其作用均优于脑复康组。红细胞滤过指数反应了红细胞的变形能力，滤过指数越低，则变形能力越强。各给药组均能够提高红细胞的变形能力，与21月龄大鼠比较差异有高度显著性，其中又以开心散大剂量组为最好(见表2)。
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2.3 开心散对家兔体外血小板聚集率的影响 实验结果表明不同浓度的开心散均能够明显抑制ADP诱导的体外血小板聚集，并且有明显的量效关系Y=45.87-12.1X，r=-0.967(见表3)。
表1 开心散对老龄大鼠全血和血浆粘度的影响(
±s) 组别剂量
(g/kg)
n
全血粘度(mpa.s)
全血还原粘度
血浆粘度(mpa.s)
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(153S-1)
ηH(230S-1
ηL(5.73S-1)
6月龄
等容积
9
5.432±0.424
31.008±4.4872)
11.278±0.6971)
2.288±0.3052)
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21月龄
等容积
10
5.727±0.160
41.646±5.339
12.120±0.962
2.822±0.337
开心散原方
0.54
10
5.228±0.3912)
29.743±7.4552)3)
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11.786±0.741
2.246±0.2292)
开心散
0.10
10
5.319±0.5021)
31.182±4.1492)
10.902±0.9641)
2.519±0.2542)
0.30
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10
5.177±0.4752)
31.619±3.1062)3)
10.708±1.2671)
2.172±0.3332)
脑复康
0.32
10
5.192±0.5162)
36.412±4.2171)
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11.519±0.684
2.388±0.2441)
与模型组比较：1)P<0.05，2)P<0.01；与脑复康组比较：3)P<0.05，4P<0.01；下同表2 开心散对老龄大鼠血细胞比容、血沉、红细胞聚集指数和变形能力的影响(
±s) 组别剂量
(g/kg)
n
红细胞压积
(%)
血沉
, 百拇医药
(mm/h)
红细胞聚集指数
红细胞变形能力
滤过指数
6月龄
等容积
9
39.33±3.24
0.72±0.79
5.69±0.512)4)
0.139±0.0262)5)
21月龄
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等容积
10
39.15±3.87
0.40±0.52
7.34±0.97
0.194±0.043
开心散原方
0.54
10
35.89±2.751)
0.69±0.47
5.651.222)4)
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0.170±0.024
开心散
0.10
10
39.65±3.47
0.74±0.74
5.90±0.912)3)
0.152±0.0321)
0.30
10
39.20±3.85
1.35±0.881)
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6.12±0.432)3)
0.112±0.0372)6)7)
脑复康
0.32
10
36.40±4.031)
1.50±0.942)
7.04±0.85
0.154±0.0431)
与开心散原方组比较：5)P<0.05，6)P<0.01；与开心散小剂量组比较：7)P<0.05；红细胞聚集指数=ηL/ηH，ηL：低切变率下的粘度，ηH：高切变率下的粘度表3 开心散对ADP诱导的家兔体外血小板聚集率的影响(
±s) 组别, 百拇医药
终浓度
(mg/ml)
n
1min聚集率
(%)
最大聚集率
(%)
抑制率
(%)
IC50
生理盐水
等容积
7
, 百拇医药
45.61±4.25
49.74±2.72
开心散
0.463
4
39.79±4.292)
41.88±4.462)
15.80
0.926
4
27.57±3.752)
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32.21±3.843)
35.24
1.756
1.852
4
10.29±0.192)
16.48±1.992)
66.87
3.704
4
3.99±1.502)
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4.94±2.352)
90.07
2.4 开心散对老龄大鼠KPTT、PT和血浆纤维蛋白原的影响 21月龄大鼠KPTT时间(32.00±5.12)比6月龄大鼠(42.22±6.55)，明显缩短(P<0.05)，PT和血浆纤维蛋白原则无明显差异。开心散原方(45.22±6.85)、开心散小剂量(44.90±9.30)、大剂量(41.80±6.61)和脑复康(50.50±10.49)均能延长KPTT时间，与21月龄大鼠比较差异均有高度显著性(P<0.01)。
3 讨 论
血液粘度是衡量血液流动性的一项综合指标，在血液循环中又是血液阻力的重要决定因素之一。血液粘度增高，可以使血流阻力增加，营养血流减少，氧气和营养物质不能及时运送到机体各脏器组织，正常的能量代谢将发生障碍，各脏器组织则难以完成其生理功能。血液粘度的增高又会引起血流变慢，血流变慢又将促使血栓的发生，血小板聚集的增加，也将促使血栓形成。实验结果表明21月龄雄性大鼠全血粘度和血浆粘度明显升高。各给药组均能降低21月龄大鼠全血粘度和血浆粘度，使之接近6月龄大鼠水平。
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正常人血液的血细胞比容约为45%，其中红细胞约占细胞总体积的95%，因此血细胞比容是影响血液粘度的最重要因素。实验发现21月龄大鼠血细胞比容与6月龄组无明显差别，而开心散原方和脑康复组血细胞比容则明显下降，推测其降低血液粘度的作用可能与此有关。如果排除这一因素，通过还原全血粘度可以看出，开心散大、小剂量组均可降低21月龄大鼠全血还原粘度，而开心散原方和脑复康组则作用不明显。
红细胞变形能力和红细胞聚集都是影响血液粘度的主要因素。红细胞变形能力降低和聚集增加均可导致全血粘度的升高。实验结果提示21月龄大鼠红细胞变形能力明显降低，而红细胞聚集指数却明显增加，因此其全血粘度的增高可能与之有关。而开心散两个剂量组均能提高红细胞变形能力，降低红细胞聚集指数，这可能是其降低全血粘度的途径之一。
血小板是一种多功能细胞，具有粘附、聚集和释放功能，并且具有较强的促凝活性，在血栓形成与止血过程中起着重要作用。有资料报道，老年人血小板粘附和聚集功能比中青年明显增加〔4，5〕；老年大鼠血小板聚集率也明显高于青年组〔6〕。因此降低血小板的聚集率，将有助于预防血栓的形成，改善血液的凝聚状态。开心散能够明显抑制体外血小板聚集率，且作用强度随剂量的增加(在一定的范围内)而增强。
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总之，开心散能够改善全血粘度和血浆粘度，提高红细胞变形能力，降低红细胞聚集指数，延长KPTT，抑制血小板聚集率，这些作用都将有助于降低血液粘稠度，改善微循环，维持组织的正常代谢，减少或延缓老年性疾病的发生和发展。
1 江苏省教育委员会自然科学基金项目(94062)
作者简介：卞慧敏，女，40岁，副研究员，硕士，从事中医基础理论和中药药理研究
4 参考文献
1 黄玉芳，卞慧敏，郭海英 et al.开心散对老年大鼠记忆力和单胺类神经递质的影响.中华老年医学杂志，1998；17：154
2 陈 奇主编.中药药理研究方法.第1版.北京：人民卫生出版社，1993：564
3 邓家栋主编.血液病实验诊断.第1版.天津：天津科学技术出版社，1985：258
4 申玉璋，陈兆乐，刘作芳 et al.老年人血小板功能变化的研究.中华老年医学杂志，1990；9(3)：168
5 徐 洁，孟家眉.健康人血液流变学、血小板聚集功能、凝血因子Ⅷ相关抗原测定分析.中华老年医学杂志，1988；7(1)：30
6 李建生，姚培发，林水淼 et al.老年大鼠血小板与动脉组织花生四烯酸代谢的变化.中华老年医学杂志，1994；13(5)：259
〔1998-05-15收稿 1998-10-10修回〕, 百拇医药