黄芩甙对过氧亚硝基阴离子致肺损伤的保护作用*
作者：谷振勇 凌亦凌 刘伟娜 刘满英 朱铁年 黄善生
单位：河北医科大学基础医学院病理生理学教研室(石家庄050017)
关键词：黄芩；肺损伤；内皮，血管；代谢；一氧化氮；药物作用；大鼠
河北医科大学学报990317 关键词 R563.8;R363.21
近年来过氧亚硝基阴离子(ONOO-)已成为一氧化氮(NO)化学及NO在多种与氧化应激有关的病理过程中作用机制的研究热点。作者新近证实，内毒素休克时，肺内有ONOO-生成；大鼠气管内推入外源性ONOO-可剂量依赖性导致肺氧化损伤，干扰肺血管内皮屏障功能，提示ONOO-在肺内生成增多时可能参与介导急性肺损伤(ALI)的发生。一些研究显示，黄芩甙(baicalin,Bai)具有较强的抗自由基氧化能力，防止致炎因子诱导的血管壁通透性增高。然而该作用对其它原因造成的氧化损伤是否也有保护作用尚不明了。本实验旨在观察黄芩甙对ONOO-诱导ALI的影响。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 主要试剂:黄芩甙为中国药品生物制品检定所产品；ONOO-由本室建立的流动淬灭反应方法合成；伊文思蓝(EB)为进口分装(Fluka)。
1.2 实验方法:SD大鼠33只(平均体质量176.29±10.11 g)，随机分为4组， Bai+ONOO- 1.0 mmol/L组(n＝8)；ONOO- 1.0 mmol/L组(n＝9)；分解(dec)ONOO- 2.5 mmol/L组(n＝7)；溶剂对照组(n＝9)，溶剂为与ONOO-溶液酸碱度相同的碱化生理盐水(pH8.5)。大鼠麻醉后，于颈部做手术分离暴露气管。舌下静脉注入EB 30 mg/kg。Bai+ONOO-组动物静脉注入黄芩甙50mg/kg。稳定5 min，各组动物在直视下分别气管内推入ONOO-、dec ONOO-或溶剂200 μl。2 h后，处死动物，摘取肺脏备检。
, 百拇医药
1.3 功能指标
1.3.1 反映微血管壁通透性变化的指标:肺系数，肺湿干比，肺含水体积分数(%)用经典方法检测。肺组织EB质量分数用甲酰胺法检测。
1.3.2 肺组织病理学：常规制做石蜡切片，HE染色光镜观察。
1.4 统计学处理:数据为均值±标准差(
±s)，采用多样本均数t检验分析。
2 结 果
2.1 黄芩甙对ONOO-致大鼠肺血管壁通透性变化的影响，见表1。
表1 黄芩甙对ONOO-致大鼠肺系数、肺湿干比、肺含水体积分数及EB质量分数的影响 组 别
, 百拇医药
mmol/L
例数
肺系数
肺湿干比
水体积分数(%)
EB质量分数
(ng/mg)
Bai+ONOO-
1.0
9
5.42±0.26***△△
4.55±0.21
, 百拇医药
78.02±0.21
299.70±40.35*△
ONOO-
1.0
8
7.44±0.87##
5.24±0.84#
80.56±2.573##
390.98±109.02#
dec ONOO-
, 百拇医药
2.5
7
5.12±0.30
4.34±0.26
76.962±1.51
301.77±15.95
溶剂对照
9
4.94±0.26***
4.30±0.27**
76.66±1.59**
, 百拇医药
280.26±61.42*
注 与ONOO-组比较，* P<0.05,** P<0.01，***P<0.001与dec ONOO-组比较,# P<0.05,##P<0.01,与溶剂对照组比较,△P<0.05,△△P<0.01
2.2 肺组织病理变化:溶剂对照组肺泡腔大，肺泡壁薄，有处略增厚。dec ONOO-组有轻度肺泡萎陷。ONOO-组弥漫性肺泡萎陷，肺泡腔窄小，肺泡壁增厚，有处实变，毛细血管高度淤血伴局灶性出血，内皮肿胀、并有脱落。Bai+ONOO-组病变较ONOO-组减轻。
3 讨 论
黄芩为唇形科黄芩Scutellaria baicalensis Georgi及多种同属植物的干燥根，其有效成分为黄酮成分如黄芩甙、黄芩素、汉黄芩素等。新近发现，黄芩甙可激活组织CuZn-SOD活性、清除
，鳌合Fe2+和抑制铁依赖的脂质过氧化。本室另一项研究显示，在内毒素休克时，黄芩甙激活血液SOD，抑制全血化学发光，缓解肺动脉压增高和体动脉压降低，提示黄芩甙有抗休克作用，机制可能与其抗氧化作用有关。本实验在已证实ONOO-可致ALI基础上，观察了静脉预注入黄芩甙的影响。
, 百拇医药
实验结果显示，气管注入与ONOO-溶液pH值相同的溶剂未造成肺损害，说明溶液酸碱度未参与损伤发生；分解ONOO-呈现轻微致伤作用；ONOO-(1.0 mmol/L ,200 μl)引起了肺血管内皮屏障功能障碍和弥漫性肺泡萎陷，间质血管扩张充血；使用黄芩甙后肺组织的病理变化明显减轻，肺系数、肺湿干比、肺含水体积分数和EB质量分数显著降低，但与溶剂对照组相比也有显著性差异，表明黄芩甙对ONOO-诱导的ALI呈现出一定的保护作用。ONOO-介导的氧化损伤不依赖金属离子，SOD对其直接损伤无保护作用。黄芩甙能部分逆转ONOO-启动的损害作用，提示其对抗氧化应激的功能可能具有普遍性。ONOO-有跨膜弥散能力，作者初步认为，ONOO-入肺后，通过弥散透过微血管壁入血，为血中的黄芩甙或其激活机体的其它抗氧化机制所清除。
* 国家自然科学基金资助项目(No.39870317)和河北省科委资助课题(No.96216248)
(1998-12-21 收稿), http://www.100md.com
单位：河北医科大学基础医学院病理生理学教研室(石家庄050017)
关键词：黄芩；肺损伤；内皮，血管；代谢；一氧化氮；药物作用；大鼠
河北医科大学学报990317 关键词 R563.8;R363.21
近年来过氧亚硝基阴离子(ONOO-)已成为一氧化氮(NO)化学及NO在多种与氧化应激有关的病理过程中作用机制的研究热点。作者新近证实，内毒素休克时，肺内有ONOO-生成；大鼠气管内推入外源性ONOO-可剂量依赖性导致肺氧化损伤，干扰肺血管内皮屏障功能，提示ONOO-在肺内生成增多时可能参与介导急性肺损伤(ALI)的发生。一些研究显示，黄芩甙(baicalin,Bai)具有较强的抗自由基氧化能力，防止致炎因子诱导的血管壁通透性增高。然而该作用对其它原因造成的氧化损伤是否也有保护作用尚不明了。本实验旨在观察黄芩甙对ONOO-诱导ALI的影响。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 主要试剂:黄芩甙为中国药品生物制品检定所产品；ONOO-由本室建立的流动淬灭反应方法合成；伊文思蓝(EB)为进口分装(Fluka)。
1.2 实验方法:SD大鼠33只(平均体质量176.29±10.11 g)，随机分为4组， Bai+ONOO- 1.0 mmol/L组(n＝8)；ONOO- 1.0 mmol/L组(n＝9)；分解(dec)ONOO- 2.5 mmol/L组(n＝7)；溶剂对照组(n＝9)，溶剂为与ONOO-溶液酸碱度相同的碱化生理盐水(pH8.5)。大鼠麻醉后，于颈部做手术分离暴露气管。舌下静脉注入EB 30 mg/kg。Bai+ONOO-组动物静脉注入黄芩甙50mg/kg。稳定5 min，各组动物在直视下分别气管内推入ONOO-、dec ONOO-或溶剂200 μl。2 h后，处死动物，摘取肺脏备检。
, 百拇医药
1.3 功能指标
1.3.1 反映微血管壁通透性变化的指标:肺系数，肺湿干比，肺含水体积分数(%)用经典方法检测。肺组织EB质量分数用甲酰胺法检测。
1.3.2 肺组织病理学：常规制做石蜡切片，HE染色光镜观察。
1.4 统计学处理:数据为均值±标准差(
±s)，采用多样本均数t检验分析。2 结 果
2.1 黄芩甙对ONOO-致大鼠肺血管壁通透性变化的影响，见表1。
表1 黄芩甙对ONOO-致大鼠肺系数、肺湿干比、肺含水体积分数及EB质量分数的影响 组 别
, 百拇医药
mmol/L
例数
肺系数
肺湿干比
水体积分数(%)
EB质量分数
(ng/mg)
Bai+ONOO-
1.0
9
5.42±0.26***△△
4.55±0.21
, 百拇医药
78.02±0.21
299.70±40.35*△
ONOO-
1.0
8
7.44±0.87##
5.24±0.84#
80.56±2.573##
390.98±109.02#
dec ONOO-
, 百拇医药
2.5
7
5.12±0.30
4.34±0.26
76.962±1.51
301.77±15.95
溶剂对照
9
4.94±0.26***
4.30±0.27**
76.66±1.59**
, 百拇医药
280.26±61.42*
注 与ONOO-组比较，* P<0.05,** P<0.01，***P<0.001与dec ONOO-组比较,# P<0.05,##P<0.01,与溶剂对照组比较,△P<0.05,△△P<0.01
2.2 肺组织病理变化:溶剂对照组肺泡腔大，肺泡壁薄，有处略增厚。dec ONOO-组有轻度肺泡萎陷。ONOO-组弥漫性肺泡萎陷，肺泡腔窄小，肺泡壁增厚，有处实变，毛细血管高度淤血伴局灶性出血，内皮肿胀、并有脱落。Bai+ONOO-组病变较ONOO-组减轻。
3 讨 论
黄芩为唇形科黄芩Scutellaria baicalensis Georgi及多种同属植物的干燥根，其有效成分为黄酮成分如黄芩甙、黄芩素、汉黄芩素等。新近发现，黄芩甙可激活组织CuZn-SOD活性、清除
，鳌合Fe2+和抑制铁依赖的脂质过氧化。本室另一项研究显示，在内毒素休克时，黄芩甙激活血液SOD，抑制全血化学发光，缓解肺动脉压增高和体动脉压降低，提示黄芩甙有抗休克作用，机制可能与其抗氧化作用有关。本实验在已证实ONOO-可致ALI基础上，观察了静脉预注入黄芩甙的影响。, 百拇医药
实验结果显示，气管注入与ONOO-溶液pH值相同的溶剂未造成肺损害，说明溶液酸碱度未参与损伤发生；分解ONOO-呈现轻微致伤作用；ONOO-(1.0 mmol/L ,200 μl)引起了肺血管内皮屏障功能障碍和弥漫性肺泡萎陷，间质血管扩张充血；使用黄芩甙后肺组织的病理变化明显减轻，肺系数、肺湿干比、肺含水体积分数和EB质量分数显著降低，但与溶剂对照组相比也有显著性差异，表明黄芩甙对ONOO-诱导的ALI呈现出一定的保护作用。ONOO-介导的氧化损伤不依赖金属离子，SOD对其直接损伤无保护作用。黄芩甙能部分逆转ONOO-启动的损害作用，提示其对抗氧化应激的功能可能具有普遍性。ONOO-有跨膜弥散能力，作者初步认为，ONOO-入肺后，通过弥散透过微血管壁入血，为血中的黄芩甙或其激活机体的其它抗氧化机制所清除。
* 国家自然科学基金资助项目(No.39870317)和河北省科委资助课题(No.96216248)
(1998-12-21 收稿), http://www.100md.com