女金丹对雌性大鼠卵巢HCG受体的影响★
作者：吴清和李育浩陈 军韩 坚梁颂名
单位：吴清和李育浩陈 军韩 坚梁颂名 广州中医药大学中药学院,广州市机场路12号大院
关键词：＠女金丹；药理学；HCG受体；大鼠；动物
新中医990318提 要 通过研究女金丹对雌性大鼠卵巢HCG受体的影响，以进一步阐明女金丹调经助孕的机理。结果发现女金丹可明显提高卵巢HCG受体的特异性结合量，增强其亲和力，其受体数目也有增加的趋势。表明了女金丹能增强卵巢的功能，与其能明显提高卵巢HCG受体的特异结合量，增强亲和力有一定的关系。
女金丹又名胜金丸、不换金丹，是古代治疗女性月经不调、不孕症的名方。全方由香附、当归、川芎、白芍、人参、茯苓、延胡索、牡丹皮等16味药组成，具有疏肝理气、益气养血、活血散瘀、调经助孕的作用，临床沿用多年，疗效显著。为阐明女金丹调经助孕的药理作用，本课题研究了女金丹对雌性大鼠卵巢HCG受体的影响，现将研究结果报告如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 实验药物 女金丹：采用水煎、收取挥发油、醇沉(含醇量为50%)的方法，制成每ml含生药2 g的浓缩液，置冰箱保存，用时以蒸馏水配成所需浓度(所用药物均从本校第一附属医院购入，并经本校中药学院药物鉴定教研室鉴定)；调经丸：广州中药一厂产品，批号：9307015；己烯雌酚：广州明兴制药厂产品，批号：930522-20；
1.2 实验动物 Wistar大白鼠(合格证号：94018)，由广州第一军医大学实验动物中心购入。
1.3 主要试剂 Tris试剂：德国Boehringer Mannheim公司产品，批号：950401。HCG：美国SIGMA公司产品，批号：950412。BSA：上海长阳生化制药厂产品，批号：940627。125I-HCG：中国原子能科学院同位素所产品，比度为70 uci/ug，纯度为92%，用时以Tris-HCL缓冲液(0.04 M，pH为7.4，内含0.005 mol/L的MgSO)配制。批号：950917。
, 百拇医药
1.4 方法 选取健康未成熟雌性大鼠32只，体重70～90 g，随机分为蒸馏水组、阳性对照(调经丸)组和女金丹大、小剂量组，每组8只。灌胃给药，每日1次，连续10天。末次给药后禁食12 h，称体重后处
死动物，剖取卵巢精密称重并留作受体测定。卵巢HCG受体的测定，参照文献方法〔1、2〕先测定其总结合量，然后测定其特异结合量、卵巢HCG受体的数目、计算亲和力等。为了测定卵巢HCG受体的非特异性结合量，在每一测定管同时作一平行测定管，其中加入过量的非标记HCG(2000 ng)，以抑制特异结合，同上法测得非特异性结合量。总结合量减去非特异性结合量，即为卵巢HCG受体的特异结合量，以HCG(pg/10 mg卵巢)表示。
此外，为了测定卵巢HCG受体的数量及其对HCG标记物的亲和力，需对同一组织匀浆作一系列的结合试验。向各测定管加入不同剂量125I-HCG，测定计算出卵巢HCG受体的特异结合量。另以各管加入的125I-HCG的量为横坐标，相应的特异结合量为纵坐标，做特异结合曲线，并且做Scalchard分析〔3〕。求出每 mg卵巢组织之最大结合量，代表卵巢HCG的受体数目，并求出解离常数(Kd)，代表亲和力。
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2 结果
2.1 女金丹对大鼠卵巢HCG受体结合力的影响 见表1。
2.2 女金丹对大鼠卵巢HCG受体数的影响 见表2。
表1 女金丹对大鼠卵巢HCG受体结合力的影响(
±s) 组别
n
剂量
(g/kg)
对125I-HCG的结合力(pg/10 mg卵巢)
总结合力
, 百拇医药
非特异性结合力
特异性结合力
蒸馏水
8
-
108.3±30.2
90.2±21.9
18.1±11.1
调经丸
8
7.5
162.5±58.3※
, 百拇医药
123.1±55.1
39.4±19.2※
女金丹低剂量
8
7.5
150.0±48.3
120.1±40.7
29.9±15.6
女金丹高剂量
8
15.0
211.6±80.6※ ※
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168.9±76.9※
42.6±19.0※ ※
注：与蒸馏水比较，※P<0.05；※※P<0.01(下同)表2 女金丹对大鼠卵巢HCG受体数的影响(±s) 组别
卵巢系数
(mg100g体重)
卵巢HCG受体总数
(×10-4nM)
卵巢HCG受体亲和力
(×10-3nM
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蒸馏水
35.28±10.27
13.56±5.43
35.56±12.32
调经丸
55.11±9.19※※
17.70±2.33
13.14±4.87※※
女金丹低剂量
51.38±8.44※※
17.26±4.56
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21.73±7.71※
女金丹高剂量
56.81±15.25※※
18.32±4.98
10.64±3.26※※
从表1和表2中可知，女金丹大剂量可促进未成熟雌性大鼠卵巢的发育，提高卵巢HCG受体的特异结合量和亲和力，与对照组相比，差异有非常显著性意义(P<0.01)；而小剂量也能增加卵巢重量(P<0.01)，增加卵巢HCG受体亲和力(P<0.05)。女金丹两个剂量均有增加卵巢HCG受体总数的趋势，但与对照组相比较，作用不明显(P>0.05)。
3 讨论
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有研究认为〔4〕，激素靶器官对于激素的反应能力，不仅取决于血中浓度，而且取决于靶器官中受体含量和激素受体复合力是否能正常转入细胞核。研究靶器官对激素反应状态时，仅仅测血中激素含量是不够的，只有结合测定细胞质和细胞核中激素受体含量，才可以从动态平衡角度对激素受体反应能力做全面评价。
女金丹方出《韩氏医通》，明代《济阴纲目》又加予评释，是古代治疗女性月经不调、不孕症的名方。我们曾经报道了〔5、6〕女金丹能增强雌性动物的性腺功能，对垂体-卵巢轴具有调整和雌性激素样等作用。本研究结果发现女金丹可明显提高卵巢HCG受体的特异性结合量及增强其亲和力，卵巢HCG受体总数也有增加的趋势。这一实验结果表明了女金丹能增强卵巢的功能，与其能明显提高卵巢HCG受体的特异结合量及增强亲和力有一定的关系。从而对下丘脑-垂体-卵巢轴起增强和调节作用，发挥调经助孕的功效。
★广东省中医药管理局资助课题(92035)
, 百拇医药
参考文献
1 周楚华，葛仁勇，佘运初，等.酷安酸对大鼠生殖内分泌功能的影响.生理学报， 1982，34(4)∶434
2 夏宗勤.实验核医学与核药学.上海：同济大学出版社，1989.224～236
3 周廷华.受体生化药理学.北京：人民卫生出版社，1985.80
4 刘以训.雌、孕激素受体测定.生殖与避孕，1981(2)∶53
5 吴清和，李育浩，梁颂名，等.女金丹对垂体-卵巢轴的影响.中国实验方剂学杂志，1996，2(5)∶15
6 吴清和，李育浩，梁颂名，等.女金丹雌激素样作用的实验研究.中国实验方剂学杂志，1996，2(4)∶28
修回日期：1998-03-01, http://www.100md.com
单位：吴清和李育浩陈 军韩 坚梁颂名 广州中医药大学中药学院,广州市机场路12号大院
关键词：＠女金丹；药理学；HCG受体；大鼠；动物
新中医990318提 要 通过研究女金丹对雌性大鼠卵巢HCG受体的影响，以进一步阐明女金丹调经助孕的机理。结果发现女金丹可明显提高卵巢HCG受体的特异性结合量，增强其亲和力，其受体数目也有增加的趋势。表明了女金丹能增强卵巢的功能，与其能明显提高卵巢HCG受体的特异结合量，增强亲和力有一定的关系。
女金丹又名胜金丸、不换金丹，是古代治疗女性月经不调、不孕症的名方。全方由香附、当归、川芎、白芍、人参、茯苓、延胡索、牡丹皮等16味药组成，具有疏肝理气、益气养血、活血散瘀、调经助孕的作用，临床沿用多年，疗效显著。为阐明女金丹调经助孕的药理作用，本课题研究了女金丹对雌性大鼠卵巢HCG受体的影响，现将研究结果报告如下。
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1 材料与方法
1.1 实验药物 女金丹：采用水煎、收取挥发油、醇沉(含醇量为50%)的方法，制成每ml含生药2 g的浓缩液，置冰箱保存，用时以蒸馏水配成所需浓度(所用药物均从本校第一附属医院购入，并经本校中药学院药物鉴定教研室鉴定)；调经丸：广州中药一厂产品，批号：9307015；己烯雌酚：广州明兴制药厂产品，批号：930522-20；
1.2 实验动物 Wistar大白鼠(合格证号：94018)，由广州第一军医大学实验动物中心购入。
1.3 主要试剂 Tris试剂：德国Boehringer Mannheim公司产品，批号：950401。HCG：美国SIGMA公司产品，批号：950412。BSA：上海长阳生化制药厂产品，批号：940627。125I-HCG：中国原子能科学院同位素所产品，比度为70 uci/ug，纯度为92%，用时以Tris-HCL缓冲液(0.04 M，pH为7.4，内含0.005 mol/L的MgSO)配制。批号：950917。
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1.4 方法 选取健康未成熟雌性大鼠32只，体重70～90 g，随机分为蒸馏水组、阳性对照(调经丸)组和女金丹大、小剂量组，每组8只。灌胃给药，每日1次，连续10天。末次给药后禁食12 h，称体重后处
死动物，剖取卵巢精密称重并留作受体测定。卵巢HCG受体的测定，参照文献方法〔1、2〕先测定其总结合量，然后测定其特异结合量、卵巢HCG受体的数目、计算亲和力等。为了测定卵巢HCG受体的非特异性结合量，在每一测定管同时作一平行测定管，其中加入过量的非标记HCG(2000 ng)，以抑制特异结合，同上法测得非特异性结合量。总结合量减去非特异性结合量，即为卵巢HCG受体的特异结合量，以HCG(pg/10 mg卵巢)表示。
此外，为了测定卵巢HCG受体的数量及其对HCG标记物的亲和力，需对同一组织匀浆作一系列的结合试验。向各测定管加入不同剂量125I-HCG，测定计算出卵巢HCG受体的特异结合量。另以各管加入的125I-HCG的量为横坐标，相应的特异结合量为纵坐标，做特异结合曲线，并且做Scalchard分析〔3〕。求出每 mg卵巢组织之最大结合量，代表卵巢HCG的受体数目，并求出解离常数(Kd)，代表亲和力。
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2 结果
2.1 女金丹对大鼠卵巢HCG受体结合力的影响 见表1。
2.2 女金丹对大鼠卵巢HCG受体数的影响 见表2。
表1 女金丹对大鼠卵巢HCG受体结合力的影响(
±s) 组别n
剂量
(g/kg)
对125I-HCG的结合力(pg/10 mg卵巢)
总结合力
, 百拇医药
非特异性结合力
特异性结合力
蒸馏水
8
-
108.3±30.2
90.2±21.9
18.1±11.1
调经丸
8
7.5
162.5±58.3※
, 百拇医药
123.1±55.1
39.4±19.2※
女金丹低剂量
8
7.5
150.0±48.3
120.1±40.7
29.9±15.6
女金丹高剂量
8
15.0
211.6±80.6※ ※
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168.9±76.9※
42.6±19.0※ ※
注：与蒸馏水比较，※P<0.05；※※P<0.01(下同)表2 女金丹对大鼠卵巢HCG受体数的影响(
±s) 组别卵巢系数
(mg100g体重)
卵巢HCG受体总数
(×10-4nM)
卵巢HCG受体亲和力
(×10-3nM
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蒸馏水
35.28±10.27
13.56±5.43
35.56±12.32
调经丸
55.11±9.19※※
17.70±2.33
13.14±4.87※※
女金丹低剂量
51.38±8.44※※
17.26±4.56
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21.73±7.71※
女金丹高剂量
56.81±15.25※※
18.32±4.98
10.64±3.26※※
从表1和表2中可知，女金丹大剂量可促进未成熟雌性大鼠卵巢的发育，提高卵巢HCG受体的特异结合量和亲和力，与对照组相比，差异有非常显著性意义(P<0.01)；而小剂量也能增加卵巢重量(P<0.01)，增加卵巢HCG受体亲和力(P<0.05)。女金丹两个剂量均有增加卵巢HCG受体总数的趋势，但与对照组相比较，作用不明显(P>0.05)。
3 讨论
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有研究认为〔4〕，激素靶器官对于激素的反应能力，不仅取决于血中浓度，而且取决于靶器官中受体含量和激素受体复合力是否能正常转入细胞核。研究靶器官对激素反应状态时，仅仅测血中激素含量是不够的，只有结合测定细胞质和细胞核中激素受体含量，才可以从动态平衡角度对激素受体反应能力做全面评价。
女金丹方出《韩氏医通》，明代《济阴纲目》又加予评释，是古代治疗女性月经不调、不孕症的名方。我们曾经报道了〔5、6〕女金丹能增强雌性动物的性腺功能，对垂体-卵巢轴具有调整和雌性激素样等作用。本研究结果发现女金丹可明显提高卵巢HCG受体的特异性结合量及增强其亲和力，卵巢HCG受体总数也有增加的趋势。这一实验结果表明了女金丹能增强卵巢的功能，与其能明显提高卵巢HCG受体的特异结合量及增强亲和力有一定的关系。从而对下丘脑-垂体-卵巢轴起增强和调节作用，发挥调经助孕的功效。
★广东省中医药管理局资助课题(92035)
, 百拇医药
参考文献
1 周楚华，葛仁勇，佘运初，等.酷安酸对大鼠生殖内分泌功能的影响.生理学报， 1982，34(4)∶434
2 夏宗勤.实验核医学与核药学.上海：同济大学出版社，1989.224～236
3 周廷华.受体生化药理学.北京：人民卫生出版社，1985.80
4 刘以训.雌、孕激素受体测定.生殖与避孕，1981(2)∶53
5 吴清和，李育浩，梁颂名，等.女金丹对垂体-卵巢轴的影响.中国实验方剂学杂志，1996，2(5)∶15
6 吴清和，李育浩，梁颂名，等.女金丹雌激素样作用的实验研究.中国实验方剂学杂志，1996，2(4)∶28
修回日期：1998-03-01, http://www.100md.com