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编号:10230986
人参根及茎叶皂苷对群养及隔离孤独饲育小鼠神经精神药理作用的研究
http://www.100md.com 《中草药》 1999年第3期
     作者:倪小虎 吕育齐 姜成忠 朱云秀 刘丽多 杨柳

    单位:倪小虎 吕育齐 姜成忠 朱云秀 刘丽多黑龙江商学院(哈尔滨150076);杨柳 安徽芜湖张恒春制药厂

    关键词:人参根皂苷;人参茎叶皂苷;自发运动;隔离小鼠;群养小鼠;攻击行为

    人参根及茎叶皂苷对群养及隔离孤独 饲育小鼠神经精神药理作用的研究 摘 要 人参根及茎叶皂苷50~200 mg/kg能使群养小鼠的自发运动量明显增加,8周隔离饲育小鼠比群养小鼠自发运动量明显增加,人参根皂苷能使其剂量依赖性降低,而人参茎叶皂苷影响不明显;对戊巴比妥钠所致睡眠试验中,隔离孤独饲育小鼠比群养小鼠睡眠时间明显缩短(t=4.356,P<0.001)。人参根皂苷50~200 mg/kg使孤独饲育小鼠的睡眠时间随剂量增加而延长,200 mg/kg组与对照组比较,t=3.665,P<0.01。并能使8周隔离饲育的小鼠20 min内连续攻击时间有意义地下降(t=4.540,P=0.001),但人参茎叶皂苷效果不明显。证明人参根及茎叶皂苷具有中枢兴奋作用,同时人参根皂苷还具有中枢镇静作用。
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    Psychopharmacological Studies on the Effects of Ginsenosides from Ginseng Root

    or Ginseng Stem and Leaf on Group-housed and Isolated Mice

    Ni Xiaohu, Yang Liu, Lu Yuqi, et al.

    (Heilongjiang College of Commerce, Haerbin 150076)

    Abstract Ginsenosides from root (RG) or stem and leaf (SLG) of Panax ginseng C.A.Mey.were different in their glycosidic composition. Their effects on group-housed and isolated mice were studied to assess their respective psychopharmacological activities. Results of the study showed that:
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    Ⅰ.Effects on spontaneous movements:Both RG and SLG at doses of 50~200 mg/kg increased the spontaneous movement of group-housed mice(P<0.05 or 0.001) as compared with physiological saline; mice isolated over a period of 8 weeks showed more movement activities than group-housed mice (P<0.01); only 200 mg/kg dose of RG caused a decrease of movement activity of isolated mice (P<0.05). All other doses of either RG or SLG showed no obvious effect.Ⅱ.Effects of pentobarbital (50 mg/kg) induced sleeping time:Pentobarbital induced a shorter sleeping time in isolated mice as compared with group-housed mice (P<0.01); RG increased the sleeping time of isolated mice in a dose dependent manner (P<0.001 at 200 mg/kg);but SLG showed no obvious effect.Ⅲ.Effects on aggressive behavior:Mice isolated over a period of 8 weeks showed a greater aggressive tendency than group-housed mice(P<0.01); RG decreased the aggressive tendency of isolated mice in a dose dependent manner (P<0.01 at 200 mg/kg); but SLG showed no obvious effect. Conclusion:An analysis of the ginsenosides in RG and SLG showed that RG contains 9.75% ginsenoside Rb1 vs 1.35% in SLG, and 8.57% gensenoside Re1 vs 36.48% in SLG. It was speculated that central sedative action shown in this study may be due to the action of Rb1 in RG. Further study is necessary to enlighten the central stimulative effect shown in the increase of spontaneous movement of group-housed mice.
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    Key words ginsenoside from stem and leaf of Panax ginseng C.A.Mey. ginsenoside from root of P.ginseng C.A.Mey. group-housed mice isolated mice spontaneous movement activity aggressive behavior

    《神农本草经》载:“人参、味甘微寒,补五脏、安精神、定魂魄、明目、开心、益智……”。近代药理研究证明:人参皂苷中Rb1有中枢抑制,Rg1有中枢兴奋作用〔1〕。在动物学习记忆研究方面,人参水提液和Rb1、Rg对电击所致记忆障碍有改善效果〔2〕。人参根及茎叶皂苷对东莨菪碱诱发的大鼠学习记忆障碍有改善作用〔3〕。我们研究了人参根及茎叶皂苷对隔离饲育及群养小鼠的自发运动、戊巴比妥钠诱发的睡眠及小鼠攻击行为等神经精神药理作用。
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    1 材料

    1.1 动物:昆明种雄性小鼠,体重23~25 g。群养小鼠8~10只一笼,隔离饲育小鼠1只一笼饲育。饲育室内温度(20±5) ℃,湿度60%±5%,12 h明暗周期变化。

    1.2 药品:人参根及茎叶皂苷由台宝山教授提供。总皂苷用双波长薄层扫描(岛津CS-910)作定量分析,人参根及茎叶总皂苷中Rb1、Rg1、Re1含量分别为9.75%、4.86%、8.57%和1.35%、12.28%、36.48%。

    2 方法和结果

    2.1 统计处理:根据Statewiew 4.0版数据统计软件,经方差分析后用Fisher's PLSD或Student-t检验法,检查各组间差异。

    2.2 对群养小鼠自发运动量的影响:测定装置为Scannet SV-10(东洋产业,日本富山)。人参根及茎叶皂苷按0、50、200 mg/kg ig给药1 h后,将小鼠放入装置内,测定30 min内自发运动和站立次数(由红外扫描装置导联计算机自动记录),结果见表1。与生理盐水组比较,人参根及茎叶皂苷50、200 mg/kg对小鼠的自发运动量有明显的增加。
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    2.3 对隔离饲育及群养小鼠戊巴比妥钠所致睡眠时间的影响:给药方法同2.2,1 h后ip戊巴比妥钠50 mg/kg,测定小鼠的睡眠时间(翻正反射消失到恢复所需时间)。

    2.3.1 群养小鼠睡眠时间:结果见图1。人参根皂苷50、200 mg/kg能使戊巴比妥钠诱发的睡眠时间显著延长,与对照组比,t=3.241,P<0.01;t=5.490,P<0.001。但人参茎叶皂苷给药组与对照组比无显著差异。

    表1 对群养小鼠自发运动量的影响(Image375.gif (850 bytes)±s)

    组别

    剂量

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    运动计数

    站立数

    (mg/kg)

    (只)

    (次/30分)

    (次/30分)

    生理盐水

    -

    10

    2 950±267

    25±5.8

    人参茎叶皂苷
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    50

    10

    5 078±662*

    33±21.3

    200

    10

    5 598±597**

    61±11.7*

    人参根皂苷

    50

    10

    5 237±1 047
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    59±17.5

    200

    10

    5 909±659**

    77±17.9*

    与生理盐水组比较:*P<0.05 **P<0.01194-01.gif (4136 bytes)

    n=9,与对照组比较:**P<0.01 ***P<0.001
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    A-对照组 B-人参茎叶皂苷50 mg/kg C-人参茎叶皂苷200 mg/kg D-人参根皂苷50 mg/kg E-人参根皂苷200 mg/kg

    图1 对戊巴比妥钠所致群养小鼠睡眠时间的影响

    2.3.2 隔离饲育小鼠睡眠时间:结果见图2。与群养组比较,隔离小鼠的睡眠时间显著缩短,t=4.356,P<0.01。隔离饲育小鼠ig人参根皂苷后,随用量增加小鼠睡眠时间延长,200 mg/kg给药组与对照组比较:t=3.665,P<0.01,而人参茎叶皂苷无显著性影响。

    2.4 对隔离饲育小鼠自发运动量的影响:测定方法采用Open field activity test〔2〕,实验装置为60 cm×50 cm×25 cm的透明有机玻璃,底面分别用黑线划分为10 cm×10 cm的等分小方格。将小鼠放入装置内、记录20 min内爬格数和站立次数,爬格数以20 min内小鼠实验走行跨越的方格数目为准。站立次数以小鼠两前肢离地直立为准。经8周隔离饲育的小鼠与群养小鼠比,自发运动量有明显增加(表2)。检验结果t=3.656,P<0.01。人参根皂苷50~200 mg/kg剂量依赖性地使隔离孤独饲育小鼠自发运动量降低,t=2.315,P<0.05。而人参茎叶皂苷给药组对隔离饲育小鼠的自发运动量影响不明显。194-02.gif (7480 bytes)
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    n=7~8,与隔离孤独饲育空白组比较:**P<0.01

    A-群养小鼠空白 B-隔离孤独饲育小鼠空白 C-人参茎叶皂苷50 mg/kg D-人参茎叶皂苷200 mg/kg E-人参根皂苷50 mg/kg F-人参根皂苷200 mg/kg

    图2 对戊巴比妥钠所致隔离饲育小鼠睡眠时间的影响

    表2 对隔离饲育小鼠自发运动量的影响(Image375.gif (850 bytes)±s)

    组别

    剂量

    动物
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    爬格数

    站立数

    (mg/kg)

    (只)

    (格/20分)

    (次/20分)

    群养组

    -

    8

    211±20**

    81±16

    隔离饲育组

    -
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    8

    350±32

    117±17

    隔离+人参茎叶皂苷

    50

    9

    274±39

    103±28

    200

    9

    303±39

    129±27

    隔离+人参根皂苷
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    50

    9

    266±40

    94±26

    200

    9

    234±37*

    81±27

    与隔离饲育组比较:*P<0.05 **P<0.01 2.5 对隔离饲育小鼠攻击行为的影响:经0、2、4、8周隔离饲育小鼠,两只单笼各取1只放入中立的饲养笼中,人参根及茎叶皂苷按0、50、200 mg/kgig,1 h后测定20 min内攻击行为连续时间(攻击行为以相互打斗、撕咬为准)。隔离孤独饲育小鼠随隔离时间延长,攻击行为时间增长(图3),经检验F=3.840,P<0.01有非常显著性差异。人参根及茎叶皂苷对隔离饲育8周的小鼠攻击行为的影响如图4所示。统计结果表明,人参根皂苷随用量增加使隔离小鼠20 min内的连续攻击行为显著下降,200 mg/kg给药组与对照组比,t=4.540,P<0.01。同样地给予人参茎叶皂苷,此药理效果不明显。195-03.gif (2887 bytes)
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    图3 隔离孤独饲育所致小鼠攻击行为(n=10)195-04.gif (3386 bytes)

    n=8~10,与隔离孤独饲育组比较:**P<0.01

    A-空白对照 B-人参茎叶皂苷50 mg/kg C-人参茎叶皂苷200 mg/kg D-人参根皂苷50 mg/kg E-人参根皂苷200 mg/kg

    图4 对隔离孤独饲育8周小鼠所致攻击行为的影响

    3 讨论

    人参通常以根入药,但人参茎叶中同样存在人参有效成分人参皂苷〔4〕。在群养小鼠自发运动量的测定中,人参根及茎叶皂苷50、200 mg/kg给药量均能使小鼠运动计数和站立次数增加。提示人参根及茎叶皂苷对中枢神经有兴奋作用。
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    长期隔离孤独饲养的动物自发运动量比群养小鼠显著增加〔5,6〕。在open field activity 试验中,经8周隔离饲育的小鼠爬格数和站立次数比群养小鼠显著增加,此结果与以上结论一致。隔离孤独饲育小鼠给予人参根及茎叶皂苷特别是人参根皂苷,能使小鼠增加的自发运动量显著地下降。单体成分分析,人参根皂苷中Rb1的含量远比茎叶皂苷中多,提示发挥中枢镇静作用可能主要是人参皂苷Rb成分。

    实验证明长期隔离饲育会使小鼠戊巴比妥钠诱发的睡眠时间缩短。人参根皂苷不仅使群养小鼠戊巴比妥钠诱发的睡眠时间延长,也能够使隔离孤独饲育小鼠戊巴比妥钠诱发的睡眠时间延长,而人参茎叶皂苷这一作用不显著。人参根皂苷中Rb1含量9.75%,而茎叶皂苷中仅为1.35%,提示Rb1可能是延长小鼠睡眠的主要成分。

    随着隔离孤独饲育时间延长,小鼠的攻击行为增加,并且长期隔离环境中饲育的小鼠引起内分泌功能失调和神经系统功能失调〔7〕。研究中给予人参根皂苷200 mg/kg使隔离饲育小鼠攻击行为降低,说明人参根皂苷有镇静、抗焦虑等调节中枢神经系统的药理作用。
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    人参根及茎叶皂苷的中枢兴奋和中枢镇静这一对神经系统的双向调节作用机制目前尚不十分明确。人参的药理研究受到人们广泛重视,在免疫、循环系统,神经系统、代谢调节等多方面已进行了深入研究。近几年以学习记忆、神经精神药理作用的实验研究屡见报道。为了探明人参的作用机制,今后将在人参对实验动物的神经递质影响等方面进一步深入研究。

    致谢:实验用人参根及茎叶皂苷均由台宝山教授提供,在此深表感谢!

    *Address:Ni Xiaohu,Helongjian,College of Commerce ,Haerbin

    作者简介:倪小虎 毕业黑龙江中医药大学。曾二度留学日本富山医科大学,专攻神经精神药理学。多年来从事学习记忆和抗老年性疾呆药物的开发研究。先后在国际刊物和学术大会上发表过10余篇、在国内各级刊物上发表近20篇有价值的学术论文。现为黑龙江商学院中药系药理学副教授,担任生理学、药理学、中药药理学本科生和研究生的教学任务,并承担硕士生导师工作。
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    参 考 文 献

    [1] 熊谷朗.药用人参.′95共立出版株式会议,1995:159、253

    [2] Saito H.Recent advances in Ginseng Study. Tokyo: Hirokawa Publishing,1990:99

    [3] Ni X H, et al. J Traditional Medicines,1995,12:118

    [4] Sodati F, et al. Planta Medica,1980, 38:348

    [5] Watanabe H, et al.Recent Advances in Ginseng Study. Tokyo: Hirokawa Publishing, 1990:73

    [6] Gentsch C, et al. Physiol Behav,1988,43:13

    [7] Ojima K, et al. Brain Res,1995,684:87

    (1998-09-07收稿), 百拇医药