千斤拔的品种调查与质量研究
作者：饶伟文 黄建楷 温志芳 黄凤群
单位：饶伟文 黄建楷 温志芳 黄凤群 广西贺州地区药检所(梧州543001)
关键词：千斤拔；成分分析；药理试验
中草药/990328 摘 要 对千斤拔的品种调查表明，蔓性千斤拔、大叶千斤拔和宽叶千斤拔是当前的主流品种。经对3种千斤拔的药材性状，组织结构，化学成分预试，TLC、UV比较，以及浸出物、总黄酮含量测定，急性毒性与药效学试验，结果表明3者所含成分大致相似，药理作用无明显差异，认为可等同入药
A Survey on the Varieties of Flemingia
(Flemingia)and Comparison of Their Respective Quality
, 百拇医药
Rao Weiwen, Huang Jiankai, Wen Zhifang, et al.
(Hezhou Institute for Drug Conrtol, Wuzhou 543001)
Abstract Result of the survey showed that Flemingia philippinesis Merr. et Rolfe, F.macrophylla (Willd) Prain and F.latifolia Benth.were the main varieties under current usage. Results from the comparative studies on their pharmacognostic characteristics, tissue structure, preliminary chemical compositions tests,TLC and UV spectra of crude drugs, quantitative analysis of total flavones in water extracts, acute toxicity and pharmacodynamics showed that their compositions and pharmacologic effects are essentially similar without obvious differences. Therefore, they may have the same value in medical practice.
, 百拇医药
Key words Flemingia Roxb.ex Ait et Ait.f. F . philippinesis F.macrophylla F.lalifolia
千斤拔始载于《植物名实图考》，近代本草多有收载，主要用于风湿骨痛，腰肌劳损，带下等。70年代始作为金鸡冲剂、壮腰健肾丸等的原料用于中成药生产。千斤拔属植物在我国分布有6种1变种，其中6种在民间有药用历史〔1，2〕。《中国药典》1977年版〔3〕仅收载蔓性千斤拔Flemingia philippinesis Merr.et Rolfe 1种，《广西中药材标准》收载2种〔4〕。由于长期大量采挖，蔓性千斤拔资源日益减少，寻找新的药源已势在必行。为此，我们进行了千斤拔的品种调查与质量研究，现报道如下。
1 原植物调查
目前各地作为千斤拔药用的主要有4种：蔓性千斤拔、大叶千斤拔F.macrophylla(Willd.) Prain.、宽叶千斤拔F.latifolia Benth.、球穗千斤拔F.strobilifera(Linn.)Ait.,其中蔓性千斤拔、大叶千斤拔分布较广，宽叶千斤拔主要分布云南、广西；球穗千斤拔目前未形成大宗商品，但可见到混杂于蔓性千斤拔商品中。
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为了考察不同品种千斤拔的质量，我们收集了不同产地的蔓性千斤拔、大叶千斤拔和宽叶千斤拔3个主流品种样品进行了初步对比研究。
样品来源：A)蔓性千斤拔：A1-云南富宁县板仑乡；A2-广西梧州市；A3-江西。
B)大叶千斤拔：B1-云南富宁县板仑乡，B2-云南富宁县剥隘乡，B3-广西贺州市。
C)宽叶千斤拔：C1-云南富宁县板仑乡，C2-云南富宁县收购站，C3-广西灵峰药业公司。
上述药材的原植物宽叶千斤拔由广西植物研究所韦裕宗研究员鉴定，其余由饶伟文鉴定。
, http://www.100md.com 2 药材性状比较
蔓性千斤拔：根呈长圆锥形，多不分枝，形似牛尾，直径1～1.5 cm，表面灰棕色或红棕色，具细纵纹及横长皮孔，顶端常有较多的细茎残基。质硬，断面纤维性，皮部薄，棕红色，木质部黄白色。微具豆腥气，味微甘涩。
大叶千斤拔：常有分枝，直径可达6 cm，根头部常呈结节状膨大，残留的茎基较粗，表面横向皮孔较明显，断面木质部黄白色或淡红色。
宽叶千斤拔：与大叶千斤拔近似，唯其呈红棕色，木栓层常呈片状脱落，断面木质部呈淡红色或紫棕色。
3 组织结构比较
我们对3种千斤拔根的横切面进行了观察，发现蔓性千斤拔和大叶千斤拔的组织结构与文献〔4，5〕报道基本相同，宽叶千斤拔亦与之相似，唯大叶千斤拔和宽叶千斤拔薄壁组织中含棕色物特别多，而草酸钙方晶较少见，其中又以宽叶千斤拔为甚。
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4 化学成分比较
4.1 化学成分预试：取同一产地的3种千斤拔样品(A1、B1、C1)粗粉，参照文献〔6〕的方法进行试管法和TLC法预试，结果表明蔓性千斤拔、大叶千斤拔和宽叶千斤拔含有相同的成分类型：酚类、黄酮、鞣质、糖类、甾醇、生物碱和氨基酸类试验均呈阳性反应；皂苷、蒽醌、强心苷和内酯类试验均呈阴性反应。
4.2 TLC比较：分别取各样品粗粉2 g，加甲醇30 mL振摇提取20 min，滤过，滤液用石油醚(60℃～90℃)萃取2次，合并石油醚液，浓缩至1 mL，备用。甲醇液置水浴加热蒸干，残留物加水10 mL，搅拌成混悬液，移置分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取2次，每次10 mL，合并乙酸乙酯液，浓缩至1 mL备用，水层液置蒸发皿中，水浴加热蒸干，残留物加甲醇2 mL溶解，滤过，备用。
分别吸取上述石油醚、乙酸乙酯和甲醇提取液3～5 μL，点样于硅胶G薄层板或聚酰胺薄膜上，按一规定条件进行TLC试验，结果表明，3个品种千斤拔的层析图谱主斑点基本相同，但大叶千斤拔与宽叶千斤拔的相似性更大，同一品种不同产地的样品之间也有一定区别(图1～3)。
, 百拇医药
4.3 紫外光谱比较：分别取样品粗粉0.2 g，加乙醇20 mL，浸泡2 h，滤过，取滤液适量，稀释10～50倍，用乙醇作空白，于岛津 UV-265分光光度计测定UV光谱，结果表明，9个样品均在265～275 nm范围内有一最大吸收峰和一个不明显的肩峰，而蔓性千斤拔则在340 nm附近另有一最大吸收峰或肩峰；总的看来，不同品种之间，蔓性千斤拔与其他两种区别较明显，大叶千斤拔与宽叶千斤拔较相似，同品种不同产地的样品间也有一定区别(表1)。
表1 不同千斤拔样品的UV光谱比较 品种
蔓性千斤拔
大叶千斤拔
宽叶千斤拔
样品代号
A1
, 百拇医药
A2
A3
B1
B2
B3
C1
C2
C3
λmax/nm
265
274
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265
274
275
266
275
274
274
(或肩峰)
342
(340)
层析板-硅胶G-CMC板 展开剂-苯-氯仿(65∶35) 显色剂-喷10%磷钼酸溶液，105℃，5 min 样品代号同正文A1～A3-不同产地蔓性千斤拔 B1～B3-不同产地大叶千斤拔C1～C3-不同产地宽叶千斤拔(下同)
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图1 石油醚提取物TLC图
层析板-聚酰胺薄膜 展开剂-35%乙酸 显色剂-喷
1%三氯化铝溶液，热风吹干，365 nm紫外光下观察
图2 乙酸乙酯提取物TLC图
层析条件、样品代号均同图2
图3 甲醇提取物TLC图
4.4 水溶性浸出物测定：取各样品粗粉，按《中国药典》1995年版附录“浸出物测定法”中热浸法测定水溶性浸出物含量(表2)。
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表2 不同千斤拔样品水溶性浸出物测定结果(n=2) 品种
蔓性千斤拔
大叶千斤拔
宽叶千斤拔
样品代号
A1
A2
A3
B1
B2
B3
, 百拇医药
C1
C2
C3
含量(%)
16.9
24.3
13.3
14.0
16.2
18.2
19.5
15.0
, 百拇医药
14.6
均值(%)
18.2
16.1
16.4
4.5 总黄酮含量测定：已知蔓性千斤拔的根含蔓性千斤拔素A、B、C、D，刺桐叶素B，金雀异黄酮素等黄酮类成分〔7〕。我们做成分预试和聚酰胺TLC试验也表明，千斤拔中黄酮类成分含量较高。为此，我们在文献〔6〕黄酮苷测定方法的基础上，根据样品的实验情况比较了提取及显色条件，确定了含量测定方法如下。
对照品溶液的制备：精密称取120 ℃干燥至恒重的芦丁对照品适量，用80 %乙醇溶解配成每1 mL含无水芦丁62.4 μg的溶液，即得。
, 百拇医药
标准曲线的制备：精密量取对照溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL分别置具塞试管中，各加80 %乙醇至5.0 mL，摇匀，精密加入0.1 mol的三氯化铝80%乙醇溶液5.0 mL，摇匀，置70℃水浴中加热10 min显色，放冷至室温，以80%乙醇作空白，在402 nm波长处测定吸收度，计得回归方程为：C=38.602A-0.5037，r=0.9998。
样品测定：精密称取样品粗粉约0.5 g，至磨口烧瓶中，精密加入80 %乙醇25 mL，称定重量(准确到0.01 g)，加热回流提取1.5 h，放冷，擦干烧瓶外壁，称重，补足损失的溶媒，滤过，取续滤液作为供试品溶液。精密量取5.0 mL，取A、B两份，分别置具塞试管中，其中A份精密加入80%乙醇5.0 mL,B份精密加入0.1 mol三氯化铝80 %乙醇液5.0 mL，摇匀，置70℃水浴上加热10 min显色，放冷至室温，以A作空白，在402 nm波长处测定吸收度，根据回归方程求出样品中总黄酮(以芦丁计)的百分含量(表3)。表3 不同千斤拔样品总黄酮测定结果(n=2) 品种
, 百拇医药
蔓性千斤拔
大叶千斤拔
宽叶千斤拔
样品代号
A1
A2
A3
B1
B2
B3
C1
, 百拇医药
C2
C3
含量(%)
0.32
0.15
0.29
0.29
0.27
0.27
0.50
0.49
0.39
均值(%)
, http://www.100md.com
0.25
0.25
0.46
5 药理作用比较 我们利用昆明小白鼠，对3种千斤拔的水煎液做了急性毒性与药效学比较，结果表明，3种千斤拔均属无毒类；与蒸馏水对照组相比，抗炎作用、免疫增强作用、镇痛、抗疲劳、抗缺氧等指标，均有增强作用的趋向，但3种千斤拔无明显差别(另文报道)。
6 小结
品种调查表明，蔓性千斤拔、大叶千斤拔和宽叶千斤拔是当前千斤拔药材商品的主流品种。化学和药理研究结果表明，3种千斤拔所含成分大致相似，药理作用无明显差别，认为可等同入药。
*Address:Rao Weizhi,Hezhou Hezhou Institute for Drug Control Wuzhou
, 百拇医药
作者简介:饶伟文 1982年毕业于广西中医学院中药专业,学士,1988年在中国药品生物制品检定所进修,现为副主任药师.从事中药检验及中草药研究工作16年,先后在国家级医药杂志发表论文、译文10余篇，入选国际学术会议交流2篇，获省级科研成果1项。
参 考 文 献
[1] 韦裕宗.广西植物，1991，11(3)：200
[2] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志.41卷.北京：科学出版社，1995：325
[3] 中华人民共和国药典.1977年版.1977：附录22
[4] 广西中药材标准.第二册.1996：37
[5] 陈世文，等.中药通报，1984，9(3)：13
[6] 中国医科院药物研究所.中草药有效成分的研究.第一分册.北京：人民卫生出版社，1972：9、330
[7] 陈 敏，等.药学学报，1991，26(1)：42
(1998-05-22收稿), 百拇医药
单位：饶伟文 黄建楷 温志芳 黄凤群 广西贺州地区药检所(梧州543001)
关键词：千斤拔；成分分析；药理试验
中草药/990328 摘 要 对千斤拔的品种调查表明，蔓性千斤拔、大叶千斤拔和宽叶千斤拔是当前的主流品种。经对3种千斤拔的药材性状，组织结构，化学成分预试，TLC、UV比较，以及浸出物、总黄酮含量测定，急性毒性与药效学试验，结果表明3者所含成分大致相似，药理作用无明显差异，认为可等同入药
A Survey on the Varieties of Flemingia
(Flemingia)and Comparison of Their Respective Quality
, 百拇医药
Rao Weiwen, Huang Jiankai, Wen Zhifang, et al.
(Hezhou Institute for Drug Conrtol, Wuzhou 543001)
Abstract Result of the survey showed that Flemingia philippinesis Merr. et Rolfe, F.macrophylla (Willd) Prain and F.latifolia Benth.were the main varieties under current usage. Results from the comparative studies on their pharmacognostic characteristics, tissue structure, preliminary chemical compositions tests,TLC and UV spectra of crude drugs, quantitative analysis of total flavones in water extracts, acute toxicity and pharmacodynamics showed that their compositions and pharmacologic effects are essentially similar without obvious differences. Therefore, they may have the same value in medical practice.
, 百拇医药
Key words Flemingia Roxb.ex Ait et Ait.f. F . philippinesis F.macrophylla F.lalifolia
千斤拔始载于《植物名实图考》，近代本草多有收载，主要用于风湿骨痛，腰肌劳损，带下等。70年代始作为金鸡冲剂、壮腰健肾丸等的原料用于中成药生产。千斤拔属植物在我国分布有6种1变种，其中6种在民间有药用历史〔1，2〕。《中国药典》1977年版〔3〕仅收载蔓性千斤拔Flemingia philippinesis Merr.et Rolfe 1种，《广西中药材标准》收载2种〔4〕。由于长期大量采挖，蔓性千斤拔资源日益减少，寻找新的药源已势在必行。为此，我们进行了千斤拔的品种调查与质量研究，现报道如下。
1 原植物调查
目前各地作为千斤拔药用的主要有4种：蔓性千斤拔、大叶千斤拔F.macrophylla(Willd.) Prain.、宽叶千斤拔F.latifolia Benth.、球穗千斤拔F.strobilifera(Linn.)Ait.,其中蔓性千斤拔、大叶千斤拔分布较广，宽叶千斤拔主要分布云南、广西；球穗千斤拔目前未形成大宗商品，但可见到混杂于蔓性千斤拔商品中。
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为了考察不同品种千斤拔的质量，我们收集了不同产地的蔓性千斤拔、大叶千斤拔和宽叶千斤拔3个主流品种样品进行了初步对比研究。
样品来源：A)蔓性千斤拔：A1-云南富宁县板仑乡；A2-广西梧州市；A3-江西。
B)大叶千斤拔：B1-云南富宁县板仑乡，B2-云南富宁县剥隘乡，B3-广西贺州市。
C)宽叶千斤拔：C1-云南富宁县板仑乡，C2-云南富宁县收购站，C3-广西灵峰药业公司。
上述药材的原植物宽叶千斤拔由广西植物研究所韦裕宗研究员鉴定，其余由饶伟文鉴定。
, http://www.100md.com 2 药材性状比较
蔓性千斤拔：根呈长圆锥形，多不分枝，形似牛尾，直径1～1.5 cm，表面灰棕色或红棕色，具细纵纹及横长皮孔，顶端常有较多的细茎残基。质硬，断面纤维性，皮部薄，棕红色，木质部黄白色。微具豆腥气，味微甘涩。
大叶千斤拔：常有分枝，直径可达6 cm，根头部常呈结节状膨大，残留的茎基较粗，表面横向皮孔较明显，断面木质部黄白色或淡红色。
宽叶千斤拔：与大叶千斤拔近似，唯其呈红棕色，木栓层常呈片状脱落，断面木质部呈淡红色或紫棕色。
3 组织结构比较
我们对3种千斤拔根的横切面进行了观察，发现蔓性千斤拔和大叶千斤拔的组织结构与文献〔4，5〕报道基本相同，宽叶千斤拔亦与之相似，唯大叶千斤拔和宽叶千斤拔薄壁组织中含棕色物特别多，而草酸钙方晶较少见，其中又以宽叶千斤拔为甚。
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4 化学成分比较
4.1 化学成分预试：取同一产地的3种千斤拔样品(A1、B1、C1)粗粉，参照文献〔6〕的方法进行试管法和TLC法预试，结果表明蔓性千斤拔、大叶千斤拔和宽叶千斤拔含有相同的成分类型：酚类、黄酮、鞣质、糖类、甾醇、生物碱和氨基酸类试验均呈阳性反应；皂苷、蒽醌、强心苷和内酯类试验均呈阴性反应。
4.2 TLC比较：分别取各样品粗粉2 g，加甲醇30 mL振摇提取20 min，滤过，滤液用石油醚(60℃～90℃)萃取2次，合并石油醚液，浓缩至1 mL，备用。甲醇液置水浴加热蒸干，残留物加水10 mL，搅拌成混悬液，移置分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取2次，每次10 mL，合并乙酸乙酯液，浓缩至1 mL备用，水层液置蒸发皿中，水浴加热蒸干，残留物加甲醇2 mL溶解，滤过，备用。
分别吸取上述石油醚、乙酸乙酯和甲醇提取液3～5 μL，点样于硅胶G薄层板或聚酰胺薄膜上，按一规定条件进行TLC试验，结果表明，3个品种千斤拔的层析图谱主斑点基本相同，但大叶千斤拔与宽叶千斤拔的相似性更大，同一品种不同产地的样品之间也有一定区别(图1～3)。
, 百拇医药
4.3 紫外光谱比较：分别取样品粗粉0.2 g，加乙醇20 mL，浸泡2 h，滤过，取滤液适量，稀释10～50倍，用乙醇作空白，于岛津 UV-265分光光度计测定UV光谱，结果表明，9个样品均在265～275 nm范围内有一最大吸收峰和一个不明显的肩峰，而蔓性千斤拔则在340 nm附近另有一最大吸收峰或肩峰；总的看来，不同品种之间，蔓性千斤拔与其他两种区别较明显，大叶千斤拔与宽叶千斤拔较相似，同品种不同产地的样品间也有一定区别(表1)。
表1 不同千斤拔样品的UV光谱比较 品种
蔓性千斤拔
大叶千斤拔
宽叶千斤拔
样品代号
A1
, 百拇医药
A2
A3
B1
B2
B3
C1
C2
C3
λmax/nm
265
274
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265
274
275
266
275
274
274
(或肩峰)
342
(340)
层析板-硅胶G-CMC板 展开剂-苯-氯仿(65∶35) 显色剂-喷10%磷钼酸溶液，105℃，5 min 样品代号同正文A1～A3-不同产地蔓性千斤拔 B1～B3-不同产地大叶千斤拔C1～C3-不同产地宽叶千斤拔(下同)
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图1 石油醚提取物TLC图
层析板-聚酰胺薄膜 展开剂-35%乙酸 显色剂-喷
1%三氯化铝溶液，热风吹干，365 nm紫外光下观察
图2 乙酸乙酯提取物TLC图
层析条件、样品代号均同图2
图3 甲醇提取物TLC图
4.4 水溶性浸出物测定：取各样品粗粉，按《中国药典》1995年版附录“浸出物测定法”中热浸法测定水溶性浸出物含量(表2)。
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表2 不同千斤拔样品水溶性浸出物测定结果(n=2) 品种
蔓性千斤拔
大叶千斤拔
宽叶千斤拔
样品代号
A1
A2
A3
B1
B2
B3
, 百拇医药
C1
C2
C3
含量(%)
16.9
24.3
13.3
14.0
16.2
18.2
19.5
15.0
, 百拇医药
14.6
均值(%)
18.2
16.1
16.4
4.5 总黄酮含量测定：已知蔓性千斤拔的根含蔓性千斤拔素A、B、C、D，刺桐叶素B，金雀异黄酮素等黄酮类成分〔7〕。我们做成分预试和聚酰胺TLC试验也表明，千斤拔中黄酮类成分含量较高。为此，我们在文献〔6〕黄酮苷测定方法的基础上，根据样品的实验情况比较了提取及显色条件，确定了含量测定方法如下。
对照品溶液的制备：精密称取120 ℃干燥至恒重的芦丁对照品适量，用80 %乙醇溶解配成每1 mL含无水芦丁62.4 μg的溶液，即得。
, 百拇医药
标准曲线的制备：精密量取对照溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL分别置具塞试管中，各加80 %乙醇至5.0 mL，摇匀，精密加入0.1 mol的三氯化铝80%乙醇溶液5.0 mL，摇匀，置70℃水浴中加热10 min显色，放冷至室温，以80%乙醇作空白，在402 nm波长处测定吸收度，计得回归方程为：C=38.602A-0.5037，r=0.9998。
样品测定：精密称取样品粗粉约0.5 g，至磨口烧瓶中，精密加入80 %乙醇25 mL，称定重量(准确到0.01 g)，加热回流提取1.5 h，放冷，擦干烧瓶外壁，称重，补足损失的溶媒，滤过，取续滤液作为供试品溶液。精密量取5.0 mL，取A、B两份，分别置具塞试管中，其中A份精密加入80%乙醇5.0 mL,B份精密加入0.1 mol三氯化铝80 %乙醇液5.0 mL，摇匀，置70℃水浴上加热10 min显色，放冷至室温，以A作空白，在402 nm波长处测定吸收度，根据回归方程求出样品中总黄酮(以芦丁计)的百分含量(表3)。表3 不同千斤拔样品总黄酮测定结果(n=2) 品种
, 百拇医药
蔓性千斤拔
大叶千斤拔
宽叶千斤拔
样品代号
A1
A2
A3
B1
B2
B3
C1
, 百拇医药
C2
C3
含量(%)
0.32
0.15
0.29
0.29
0.27
0.27
0.50
0.49
0.39
均值(%)
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0.25
0.25
0.46
5 药理作用比较 我们利用昆明小白鼠，对3种千斤拔的水煎液做了急性毒性与药效学比较，结果表明，3种千斤拔均属无毒类；与蒸馏水对照组相比，抗炎作用、免疫增强作用、镇痛、抗疲劳、抗缺氧等指标，均有增强作用的趋向，但3种千斤拔无明显差别(另文报道)。
6 小结
品种调查表明，蔓性千斤拔、大叶千斤拔和宽叶千斤拔是当前千斤拔药材商品的主流品种。化学和药理研究结果表明，3种千斤拔所含成分大致相似，药理作用无明显差别，认为可等同入药。
*Address:Rao Weizhi,Hezhou Hezhou Institute for Drug Control Wuzhou
, 百拇医药
作者简介:饶伟文 1982年毕业于广西中医学院中药专业,学士,1988年在中国药品生物制品检定所进修,现为副主任药师.从事中药检验及中草药研究工作16年,先后在国家级医药杂志发表论文、译文10余篇，入选国际学术会议交流2篇，获省级科研成果1项。
参 考 文 献
[1] 韦裕宗.广西植物，1991，11(3)：200
[2] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志.41卷.北京：科学出版社，1995：325
[3] 中华人民共和国药典.1977年版.1977：附录22
[4] 广西中药材标准.第二册.1996：37
[5] 陈世文，等.中药通报，1984，9(3)：13
[6] 中国医科院药物研究所.中草药有效成分的研究.第一分册.北京：人民卫生出版社，1972：9、330
[7] 陈 敏，等.药学学报，1991，26(1)：42
(1998-05-22收稿), 百拇医药