通脉促活胶囊对兔红细胞流变性作用的实验研究
作者：刘剑刚 许勇钢 兰洁英 马增香
单位：刘剑刚 许勇钢 100091 北京，中国中医研究院西苑医院；兰洁英 马增香 河北省沧州中西医结合医院
关键词：通脉促活胶囊；红细胞流变性；血瘀证；动物模型；活血化瘀
中国微循环990307
【摘要】 目的 观察通脉促活胶囊对兔实验性高粘滞血症的红细胞流变性的作用。方法 用高分子右旋糖苷对兔造成高粘滞血症，即血瘀证动物模型，通过对动物血液粘度和红细胞流变性指标的检测，观察通脉促活胶囊的药理作用。结果 通脉促活胶囊具有降低血液粘度、降低红细胞聚集指数和提高红细胞变形能力的作用。给药后，红细胞聚集指数为14.29±5.06%，红细胞变形指数为45.58±6.41%，和生理盐水对照组比较有显著差异(P<0.01)。结论 通脉促活胶囊具有降低兔血液粘度，增加细胞流动性，改善红细胞流变性的作用，具有预防和治疗作用。
, 百拇医药
Experimental Study of Tongmaicuhuo Capsule on Erythrocyte Rheology of Blood Stasis Model in Rabbits
Liu Jiangang，Xu Yonggang，Lan Jieying，et al.
Xiyuan Hospital，China Academy of Traditional Chinese Medicine，Beijing 100091
【Abstract】 Objective Observing the changes of erythrocyte rheology on blood stasis syndrome model in rabbits with Tongmaicuhuo capsule.Methods We used animal model of blood stasis in rabbit made by injecting high molecular weight dextran，observed effect of Tongmaicuhuo capsule on the erythrocyte rheology and indexes of blood stasis.Results Tongmaicuhuo capsule could improve the erythrocyte rheology indexes of blood stasis，whole blood viscosity，upgrade red blood cell deformability，reduce erythrocytes aggregation，after taking Tongmaicuhuo capsule，erythrocytes aggregation index (14.29±5.06%) and red blood cell deformability index (45.58±6.41%) in Tongmaicuhuo capsule group，compared with model group，the difference was significant (P<0.01).Conclusion Tongmaicuhuo capsule might descend the blood viscosity and red blood cell aggregation，improve red blood cell deformative ability.It indicated that Tongmaicuhuo capsule might prevent hyperviscosity syndrome.
, 百拇医药
【Key words】 Tongmaicuhuo capsule Erythrocyte rheology Blood stasis Animal model
Invigorate blood circulation and remove blood stasis
通脉促活胶囊是以中医活血化瘀为治则，由三棱、莪术破血化瘀药为主组成的中药复方制剂，临床用于治疗脑梗塞、脑萎缩等病症，取得了较好的临床疗效[1]。为进一步探讨该药的活血化瘀作用及对红细胞流变能力的影响，我们观察其对用高分子右旋糖苷造成兔血瘀证动物模型，观察通脉促活胶囊的药理作用，现将实验结果报告如下。
材料与方法
1 实验动物与分组
实验用新西兰种大白兔40只，体重1.80～2.30kg，雄性，由北京农业大学实验种兔场提供。
, 百拇医药
大白兔40只，基础饲料喂养一周后，随机分为四组，每组各用动物10只。即1.生理盐水对照组：0.9%氯化钠注射液(10ml/kg)；2.阳性药物对照组： 复方丹参片组，2.00g生药/kg；3.通脉促活胶囊： 大剂量组(4.00g生药/kg)；4.通脉促活胶囊： 小剂量组(2.00g生药/kg)。
实验药物用蒸馏水稀释，备用。
2 实验药物
2.1 通脉促活胶囊(2.00g生药/kg)，由三棱、莪术、川芎等组成，河北省沧州中西医结合医院制剂室制成胶囊并提供样品，批号： 940808；
2.2 高分子右旋糖酐，分子量为50万单位，由瑞士UPPSALA SWEDEN公司生产，批号： 17—0320—01；
2.3 聚乙烯吡咯烷酮K30(PVP)，北京市东环联合化工厂生产，批号： 960515；
, http://www.100md.com
2.4 复方丹参片(0.27g生药/片)，由河北省南宫市制药厂生产，批号： 929951；
2.5 乙二胺四乙酸二钠(EDTA Na2)，由北京化工厂生产，批号： 940526。
3 实验方法
给药前，兔心脏穿刺取血，2%EDTA Na2抗凝，检测红细胞流变性各项指标。第1天上、下午各一次从兔耳缘静脉注射15%的高分子右旋糖酐(5ml/kg)，之后改为每天一次，同时每天灌胃一次，连续7天。第8天，停药禁食。1h后从心脏取血，再次检测红细胞流变性各项指标[2]。
4 实验测定指标及仪器
4.1 血液粘度： 日本东京计器株氏会社ELD型锥-板粘度计，取其在1.92S-1、9.61S-1、38.4S-1、192S-1四个切速下的全血粘度。
, 百拇医药
4.2 红细胞沉降率： 毛细管微量法。
4.3 红细胞比积： 毛细管微量法，用日本KUBOTA公司KH-120-Ⅱ型红细胞比积仪。
4.4 红细胞聚集性： 光密度法，LBY-BX2红细胞聚集激光衍射仪，测定红细胞聚集指数。在理论上，悬浮液中粒子处于散在状态时透光度较小，而当聚集体生成时，随着粒子数的下降，散射光的量下降，而透光度则增高。样品池为透明材料制成的圆锥-平板结构，样品在600S-1高切变率下剪切10s，使红细胞解聚，然后锥-板间的旋转运动停止，红细胞重新聚集，时间为100s。
4.5 红细胞变形性： 激光衍射法，LBY-BX2红细胞变形激光衍射仪，测定红细胞变形指数。本仪器采用独特的锥-板测试结构，将稀释的红细胞悬浮液注入圆台上，测试时，切变率由100～1500S-1不断增加，使红细胞所受切应力也不断增加，细胞的形态由圆形逐渐被拉长成椭圆形，计算机自动计算出DI值。红细胞悬浮液为15%PVP磷酸缓冲液，pH调节到7.4。
, http://www.100md.com
实验室温度为25℃，仪器测定温度为37℃。
5 统计方法
统计学处理为t检验。
结 果
1 通脉促活胶囊对红细胞流变性的影响
结果见表1。动物造模后，生理盐水对照组红细胞聚集指数明显升高，红细胞变形能力减弱；通脉促活胶囊组具有降低红细胞聚集指数，提高红细胞变形指数的作用，并有降低红细胞压积的作用，和生理盐水对照组比较有显著的差异(P<0.01、P<0.01、P<0.05)。对红细胞沉降率指标无明显影响。复方丹参片具有降低红细胞聚集指数，提高红细胞变形指数的作用，和生理盐水对照组比较有显著的差异(P<0.01、P<0.01)。对红细胞沉降率、红细胞压积指标无明显影响。
表1 通脉促活胶囊对红细胞流变性的影响(
±s) 分 组
, http://www.100md.com
只数
红细胞沉降率(mm/h)
红细胞压积(%)
红细胞聚集指数(%)
红细胞变形指数(%)
生理盐水组
药前
药后
10
10
0.55±0.60
0.94±0.79
, http://www.100md.com
42.20±3.26
45.10±1.71
11.53±3.74
28.50±4.79
48.17±5.29
33.42±6.28
复方丹参片组
药前
药后
10
10
0.50±0.75
, 百拇医药
0.61±0.49
40.60±4.68
45.20±2.10
9.20±3.27
11.94±2.98**
47.13±6.22
43.67±5.36**
通脉小剂量组
药前
药后
10
, http://www.100md.com 10
0.56±0.62
0.72±0.75
42.15±2.71
44.70±1.51
10.77±4.08
15.06±4.89**
48.76±4.92
43.44±4.52**
通脉大剂量组
药前
, http://www.100md.com
药后
10
10
0.55±0.73
0.75±0.76
43.25±2.70
43.90±1.78*
9.94±3.26
14.29±5.06**
47.69±5.73
45.58±6.41**
, 百拇医药
注： 与生理盐水组药后比较： * P<0.05，** P<0.01
2 通脉促活胶囊对血液粘度的影响
结果见表2。造模后，生理盐水组动物的血液粘度显著升高(P<0.01)，而通脉促活胶囊两个剂量组均可有效抑制血液粘度的升高，降低1.92S-1、9.61S-1切速下的血液粘度值，和生理盐水对照组比较有非常显著的差异(P<0.01)。
表2 通脉促活胶囊对血液粘度的影响(±s) 分 组
例数
血 液 粘 度(mpa.s)
, 百拇医药 1.92S-1
9.61S-1
38.4S-1
192S-1
生理盐水组
药前
药后
10
10
19.25±3.41
33.45±2.82
17.14±3.93
, http://www.100md.com
27.45±2.71
8.79±1.71
10.85±0.67
5.28±0.59
5.60±0.48
复方丹参片组
药前
药后
10
10
20.76±3.24
23.40±4.27**
, http://www.100md.com
18.00±3.25
19.11±4.40**
6.51±0.69
8.73±1.88**
4.76±0.46
6.12±0.79
通脉小剂量组
药前
药后
10
10
19.78±2.79
, 百拇医药
24.38±3.15**
17.28±2.23
18.32±2.76**
8.87±1.47
10.09±1.75
5.23±0.77
5.67±0.57
通脉大剂量组
药前
药后
10
, http://www.100md.com 10
20.60±3.14
22.10±2.35**
17.86±2.64
17.10±2.41**
9.10±0.96
9.87±1.33
4.94±0.58
5.47±0.57
注： 与生理盐水组药后比较： * P<0.05，** P<0.01
复方丹参片可有效抑制血液粘度的升高，降低1.92S-1、9.61S-1切速下的血液粘度值和生理盐水对照组比较有非常显著的差异(P<0.01)。
, 百拇医药
讨 论
血液流变学的改变对脑梗塞发病、治疗和预后的作用十分重要。临床研究表明，脑梗塞患者多患有脑动脉硬化症、高血压、高脂血症等，并导致血管壁病变，脂肪沉积，血小板易聚集，血液粘度增高和红细胞变形性能力降低。中医理论认为本病多属于“中风”、“偏枯”的范畴，为痰浊互结，瘀血阻络，气不运血所至，尤以血瘀为本病的重要病机。本病气少而血行缓慢，不能推动血液在脉络中运行，故产生血瘀阻塞脉络，出现半身不隧，口眼歪斜，语言阻塞等症状。高分子右旋糖酐所致“血瘀”模型，可使血液粘度增加，造成微循环障碍、血流变慢、红细胞聚集等，与临床“血瘀证”患者表现接近。通脉促活胶囊由三棱、莪术为君药，辅佐以川芎、丹参等。三棱、莪术为传统活血化瘀药中的破血药，具有破血祛瘀、行气止痛的功效。本实验结果表明，通脉促活胶囊具有降低红细胞聚集指数，提高红细胞变形能力的作用。
血液是血细胞在血浆中的悬浮液，其粘度受血浆、血细胞及它们之间相互作用的影响。红细胞压积是决定血液粘度的最主要的因素[3]。红细胞的聚集性对低切变率时血液粘度起重要作用，通脉促活胶囊降低红细胞压积和红细胞聚集性的作用，改善红细胞的流变性，抑制血液粘度的升高，对高分子右旋糖苷所致的高粘滞血症有良好的预防和治疗作用，为临床观察与应用提供了一定的药理学依据。
参考文献
1 兰洁英，马增香.通脉促活胶囊治疗脑梗塞患者104例临床观察.中国中西医结合杂志.1994，12(14)：189
2 刘剑刚，许秀森.益冠胶囊抗血栓作用的实验研究.中国中西医结合杂志.基础理论研究特集.1997，7(17)：251
3 翁维良，廖福龙，吴云鹏主编.血液流变学研究方法及其应用.北京： 科学出版社.1989，96～97
收稿： 1998-10-05 修回： 1999-02-13, http://www.100md.com
单位：刘剑刚 许勇钢 100091 北京，中国中医研究院西苑医院；兰洁英 马增香 河北省沧州中西医结合医院
关键词：通脉促活胶囊；红细胞流变性；血瘀证；动物模型；活血化瘀
中国微循环990307
【摘要】 目的 观察通脉促活胶囊对兔实验性高粘滞血症的红细胞流变性的作用。方法 用高分子右旋糖苷对兔造成高粘滞血症，即血瘀证动物模型，通过对动物血液粘度和红细胞流变性指标的检测，观察通脉促活胶囊的药理作用。结果 通脉促活胶囊具有降低血液粘度、降低红细胞聚集指数和提高红细胞变形能力的作用。给药后，红细胞聚集指数为14.29±5.06%，红细胞变形指数为45.58±6.41%，和生理盐水对照组比较有显著差异(P<0.01)。结论 通脉促活胶囊具有降低兔血液粘度，增加细胞流动性，改善红细胞流变性的作用，具有预防和治疗作用。
, 百拇医药
Experimental Study of Tongmaicuhuo Capsule on Erythrocyte Rheology of Blood Stasis Model in Rabbits
Liu Jiangang，Xu Yonggang，Lan Jieying，et al.
Xiyuan Hospital，China Academy of Traditional Chinese Medicine，Beijing 100091
【Abstract】 Objective Observing the changes of erythrocyte rheology on blood stasis syndrome model in rabbits with Tongmaicuhuo capsule.Methods We used animal model of blood stasis in rabbit made by injecting high molecular weight dextran，observed effect of Tongmaicuhuo capsule on the erythrocyte rheology and indexes of blood stasis.Results Tongmaicuhuo capsule could improve the erythrocyte rheology indexes of blood stasis，whole blood viscosity，upgrade red blood cell deformability，reduce erythrocytes aggregation，after taking Tongmaicuhuo capsule，erythrocytes aggregation index (14.29±5.06%) and red blood cell deformability index (45.58±6.41%) in Tongmaicuhuo capsule group，compared with model group，the difference was significant (P<0.01).Conclusion Tongmaicuhuo capsule might descend the blood viscosity and red blood cell aggregation，improve red blood cell deformative ability.It indicated that Tongmaicuhuo capsule might prevent hyperviscosity syndrome.
, 百拇医药
【Key words】 Tongmaicuhuo capsule Erythrocyte rheology Blood stasis Animal model
Invigorate blood circulation and remove blood stasis
通脉促活胶囊是以中医活血化瘀为治则，由三棱、莪术破血化瘀药为主组成的中药复方制剂，临床用于治疗脑梗塞、脑萎缩等病症，取得了较好的临床疗效[1]。为进一步探讨该药的活血化瘀作用及对红细胞流变能力的影响，我们观察其对用高分子右旋糖苷造成兔血瘀证动物模型，观察通脉促活胶囊的药理作用，现将实验结果报告如下。
材料与方法
1 实验动物与分组
实验用新西兰种大白兔40只，体重1.80～2.30kg，雄性，由北京农业大学实验种兔场提供。
, 百拇医药
大白兔40只，基础饲料喂养一周后，随机分为四组，每组各用动物10只。即1.生理盐水对照组：0.9%氯化钠注射液(10ml/kg)；2.阳性药物对照组： 复方丹参片组，2.00g生药/kg；3.通脉促活胶囊： 大剂量组(4.00g生药/kg)；4.通脉促活胶囊： 小剂量组(2.00g生药/kg)。
实验药物用蒸馏水稀释，备用。
2 实验药物
2.1 通脉促活胶囊(2.00g生药/kg)，由三棱、莪术、川芎等组成，河北省沧州中西医结合医院制剂室制成胶囊并提供样品，批号： 940808；
2.2 高分子右旋糖酐，分子量为50万单位，由瑞士UPPSALA SWEDEN公司生产，批号： 17—0320—01；
2.3 聚乙烯吡咯烷酮K30(PVP)，北京市东环联合化工厂生产，批号： 960515；
, http://www.100md.com
2.4 复方丹参片(0.27g生药/片)，由河北省南宫市制药厂生产，批号： 929951；
2.5 乙二胺四乙酸二钠(EDTA Na2)，由北京化工厂生产，批号： 940526。
3 实验方法
给药前，兔心脏穿刺取血，2%EDTA Na2抗凝，检测红细胞流变性各项指标。第1天上、下午各一次从兔耳缘静脉注射15%的高分子右旋糖酐(5ml/kg)，之后改为每天一次，同时每天灌胃一次，连续7天。第8天，停药禁食。1h后从心脏取血，再次检测红细胞流变性各项指标[2]。
4 实验测定指标及仪器
4.1 血液粘度： 日本东京计器株氏会社ELD型锥-板粘度计，取其在1.92S-1、9.61S-1、38.4S-1、192S-1四个切速下的全血粘度。
, 百拇医药
4.2 红细胞沉降率： 毛细管微量法。
4.3 红细胞比积： 毛细管微量法，用日本KUBOTA公司KH-120-Ⅱ型红细胞比积仪。
4.4 红细胞聚集性： 光密度法，LBY-BX2红细胞聚集激光衍射仪，测定红细胞聚集指数。在理论上，悬浮液中粒子处于散在状态时透光度较小，而当聚集体生成时，随着粒子数的下降，散射光的量下降，而透光度则增高。样品池为透明材料制成的圆锥-平板结构，样品在600S-1高切变率下剪切10s，使红细胞解聚，然后锥-板间的旋转运动停止，红细胞重新聚集，时间为100s。
4.5 红细胞变形性： 激光衍射法，LBY-BX2红细胞变形激光衍射仪，测定红细胞变形指数。本仪器采用独特的锥-板测试结构，将稀释的红细胞悬浮液注入圆台上，测试时，切变率由100～1500S-1不断增加，使红细胞所受切应力也不断增加，细胞的形态由圆形逐渐被拉长成椭圆形，计算机自动计算出DI值。红细胞悬浮液为15%PVP磷酸缓冲液，pH调节到7.4。
, http://www.100md.com
实验室温度为25℃，仪器测定温度为37℃。
5 统计方法
统计学处理为t检验。
结 果
1 通脉促活胶囊对红细胞流变性的影响
结果见表1。动物造模后，生理盐水对照组红细胞聚集指数明显升高，红细胞变形能力减弱；通脉促活胶囊组具有降低红细胞聚集指数，提高红细胞变形指数的作用，并有降低红细胞压积的作用，和生理盐水对照组比较有显著的差异(P<0.01、P<0.01、P<0.05)。对红细胞沉降率指标无明显影响。复方丹参片具有降低红细胞聚集指数，提高红细胞变形指数的作用，和生理盐水对照组比较有显著的差异(P<0.01、P<0.01)。对红细胞沉降率、红细胞压积指标无明显影响。
表1 通脉促活胶囊对红细胞流变性的影响(
±s) 分 组, http://www.100md.com
只数
红细胞沉降率(mm/h)
红细胞压积(%)
红细胞聚集指数(%)
红细胞变形指数(%)
生理盐水组
药前
药后
10
10
0.55±0.60
0.94±0.79
, http://www.100md.com
42.20±3.26
45.10±1.71
11.53±3.74
28.50±4.79
48.17±5.29
33.42±6.28
复方丹参片组
药前
药后
10
10
0.50±0.75
, 百拇医药
0.61±0.49
40.60±4.68
45.20±2.10
9.20±3.27
11.94±2.98**
47.13±6.22
43.67±5.36**
通脉小剂量组
药前
药后
10
, http://www.100md.com 10
0.56±0.62
0.72±0.75
42.15±2.71
44.70±1.51
10.77±4.08
15.06±4.89**
48.76±4.92
43.44±4.52**
通脉大剂量组
药前
, http://www.100md.com
药后
10
10
0.55±0.73
0.75±0.76
43.25±2.70
43.90±1.78*
9.94±3.26
14.29±5.06**
47.69±5.73
45.58±6.41**
, 百拇医药
注： 与生理盐水组药后比较： * P<0.05，** P<0.01
2 通脉促活胶囊对血液粘度的影响
结果见表2。造模后，生理盐水组动物的血液粘度显著升高(P<0.01)，而通脉促活胶囊两个剂量组均可有效抑制血液粘度的升高，降低1.92S-1、9.61S-1切速下的血液粘度值，和生理盐水对照组比较有非常显著的差异(P<0.01)。
表2 通脉促活胶囊对血液粘度的影响(
±s) 分 组例数
血 液 粘 度(mpa.s)
, 百拇医药 1.92S-1
9.61S-1
38.4S-1
192S-1
生理盐水组
药前
药后
10
10
19.25±3.41
33.45±2.82
17.14±3.93
, http://www.100md.com
27.45±2.71
8.79±1.71
10.85±0.67
5.28±0.59
5.60±0.48
复方丹参片组
药前
药后
10
10
20.76±3.24
23.40±4.27**
, http://www.100md.com
18.00±3.25
19.11±4.40**
6.51±0.69
8.73±1.88**
4.76±0.46
6.12±0.79
通脉小剂量组
药前
药后
10
10
19.78±2.79
, 百拇医药
24.38±3.15**
17.28±2.23
18.32±2.76**
8.87±1.47
10.09±1.75
5.23±0.77
5.67±0.57
通脉大剂量组
药前
药后
10
, http://www.100md.com 10
20.60±3.14
22.10±2.35**
17.86±2.64
17.10±2.41**
9.10±0.96
9.87±1.33
4.94±0.58
5.47±0.57
注： 与生理盐水组药后比较： * P<0.05，** P<0.01
复方丹参片可有效抑制血液粘度的升高，降低1.92S-1、9.61S-1切速下的血液粘度值和生理盐水对照组比较有非常显著的差异(P<0.01)。
, 百拇医药
讨 论
血液流变学的改变对脑梗塞发病、治疗和预后的作用十分重要。临床研究表明，脑梗塞患者多患有脑动脉硬化症、高血压、高脂血症等，并导致血管壁病变，脂肪沉积，血小板易聚集，血液粘度增高和红细胞变形性能力降低。中医理论认为本病多属于“中风”、“偏枯”的范畴，为痰浊互结，瘀血阻络，气不运血所至，尤以血瘀为本病的重要病机。本病气少而血行缓慢，不能推动血液在脉络中运行，故产生血瘀阻塞脉络，出现半身不隧，口眼歪斜，语言阻塞等症状。高分子右旋糖酐所致“血瘀”模型，可使血液粘度增加，造成微循环障碍、血流变慢、红细胞聚集等，与临床“血瘀证”患者表现接近。通脉促活胶囊由三棱、莪术为君药，辅佐以川芎、丹参等。三棱、莪术为传统活血化瘀药中的破血药，具有破血祛瘀、行气止痛的功效。本实验结果表明，通脉促活胶囊具有降低红细胞聚集指数，提高红细胞变形能力的作用。
血液是血细胞在血浆中的悬浮液，其粘度受血浆、血细胞及它们之间相互作用的影响。红细胞压积是决定血液粘度的最主要的因素[3]。红细胞的聚集性对低切变率时血液粘度起重要作用，通脉促活胶囊降低红细胞压积和红细胞聚集性的作用，改善红细胞的流变性，抑制血液粘度的升高，对高分子右旋糖苷所致的高粘滞血症有良好的预防和治疗作用，为临床观察与应用提供了一定的药理学依据。
参考文献
1 兰洁英，马增香.通脉促活胶囊治疗脑梗塞患者104例临床观察.中国中西医结合杂志.1994，12(14)：189
2 刘剑刚，许秀森.益冠胶囊抗血栓作用的实验研究.中国中西医结合杂志.基础理论研究特集.1997，7(17)：251
3 翁维良，廖福龙，吴云鹏主编.血液流变学研究方法及其应用.北京： 科学出版社.1989，96～97
收稿： 1998-10-05 修回： 1999-02-13, http://www.100md.com