合成鱼腥草素对小鼠免疫功能的影响
作者：邵兰 于庆海 吴红艳 李霞
单位：沈阳药科大学中药系， 沈阳 110015
关键词：合成鱼腥草素；脾切除；免疫增强
沈阳药科大学学报990315 摘 要 对于脾切除致免疫功能低下小鼠，合成鱼腥草素(HOU)60 mg/kg，120 mg/kg灌胃给药均能增强其腹腔巨噬细胞的吞噬功能(P<0.001)；迟发型超敏反应强度(P<0.001)；明显提高血清溶血素水平(P<0.05；P<0.001)；外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率(P<0.001)；HOU60 mg/kg还能明显提高脾切小鼠腹股沟淋巴结中淋巴细胞个数(P<0.01)，表明HOU对脾切除致免疫功能低下小鼠的特异性、非特异性免疫功能均有明显增强作用.
分类号 R96
The Effects of Houttuyninum on Immunologic Function of Splenectomized Mice
, http://www.100md.com
Shao Lan,Yu Qinghai,Wu Hongyan,Li Xia
Department of Traditional Chinese Medicines,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015
Abstract For the immunodeficiency mice following splenectomy,houttuyninum ig 60 mg/kg，120 mg/kg strikingly strengthened the phagocytosing function of the peritoneal macrophage system (P<0.001),delayed the type hypersensitivity (DTH)reaction (P<0.001)；significantly enhanced the level of serumhemolysin(P<0.05；P<0.01)，and ANAE(+) cell percentage of peripheral blood lymphocytes(P<0.001)furthermore,60 mg/kg remarkably raised the amount of lymphocytes of groin lymph node(P<0.05).These experimental results of hottnyninum were suggested that houttuyninum could obviously strengthen the nonspecific and sepecific immune function in splenectomized mice.
, 百拇医药
Key words houttuyninum;splenectomy;immunoenhancement
合成鱼腥草素(HOU)为中药鱼腥草的有效成分鱼腥草素的亚硫酸钠加成物，具有抑菌、抗炎等方面的药理作用，本室在进行抗炎研究中发现，其对免疫功能低下小鼠具有较好的调节作用.脾为机体最大的免疫器官，脾切除势必造成免疫功能的紊乱.本实验以HOU为供试药物，利用脾切除造成免疫功能低下小鼠模型，对HOU免疫调节机制进行了研究.
1 实验方法
1.1 脾切除方法
用乙醚麻醉小鼠，小鼠俯卧位，左背后部肋缘下切口长约0.5 cm,将脾拉出切口，结扎脾蒂血管，去脾，缝合肌层和皮肤，假手术组同样方法只是不去脾，缝合.术后常规饲养2周，第2周给药.
1.2 分组及给药方法
, 百拇医药
实验分5组进行，假手术组，脾切除模型组，HOU低剂量组，HOU高剂量组，阳性对照药组.HOU低剂量组，HOU高剂量组分别给予HOU60，120 mg/kg，连续7天，假手术组，脾切除模型组给予等容量的1% CMC，阳性对照药组在最后3天给予盐酸左旋咪唑18 mg/kg，末次给药1 h，按文献方法〔1～6〕进行各种药理指标的测定.
腹腔巨噬细胞的吞噬鸡红细胞能力测定〔1〕，DNCB诱导的迟发型超敏反应强度测定〔2〕，外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率测定〔3，4〕，血清溶血素测定〔5，6〕，腹股沟淋巴结中淋巴细胞计数〔6〕见文献.
2 实验结果
2.1 HOU对腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响
, 百拇医药
如表1所示，脾切除后小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的功能明显降低，HOU60,120 mg/kg均能明显增强脾切除致兔疫功能低下小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能.
Tab.1 The effect of HOU on phagocytosing function of peritoneal macrophage in splenectomized mice/
±S Group
Dose/mg.kg-1
Number
Phagocytosing percentage/%
Phagocytosing index
, http://www.100md.com
Sham-Operated
—
10
54.6±6.5
4.5±0.6
Operated
—
10
21.3±3.9△△△
1.8±0.2△△△
HOU+Operated
60
, http://www.100md.com
10
38.7±7.3***
3.3±0.4***
120
10
42.6±6.5***
3.2±0.5***
LMS+Operated
18
10
52.4±5.2***
, 百拇医药
4.6±0.6***
Compared with sham-operated group △△△ P<0.001；compared with operated group * * * P<0.001
2.2 HOU对DNCB诱导的迟发型超敏反应强度的影响
如表2所示，脾切除能明显降低DNCB诱导的迟发型超敏反应强度，HOU60，120 mg/kg均能明显增强脾切除致免疫功能低下小鼠迟发型超敏反应强度.Tab.2 The effect of HOU on delayed type hypersensitivity reaction in splenectomized mice/±S Group
Dose/mg.kg-1
, http://www.100md.com
Number
Ear Swelling/mg
Sham-Operated
—
10
2.791±0.933
Operated
—
11
1.209±0.526△△△
HOU+Operated
60
, http://www.100md.com
11
2.873±0.983* * *
120
12
2.592±0.825* * *
LMS+Operated
18
11
3.173±1.199* * *
Compared with sham-operated group △△△ P<0.001；compared with operated group * * * P<0.001
, 百拇医药
2.3 HOU对外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率的影响
如表3所示，脾切除能明显降低外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率，HOU60,120 mg/kg均能明显增强脾切除致免疫功能低下小鼠外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率.Tab.3 The effect of HOU on ANAE(+) cell percentage of peripheral blood lymphocytes in splenectomized mice/±S Group
Dose/mg.kg-1
Number
ANAE(+)cell per/%
Sham-Operated
, 百拇医药
—
11
68.3±4.8
Operated
—
12
26.8±7.9△△△
HOU+Operated
60
12
70.4±6.3* * *
120
, 百拇医药
12
67.9±9.7* * *
LMS+Operated
18
12
70.1±7.4* * *
Compared with sham-operated group △△△ P<0.001；compared with operated group ***P<0.001
2.4 HOU对血清溶血素的影响
如表4所示，脾切除能明显降低小鼠血清溶血素的水平，HOU60，120 mg/kg均能明显增强脾切除致免疫功能低下小鼠血清溶血素的水平，且呈剂量依赖关系.Tab.4 The effect of HOU on serum hemolytic concentration in splenectomized mice/±S Group
, http://www.100md.com
Dose/mg.kg-1
Number
A
CH50
Sham-Operated
—
12
0.147 4±0.119 3
117.73±95.29
Operated
—
12
, 百拇医药
0.012 2±0.008 5△△△
9.744±6.797△△△
HOU+Operated
60
10
0.803±0.110 3*
64.14±88.10*
120
10
0.095 0±0.090 0* *
, 百拇医药
75.88±71.88* *
LMS+Operated
18
10
0.081 1±0.944* *
64.78±75.40* *
Compared with sham-operated group △△△ P<0.001；compared with operated group * P<0.05，* * P<0.01
2.5 HOU对腹沟淋巴结中淋巴细胞计数的影响
如表5所示，脾切除后，小鼠淋巴结中淋巴细胞个数明显增加，HOU60 mg/kg能进一步提高小鼠淋巴细胞个数，HOU120 mg/kg则无明显影响.Tab.5 The effect of HOU on the amount of lymphocytes of groin lymph node in splenectomized mice/±S Group
, 百拇医药
Dose/mg.kg-1
Number
Amount of lymphocytes
Sham-Operated
—
9
4.6±1.6
Operated
—
12
6.9±1.4△△△
, 百拇医药 HOU+Operated
60
10
8.7±2.5* *
120
11
8.3±2.6
LMS+Operated
18
10
8.4±1.2*
Compared with sham-operated group △△△ P<0.001；compared with operated group *P<0.05，* * P<0.01
, http://www.100md.com
参考文献
1 孙国贤，廖永葆，朱信厚，等.淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶测定及其应用的初步探讨.中华医学检验杂志，1981,4(2)：76～78
2 朱信厚，陈卫生，邵秀兰.卡介苗对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响.上海免疫学杂志，1984,4(1):9～10
3 Corsini AC,et al.A simple method of evaluationg delayed type hypersensitivity in mice.Immuno Methods,1979，30:195
4 宫伟,于爱萍,彭风生.T淋巴细胞酶标记染色鉴定在实验动物的应用.中国医科大学学报，1979,(3)：42～46
5 徐学瑛，李元，许津.一个改进的体液免疫测定方法—溶血素测定法.药学学报，1979，(3)：442～445
6 施新.医学动物实验方法学.北京：人民卫生出版社，1983.269
收稿日期:1999-02-01, http://www.100md.com
单位：沈阳药科大学中药系， 沈阳 110015
关键词：合成鱼腥草素；脾切除；免疫增强
沈阳药科大学学报990315 摘 要 对于脾切除致免疫功能低下小鼠，合成鱼腥草素(HOU)60 mg/kg，120 mg/kg灌胃给药均能增强其腹腔巨噬细胞的吞噬功能(P<0.001)；迟发型超敏反应强度(P<0.001)；明显提高血清溶血素水平(P<0.05；P<0.001)；外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率(P<0.001)；HOU60 mg/kg还能明显提高脾切小鼠腹股沟淋巴结中淋巴细胞个数(P<0.01)，表明HOU对脾切除致免疫功能低下小鼠的特异性、非特异性免疫功能均有明显增强作用.
分类号 R96
The Effects of Houttuyninum on Immunologic Function of Splenectomized Mice
, http://www.100md.com
Shao Lan,Yu Qinghai,Wu Hongyan,Li Xia
Department of Traditional Chinese Medicines,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015
Abstract For the immunodeficiency mice following splenectomy,houttuyninum ig 60 mg/kg，120 mg/kg strikingly strengthened the phagocytosing function of the peritoneal macrophage system (P<0.001),delayed the type hypersensitivity (DTH)reaction (P<0.001)；significantly enhanced the level of serumhemolysin(P<0.05；P<0.01)，and ANAE(+) cell percentage of peripheral blood lymphocytes(P<0.001)furthermore,60 mg/kg remarkably raised the amount of lymphocytes of groin lymph node(P<0.05).These experimental results of hottnyninum were suggested that houttuyninum could obviously strengthen the nonspecific and sepecific immune function in splenectomized mice.
, 百拇医药
Key words houttuyninum;splenectomy;immunoenhancement
合成鱼腥草素(HOU)为中药鱼腥草的有效成分鱼腥草素的亚硫酸钠加成物，具有抑菌、抗炎等方面的药理作用，本室在进行抗炎研究中发现，其对免疫功能低下小鼠具有较好的调节作用.脾为机体最大的免疫器官，脾切除势必造成免疫功能的紊乱.本实验以HOU为供试药物，利用脾切除造成免疫功能低下小鼠模型，对HOU免疫调节机制进行了研究.
1 实验方法
1.1 脾切除方法
用乙醚麻醉小鼠，小鼠俯卧位，左背后部肋缘下切口长约0.5 cm,将脾拉出切口，结扎脾蒂血管，去脾，缝合肌层和皮肤，假手术组同样方法只是不去脾，缝合.术后常规饲养2周，第2周给药.
1.2 分组及给药方法
, 百拇医药
实验分5组进行，假手术组，脾切除模型组，HOU低剂量组，HOU高剂量组，阳性对照药组.HOU低剂量组，HOU高剂量组分别给予HOU60，120 mg/kg，连续7天，假手术组，脾切除模型组给予等容量的1% CMC，阳性对照药组在最后3天给予盐酸左旋咪唑18 mg/kg，末次给药1 h，按文献方法〔1～6〕进行各种药理指标的测定.
腹腔巨噬细胞的吞噬鸡红细胞能力测定〔1〕，DNCB诱导的迟发型超敏反应强度测定〔2〕，外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率测定〔3，4〕，血清溶血素测定〔5，6〕，腹股沟淋巴结中淋巴细胞计数〔6〕见文献.
2 实验结果
2.1 HOU对腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响
, 百拇医药
如表1所示，脾切除后小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的功能明显降低，HOU60,120 mg/kg均能明显增强脾切除致兔疫功能低下小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能.
Tab.1 The effect of HOU on phagocytosing function of peritoneal macrophage in splenectomized mice/
±S GroupDose/mg.kg-1
Number
Phagocytosing percentage/%
Phagocytosing index
, http://www.100md.com
Sham-Operated
—
10
54.6±6.5
4.5±0.6
Operated
—
10
21.3±3.9△△△
1.8±0.2△△△
HOU+Operated
60
, http://www.100md.com
10
38.7±7.3***
3.3±0.4***
120
10
42.6±6.5***
3.2±0.5***
LMS+Operated
18
10
52.4±5.2***
, 百拇医药
4.6±0.6***
Compared with sham-operated group △△△ P<0.001；compared with operated group * * * P<0.001
2.2 HOU对DNCB诱导的迟发型超敏反应强度的影响
如表2所示，脾切除能明显降低DNCB诱导的迟发型超敏反应强度，HOU60，120 mg/kg均能明显增强脾切除致免疫功能低下小鼠迟发型超敏反应强度.Tab.2 The effect of HOU on delayed type hypersensitivity reaction in splenectomized mice/
±S GroupDose/mg.kg-1
, http://www.100md.com
Number
Ear Swelling/mg
Sham-Operated
—
10
2.791±0.933
Operated
—
11
1.209±0.526△△△
HOU+Operated
60
, http://www.100md.com
11
2.873±0.983* * *
120
12
2.592±0.825* * *
LMS+Operated
18
11
3.173±1.199* * *
Compared with sham-operated group △△△ P<0.001；compared with operated group * * * P<0.001
, 百拇医药
2.3 HOU对外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率的影响
如表3所示，脾切除能明显降低外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率，HOU60,120 mg/kg均能明显增强脾切除致免疫功能低下小鼠外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率.Tab.3 The effect of HOU on ANAE(+) cell percentage of peripheral blood lymphocytes in splenectomized mice/
±S GroupDose/mg.kg-1
Number
ANAE(+)cell per/%
Sham-Operated
, 百拇医药
—
11
68.3±4.8
Operated
—
12
26.8±7.9△△△
HOU+Operated
60
12
70.4±6.3* * *
120
, 百拇医药
12
67.9±9.7* * *
LMS+Operated
18
12
70.1±7.4* * *
Compared with sham-operated group △△△ P<0.001；compared with operated group ***P<0.001
2.4 HOU对血清溶血素的影响
如表4所示，脾切除能明显降低小鼠血清溶血素的水平，HOU60，120 mg/kg均能明显增强脾切除致免疫功能低下小鼠血清溶血素的水平，且呈剂量依赖关系.Tab.4 The effect of HOU on serum hemolytic concentration in splenectomized mice/
±S Group, http://www.100md.com
Dose/mg.kg-1
Number
A
CH50
Sham-Operated
—
12
0.147 4±0.119 3
117.73±95.29
Operated
—
12
, 百拇医药
0.012 2±0.008 5△△△
9.744±6.797△△△
HOU+Operated
60
10
0.803±0.110 3*
64.14±88.10*
120
10
0.095 0±0.090 0* *
, 百拇医药
75.88±71.88* *
LMS+Operated
18
10
0.081 1±0.944* *
64.78±75.40* *
Compared with sham-operated group △△△ P<0.001；compared with operated group * P<0.05，* * P<0.01
2.5 HOU对腹沟淋巴结中淋巴细胞计数的影响
如表5所示，脾切除后，小鼠淋巴结中淋巴细胞个数明显增加，HOU60 mg/kg能进一步提高小鼠淋巴细胞个数，HOU120 mg/kg则无明显影响.Tab.5 The effect of HOU on the amount of lymphocytes of groin lymph node in splenectomized mice/
±S Group, 百拇医药
Dose/mg.kg-1
Number
Amount of lymphocytes
Sham-Operated
—
9
4.6±1.6
Operated
—
12
6.9±1.4△△△
, 百拇医药 HOU+Operated
60
10
8.7±2.5* *
120
11
8.3±2.6
LMS+Operated
18
10
8.4±1.2*
Compared with sham-operated group △△△ P<0.001；compared with operated group *P<0.05，* * P<0.01
, http://www.100md.com
参考文献
1 孙国贤，廖永葆，朱信厚，等.淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶测定及其应用的初步探讨.中华医学检验杂志，1981,4(2)：76～78
2 朱信厚，陈卫生，邵秀兰.卡介苗对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响.上海免疫学杂志，1984,4(1):9～10
3 Corsini AC,et al.A simple method of evaluationg delayed type hypersensitivity in mice.Immuno Methods,1979，30:195
4 宫伟,于爱萍,彭风生.T淋巴细胞酶标记染色鉴定在实验动物的应用.中国医科大学学报，1979,(3)：42～46
5 徐学瑛，李元，许津.一个改进的体液免疫测定方法—溶血素测定法.药学学报，1979，(3)：442～445
6 施新.医学动物实验方法学.北京：人民卫生出版社，1983.269
收稿日期:1999-02-01, http://www.100md.com