感染性骨髓象与粒细胞集落刺激因子关系研究
作者：魏斌 刘德斌 吴文 沈志祥
单位：上海第二医科大学附属瑞金医院*
关键词：骨髓象，感染性；粒细胞集落刺激因子
临床血液学杂志990310 摘要 目的：探讨“感染性骨髓象”与血清G-CSF水平之间关系。方法：以50例正常人血清G-CSF为对照，测定14例感染性疾病和Still病患者血清G-CSF水平(骨髓象均提示感染性骨髓象)。同时，比较15例血液系统肿瘤病人(使用外源性G-CSF，同时骨髓涂片表现为感染性骨髓象)。结果：实验组29例均表现为典型感染性骨髓象，其中15例血液系统肿瘤病人使用外源性G-CSF(总量750～1 500 μg)。14例感染性疾病和Still病人血清G-CSF测定均明显高于正常对照(正常：<60 ng/L，感染性疾病1 220±501 ng/L,Still病973±425 ng/L)。结论：感染性骨髓象并非机体感染所特有的表现，某种原因致机体G-CSF水平增高可能是其产生机制之一。
, http://www.100md.com
“感染性骨髓象”一般指机体经受细菌感染时骨髓穿刺涂片检查所特有的中性粒细胞核左移、出现中毒颗粒、空泡和AKP积分增高等表现。粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是由单核/巨噬细胞或成纤维/内皮细胞和上皮细胞产生的细胞因子，它对粒系细胞有刺激其增殖、成熟、释放和增强成熟粒细胞功能的作用。本文对“感染性骨髓象”和血清G-CSF水平二者关系进行初步探讨。
1 材料和方法
1.1 病例 29例均为我科住院病人(1995年1月～1995年12月)。其中血液系统恶性肿瘤15例(ANLL 7例，ALL 2例，NHL 5例，MM 1例，均为首次CR后巩固治疗病人，其中男9例，女6例，平均年龄45岁)，感染性疾病10例(均有嗜中性粒细胞增多，发热>38.5℃，其中呼吸道感染7例，其他部位感染3例)，Still病4例。所有病例的诊断均由我科专科医师依据临床表现、实验室检查(痰、血、尿培养、体液和细胞免疫学指标)、骨髓穿刺涂片细胞学检查和骨髓活检、淋巴结活检、X线、B超、CT等检查而确诊。
, http://www.100md.com
1.2 方法 15例血液系统恶性肿瘤病人化疗后24 h均给予惠尔血(日本麒麟公司生产的rhG-CSF) 150 μg/d皮下注射，5～10 d，待外周血粒细胞计数(ANG)上升>2×109/L后进行骨髓穿刺涂片检查。10例感染性疾病和4例Still病病人在进行骨穿检查同时测定血清G-CSF水平。
1.3 血清G-CSF测定方法(ELISA法) 以鼠抗人rhG-CSF单克隆抗体(B5B4900731，日本名古屋大学医学院Ohno教授惠赠)0.1 ml/孔(20 μg/ml)包被40孔酶标板，置4℃24 h洗涤3次。再加入含10% FCS洗涤液0.2 ml/孔，4度下封闭16 h，然后洗涤3次。加入标准rhG-CSF(25，12.5，6.25，……，0.024 μg/ml)及血清标本0.1 ml/孔，置4℃24 h洗涤3次。加入HRP抗rhG-CSF IgG抗体(1∶800)0.1 ml/孔，37℃置1.5 h洗涤3次。继之加入底物反应液0.1 ml/孔，室温下避光10 min，加入3 N H2SO4 50 μl/孔终止反应。用MB 4000酶标仪测吸光度，并以标准曲线查出标本对应的G-CSF含量。正常值以测定50例健康者(男女各25例，年龄18～60岁)血清G-CSF为标准。
, http://www.100md.com
2 结果
50例正常人的血清G-CSF正常值为<60 ng/L。29例患者经骨髓穿刺涂片细胞学检查均有中性粒细胞核左移、空泡和(或)中毒颗粒、AKP积分增高，符合感染性骨髓象诊断标准(见附表)。在14例感染性疾病及Still病患者血清GCSF水平均>60 ng/L，在10例感染性疾病患者中，4例ANC明显增高(>20×109/L)，他们的血清G-CSF水平也相应较高(1 364±420 ng/L)。15例血液系统恶性肿瘤病人在骨穿前均曾应用外源性rhG-CSF(麒麟公司之惠尔血)，惠尔血应用总量为750～1 500 μg。
附表 29例骨穿细胞学检查结果
例数
骨髓象阳性例数
血清G-CSF水平
, http://www.100md.com
核左移
中毒颗粒
空泡
AKP积分1
血液系统恶性肿瘤
15
15
12
13
15
未测(应用外源G-CSF)
感染性疾病
10
, 百拇医药
10
10
7
10
1 220±501 ng/L
Still病
4
4
4
4
4
973±425 ng/L
3 讨论
, 百拇医药
一般认为感染性骨髓象是机体受到细菌等微生物感染时的骨髓细胞学改变，具体机制不清。G-CSF是一种小分子酸性糖蛋白，主要来源于单核/巨噬细胞或成纤维/内皮细胞和上皮细胞。现已知道G-CSF具有调节骨髓造血祖细胞增殖、分化、成熟的功能〔1，2〕。体外实验证实：G-CSF可以增强粒细胞的吞噬功能。本组29例患者骨髓检查均提示有感染性骨髓象表现，其中10例为感染性疾病。该组病人血清G-CSF检测均高于正常，与Kawakami等报告结果相一致。Still病为自身免疫性疾病，本组4例病人经临床及实验室检查证实均无细菌等微生物感染之症象，其血清G-CSF浓度测定皆高于正常。15例血液系统恶性肿瘤患者化疗后白细胞明显减少，经G-CSF注射后ANC增高，恢复至正常范围，但临床无1例有感染并发症。
综上所述，“感染性骨髓象”并非为机体感染所特有的表现。其产生机制之一可能是由于某种原因引起机体G-CSF水平的增高，从而刺激了骨髓中粒细胞的增殖、成熟、释放并增强了成熟粒细胞的功能，使骨髓象出现粒细胞核左移，出现中毒颗粒、空泡和AKP积分增高。
*邮政编码：上海，200025
魏斌 浙江省金华市中心医院血液科(321000)
刘德斌 福建省泉州市中心医院血液科
1998-09-16 收稿 1999-01-25 修回, 百拇医药
单位：上海第二医科大学附属瑞金医院*
关键词：骨髓象，感染性；粒细胞集落刺激因子
临床血液学杂志990310 摘要 目的：探讨“感染性骨髓象”与血清G-CSF水平之间关系。方法：以50例正常人血清G-CSF为对照，测定14例感染性疾病和Still病患者血清G-CSF水平(骨髓象均提示感染性骨髓象)。同时，比较15例血液系统肿瘤病人(使用外源性G-CSF，同时骨髓涂片表现为感染性骨髓象)。结果：实验组29例均表现为典型感染性骨髓象，其中15例血液系统肿瘤病人使用外源性G-CSF(总量750～1 500 μg)。14例感染性疾病和Still病人血清G-CSF测定均明显高于正常对照(正常：<60 ng/L，感染性疾病1 220±501 ng/L,Still病973±425 ng/L)。结论：感染性骨髓象并非机体感染所特有的表现，某种原因致机体G-CSF水平增高可能是其产生机制之一。
, http://www.100md.com
“感染性骨髓象”一般指机体经受细菌感染时骨髓穿刺涂片检查所特有的中性粒细胞核左移、出现中毒颗粒、空泡和AKP积分增高等表现。粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是由单核/巨噬细胞或成纤维/内皮细胞和上皮细胞产生的细胞因子，它对粒系细胞有刺激其增殖、成熟、释放和增强成熟粒细胞功能的作用。本文对“感染性骨髓象”和血清G-CSF水平二者关系进行初步探讨。
1 材料和方法
1.1 病例 29例均为我科住院病人(1995年1月～1995年12月)。其中血液系统恶性肿瘤15例(ANLL 7例，ALL 2例，NHL 5例，MM 1例，均为首次CR后巩固治疗病人，其中男9例，女6例，平均年龄45岁)，感染性疾病10例(均有嗜中性粒细胞增多，发热>38.5℃，其中呼吸道感染7例，其他部位感染3例)，Still病4例。所有病例的诊断均由我科专科医师依据临床表现、实验室检查(痰、血、尿培养、体液和细胞免疫学指标)、骨髓穿刺涂片细胞学检查和骨髓活检、淋巴结活检、X线、B超、CT等检查而确诊。
, http://www.100md.com
1.2 方法 15例血液系统恶性肿瘤病人化疗后24 h均给予惠尔血(日本麒麟公司生产的rhG-CSF) 150 μg/d皮下注射，5～10 d，待外周血粒细胞计数(ANG)上升>2×109/L后进行骨髓穿刺涂片检查。10例感染性疾病和4例Still病病人在进行骨穿检查同时测定血清G-CSF水平。
1.3 血清G-CSF测定方法(ELISA法) 以鼠抗人rhG-CSF单克隆抗体(B5B4900731，日本名古屋大学医学院Ohno教授惠赠)0.1 ml/孔(20 μg/ml)包被40孔酶标板，置4℃24 h洗涤3次。再加入含10% FCS洗涤液0.2 ml/孔，4度下封闭16 h，然后洗涤3次。加入标准rhG-CSF(25，12.5，6.25，……，0.024 μg/ml)及血清标本0.1 ml/孔，置4℃24 h洗涤3次。加入HRP抗rhG-CSF IgG抗体(1∶800)0.1 ml/孔，37℃置1.5 h洗涤3次。继之加入底物反应液0.1 ml/孔，室温下避光10 min，加入3 N H2SO4 50 μl/孔终止反应。用MB 4000酶标仪测吸光度，并以标准曲线查出标本对应的G-CSF含量。正常值以测定50例健康者(男女各25例，年龄18～60岁)血清G-CSF为标准。
, http://www.100md.com
2 结果
50例正常人的血清G-CSF正常值为<60 ng/L。29例患者经骨髓穿刺涂片细胞学检查均有中性粒细胞核左移、空泡和(或)中毒颗粒、AKP积分增高，符合感染性骨髓象诊断标准(见附表)。在14例感染性疾病及Still病患者血清GCSF水平均>60 ng/L，在10例感染性疾病患者中，4例ANC明显增高(>20×109/L)，他们的血清G-CSF水平也相应较高(1 364±420 ng/L)。15例血液系统恶性肿瘤病人在骨穿前均曾应用外源性rhG-CSF(麒麟公司之惠尔血)，惠尔血应用总量为750～1 500 μg。
附表 29例骨穿细胞学检查结果
例数
骨髓象阳性例数
血清G-CSF水平
, http://www.100md.com
核左移
中毒颗粒
空泡
AKP积分1
血液系统恶性肿瘤
15
15
12
13
15
未测(应用外源G-CSF)
感染性疾病
10
, 百拇医药
10
10
7
10
1 220±501 ng/L
Still病
4
4
4
4
4
973±425 ng/L
3 讨论
, 百拇医药
一般认为感染性骨髓象是机体受到细菌等微生物感染时的骨髓细胞学改变，具体机制不清。G-CSF是一种小分子酸性糖蛋白，主要来源于单核/巨噬细胞或成纤维/内皮细胞和上皮细胞。现已知道G-CSF具有调节骨髓造血祖细胞增殖、分化、成熟的功能〔1，2〕。体外实验证实：G-CSF可以增强粒细胞的吞噬功能。本组29例患者骨髓检查均提示有感染性骨髓象表现，其中10例为感染性疾病。该组病人血清G-CSF检测均高于正常，与Kawakami等报告结果相一致。Still病为自身免疫性疾病，本组4例病人经临床及实验室检查证实均无细菌等微生物感染之症象，其血清G-CSF浓度测定皆高于正常。15例血液系统恶性肿瘤患者化疗后白细胞明显减少，经G-CSF注射后ANC增高，恢复至正常范围，但临床无1例有感染并发症。
综上所述，“感染性骨髓象”并非为机体感染所特有的表现。其产生机制之一可能是由于某种原因引起机体G-CSF水平的增高，从而刺激了骨髓中粒细胞的增殖、成熟、释放并增强了成熟粒细胞的功能，使骨髓象出现粒细胞核左移，出现中毒颗粒、空泡和AKP积分增高。
*邮政编码：上海，200025
魏斌 浙江省金华市中心医院血液科(321000)
刘德斌 福建省泉州市中心医院血液科
1998-09-16 收稿 1999-01-25 修回, 百拇医药