钙MTB手工比色法试剂在自动生化分析仪上的应用
作者：张均 蒋兴亮 罗书久 施宗莲
单位：川北医学院附属医院检验科 南充 637000
关键词：
川北医学院学报990362 文章编号：1005-3697(1999)03—0083—01 中图分类号：R446.1 文献标识码：A
钙测定在BeckmanCX3全自动生化分析仪上用原装进口试剂，使用极为方便，但价格昂贵，有时不能及时供货。为此，我们对MTB手工比色法略作修改，根据仪器本身参数设置的特点，通过反复实验，自编程序在BeckmanCX4全自动生化分析仪上应用获得成功，结果满意。其原理在于血清中钙离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝(MTB)结合，生成蓝色的络合物。加入适量的8-羟基喹啉，可消除镁离子对测定的干扰。现报告如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 材 料
1.1.1 碱性试剂A 取Na2SO311g，乙醇胺200ml缓慢加入，待为冷却后，加去离子水至1000ml。
1.1.2 显色试剂B 8-羟基喹啉3g，浓HCl 2.2ml，去离子水20ml；MTB150mg，加去离子水约400ml；PVP4g，加去离子水约400ml；分别溶解，混合后加去离子水至1000ml。每升显色剂加EDTA(40mmol/L)约2.5ml。
1.1.3 钙标准液 2.5mmol/L。
1.2 方 法
1.2.1 在BeckmanCX4全自动生化分析仪上自编程序，其主要参数为：终点法2、主波长600nm、次波长700nm、样品3μl、试剂A150μl、试剂B75μl、试剂空白读数时间300s、反应读数时间100s。
, 百拇医药
1.2.2 用BeckmanCX3原装试剂法与本法作平行检测。
2 结 果
2.1 波长选择和EDTA加入量 钙与MTB在反应液中形成的络合物的光吸收峰在610nm，在BeckmanCX4仪上以600nm波长较为合适(注：该仪器无610nm波长)。我们通过实验摸索表明，EDTA加入量应以试剂的质量优劣而定，钙标准液(2.5mmol/L)在600nm波长时吸光度达0.43左右较为适宜，试剂空白吸光度在0.25左右较好。
2.2 分析性能
2.2.1 平行对比试验 用本法和BeckmanmCX3原装试剂法对56份不同含量(0.80～3.40mmol/L)的样品作平行对照测定，其均值和标准差分别为2.22+0.366mmol/L，和2.22+0.364mmol/L。t检验无显著差异(t＝1.0135，P>0.05)。
, http://www.100md.com
2.2.2 线性范围 用不同稀释倍数的定值钙标准液在0.60～3.80mmol/L范围内线性良好。Y＝0.016+0.060X，r＝0.9987。
2.2.3 重复试验 不同钙含量样品各一份，其批内和批间精密度见表1和表2。
表1 批内精密度试验 N
S
批内CV%
21
1.59
0.017
1.08
, 百拇医药
21
3.39
0.028
0.82
表2 批间精密度试验 N
S
批间CV%
21
1.60
0.023
1.44
21
, 百拇医药
3.38
0.041
1.10
3 讨 论
目前，MTB或OCPC比色法测定血清钙，碱性试剂和显色试剂多为1∶1，而BeckmanCX4生化分析仪第二试剂最大加样量为75μl，与第一试剂加样量之总量须大于200μl，常规应用甚感不便，为此，我们对MTB法原配方略作修改，通过性能试验表明，其准确性和精密度均较好，完全符合常规测定要求。
为了排除试剂中污染钙的影响，在试剂中加入了EDTA。应注意加入EDTA的量，以免影响试验的灵敏度以及导致测定结果偏低。 (收稿日期：1999-06-30), http://www.100md.com
单位：川北医学院附属医院检验科 南充 637000
关键词：
川北医学院学报990362 文章编号：1005-3697(1999)03—0083—01 中图分类号：R446.1 文献标识码：A
钙测定在BeckmanCX3全自动生化分析仪上用原装进口试剂，使用极为方便，但价格昂贵，有时不能及时供货。为此，我们对MTB手工比色法略作修改，根据仪器本身参数设置的特点，通过反复实验，自编程序在BeckmanCX4全自动生化分析仪上应用获得成功，结果满意。其原理在于血清中钙离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝(MTB)结合，生成蓝色的络合物。加入适量的8-羟基喹啉，可消除镁离子对测定的干扰。现报告如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 材 料
1.1.1 碱性试剂A 取Na2SO311g，乙醇胺200ml缓慢加入，待为冷却后，加去离子水至1000ml。
1.1.2 显色试剂B 8-羟基喹啉3g，浓HCl 2.2ml，去离子水20ml；MTB150mg，加去离子水约400ml；PVP4g，加去离子水约400ml；分别溶解，混合后加去离子水至1000ml。每升显色剂加EDTA(40mmol/L)约2.5ml。
1.1.3 钙标准液 2.5mmol/L。
1.2 方 法
1.2.1 在BeckmanCX4全自动生化分析仪上自编程序，其主要参数为：终点法2、主波长600nm、次波长700nm、样品3μl、试剂A150μl、试剂B75μl、试剂空白读数时间300s、反应读数时间100s。
, 百拇医药
1.2.2 用BeckmanCX3原装试剂法与本法作平行检测。
2 结 果
2.1 波长选择和EDTA加入量 钙与MTB在反应液中形成的络合物的光吸收峰在610nm，在BeckmanCX4仪上以600nm波长较为合适(注：该仪器无610nm波长)。我们通过实验摸索表明，EDTA加入量应以试剂的质量优劣而定，钙标准液(2.5mmol/L)在600nm波长时吸光度达0.43左右较为适宜，试剂空白吸光度在0.25左右较好。
2.2 分析性能
2.2.1 平行对比试验 用本法和BeckmanmCX3原装试剂法对56份不同含量(0.80～3.40mmol/L)的样品作平行对照测定，其均值和标准差分别为2.22+0.366mmol/L，和2.22+0.364mmol/L。t检验无显著差异(t＝1.0135，P>0.05)。
, http://www.100md.com
2.2.2 线性范围 用不同稀释倍数的定值钙标准液在0.60～3.80mmol/L范围内线性良好。Y＝0.016+0.060X，r＝0.9987。
2.2.3 重复试验 不同钙含量样品各一份，其批内和批间精密度见表1和表2。
表1 批内精密度试验 N
S
批内CV%
21
1.59
0.017
1.08
, 百拇医药
21
3.39
0.028
0.82
表2 批间精密度试验 N
S
批间CV%
21
1.60
0.023
1.44
21
, 百拇医药
3.38
0.041
1.10
3 讨 论
目前，MTB或OCPC比色法测定血清钙，碱性试剂和显色试剂多为1∶1，而BeckmanCX4生化分析仪第二试剂最大加样量为75μl，与第一试剂加样量之总量须大于200μl，常规应用甚感不便，为此，我们对MTB法原配方略作修改，通过性能试验表明，其准确性和精密度均较好，完全符合常规测定要求。
为了排除试剂中污染钙的影响，在试剂中加入了EDTA。应注意加入EDTA的量，以免影响试验的灵敏度以及导致测定结果偏低。 (收稿日期：1999-06-30), http://www.100md.com