胶原膜与骨形成蛋白复合物的成骨作用研究
作者：陈钢 赵士杰 俞光岩 王会信 赵明
单位：100081 北京医科大学口腔医学院(陈钢、赵士杰、俞光岩)；军事医学科学院基础医学研究所(王会信、赵明)
关键词：
中华口腔医学杂志/990329 我们将骨形成蛋白(bone morphogenetic protein, BMP)与胶原膜相复合，制得一种新型的复合材料，使其既具有组织引导再生作用，又具有骨诱导作用。以下评价它对大鼠颅骨缺损修复的作用。
1.材料与方法：①实验试剂。人重组骨形成蛋白(Rh-BMP-2)：利用人的BMP-2成熟肽基因克隆，通过大肠杆菌表达获得。胶原膜：中国医学科学院生物医学工程研究所研制，为可吸收性的组织引导再生膜。②Rh-BMP-2与胶原膜复合物(BMP-incorporated membrane, BIM)的制作：Rh-BMP-2溶于尿素溶液中，将胶原膜浸透后对50倍蒸馏水透析，将复合物冻干，消毒备用。小鼠体内埋植实验表明其具有骨诱导活性。③复合物对大鼠颅骨缺损修复的作用：将18只8周龄雄性Wistar大鼠(270～320 g)随机分为3组。在每只大鼠的额骨及双侧顶骨各作一个直径5 mm的骨缺损，再将3个骨缺损按不同手术方法随机分为3类。第一类作为对照(对照缺损)，不作任何处理；第二类覆盖一个直径6 mm的胶原膜(胶原膜缺损)；第三类覆盖一个复合膜(BIM缺损)。分别于术后2、4、6周处死各组动物，4周组动物处死前10天及3天皮下注射盐酸四环素(25 mg/kg体重)。④研究方法：取颅骨标本行X线检查并以计算机辅助图像分析系统测量成骨面积百分比。4周组动物的一半标本制作不脱钙切片，在荧光显微镜下进行观察。其余标本脱钙后制作序列石蜡切片，进行组织计量学分析。
2.结果：①X线检查：在各组内，BIM缺损的成骨面积百分比均明显高于胶原膜缺损及对照缺损(P<0.01)。术后6周，BIM缺损组平均成骨面积为75.22%±7.35%，胶原膜缺损组平均成骨面积为23.72%±9.13%，对照缺损组平均成骨面积为13.48%±6.30%。②组织学观察：组织计量学分析表明，各组内BIM缺损的成骨面积均大于胶原膜缺损及对照缺损，差异具有统计学意义。③荧光显微镜观察：BIM缺损的缺损边缘及中心均可见多量矿化组织；胶原膜缺损及对照缺损的矿化仅限于缺损边缘，缺损中央大部分仍为非矿化组织所占据。
3.结论：①8周龄Wistar大鼠颅骨直径5 mm的骨缺损，很难自行达到骨愈合。②胶原膜与BMP的复合物不但具有机械性的阻挡作用，而且具有骨诱导性，可促进骨愈合。
(收稿：1998-07-16 修回：1999-02-12), 百拇医药
单位：100081 北京医科大学口腔医学院(陈钢、赵士杰、俞光岩)；军事医学科学院基础医学研究所(王会信、赵明)
关键词：
中华口腔医学杂志/990329 我们将骨形成蛋白(bone morphogenetic protein, BMP)与胶原膜相复合，制得一种新型的复合材料，使其既具有组织引导再生作用，又具有骨诱导作用。以下评价它对大鼠颅骨缺损修复的作用。
1.材料与方法：①实验试剂。人重组骨形成蛋白(Rh-BMP-2)：利用人的BMP-2成熟肽基因克隆，通过大肠杆菌表达获得。胶原膜：中国医学科学院生物医学工程研究所研制，为可吸收性的组织引导再生膜。②Rh-BMP-2与胶原膜复合物(BMP-incorporated membrane, BIM)的制作：Rh-BMP-2溶于尿素溶液中，将胶原膜浸透后对50倍蒸馏水透析，将复合物冻干，消毒备用。小鼠体内埋植实验表明其具有骨诱导活性。③复合物对大鼠颅骨缺损修复的作用：将18只8周龄雄性Wistar大鼠(270～320 g)随机分为3组。在每只大鼠的额骨及双侧顶骨各作一个直径5 mm的骨缺损，再将3个骨缺损按不同手术方法随机分为3类。第一类作为对照(对照缺损)，不作任何处理；第二类覆盖一个直径6 mm的胶原膜(胶原膜缺损)；第三类覆盖一个复合膜(BIM缺损)。分别于术后2、4、6周处死各组动物，4周组动物处死前10天及3天皮下注射盐酸四环素(25 mg/kg体重)。④研究方法：取颅骨标本行X线检查并以计算机辅助图像分析系统测量成骨面积百分比。4周组动物的一半标本制作不脱钙切片，在荧光显微镜下进行观察。其余标本脱钙后制作序列石蜡切片，进行组织计量学分析。
2.结果：①X线检查：在各组内，BIM缺损的成骨面积百分比均明显高于胶原膜缺损及对照缺损(P<0.01)。术后6周，BIM缺损组平均成骨面积为75.22%±7.35%，胶原膜缺损组平均成骨面积为23.72%±9.13%，对照缺损组平均成骨面积为13.48%±6.30%。②组织学观察：组织计量学分析表明，各组内BIM缺损的成骨面积均大于胶原膜缺损及对照缺损，差异具有统计学意义。③荧光显微镜观察：BIM缺损的缺损边缘及中心均可见多量矿化组织；胶原膜缺损及对照缺损的矿化仅限于缺损边缘，缺损中央大部分仍为非矿化组织所占据。
3.结论：①8周龄Wistar大鼠颅骨直径5 mm的骨缺损，很难自行达到骨愈合。②胶原膜与BMP的复合物不但具有机械性的阻挡作用，而且具有骨诱导性，可促进骨愈合。
(收稿：1998-07-16 修回：1999-02-12), 百拇医药