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编号:10243599
口腔鳞癌转移癌细胞系转移特性的体外研究
http://www.100md.com 《中华口腔医学杂志》 1999年第3期
     作者:刘刚 李金荣 陈新明

    单位:430079 武汉,湖北医科大学口腔医学院

    关键词:

    中华口腔医学杂志/990328 癌转移是恶性肿瘤致死的主要原因。有研究表明,原发癌细胞中只有那些具有较高的转移相关潜能的亚群才能形成转移灶。我们利用人口腔鳞癌颈淋巴结转移癌细胞系GNM和人舌鳞癌细胞系TSCCa研究比较了两者转移相关特性的差异,初步探讨了口腔鳞癌颈淋巴结转移的机理。

    材料和方法:①GNM及TSCCa分别来源于两个口腔鳞癌患者,细胞常规培养。②体外粘附实验:将浓度为2×108/L的两细胞悬液加入包被3层粘连蛋白的24孔板内,于37℃下15、30、45、60 min时弃去未粘附细胞,消化并计算粘附细胞百分比。③体外运动实验:各取85μl浓度为1×109/L的两细胞悬液和15 μl 2%琼脂糖混匀,加入24孔板内,每孔1滴,48小时后,测量迁移距离。④体外侵袭实验:Boyden小室下室为NIH3T3细胞条件培养液,中间隔以预铺了人工基底膜胶的硝化纤维膜,将两细胞系各2×105个细胞加入上室培养过夜,计数穿过膜进入下室细胞数。⑤Ⅳ型胶原酶活性测定:将两细胞系条件培养液冷冻、抽干、再溶解后取等量于有明胶底物的PAGE电泳后,孵育、染色、脱色,用IBAS图像分析仪测量蓝色背景中透亮带的面积。

    结果:①同一时间内GNM粘附率高于TSCCa,说明GNM对基质的粘附能力高于TSCCa。②GNM平均迁移距离为(1 589±75)μm,TSCCa为(1 038±91)μm,GNM体外运动能力明显高于TSCCa(P<0.05)。③GNM和TSCCa细胞进入Boyden小室下室数量分别为580.0±35.7和343.0±41.6个,GNM体外侵袭能力高于TSCCa(P<0.05)。④GNM 92 000、84 000、72 000道条带面积分别为37.3、31.4及40.3mm2,而TSCCa 72 000道条带面积为34.7mm2,92 000和84 000道两带缺如,GNMⅣ型胶原酶活性高于TSCCa。

    转移的发生必须经过癌细胞脱离原发灶,粘附基底膜,分泌蛋白酶溶解基底膜,于脉管中运动至靶器官并诱导血管增生,最终形成转移灶。原发肿瘤是一个异质性的群体,只有具有较高的转移相关潜能的亚群才能通过以上几个步骤形成转移灶,我们的实验初步证实了转移癌细胞的确具有较高的转移相关潜能。

    (收稿:1998-07-07 修回:1999-02-23), http://www.100md.com