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编号:10244580
皮质类固醇FLAREX对PRK术后兔角膜前基质炎症的影响△
http://www.100md.com 《眼科新进展》 1999年第3期
     作者:张建华 郑磊 郭鸣华 韩传贵 桑延智 王康孙 廉井财

    单位:200433 上海,第二军医大学长海医院眼科(张建华,郑 磊,郭鸣华,韩传贵,桑延智);200025上海第二医科大学瑞金医院眼科(王康孙,廉井财)

    关键词:准分子激光;屈光性角膜切削术;皮质类固醇;白细胞计数

    眼科新进展990302 摘要 目的 探讨皮质类固醇在准分子激光屈光性角膜切削术(PRK)术后早期对角膜前基质炎症反应的影响。方法 新西兰白兔24只,双眼均作-6D PRK切削,术后右眼点FLAREX,左眼作为对照。分3组,分别于术后12、36及72h处死,取PRK切削区角膜,作白细胞计数。结果 实验组PMNs计数少于对照组,2组有显著差异。结论 皮质类固醇FLAREX有减轻PRK术后早期兔角膜前基质炎症反应的作用。

    [眼科新进展1999;19(3)∶149-151]
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    Role of topical steroids FLAREX on inflammation of

    rabbit corneal stroma after PRK

    ZHANG Jian-Hua,ZHENG Lei,GUO Ming-Hua,HAN Chuan-Gui,SANG Yan-Zhi,WANG Kang-Sun,LIAN Jing-Cai

    Abstract Objective To examine the role of topical steroids on corneal stromal inflammation induced by photorefractive keratectomy(PRK).Methods Twenty-four rabbits underwent binocular PRK with -6D ablation.Topical steroids FLAREX(contain fluorometholone acetate 1g.L-1)was applied to the right eyes,with the left eyes as controls.Polymorphonuclear leukocytes(PMNs) were divided into three groups and killed in 12、36 and 72 hours respectively after the surgery.Results As a whole,the number of PMNs in the corneal stroma of experimental groups was significantly less than that of the control groups(P<0.01).Conclusion FLAREX can reduce rabbit corneal stromal inflammation early after PRK.
, 百拇医药
    Key words excimer laser;photorefractive keratectomy;corticosteroids;polymorphonuclear leukocyte

    [Rec Adv Ophthalmol 1999;19(3)∶149-151] 准分子激光屈光性角膜切削术(photorefractive keratectomy,PRK)治疗近视眼具有安全、有效,预测性和稳定性好的优点,在世界范围内已被广泛接受。PRK术后一般用皮质类固醇,以减轻并发症。为了解皮质类固醇在PRK术后角膜愈合过程中的作用,本研究从观察术后3d内的角膜炎性细胞浸润的角度,来探讨皮质类固醇在PRK术后早期对角膜前基质炎症反应的影响。

    1 材料和方法

    1.1 动物 新西兰白兔24只,体重2.0~2.5kg,雌雄不限,眼部无疾患。由第二军医大学动物所提供。
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    1.2 PRK治疗过程 麻醉用戌巴比妥纳30mg.kg-1作兔耳缘静脉缓慢推注至兔四肢瘫软。双眼各点1次10g.L-1的卡因局部麻醉。用刮铲机械刮除角膜上皮,范围7mm,双眼均作-6D切削。准分子激光机为Chiron-Technolas Keracor 116型准分子激光治疗仪。术后立即点2.5g.L-1氯霉素1次,并在术后1h内再点2次,以防止角膜感染。

    1.3 用药 24只兔右眼均作为实验组,术后1h开始点FLAREX(fluoro-metholone acetate 1g.L-1,Alcon公司提供,免费医疗样品),每小时点1次,每次1~2滴,确保滴入结膜囊内。左眼均作为对照组,点安慰剂(利福平眼液缓冲液,上海集成药厂生产),点药时间及剂量同实验组。

    1.4 分组 24只兔随机分为3组:Ⅰ组8只,术后每小时点药1次,共11次,术后12h处死。Ⅱ组8只,术后d1每小时点药1次,共11次;术后d2每2h点药1次,共9次,累计点药20次,术后36h处死。Ⅲ组8只,术后d1每小时点药1次,共11次;术后d2每2h点药1次,共9次;术后d3每2h点药1次,共9次;术后d4每2h点药1次,共4次,累计点药33次,术后72h处死。
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    1.5 组织学处理 所有兔处死后立即取出眼球,固定于3.03mol.L-1甲醛溶液。取角膜中央约4mm×6mm组织,石腊包埋,组织切片厚约5μm。作苏木精及伊红染色。每个角膜取中央部位切片20张备PMNs计数。

    1.6 多形核白细胞计数(PMNs) 每张切片取PRK切削区中央部位3个高倍视野,作PMNs计数(日本产Olympus光学显微镜,40×)。统计学处理采用t检验。

    2 结果

    3组PRK术后不同时间兔角膜PMNs计数见表1~3。

    表1 PRK术后12h兔角膜PMNs计数

    Table 1 PMNs count of rabbit cornea after 12h of PRK Experimental eyes
, 百拇医药
    PMNs

    Control eyes

    PMNs

    1R

    0.44±0.73

    1L

    7.63±4.82

    2R

    20.11±9.00

    2L

    19.75±7.78

    3R

, http://www.100md.com     22.00±3.10

    3L

    36.77±9.39

    4R

    56.15±11.56

    4L

    53.00±11.10

    5R

    4.00±2.83

    5L

    51.36±17.12

    6R

, 百拇医药     38.13±6.51

    6L

    16.09±7.40

    7R

    9.75±1.04

    7L

    19.57±4.35

    8R

    42.86±9.94

    8L

    23.11±5.88

    Note:1R means right eye of No.1 rabbit表2 PRK术后36h兔角膜PMNs计数
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    Table 2 PMNs count of rabbit cornea after 36h of PRK Experimental eyes

    PMNs

    Control eyes

    PMNs

    9R

    2.93±2.09

    9L

    6.60±2.53

    10R

    63.91±12.98

    10L
, 百拇医药
    89.67±13.63

    11R

    132.50±15.00

    11L

    119.00±5.48

    12R

    68.43±19.20

    12L

    90.00±12.65

    13R

    3.92±0.78

    13L
, 百拇医药
    2.75±0.50

    14R

    75.50±13.17

    14L

    140.00±20.00

    15R

    63.00±10.18

    15L

    112.75±12.84

    16R

    58.71±13.84

    16L
, 百拇医药
    501.67±8.07

    表3 PRK术后72h兔角膜PMNs计数

    Table 3 PMNs count of rabbit cornea after 72h of PRK Experimental eyes

    PMNs

    Control eyes

    PMNs

    17R

    256.25±42.70

    17L

    82.00±15.25
, http://www.100md.com
    18R

    84.20±13.86

    18L

    96.38±9.73

    19R

    107.50±23.92

    19L

    125.00±17.32

    20R

    82.50±20.62

    20L

    27.60±9.89
, 百拇医药
    21R

    6.88±3.35

    21L

    20.11±9.09

    22R

    53.00±4.34

    22L

    54.20±9.39

    23R

    134.50±20.51

    23L

    44.33±7.51
, 百拇医药
    24R

    25.50±4.20

    24L

    136.67±15.28

    经统计学处理,Ⅰ组有4只兔实验眼PNMs少于对照眼(P<0.01),2只兔双眼无显著差异;Ⅱ组有5只兔实验眼PNMs少于对照眼(P<0.01),1只兔双眼无显著差异(剔除16号兔,左眼可疑感染);Ⅲ组有4只兔实验眼PMNs少于对照眼(P<0.01),1只兔双眼无显著差异(剔除17号兔,右眼可疑感染)。3组的实验组及对照组PMNs计数中有13只兔右眼PMNs少于左眼,5只兔右眼PMNs多于左眼,4只兔双眼PMNs无显著差异,从总体上看实验组PMNs少于对照组(P<0.01)。

    3 讨论

    PRK通过切削角膜中央前表面的前弹力层及前基质,改变角膜曲率,从而达到矫正近视的目的。PRK术后角膜愈合过程包括上皮再生伴过度增生,前基质成纤维细胞活化增殖及合成新生胶原,这些组织病理学改变导致了角膜上皮下混浊(Haze)及屈光回退等并发症,影响了手术效果[1,2]
, 百拇医药
    皮质类固醇具有减轻组织炎症反应,减少伤口炎性细胞浸润的作用。而炎症细胞的浸润,释放一些炎性因子及细胞因子,刺激创面成纤维细胞活化增生,产生胶原等细胞外基质(ECM),胶原的沉积导致了伤口的瘢痕愈合。从这个意义上讲,如果PRK术后局部应用皮质类固醇能够减少角膜前基质的炎性细胞浸润,则将有助于减少成纤维细胞的活化增殖及胶原合成,减少术后Haze及屈光回退的发生。

    目前临床上PRK术后一般局部用皮质类固醇,如FML(fluorometholone)、FLAREX等,以图减轻并发症。但对于皮质类固醇是否具有上述作用,目前尚有争议,各家实验及观察结果不同,结论亦不一致[3~5]

    目前,大量的研究多在探讨皮质类固醇对PRK术后中后期(术后数周到数月)对角膜前基质成纤维细胞及胶原合成的影响,以及临床观察其对Haze及屈光回退的影响,而对皮质类固醇对PRK术后早期角膜炎症的影响则研究较少,而术后早期的炎症反应对后期的增殖过程是有直接影响的。
, 百拇医药
    本研究分3组分别对PRK术后12、36及72h实验组及对照组兔角膜前基质炎症细胞的浸润情况作了组织病理学观察。结果表明,3组兔角膜PMNs计数在大多数眼实验组少于对照组,2组有显著差异。这表明在PRK术后1~3d内局部应用FLAREX可减少兔角膜前基质白细胞浸润,结果同Campos等[6]的报道一致。和Campos等的报道比较,本研究有如下特点:(1)本研究设3组,分别对PRK术后12、36及72h兔角膜进行PMNs计数,Campos等只观察了PRK术后24h 1组,而PRK术后角膜上皮一般在3~4d才完全愈合,炎症反应在3d内都比较明显,至1wk时白细胞浸润才明显减少[1];(2)本研究所用FLAREX含fluorometholone acetate浓度为1g.L-1,低于Campos等所用的FML(5g.L-1)浓度,而目前临床上PRK术后用FML及FLAREX的浓度一般为1g.L-1而非5g.L-1,因而本研究用药应更具有代表性。另外,是否由于药物浓度的不同造成Campos等用药组效果更为明显,尚有待于进一步研究;(3)本研究每组观察例数较多,各为8只眼,而Campos等每组观察4只眼。例数较多,提高了统计学处理结果的合理性和可信度;(4)本研究对照组用了安慰剂,而Campos等对照组未用任何药物。
, 百拇医药
    影响PRK术后角膜愈合过程的因素很多,除了药物治疗等作用外,角膜本身对激光的反应及愈合过程的个体差异也是需要考虑的因素。本研究结果表明,虽然绝大多数兔左右眼PMNs计数有显著性差异,但兔与兔之间PMNs计数则往往显示更显著差异,表明个体差异所致PRK术后角膜愈合过程的不同也是不容忽视的因素。

    本研究结果表明,FLAREX可减轻PRK术后兔角膜早期炎性细胞的浸润,提示PRK术后局部用皮质类固醇有助于减轻组织反应,减少并发症。当然,这仅仅是从PRK术后3d内炎性反应的角度来观察皮质类固醇的作用,而这时角膜上皮尚未完全愈合,临床上患者这时尚未开始用皮质类固醇眼液,因而本实验结果只是短期的、有限的观察结果。对于皮质类固醇对PRK后角膜愈合过程的长期影响,本研究尚不能作出结论,有待于进一步的研究证实。

     国家自然科学基金资助(No.69878013),博士研究生课题

, 百拇医药     作者简介:张建华,女,出生于1962年。1978年考入第二军医大学,毕业后任眼科住院医师。1989年获眼科硕士学位,1990年任长海医院眼科主治医师、讲师。1997年获眼科博士学位,现任长海医院眼科副主任医师、副教授。硕士及博士课题均为眼屈光学方面的研究,在眼屈光学领域有坚实的理论基础和丰富的临床经验。主刀对800余只各种程度的近视眼进行了PRK术。

    Accepted for publication Sep 17,1998

    From the Department of Ophthalmology,Changhai Hospital,the Second Military Medical University(ZHANG Jian-Hua,ZHENG Lei,GUO Ming-Hua,HAN Chuan-Gui,SANG Yan

    -Zhi),Shanghai 200433,China;Department of Ophthalmology,Ruijin Hospital,the Shanghai Second Medical University(WANG Kang-Sun,LIAN Jing-Cai),Shanghai 200025,China
, 百拇医药
    参考文献

    1 Hanna KD,Pouliquen YM,Waring GO,et al.Corneal stromal wound healing in rabbits after 193-nm excimer laser surface ablation.Arch Ophthalmol 1989;107∶895-901.

    2 Fantes FE,Hanna KD,Waring GO,et al.Wound healing after excimer laser keratomileusis in monkeys.Arch Ophthalmol 1990;108∶665-675.

    3 Carones F,Brancato R,Venturi E et al.Efficacy of corticosteroids in reversing regresion after myopic photorefractive keratectomy.Refract Corneal Surg 1993;9(suppl)∶52-56.
, 百拇医药
    4 王 铮,李绍珍,陈家祺,等.准分子激光角膜切削术后角膜创面的愈合及皮质类固醇对愈合的影响.中华眼科杂志 1996;32∶245-247.

    5 Gartry DS,Muri MG,Lohmann CP,et al.The effect of topical corticosteroids in refractive outcome and corneal haze after photorefractive keratectomy.Arch Ophthalmol 1992;110∶944-952.

    6 Campos M,Abed HM,McDonnell PJ.Topical fluorometholone reduce stromal inflammation after photorefractive keratectomy.Ophthalmic Surg 1993;24∶654-657.

    收稿 1998-09-17 修回 1998-11-23, http://www.100md.com