瞬间性高眼压对视网膜血流量的影响
作者：周跃华 李志辉 安伟丽 乔治。邱
单位：北京同仁医院眼科，100730；美国德克萨斯A与M大学医学院药理系
关键词：眼高压；视网膜/血液供给；动物；实验
眼科OPHTHALMOLOGY IN CHINA1999年 第8卷 第3期 Vol 摘 要 本研究主要观察瞬间性高眼压对视网膜血流量的影响。实验对象为12只新西兰白兔
(12只眼)。观察发现，瞬间性高眼压持续的时间不同，视网膜及其它眼组织的血流量改变的差
异具有显著性(P<0.05)。该研究表明，瞬间性高眼压及其持续时间可以影响视网膜及其它眼
组织血流量的改变和恢复。
, http://www.100md.com
分类号 R755
The effects of transient ocular hypertension on retinal blood flow
Zhou Yuehua …∥ Ophthalmol CHN.-1999，8(3).-165～167(Dept.of Ophthalmology，Tong-Ren Hospital，Beijing 100730)
This study is designed to investigate the effects of transient ocular
hypertension on retinal blood flow.Experiments were performed on 12 New Zealand white rabbits(12 eyes).It was found that the changes of blood flow of retina and other ocular tissues were significantly different(P<0.05)if the time of transient ocular hypertension wasdifferent.These results in dicate that the time of transient ocular hypertension can affect the changes and recovery of blood flow of retina and other ocular tissues.
, 百拇医药
Subject terms Ocular hypertension；Retina/blood supply；Animal，laboratory
准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis，LASIK)是联合准分子激光角膜切削术(photorefractive keratectomy，PRK)及自动板层角膜成形术(automated lamellar keratoplasty，ALK)矫治近视的一种新方法。为了切削良好的角膜瓣，术中需要一定的负压吸引而使眼压瞬间性升高达65mmHg。为了探讨这种瞬间性眼压升高对视网膜血流量及其功能的影响，本研究以新西兰白兔作为对象进行了初步的实验性观察。
1 资料与方法
1.1 动物模型 新西兰白兔，体重2.5～3.0kg。盐酸氯胺酮35mg/kg及盐酸甲苯噻嗪5mg/kg联合肌肉注射麻醉，以后每1小时半量肌肉注射以维持麻醉。右颈总动脉插管(PE-90)约5～7厘米入左心室，以此进行微球注射。左股动脉插管(PE-90)，用以收集血液样本。眼压升高的模型按本实验室的常规方法[1，2]，将其升高至65mmHg。实验结束后，戊巴比妥钠100mg/kg静脉注射将兔处死。摘除左眼，将虹膜、睫状体、视网膜和脉络膜分离，并称量其湿重，以备眼组织的微球计数。
, 百拇医药
1.2 检测方法 彩色微球(15.0μmDIA，1千万/ml)购于美国E-Z Trac公司。实验共分两组，每组各6只(6只眼)新西兰白兔。每次从右颈总动脉快速注入微球0.2ml，从左股动脉收集微球注入起1分钟的血液样本于肝素化的试管。检测时间为眼压升高前、眼压升高1分钟或5分钟，眼压恢复正常后30分钟和90分钟。
1.3 组织处理 所有组织处理液均购自美国E-Z Trac公司。主要步骤如下：称重后的组织样本放于适当的离心管内，加入一定量的组织及血液消化液Ⅰ，加热95℃15分钟，摇匀再加热至组织完全溶解；加入一定量的组织及血液消化液Ⅱ，摇匀离心(6 000转/分)30分钟；去上清液，加微球计数液，再离心(6 000转/分)15分钟；去上清液，加50微升微球计数液，进行计数。血液样本的处理与之基本相同，但需要先加入血细胞溶解液，摇匀离心(6 000转/分)30分钟，去上清液后再加入组织及血液消化液Ⅰ，其余步骤均相同。
1.4 微球计数方法 在显微镜下，以血细胞计数器进行计数。组织的血流量Qm(μl/min/mg)＝(Cm×Qr)/Cr，其中Cm为每毫克组织的微球计数，Qr为血液样本的血流率(μl/min)，Cr为血中微球数。
, 百拇医药
2 结果
2.1 眼压升高至65mmHg 1分钟组眼各部组织的血流量改变 见表1。
2.2 眼压升高65mmHg 5分钟组眼各部组织的血流量改变 见表2。
表1 眼压升高65mmHg 1分钟组的血流量的改变(μl/min/mg)
眼压升高前
眼压升高1分钟
眼压恢复后30分钟
眼压恢复后90分钟
视网膜
0.26±0.03
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0.11±0.05
0.25±0.05
0.26±0.04
脉络膜
14.79±0.13
5.04±0.63
13.29±0.71
15.53±0.34
睫状体
5.41±1.63
2.76±1.21
, http://www.100md.com
5.36±1.54
5.45±1.63
虹 膜
3.15±1.39
1.54±0.75
2.95±0.96
3.21±1.17
与眼压升高前的血流量比较，有显著性差异(P<0.05，t检验)表2 眼压升高65mmHg 5分钟组的血流量的改变(μl/min/mg)
眼压升高前
眼压升高5分钟
, 百拇医药
眼压恢复后30分钟
眼压恢复后90分钟
视网膜
0.24±0.08
0.03±0.04
0.26±0.08
0.22±0.04
脉络膜
14.77±0.96
1.04±1.01
12.17±1.69
, http://www.100md.com
14.69±1.64
睫状体
5.84±2.76
0.51±0.49
5.81±2.59
6.40±2.27
虹 膜
2.52±1.63
0.07±0.10
3.03±1.18
3.33±1.55
, http://www.100md.com
与眼压升高前的血流量比较，有显著性差异(P<0.05，t检验)
2.3 眼压升高65mmHg 1分钟组和5分钟组的比较 眼压升高前，两组的视网膜血流量、脉络膜血流量、睫状体血流量和虹膜血流量差异均无显著性(P>0.05)。眼压升高后，两组间的视网膜、脉络膜、睫状体和虹膜血流量均发生显著性改变(P<0.05)。眼压恢复30分钟后，其血流量差异均不再具有显著性(P>0.05)。
3 讨论
视网膜的正常生理功能需要一定的血流量来维持。如果任何原因使视网膜的血流量降低到一定程度并持续一定的时间，则必将引起视网膜缺血性损伤[3，4]。
3.1 瞬间性高眼压对视网膜血流量的影响
从本研究的结果来看，无论是瞬间性高眼压持续1分钟组或5分钟组，其视网膜的血流量及脉络膜、睫状体和虹膜的血流量均较眼压升高前发生显著性的改变，且两组间的血流量的差异具有显著性(P<0.05)，即视网膜的血流量与脉络膜、睫状体和虹膜的血流量均受瞬间性高眼压的影响，并且高眼压持续的时间越长，眼血流量减少的程度就越大。本组资料，瞬间性高眼压持续的时间较短，除脉络膜的血流量于眼压恢复后90分钟才恢复正常外，视网膜、睫状体和虹膜的血
, 百拇医药
流量均于眼压恢复后30分钟达到正常水平，两组间的眼血流量的恢复在观察的时间点上差异并无显著性。事实上，不只眼血流量减少的程度与高眼压持续的时间有关，眼血流量的恢复亦与高眼压持续的时间有关。有报道，当瞬间性高眼压达40mmHg并持续30分钟时，其眼血流量降至正常血流量的1/3左右；此后，在观察期间的2小时内，眼压虽然恢复至正常水平，但眼血流量并未见恢复而是继续下降[5]。
3.2 视网膜血流量的改变对其功能的影响
本实验主要是观察准分子激光原位角膜磨镶术中负压吸引对视网膜血流量的影响，故动物模型所选的瞬间性高眼压的持续时间较短，视网膜的血流量及脉络膜、睫状体和虹膜的血流量均只发生一过性的降低，并随着眼压的恢复而迅速恢复到正常水平。在本实验的系列研究中，我们观察到视网膜电图的改变是可恢复的，与视网膜血流量的改变一致，视网膜的功能并无损伤性的改变(待发表)。但是，如果瞬间性高眼压的持续时间超过一定的限度，由于长时间的缺血，则必
, 百拇医药
将引起视网膜缺血性损伤而影响其功能[3，4]。
4 参考文献
1 Chiou GC，Chen YJ.Effects of dopamine agonist，bromocriptine，and some dopamine antagonists on ocular blood flow.J Ocul Pharmacol，1992，8：285～294 2 Chiou GC，Chen YJ.Effects of antiglaucoma drugs on ocular blood flow in ocular hyper tensive rabbits.J Ocul Pharmacol，1993，9：13～24
3 Zhang C，Takahashi K，Lam TT，et al.Effects of basic fibroblast growth factor in retinal ischemia.Invest Ophthalmol Vis Sci，1994，35(8)：3163～3168
, 百拇医药
4 Szabo ME，Droy-lefaix MT，Doly M，et al.Ischemia and reperfusion-induced histologic changes in the rat retina .Invest Ophthalmol Vis Sci，1991，32：1471～1478
5 Liu SX，Xuan Bo，Chen Z，et al.Nitric oxide Donors：Effects of S-Nitrosog lutathione and 4-Phenyl-3-furoxancarbonitrile on ocular blood flow and retinal function recovery.J Oc ul Pharmacol Ther，1997，13：105～114.
1998-06-11收稿, http://www.100md.com
单位：北京同仁医院眼科，100730；美国德克萨斯A与M大学医学院药理系
关键词：眼高压；视网膜/血液供给；动物；实验
眼科OPHTHALMOLOGY IN CHINA1999年 第8卷 第3期 Vol 摘 要 本研究主要观察瞬间性高眼压对视网膜血流量的影响。实验对象为12只新西兰白兔
(12只眼)。观察发现，瞬间性高眼压持续的时间不同，视网膜及其它眼组织的血流量改变的差
异具有显著性(P<0.05)。该研究表明，瞬间性高眼压及其持续时间可以影响视网膜及其它眼
组织血流量的改变和恢复。
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分类号 R755
The effects of transient ocular hypertension on retinal blood flow
Zhou Yuehua …∥ Ophthalmol CHN.-1999，8(3).-165～167(Dept.of Ophthalmology，Tong-Ren Hospital，Beijing 100730)
This study is designed to investigate the effects of transient ocular
hypertension on retinal blood flow.Experiments were performed on 12 New Zealand white rabbits(12 eyes).It was found that the changes of blood flow of retina and other ocular tissues were significantly different(P<0.05)if the time of transient ocular hypertension wasdifferent.These results in dicate that the time of transient ocular hypertension can affect the changes and recovery of blood flow of retina and other ocular tissues.
, 百拇医药
Subject terms Ocular hypertension；Retina/blood supply；Animal，laboratory
准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis，LASIK)是联合准分子激光角膜切削术(photorefractive keratectomy，PRK)及自动板层角膜成形术(automated lamellar keratoplasty，ALK)矫治近视的一种新方法。为了切削良好的角膜瓣，术中需要一定的负压吸引而使眼压瞬间性升高达65mmHg。为了探讨这种瞬间性眼压升高对视网膜血流量及其功能的影响，本研究以新西兰白兔作为对象进行了初步的实验性观察。
1 资料与方法
1.1 动物模型 新西兰白兔，体重2.5～3.0kg。盐酸氯胺酮35mg/kg及盐酸甲苯噻嗪5mg/kg联合肌肉注射麻醉，以后每1小时半量肌肉注射以维持麻醉。右颈总动脉插管(PE-90)约5～7厘米入左心室，以此进行微球注射。左股动脉插管(PE-90)，用以收集血液样本。眼压升高的模型按本实验室的常规方法[1，2]，将其升高至65mmHg。实验结束后，戊巴比妥钠100mg/kg静脉注射将兔处死。摘除左眼，将虹膜、睫状体、视网膜和脉络膜分离，并称量其湿重，以备眼组织的微球计数。
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1.2 检测方法 彩色微球(15.0μmDIA，1千万/ml)购于美国E-Z Trac公司。实验共分两组，每组各6只(6只眼)新西兰白兔。每次从右颈总动脉快速注入微球0.2ml，从左股动脉收集微球注入起1分钟的血液样本于肝素化的试管。检测时间为眼压升高前、眼压升高1分钟或5分钟，眼压恢复正常后30分钟和90分钟。
1.3 组织处理 所有组织处理液均购自美国E-Z Trac公司。主要步骤如下：称重后的组织样本放于适当的离心管内，加入一定量的组织及血液消化液Ⅰ，加热95℃15分钟，摇匀再加热至组织完全溶解；加入一定量的组织及血液消化液Ⅱ，摇匀离心(6 000转/分)30分钟；去上清液，加微球计数液，再离心(6 000转/分)15分钟；去上清液，加50微升微球计数液，进行计数。血液样本的处理与之基本相同，但需要先加入血细胞溶解液，摇匀离心(6 000转/分)30分钟，去上清液后再加入组织及血液消化液Ⅰ，其余步骤均相同。
1.4 微球计数方法 在显微镜下，以血细胞计数器进行计数。组织的血流量Qm(μl/min/mg)＝(Cm×Qr)/Cr，其中Cm为每毫克组织的微球计数，Qr为血液样本的血流率(μl/min)，Cr为血中微球数。
, 百拇医药
2 结果
2.1 眼压升高至65mmHg 1分钟组眼各部组织的血流量改变 见表1。
2.2 眼压升高65mmHg 5分钟组眼各部组织的血流量改变 见表2。
表1 眼压升高65mmHg 1分钟组的血流量的改变(μl/min/mg)
眼压升高前
眼压升高1分钟
眼压恢复后30分钟
眼压恢复后90分钟
视网膜
0.26±0.03
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0.11±0.05
0.25±0.05
0.26±0.04
脉络膜
14.79±0.13
5.04±0.63
13.29±0.71
15.53±0.34
睫状体
5.41±1.63
2.76±1.21
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5.36±1.54
5.45±1.63
虹 膜
3.15±1.39
1.54±0.75
2.95±0.96
3.21±1.17
与眼压升高前的血流量比较，有显著性差异(P<0.05，t检验)表2 眼压升高65mmHg 5分钟组的血流量的改变(μl/min/mg)
眼压升高前
眼压升高5分钟
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眼压恢复后30分钟
眼压恢复后90分钟
视网膜
0.24±0.08
0.03±0.04
0.26±0.08
0.22±0.04
脉络膜
14.77±0.96
1.04±1.01
12.17±1.69
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14.69±1.64
睫状体
5.84±2.76
0.51±0.49
5.81±2.59
6.40±2.27
虹 膜
2.52±1.63
0.07±0.10
3.03±1.18
3.33±1.55
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与眼压升高前的血流量比较，有显著性差异(P<0.05，t检验)
2.3 眼压升高65mmHg 1分钟组和5分钟组的比较 眼压升高前，两组的视网膜血流量、脉络膜血流量、睫状体血流量和虹膜血流量差异均无显著性(P>0.05)。眼压升高后，两组间的视网膜、脉络膜、睫状体和虹膜血流量均发生显著性改变(P<0.05)。眼压恢复30分钟后，其血流量差异均不再具有显著性(P>0.05)。
3 讨论
视网膜的正常生理功能需要一定的血流量来维持。如果任何原因使视网膜的血流量降低到一定程度并持续一定的时间，则必将引起视网膜缺血性损伤[3，4]。
3.1 瞬间性高眼压对视网膜血流量的影响
从本研究的结果来看，无论是瞬间性高眼压持续1分钟组或5分钟组，其视网膜的血流量及脉络膜、睫状体和虹膜的血流量均较眼压升高前发生显著性的改变，且两组间的血流量的差异具有显著性(P<0.05)，即视网膜的血流量与脉络膜、睫状体和虹膜的血流量均受瞬间性高眼压的影响，并且高眼压持续的时间越长，眼血流量减少的程度就越大。本组资料，瞬间性高眼压持续的时间较短，除脉络膜的血流量于眼压恢复后90分钟才恢复正常外，视网膜、睫状体和虹膜的血
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流量均于眼压恢复后30分钟达到正常水平，两组间的眼血流量的恢复在观察的时间点上差异并无显著性。事实上，不只眼血流量减少的程度与高眼压持续的时间有关，眼血流量的恢复亦与高眼压持续的时间有关。有报道，当瞬间性高眼压达40mmHg并持续30分钟时，其眼血流量降至正常血流量的1/3左右；此后，在观察期间的2小时内，眼压虽然恢复至正常水平，但眼血流量并未见恢复而是继续下降[5]。
3.2 视网膜血流量的改变对其功能的影响
本实验主要是观察准分子激光原位角膜磨镶术中负压吸引对视网膜血流量的影响，故动物模型所选的瞬间性高眼压的持续时间较短，视网膜的血流量及脉络膜、睫状体和虹膜的血流量均只发生一过性的降低，并随着眼压的恢复而迅速恢复到正常水平。在本实验的系列研究中，我们观察到视网膜电图的改变是可恢复的，与视网膜血流量的改变一致，视网膜的功能并无损伤性的改变(待发表)。但是，如果瞬间性高眼压的持续时间超过一定的限度，由于长时间的缺血，则必
, 百拇医药
将引起视网膜缺血性损伤而影响其功能[3，4]。
4 参考文献
1 Chiou GC，Chen YJ.Effects of dopamine agonist，bromocriptine，and some dopamine antagonists on ocular blood flow.J Ocul Pharmacol，1992，8：285～294 2 Chiou GC，Chen YJ.Effects of antiglaucoma drugs on ocular blood flow in ocular hyper tensive rabbits.J Ocul Pharmacol，1993，9：13～24
3 Zhang C，Takahashi K，Lam TT，et al.Effects of basic fibroblast growth factor in retinal ischemia.Invest Ophthalmol Vis Sci，1994，35(8)：3163～3168
, 百拇医药
4 Szabo ME，Droy-lefaix MT，Doly M，et al.Ischemia and reperfusion-induced histologic changes in the rat retina .Invest Ophthalmol Vis Sci，1991，32：1471～1478
5 Liu SX，Xuan Bo，Chen Z，et al.Nitric oxide Donors：Effects of S-Nitrosog lutathione and 4-Phenyl-3-furoxancarbonitrile on ocular blood flow and retinal function recovery.J Oc ul Pharmacol Ther，1997，13：105～114.
1998-06-11收稿, http://www.100md.com