补阳还五汤对大鼠实验性心肌缺血的影响☆
作者：戴小华 茹铁周 方东革 俞兴群 余晓琪 周宜轩 韩明向
单位：戴小华 方东革 俞兴群 周宜轩 韩明向 安徽中医学院第一附属医院心内科 合肥 230032；茹铁周 江苏省昆山市中医院；余晓琪 安徽医科大学第一附属医院
关键词：补阳还五汤；心肌缺血；缺血性心脏病
安徽中医学院学报990330 摘要 采用垂体后叶素诱发Wistar大鼠心肌缺血模型，观察补阳还五汤对其保护作用。结果表明补阳还五汤可显著抑制大鼠T波变化，提高大鼠血浆SOD活性、降低MDA含量，对血素LDH、CPK的释放也有显著的抑制作用。提示本方对心肌缺血损伤的保护作用可能与其减轻氧自由基对心肌膜脂质过氧化损伤反应有关。
中图法分类号 R285.5
EFFECT OF BUYANG HUANWU DECOCTION ON EXPERIMENTAL MYOCARDIAL ISCHEMIA
, 百拇医药
Dai Xiaohua，Ru Tiezhou，Fang Dongge,Yu xingqun,Yu Xiaoqi,Zhou Yixuan,Han Mingxiang
(The first affiliated hospital,Anhui college of TCM,Hefei 230031)
ABSTRACT To observe the effect of buyang huanwu decoction (BHD) on protecting myocardial ischemia by inducing myocardial ischemia model with in mice.The results showed that BHD could significantly retard T wave changes in ECG,increase plasma SOD activity and reduced plasma MDA content and plasma LDH and CPK release.It may be concluded that BHD has a protective effect on myocardial ischemia and the action is considered to be related to the inhibition of the oxygen free redicals.
, 百拇医药
KEY WORDS Buyang huanwu decoction;Myocardial ischemia;Ischemia heart disease
补阳还五汤(BHD)为益气活血的代表方剂，临床广泛用于缺血性心脏病的治疗。笔者就其对垂体后叶素致大鼠心肌缺血损伤的保护作用进行了实验研究。
1 材料
1.1 动物 Wistar大鼠40只，雄性，体重268±43g，5～6月龄，由安徽医科大学动物实验中心提供。
1.2 药物与试剂 以《医林改错》原方所载BHD的药味和配方比例，按每钱以3g换算：生黄芪120g，当归尾6g，赤芍4.5g，地龙、桃仁、红花、川芎各3g，各单味药物由本院制剂室提供。按文献方法〔1〕制备补阳还五汤水煎剂(含生药量1.6g/ml)。消心痛由江苏盐城方强制药厂出品，垂体后叶素由上海禾丰制药有限公司出品。
, http://www.100md.com
1.3 动物分组 用随机数字表法，按动物体重随机分为4组：生理盐水组(生理盐水5ml/kg)，BHD小剂量组(5ml/kg)，BHD大剂量组(10ml/kg)，消心痛组(消心痛25mg/kg)。各组动物均为10只。
2 方法
2.1 对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血的影响 Wistar大鼠40只，按前述分组给药，每日灌胃1次，共5次，末次给药后1h，以戊巴比妥钠麻醉，记录标准Ⅱ导联心电图(弃去异常者)，由舌下静脉注射垂体后叶素1u/kg，容量为0.1ml/100g，于15s内注射完毕，诱发冠脉痉挛性心肌缺血，立即描记15s、1min、3min、5min心电图变化，并测量T波峰值。以T波、ST段改变或P-R、Q-T间期延长判断心肌缺血程度和药物作用〔2〕。
心肌缺血判断标准：第一期：注射垂体后叶素后即刻至30s，T波升高、ST段抬高超过0.1mV。第二期：T波低平、双相、倒置，心率变慢，P-R及Q-T间期延长。
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2.2 各组大鼠在诱发心肌缺血后5min，颈动脉放血，制备血浆，检测下列指标：红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性，丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酸(LDH)、磷酸肌酸激酶(CPK)含量。SOD用邻苯三酚自氧化法测定，MDA用TBA显色法测定。
2.3 统计学处理 比较组间显著性差异采用t检验，率的比较用χ2检验。
3 结果
3.1 BHD对大鼠心肌缺血的影响 各给药组心电图出现缺血性变化的动物数，生理盐水组9只，消心痛组2只，BHD小剂量组4只，大剂量组3只，经χ2检验，消心痛组及BHD大、小剂量组与生理盐水组比较均有显著性差异(P<0.01，P<0.05)。生理盐水组在15s时，心电图T波显著抬高(P<0.05)，但1、3、5min时T波显著低平(P<0.01)，表明心肌缺血。消心痛组给予垂体后叶素静脉注射后，T波变化无显著性差异(P>0.05)。BHD大、小剂量组均可显著抑制15s时T波抬高和3min、5min时T波低平，大、小剂量组之间改善T波变化的作用无显著性差异(P>0.05)。见表1。
, 百拇医药
表1 各组大鼠静注垂体后叶素前后T波变化情况(n=10，
±s) 组 别
T波变化(mV)
给药前
给药后15s
给药后1min
给药后3min
给药后5min
生理盐水
0.15±0.06
0.24±0.08*
, http://www.100md.com
0.05±0.07**
0.07±0.04*
0.07±0.05**
BHD(小)
0.14±0.04
0.17±0.03△
0.07±0.05**
0.10±0.04*
0.12±0.4△
BHD(大)
, http://www.100md.com
0.15±0.05
0.16±0.05△
0.09±0.04**
0.12±0.05△
0.13±0.04△△
消心痛
0.15±0.05
0.16±0.08△
0.14±0.07△△
0.13±0.03△△
, http://www.100md.com
0.13±0.03△△
与给药前比较，*P<0.05，**P<0.01；与生理盐水组比较，△P<0.05，△△P<0.01(下同)
2.2 BHD对大鼠血浆SOD、MDA、LDH、CPK的影响 见表2。与生理盐水组比较，BHD大、小剂量组及消心痛组均可显著提高血浆SOD活性，降低血浆MDA、LDH、CPK含量(P<0.01，P<0.05)，而BHD大小剂量且与消心痛组的作用无显著性差异(P>0.05)。
表2 各组大鼠血浆SOD、MDA、LDH、CPK的变化(n=10，±s) 组 别
SOD(u/ml)
MDA(nmol/ml)
, 百拇医药
LDH(u/ml)
CPK(u)
生理盐水
61.7±10.5
4.04±0.94
18.3±4.06
41.2±7.56
BHD(小)
82.5±14.1△△
2.58±0.72△△
12.1±4.93△△
, http://www.100md.com
34.1±6.03△
BHD(大)
86.3±11.7△△
2.26±0.86△△
11.5±4.12△△
31.9±6.11△△
消心痛
78.9±13.6△△
2.89±1.12△
13.2±6.04△
, 百拇医药
35.3±4.24△
4 讨论
冠状动脉痉挛是心绞痛重要的发病因素，本研究采用垂体后叶素诱发大鼠急性心肌缺血动物模型，以消心痛作为阳性对照药，观察了补阳还五汤对大鼠心肌缺血损伤的影响。结果显示，补阳还五汤可显著抑制静脉注射垂体后叶素后15s时T波的抬高和3min、5min时T波低平的变化，证实本方对垂体后叶素所致的大鼠心肌缺血损伤具有一定的保护作用。
研究证实，自由基是心肌缺血后心肌细胞膜发生脂质过氧化、使心肌损伤加剧的重要因素。MDA是自由基损害作用的产物，SOD是机体防御新陈代谢及其他生命活动中氧自由基损伤和破坏的抗氧化酶。本研究表明，补阳还五汤能显著保护心肌缺血时血浆SOD活性，减少MDA的生成，对LDH和CPK的释放有明显的抑制作用。提示本方对心肌缺血损伤的保护作用可能与其提高血浆SOD活性、降低MDA含量，从而减轻氧自由基对心肌膜脂质过氧化损伤反应有关。本研究为临床应用补阳还五汤治疗缺血性心脏病提供了一些药理依据，值得进一步深入研究。
☆安徽省教育委员会自然科学基金资助课题(97JL134)
作者简介：戴小华，男，36岁，副教授，副主任医师，医学硕士
参考文献
1 陈奇，邓文龙，张世玮，等.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1994：67～68
2 徐叔云，卞如漆，陈修.药理实验方法学.北京：人民卫生出版社，1982：754～755
(1999-03-25收稿), 百拇医药
单位：戴小华 方东革 俞兴群 周宜轩 韩明向 安徽中医学院第一附属医院心内科 合肥 230032；茹铁周 江苏省昆山市中医院；余晓琪 安徽医科大学第一附属医院
关键词：补阳还五汤；心肌缺血；缺血性心脏病
安徽中医学院学报990330 摘要 采用垂体后叶素诱发Wistar大鼠心肌缺血模型，观察补阳还五汤对其保护作用。结果表明补阳还五汤可显著抑制大鼠T波变化，提高大鼠血浆SOD活性、降低MDA含量，对血素LDH、CPK的释放也有显著的抑制作用。提示本方对心肌缺血损伤的保护作用可能与其减轻氧自由基对心肌膜脂质过氧化损伤反应有关。
中图法分类号 R285.5
EFFECT OF BUYANG HUANWU DECOCTION ON EXPERIMENTAL MYOCARDIAL ISCHEMIA
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Dai Xiaohua，Ru Tiezhou，Fang Dongge,Yu xingqun,Yu Xiaoqi,Zhou Yixuan,Han Mingxiang
(The first affiliated hospital,Anhui college of TCM,Hefei 230031)
ABSTRACT To observe the effect of buyang huanwu decoction (BHD) on protecting myocardial ischemia by inducing myocardial ischemia model with in mice.The results showed that BHD could significantly retard T wave changes in ECG,increase plasma SOD activity and reduced plasma MDA content and plasma LDH and CPK release.It may be concluded that BHD has a protective effect on myocardial ischemia and the action is considered to be related to the inhibition of the oxygen free redicals.
, 百拇医药
KEY WORDS Buyang huanwu decoction;Myocardial ischemia;Ischemia heart disease
补阳还五汤(BHD)为益气活血的代表方剂，临床广泛用于缺血性心脏病的治疗。笔者就其对垂体后叶素致大鼠心肌缺血损伤的保护作用进行了实验研究。
1 材料
1.1 动物 Wistar大鼠40只，雄性，体重268±43g，5～6月龄，由安徽医科大学动物实验中心提供。
1.2 药物与试剂 以《医林改错》原方所载BHD的药味和配方比例，按每钱以3g换算：生黄芪120g，当归尾6g，赤芍4.5g，地龙、桃仁、红花、川芎各3g，各单味药物由本院制剂室提供。按文献方法〔1〕制备补阳还五汤水煎剂(含生药量1.6g/ml)。消心痛由江苏盐城方强制药厂出品，垂体后叶素由上海禾丰制药有限公司出品。
, http://www.100md.com
1.3 动物分组 用随机数字表法，按动物体重随机分为4组：生理盐水组(生理盐水5ml/kg)，BHD小剂量组(5ml/kg)，BHD大剂量组(10ml/kg)，消心痛组(消心痛25mg/kg)。各组动物均为10只。
2 方法
2.1 对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血的影响 Wistar大鼠40只，按前述分组给药，每日灌胃1次，共5次，末次给药后1h，以戊巴比妥钠麻醉，记录标准Ⅱ导联心电图(弃去异常者)，由舌下静脉注射垂体后叶素1u/kg，容量为0.1ml/100g，于15s内注射完毕，诱发冠脉痉挛性心肌缺血，立即描记15s、1min、3min、5min心电图变化，并测量T波峰值。以T波、ST段改变或P-R、Q-T间期延长判断心肌缺血程度和药物作用〔2〕。
心肌缺血判断标准：第一期：注射垂体后叶素后即刻至30s，T波升高、ST段抬高超过0.1mV。第二期：T波低平、双相、倒置，心率变慢，P-R及Q-T间期延长。
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2.2 各组大鼠在诱发心肌缺血后5min，颈动脉放血，制备血浆，检测下列指标：红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性，丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酸(LDH)、磷酸肌酸激酶(CPK)含量。SOD用邻苯三酚自氧化法测定，MDA用TBA显色法测定。
2.3 统计学处理 比较组间显著性差异采用t检验，率的比较用χ2检验。
3 结果
3.1 BHD对大鼠心肌缺血的影响 各给药组心电图出现缺血性变化的动物数，生理盐水组9只，消心痛组2只，BHD小剂量组4只，大剂量组3只，经χ2检验，消心痛组及BHD大、小剂量组与生理盐水组比较均有显著性差异(P<0.01，P<0.05)。生理盐水组在15s时，心电图T波显著抬高(P<0.05)，但1、3、5min时T波显著低平(P<0.01)，表明心肌缺血。消心痛组给予垂体后叶素静脉注射后，T波变化无显著性差异(P>0.05)。BHD大、小剂量组均可显著抑制15s时T波抬高和3min、5min时T波低平，大、小剂量组之间改善T波变化的作用无显著性差异(P>0.05)。见表1。
, 百拇医药
表1 各组大鼠静注垂体后叶素前后T波变化情况(n=10，
±s) 组 别T波变化(mV)
给药前
给药后15s
给药后1min
给药后3min
给药后5min
生理盐水
0.15±0.06
0.24±0.08*
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0.05±0.07**
0.07±0.04*
0.07±0.05**
BHD(小)
0.14±0.04
0.17±0.03△
0.07±0.05**
0.10±0.04*
0.12±0.4△
BHD(大)
, http://www.100md.com
0.15±0.05
0.16±0.05△
0.09±0.04**
0.12±0.05△
0.13±0.04△△
消心痛
0.15±0.05
0.16±0.08△
0.14±0.07△△
0.13±0.03△△
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0.13±0.03△△
与给药前比较，*P<0.05，**P<0.01；与生理盐水组比较，△P<0.05，△△P<0.01(下同)
2.2 BHD对大鼠血浆SOD、MDA、LDH、CPK的影响 见表2。与生理盐水组比较，BHD大、小剂量组及消心痛组均可显著提高血浆SOD活性，降低血浆MDA、LDH、CPK含量(P<0.01，P<0.05)，而BHD大小剂量且与消心痛组的作用无显著性差异(P>0.05)。
表2 各组大鼠血浆SOD、MDA、LDH、CPK的变化(n=10，
±s) 组 别SOD(u/ml)
MDA(nmol/ml)
, 百拇医药
LDH(u/ml)
CPK(u)
生理盐水
61.7±10.5
4.04±0.94
18.3±4.06
41.2±7.56
BHD(小)
82.5±14.1△△
2.58±0.72△△
12.1±4.93△△
, http://www.100md.com
34.1±6.03△
BHD(大)
86.3±11.7△△
2.26±0.86△△
11.5±4.12△△
31.9±6.11△△
消心痛
78.9±13.6△△
2.89±1.12△
13.2±6.04△
, 百拇医药
35.3±4.24△
4 讨论
冠状动脉痉挛是心绞痛重要的发病因素，本研究采用垂体后叶素诱发大鼠急性心肌缺血动物模型，以消心痛作为阳性对照药，观察了补阳还五汤对大鼠心肌缺血损伤的影响。结果显示，补阳还五汤可显著抑制静脉注射垂体后叶素后15s时T波的抬高和3min、5min时T波低平的变化，证实本方对垂体后叶素所致的大鼠心肌缺血损伤具有一定的保护作用。
研究证实，自由基是心肌缺血后心肌细胞膜发生脂质过氧化、使心肌损伤加剧的重要因素。MDA是自由基损害作用的产物，SOD是机体防御新陈代谢及其他生命活动中氧自由基损伤和破坏的抗氧化酶。本研究表明，补阳还五汤能显著保护心肌缺血时血浆SOD活性，减少MDA的生成，对LDH和CPK的释放有明显的抑制作用。提示本方对心肌缺血损伤的保护作用可能与其提高血浆SOD活性、降低MDA含量，从而减轻氧自由基对心肌膜脂质过氧化损伤反应有关。本研究为临床应用补阳还五汤治疗缺血性心脏病提供了一些药理依据，值得进一步深入研究。
☆安徽省教育委员会自然科学基金资助课题(97JL134)
作者简介：戴小华，男，36岁，副教授，副主任医师，医学硕士
参考文献
1 陈奇，邓文龙，张世玮，等.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1994：67～68
2 徐叔云，卞如漆，陈修.药理实验方法学.北京：人民卫生出版社，1982：754～755
(1999-03-25收稿), 百拇医药